鼻息肉組織中白細胞介素17和血管內(nèi)皮生長因子的表達及其相關(guān)性

王弦，趙大勁，齊保健

(首都醫(yī)科大學(xué)石景山教學(xué)醫(yī)院 北京市石景山醫(yī)院耳鼻喉科，北京 100043)

鼻息肉組織中白細胞介素17和血管內(nèi)皮生長因子的表達及其相關(guān)性

王弦，趙大勁，齊保健

(首都醫(yī)科大學(xué)石景山教學(xué)醫(yī)院 北京市石景山醫(yī)院耳鼻喉科，北京 100043)

目的 研究鼻息肉組織中白細胞介素17(IL-17)和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達，并探討其相關(guān)性。方法選取2015年2月至2016年2月在我院耳鼻喉科接受鼻內(nèi)鏡手術(shù)治療的65例慢性鼻-鼻竇炎患者，其中A組(伴鼻息肉者)33例，B組(不伴鼻息肉者)32例；另選同期在醫(yī)院通過鼻內(nèi)鏡手術(shù)治療的30例鼻中隔偏曲者作為C組(對照組)，對比各組IL-17及VEFG的陽性表達率及表達水平，分析IL-17與VEGF表達的相關(guān)性。結(jié)果A組和B組患者的IL-17陽性率分別為93.94%、75.00%，VEGF陽性率分別為84.85%、62.50%，均明顯高于C組的3.33%和6.67%，且A組患者的IL-17陽性率和VEGF陽性率均明顯高于B組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；A組和B組患者的IL-17表達水平分別為(35.29±4.17)個/LP、(30.14±2.12)個/LP，VEGF的表達水平分別為(29.33±3.65)個/LP、(20.18±2.06)個/LP，均明顯高于C組的(8.16±1.16)個/LP，(10.22±1.25)個/LP，且A組的IL-17及VEGF的表達水平均明顯高于B組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；Pearson法分析顯示，IL-17與VEGF的表達呈正相關(guān)(r=0.784，P= 0.629＜0.05)。結(jié)論IL-17與VEGF在鼻息肉組織的表達顯著升高，且二者之間的表達呈正相關(guān)。因此，IL-17與VEGF可能共同參與了鼻息肉癥狀的形成與發(fā)展，值得臨床重視。

鼻息肉組織；白細胞介素17；血管內(nèi)皮生長因子；表達

鼻息肉是發(fā)生在上呼吸道內(nèi)的一類慢性炎性疾病，其常與慢性鼻-鼻竇炎共同發(fā)作，對患者的呼吸運動存在不良影響。鼻息肉的動物模型表明，在鼻息肉組織的生長過程當(dāng)中，相關(guān)基質(zhì)存在大量的血管生成，并包含血漿滲漏，其對鼻息肉的形成具有重要作用[1]。白細胞介素-17(interleukin 17，IL-17)是重要的炎癥性細胞因子，而血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)則是血管通透因子。IL-17與VEGF均與鼻腔內(nèi)炎癥病變有關(guān)，但關(guān)于二者在鼻息肉方面的綜合研究較少[2-3]。鑒于此，本文通過分析鼻息肉組織內(nèi)IL-17以及VEGF的表達，研究二者的相關(guān)性，旨在更好地輔助臨床治療。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年2月至2016年2月在我院接受鼻內(nèi)鏡手術(shù)治療的65例慢性鼻-鼻竇炎患者，其中伴鼻息肉者33例(A組)，不伴鼻息肉者32例(B組)。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合慢性鼻-鼻竇炎的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[4-5]；(2)治療前的1個月內(nèi)未實施激素治療與抗組胺類藥物治療；(3)經(jīng)術(shù)后病理學(xué)確診。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)變應(yīng)性鼻炎；(2)支氣管哮喘；(3)阿司匹林不耐受者；(4)其他種類的嚴重系統(tǒng)性疾病者；(5)鼻內(nèi)真菌感染者。A組患者中男性19例，女性14例；年齡18～63歲，平均(42.67±1.12)歲。B組患者中，男性20例，女性12例；年齡20～65歲，平均(43.08±0.87)歲。另選同期在我院通過鼻內(nèi)鏡手術(shù)治療的30例鼻中隔偏曲者作為C組，其中男性20例，女性10例；年齡21～65歲，平均(42.88±1.25)歲。所有患者均在術(shù)中取其較窄側(cè)的代償性肥大下鼻甲黏膜作為標(biāo)本。各組患者的基線資料比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 研究方法 實驗所用試劑中，兔抗人IL-17單克隆抗體，兔抗人VEGF單克隆抗體，SP試劑盒，以及DAB顯色試劑盒產(chǎn)自北京的博奧森公司。選取SP法針對IL-17以及VEGF實施免疫組化染色，具體步驟如下：首先將固定標(biāo)本以常規(guī)方式制作成為石蠟塊，需染色時再按照厚度5 μm標(biāo)準(zhǔn)進行連續(xù)切片。把已切好石蠟切片通過防脫片形式載玻片實施撈片，并放置在烤箱中，將烤箱設(shè)置為60℃、30 min，以便切片能夠緊緊粘附。通過3%H2O2對內(nèi)源性酶進行滅活，持續(xù)5～10 min，進而使得石蠟切片完成常規(guī)性脫蠟至水。應(yīng)用枸緣酸鹽類型緩沖液于微波爐內(nèi)給予抗原修復(fù)，其具體免疫組化型染色方式，需詳細參考SP試劑盒內(nèi)產(chǎn)品說明依次按步驟進行。通過顯微鏡觀察判斷陽性細胞，其中能夠在背景中明確表現(xiàn)為特異性質(zhì)的棕黃色以及棕褐色類型顆粒均可判定為陽性，而經(jīng)對比無顯著特異性著色者則為陰性。將各玻片置于低倍鏡視野，按照雙盲法進行選擇，選出10個陽性數(shù)量較多者給予詳細計數(shù)，并分別計算出其陽性細胞個數(shù)在總細胞個數(shù)中所占百分比，算出平均值，并進行積分評價。

1.3 觀察指標(biāo) 比較各組IL-17及VEFG的陽性表達率及表達水平，分析IL-17與VEGF表達的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料比較采用χ2檢驗，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間比較采用t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析，相關(guān)性應(yīng)用Pearson法進行評價，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組IL-17及VEFG的陽性表達率比較 A組和B組患者的IL-17陽性率及VEGF陽性率均明顯高于C組，且A組的IL-17陽性率及VEGF陽性率均明顯高于B組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=51.615、38.508、33.049、21.085、4.477、4.201，均P＜0.05)，見表1、圖1。

表1 各組IL-17及VEFG的陽性表達率比較[例（%）]

圖1 IL-17及VEGF在各組中的表達(免疫組化染色，×400倍)

2.2 各組IL-17及VEGF的表達水平比較 A組和B組患者的IL-17及VEGF的表達水平均明顯高于C組，且A組的IL-17及VEGF的表達水平均明顯高于B組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=34.422、27.244、50.166、22.827、6.246、12.394，均P＜0.05)，見表2。

表2 各組IL-17及VEGF的表達水平比較(±s)

表2 各組IL-17及VEGF的表達水平比較(±s)

注：與B組比較，aP＜0.05；與C組比較，bP＜0.05。

組別A組B組C組F值P值例數(shù)33 32 30 IL-17(個/LP) 35.29±4.17ab30.14±2.12b8.16±1.16 3.984 0.002 VEGF(個/LP) 29.33±3.65ab20.18±2.06b10.22±1.25 3.823 0.014

2.3 IL-17與VEGF表達的相關(guān)性 根據(jù)Pearson法分析IL-17與VEGF表達的相關(guān)性，A組VEGF和IL-17之間呈正相關(guān)(r=0.784，P=0.000)，B組VEGF和IL-17之間呈相關(guān)(r=0.629，P=0.001)。

3 討 論

臨床上，鼻息肉作為耳鼻喉科十分常見的一類疾病，其在成年人群體中的發(fā)病率較高，對患者的正常呼吸具有較大影響。手術(shù)療法是常見的臨床治療方案，但部分患者在術(shù)后仍會復(fù)發(fā)，進而影響其生活質(zhì)量。當(dāng)前對于鼻息肉的發(fā)病機制仍未完全闡明，國外部分報道指出，鼻息肉的特征主要表現(xiàn)在上皮增生和間質(zhì)水腫，以及血管增生與擴張等方面，還可合并多類炎性細胞的浸潤[6-7]。因此，分析炎癥細胞因子以及VEGF在鼻息肉組織中的表達，對于防治鼻息肉具有重要的意義。

本研究結(jié)果顯示，A組和B組IL-17及VEGF的陽性率及表達水平均明顯高于C組，且A組的IL-17及VEGF陽性率及表達水平均明顯高于B組，這提示隨著患者癥狀程度的加重，IL-17與VEGF均呈現(xiàn)出明顯的表達上調(diào)。且進一步根據(jù)Pearson法分析IL-17與VEGF表達的相關(guān)性可知，二者之間呈正相關(guān)聯(lián)系。分析原因，筆者認為這可能是因為IL-17作為前炎癥細胞因子，其可誘導(dǎo)機體內(nèi)細胞形成大量的促炎性因子，例如環(huán)氧化酶-2和細胞間粘附分子-1等。IL-17與相關(guān)受體結(jié)合之后，調(diào)節(jié)了促炎癥細胞因子的活性，同時參與到鼻息肉的結(jié)構(gòu)重塑，進而在鼻息肉的產(chǎn)生與發(fā)展中發(fā)揮作用[8-9]。VEGF是一種血管通透因子，其可結(jié)合血管內(nèi)皮細胞中的特異性受體FLT及FLK/KDR，從而刺激內(nèi)皮細胞不斷地分裂、增殖與移動，進而誘導(dǎo)血管生成，其在炎癥和創(chuàng)傷愈合的病理過程中具有重要作用[10-11]。在鼻息肉的形成過程中，VEGF可能通過促使鼻黏膜血管的通透性變大與血漿滲出變多，加重鼻黏膜水腫，加速血管增生，通過IL-17對鼻息肉結(jié)構(gòu)的重塑作用，最終促進了鼻息肉的發(fā)生與發(fā)展。Liu等[12]也報道證實，鼻息肉的形成是多因素和多步驟的過程，其中始動因素是患者的鼻黏膜損傷，而炎性細胞因子間的平衡紊亂則可能是一種誘導(dǎo)機制，通過一系列生化反應(yīng)致使患者的纖維組織疝出，并經(jīng)過上皮再生和間質(zhì)水腫等諸多病理過程，最終引起鼻息肉。此外，王悅等[13]的報道也有類似的結(jié)論可加以證實。

綜上所述，IL-17與VEGF在鼻息肉組織的表達顯著升高，且兩者之間的表達呈正相關(guān)。因此，IL-17與VEGF可能共同參與了鼻息肉癥狀的形成與發(fā)展，值得臨床重視。

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Expression and correlation analysis of interleukin 17 and vascular endothelial growth factor in nasal polyps.

WANG Xian,ZHAO Da-jing,QI Bao-jian.Department of ENT,the Beijing Shijingshan Hospital,Shijingshan Teaching Hospital of Capital Medical University,Beijing 100043,CHINA

Objective To study the expression of interleukin 17(IL-17)and vascular endothelial growth factor (VEGF)in nasal polyps,and explore their correlation.MethodsFrom February 2015 to February 2016,a total of 65 patients with chronic sinusitis and nasal sinusitis,who received nasal endoscopic surgery in Department of ENT of our hospital were selected and divided into A group(with nasal polyp,n=33)and B group(without nasal polyps,n=32).At the same time,30 cases of patients with nasal septum deviation underwent nasal endoscopic surgery were chosen as C group(control group).The positive expression rate and expression level of IL-17 and VEFG in the three groups were compared,and the correlation between the expression of IL-17 and VEGF was analyzed.ResultsThe positive rate of IL-17 and VEGF in A group(93.94%,84.85%,respectively)and B group(75.00%,62.50%)were significantly higher than those of C group(3.33%,6.67%,respectively),P＜0.05.Moreover,the positive rate of IL-17 and VEGF in A group was significantly higher than those in B group(P＜0.05).The expression levels of IL-17 and VEGF were(35.29±4.17)/LP, (29.33±3.65)/LP in A group and(30.14±2.12)/LP,(20.18±2.06)/LP in B group,which were significantly higher than those in C group of(8.16±1.16)/LP,(10.22±1.25)/LP.The expression levels of IL-17 and VEGF in A group were significantly higher than those in B group(P＜0.05).The correlation analysis of Pearson showed that there was a positive correlation between the two factors(r=0.784,0.629;P＜0.05).ConclusionThe expressions of IL-17 and VEGF significantly increase in nasal polyps,and there is a positive correlation between the two factors.Therefore,IL-17 and VEGF may be involved in the formation and development of nasal polyps,which is worthy of clinical attention.

Nasal polyps tissue;Interleukin 17(IL-17);Vascular endothelial growth factor(VEGF);Expression

R765.25

A

1003—6350（2016）22—3669—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.22.020

2016-04-11)

王弦。E-mail：wangxian036928@sina.com