VEGF-C/D及受體VEGFR-3與肝癌淋巴道轉(zhuǎn)移的研究進(jìn)展

李易嶙，武曉彤，黃　波

(1.大連醫(yī)科大學(xué) 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 病理教研室，遼寧 大連 116044；2.哈爾濱市胸科醫(yī)院 病理科，黑龍江 哈爾濱 150056；3.遼寧省腫瘤醫(yī)院 病理科，遼寧 沈陽 110042)

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VEGF-C/D及受體VEGFR-3與肝癌淋巴道轉(zhuǎn)移的研究進(jìn)展

李易嶙1，武曉彤2，黃波3

(1.大連醫(yī)科大學(xué) 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 病理教研室，遼寧 大連 116044；2.哈爾濱市胸科醫(yī)院 病理科，黑龍江 哈爾濱 150056；3.遼寧省腫瘤醫(yī)院 病理科，遼寧 沈陽 110042)

VEGF家族即血管內(nèi)皮生長因子家族，包括VEGF-A/B/C/D/E及PIGF(胎盤生長因子)，它們在人類的各種病理及生理過程中發(fā)揮著重要的作用。其中，VEGF-C/D及其受體VEGFR-3主要在淋巴管生成中發(fā)揮作用，可以促進(jìn)淋巴管的生成及淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的生長。對其在肝癌淋巴道轉(zhuǎn)移中的研究可以幫助早期發(fā)現(xiàn)淋巴道轉(zhuǎn)移，從而及早治療提高患者生存率。

肝癌；VEGF-C；VEGF-D；VEGFR-3；淋巴道轉(zhuǎn)移

[引用本文]李易嶙，武曉彤，黃波.VEGF-C/D及受體VEGFR-3與肝癌淋巴道轉(zhuǎn)移的研究進(jìn)展[J].大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2016,38(4)：402-406.

肝癌是世界范圍內(nèi)第五位的常見腫瘤，同時(shí)也是所有腫瘤中致死率第二位的一種惡性腫瘤。早期即可發(fā)生轉(zhuǎn)移，從而失去最佳治療時(shí)期，影響預(yù)后，死亡率約為95%。33.8%的肝細(xì)胞癌患者早期就發(fā)生肝外淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，淋巴道轉(zhuǎn)移作為肝癌重要的致死因素，其機(jī)制仍然不十分清晰[1-3]。本綜述著重介紹在淋巴道轉(zhuǎn)移中研究最為廣泛的VEGF-C/D及其受體VEGFR-3通路的相關(guān)研究進(jìn)展及其與肝癌淋巴道轉(zhuǎn)移的關(guān)系。

1　VEGF-C、VEGF-D與受體VEGFR-3結(jié)合參與腫瘤轉(zhuǎn)移

VEGF-C、VEGF-D屬于血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)家族，該家族是一類具有多重生物學(xué)功能的蛋白質(zhì)家族，由Ferrarra等[4]于1989年在牛垂體濾泡星狀細(xì)胞培養(yǎng)液中發(fā)現(xiàn)，是血小板衍生生長因子家族的成員，分子量約為25～34 kD，序列高度保守，在人和動(dòng)物體內(nèi)廣泛分布，調(diào)控各種生理病理過程。除VEGF-C/D之外，該家族還包含有VEGF-A、VEGF-B、VEGF-E及胎盤生長因子 (PIGF)，其中VEGF-A/B主要在血管的生成中發(fā)揮作用，是腫瘤血行轉(zhuǎn)移的重要調(diào)控通路。在缺血缺氧性疾病中，VEGF的表達(dá)上調(diào)，引起了血管內(nèi)皮細(xì)胞的分裂與增殖，促進(jìn)了新生血管的形成而改善了組織血供；在腫瘤組織中，腫瘤細(xì)胞本身及腫瘤組織內(nèi)部的巨噬細(xì)胞、肥大細(xì)胞均能大量分泌VEGF促進(jìn)腫瘤組織內(nèi)部血管生成，為腫瘤的生長提供足夠的氧氣與營養(yǎng)物質(zhì)，同時(shí)可增加血管通透性，促進(jìn)腫瘤基質(zhì)形成，為腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移提供方便。而VEGF-C、VEGF-D則主要在淋巴管生成中發(fā)揮作用是最重要的淋巴管生成因子，VEGFR-3則是作為其受體發(fā)揮作用[5]。

VEGFR-3屬于酪氨酸激酶類受體，其基因位于第五號(hào)染色體的q33-q35區(qū)帶上，有兩種轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，分別編碼相差65個(gè)氨基酸的長短兩種多肽。它是一個(gè)高度糖基化的單鏈跨膜蛋白，分子量為180 kD，它的細(xì)胞外部分包含7個(gè)免疫球蛋白相似的重復(fù)區(qū)域，1個(gè)轉(zhuǎn)膜區(qū)及2個(gè)細(xì)胞內(nèi)酪氨酸激酶區(qū)域(TK1和TK2)[6]。它在胚胎時(shí)期脈管系統(tǒng)的發(fā)育尤其是淋巴管的分化和形成中起重要作用，缺乏VEGFR-3表達(dá)的小鼠因脈管重塑的不足在胚胎期第9.5天死亡[7]。人類的VEGF-C基因位于染色體4q34上，擁有7個(gè)外顯子，編碼一種含有419個(gè)氨基酸殘基分子量約為46.9 kD的蛋白質(zhì)[8]。VEGF-C前蛋白含有一個(gè)N端信號(hào)肽、一個(gè)N端前肽、VEGF同源域及一個(gè)C端前肽。它以二硫鍵連接的二聚體形式分泌到體外，進(jìn)一步被纖溶酶與其他的蛋白酶修飾成21 kD的非二硫鍵連接的同源二聚體蛋白(對VEGFR-2及VEGFR-3有很強(qiáng)的親和性)發(fā)揮效應(yīng)[9]。而VEGF-D基因則位于染色體Xp22.31，全長354 bp，分子量40.9 kD。其C末端135氨基酸位點(diǎn)富含半胱氨酸殘基，N端有3個(gè)糖基化位點(diǎn)，并存在高疏水區(qū)，對蛋白質(zhì)分解有重要意義[10]。

VEGF-C是迄今為止發(fā)現(xiàn)的最具特異性的淋巴管生長因子，它與受體VEGFR-3結(jié)合可導(dǎo)致受體磷酸化，從而發(fā)揮酪氨酸激酶活性，通過MEK/ERK和PI3/AKT途徑刺激淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的有絲分裂，促進(jìn)淋巴管生長，發(fā)揮淋巴管生成因子的作用。Karkkainen等[11]發(fā)現(xiàn)VEGF-C缺失的小鼠胚胎缺乏淋巴脈管系統(tǒng)，并在出生前即死于淋巴水腫；Manila等[12]在VEGF-C基因轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，將VEGF-C過表達(dá)的人乳腺癌MCF-7細(xì)胞移植到裸鼠爪底脂肪墊后，有62%～75%的荷瘤鼠出現(xiàn)局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，而空載體轉(zhuǎn)染的荷瘤鼠則未出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，VEGF-C基因轉(zhuǎn)染組的腫瘤灶內(nèi)淋巴管及瘤旁淋巴管數(shù)均較陰性對照組明顯增加。由此推斷，VEGF-C表達(dá)能夠刺激腫瘤淋巴管生成并促進(jìn)了低轉(zhuǎn)移潛能的人乳腺癌細(xì)胞MCF-7在荷瘤鼠體內(nèi)發(fā)生局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。

VEGF-D與腫瘤淋巴管生成及淋巴道轉(zhuǎn)移有密切的關(guān)系。Stacker等[13]通過對淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)志物L(fēng)YVE-1的染色研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤細(xì)胞中VEGF-D的表達(dá)不但可以誘導(dǎo)腫瘤組織中淋巴管的形成，而且可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞向淋巴結(jié)播散。Du等[14]將VEGF-D基因重組質(zhì)粒與空白對照質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到人卵巢漿液腺癌細(xì)胞，然后分別皮下注射到裸鼠足墊，運(yùn)用免疫組化、HE染色、赫斯特染色及淋巴管顯影等技術(shù)，觀察腫瘤的生長，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等。發(fā)現(xiàn)過表達(dá)VEGF-D組小鼠，腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率及腫瘤的體積明顯高于對照組，同時(shí)高表達(dá)組細(xì)胞凋亡率也明顯低于對照組，提示VEGF-D可促進(jìn)淋巴管的生成及腫瘤的淋巴轉(zhuǎn)移。

Nathanson等[15]研究發(fā)現(xiàn)，在轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)周圍淋巴管中，VEGFR-3陽性淋巴管的密度增高，約為未發(fā)生轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)周圍淋巴管密度的4倍，而VEGFR-3陽性的血管密度約為未轉(zhuǎn)移血管密度的1/2，說明其為淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的重要標(biāo)記。Su等[16]取多種腫瘤組織與正常組織進(jìn)行免疫組化染色及熒光原位雜交，發(fā)現(xiàn)VEGF-C及VEGFR-3在不同腫瘤組織中普遍表達(dá)，且在晚期腫瘤中的表達(dá)顯著變強(qiáng)。接著進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)及RT-PCR對侵襲能力不同的細(xì)胞進(jìn)行VEGF-C及VEGFR-3表達(dá)的檢測，顯示侵襲能力強(qiáng)的細(xì)胞VEGF-C及VEGFR-3表達(dá)增強(qiáng)，提示VEGF-C與VEGFR-3能夠增加腫瘤細(xì)胞侵襲能力，促進(jìn)腫瘤的轉(zhuǎn)移。

2　調(diào)控VEGF-C/D及其受體VEGFR-3通路參與淋巴道轉(zhuǎn)移

2.1促進(jìn)VEGF-C/D及其受體VEGFR-3信號(hào)通路表達(dá)

缺氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)，是一種能夠在腫瘤形成過程中對腫瘤內(nèi)部缺氧狀況進(jìn)行調(diào)節(jié)維持細(xì)胞氧平衡的物質(zhì)[17]。Ni等[18]等選取75例未經(jīng)過放化療接受了乳腺癌根治術(shù)確診為乳腺癌的患者進(jìn)行免疫組化分析，同時(shí)在其他20例其他疾病患者上取正常乳腺組織作為對比。發(fā)現(xiàn)VEGF-C的表達(dá)與HIF-1α呈正相關(guān)且均能促進(jìn)淋巴管的生成。HIF-1α作為轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入細(xì)胞核與DNA的缺氧反應(yīng)元件結(jié)合對VEGF家族基因的表達(dá)進(jìn)行調(diào)節(jié)。Okada等[19]的實(shí)驗(yàn)結(jié)果支持了Ni的結(jié)論，在乳腺癌中HIF-1α具有淋巴管生成的調(diào)節(jié)功能，通過上調(diào)VEGF-C表達(dá)促進(jìn)淋巴道轉(zhuǎn)移。Katsuta等[20]檢測了5種食管鱗癌細(xì)胞系中HIF-1α與VEGF-C的表達(dá)提示HIF-1α可通過調(diào)節(jié)VEGF-C來對淋巴管生成與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移進(jìn)行調(diào)節(jié)[21]。Li等[21]對70例結(jié)腸癌患者進(jìn)行免疫組化分析發(fā)現(xiàn)高遷移率組蛋白1(HMGB1)的表達(dá)與微淋巴管密度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率相關(guān)，進(jìn)一步進(jìn)行細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)證明HMGB1蛋白可以通過核因子κB(NF-κB)上調(diào)VEGF-C的表達(dá)而對淋巴轉(zhuǎn)移產(chǎn)生影響。而Lane等[22]的研究通過對宮頸癌細(xì)胞系進(jìn)行不同的培養(yǎng)(普通培養(yǎng)與添加尼古丁培養(yǎng))，然后測定細(xì)胞的增殖水平并進(jìn)行免疫熒光檢測，發(fā)現(xiàn)尼古丁培養(yǎng)組細(xì)胞增殖明顯加強(qiáng)，VEGF-C水平明顯增加。證明尼古丁(nicotine)能夠有效地增強(qiáng)宮頸癌中VEGF-C的表達(dá)并促進(jìn)其轉(zhuǎn)移[22]。HIF-1α、HMGB1以及nicotine對VEGF-C都是起的正調(diào)控作用。

已證實(shí)，VEGF-D也能夠刺激腫瘤淋巴管的生成，但是對其上游調(diào)控因子的研究卻并不多。Deng等[23]用免疫組化的方法對107例胃腺癌患者的癌組織及癌旁的正常組織進(jìn)行染色，發(fā)現(xiàn)癌組織中STAT3與VEGF-D的表達(dá)明顯高于癌旁正常組織。接著研究者對胃癌細(xì)胞系HGC-27及正常胃黏膜細(xì)胞系GES-1進(jìn)行培養(yǎng)，利用siRNA技術(shù)使一部分HGC-27細(xì)胞STAT3基因滅活，從基因水平及蛋白質(zhì)水平分別測定正常細(xì)胞系與STAT3滅活細(xì)胞系中VEGF-D與STAT3的表達(dá)情況。發(fā)現(xiàn)胃癌細(xì)胞系中VEGF-D及STAT3的表達(dá)顯著高于正常胃黏膜組織，滅活STAT3基因后VEGF-D的表達(dá)也顯著下調(diào)。

腫瘤壞死因子超家族15(Tnfsf15)是一種上皮來源的細(xì)胞因子，它可以引起血管內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡，也可以促進(jìn)淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的生長與遷移，刺激淋巴管生成改善淋巴循環(huán)。研究人員發(fā)現(xiàn)用Tnfsf15處理鼠的淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞可以引起VEGFR-3的表達(dá)增加，而這種增強(qiáng)作用可以通過沉默Tnfsf15受體的表達(dá)進(jìn)行抑制[24]。在炎癥組織中，淋巴管密度比正常組織大得多，VEGFR-3的表達(dá)量也明顯高于正常組織，而將VEGFR-3沉默之后淋巴管密度下降，證明在炎癥過程中VEGFR-3在淋巴管形成中起主要作用。而這種表達(dá)的促進(jìn)主要是通過NF-κB及Prox1來進(jìn)行的[25]。

2.2抑制VEGF-C/D及其受體VEGFR-3信號(hào)通路表達(dá)

上皮膜蛋白1(EMP-1)則能夠有效的下調(diào)VEGF-C的表達(dá)對淋巴管生成及淋巴道轉(zhuǎn)移起負(fù)性調(diào)控作用。Sun等[26]先通過免疫組化對76例前列腺癌的患者與34例正常標(biāo)本進(jìn)行臨床病理分析，然后通過慢病毒載體將EMP-1基因轉(zhuǎn)入前列腺癌細(xì)胞系PC-3中，而對照組則轉(zhuǎn)染空載體，對這兩組細(xì)胞系進(jìn)行qRT-PCR、western blot、MTT比色實(shí)驗(yàn)及對侵襲及遷移能力進(jìn)行測試，對結(jié)果進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)在前列腺癌中EMP1的量對比正常組織明顯下降，單因素分析顯示EMP1的表達(dá)與前列腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及分期相關(guān)。細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果則進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)EMP-1基因轉(zhuǎn)染后細(xì)胞VEGF-C表達(dá)明顯下降，提示EMP1可通過抑制VEGF-C的表達(dá)抑制轉(zhuǎn)移。

轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)是一種具有多種生物學(xué)效應(yīng)的細(xì)胞因子，它在肺的纖維化中起到重要作用。在對肺纖維化之前肺組織中的成纖維細(xì)胞及特發(fā)性肺纖維化患者肺組織的研究中，發(fā)現(xiàn)TGF-β1可以下調(diào)VEGF-D的表達(dá)，并且這種抑制作用隨著TGF-β1量的增加及作用時(shí)間的增加而加強(qiáng)，這種抑制作用可通過抑制TGF-β1Ⅰ 型受體激酶及氨基末端激酶(JNK)而解除[27]。白細(xì)胞介素24(IL-24)被認(rèn)為是一種能夠抑制腫瘤形成的細(xì)胞因子，實(shí)驗(yàn)證明IL-24在乳腺癌中呈下調(diào)狀態(tài)且其表達(dá)的下調(diào)與淋巴道轉(zhuǎn)移的發(fā)生呈正相關(guān)，預(yù)示著不良的預(yù)后。Frewer等[28]在對乳腺癌患者標(biāo)本及乳腺癌細(xì)胞系進(jìn)行了一系列研究之后得到結(jié)論：IL-24可以通過抑制VEGF-D的表達(dá)，減少乳腺癌淋巴轉(zhuǎn)移概率。除了TGF-β1及IL-24可以下調(diào)VEGF-D的表達(dá)，TGF-α、betacellulin及調(diào)蛋白β1也可下調(diào)癌細(xì)胞中VEGF-D表達(dá)，同時(shí)它們可增加VEGF-A及VEGF-C的表達(dá)[29]。

VEGFR-3在人體中主要在淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)，與VEGF-C或VEGF-D結(jié)合后可以在炎癥、腫瘤或傷口愈合的過程中促進(jìn)淋巴管生成[30]。在炎癥組織中，MicroRNA-1236發(fā)揮的是負(fù)性調(diào)節(jié)的作用。研究人員沉默人淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞(HLEC)中microRNA1236的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)VEGFR-3的表達(dá)明顯上升，進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)顯示，microRNA-1236的這種抑制作用主要通過其與VEGFR-3 mRNA 3’端非編碼序列的結(jié)合產(chǎn)生。且這種調(diào)控作用對VEGFR-2不產(chǎn)生影響[31]。

3　VEGF-C、VEGF-D及其受體VEGFR-3與肝癌淋巴道轉(zhuǎn)移

VEGF-C與VEGFR-3通路在大部分實(shí)體腫瘤，包括肝細(xì)胞癌，是淋巴管生成和促進(jìn)轉(zhuǎn)移的主要信號(hào)通路。研究顯示，原發(fā)性肝癌瘤周肝細(xì)胞與瘤內(nèi)間質(zhì)細(xì)胞間的相互作用是肝癌淋巴道轉(zhuǎn)移的可能調(diào)控機(jī)制，并且瘤周淋巴管形成促進(jìn)了肝癌淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移，導(dǎo)致了不良的預(yù)后，具有獨(dú)立的負(fù)性預(yù)后意義[32]。Xiang等[33]對比檢測有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的肝細(xì)胞肝癌患者123例與未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者145例中VEGF-C表達(dá)的區(qū)別，證明VEGF-C是影響患者淋巴道轉(zhuǎn)移的獨(dú)立因素，能夠顯著的降低患者的生存率。VEGF-D對腫瘤淋巴管生成的作用雖然已經(jīng)明確，不過探索其在肝癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中作用的研究仍然較少。Thelen等[34]的研究選取21例肝細(xì)胞肝癌組織、5例肝硬化組織及5例正常肝臟組織進(jìn)行免疫組化分析，觀察VEGF-D及VEGFR-3的表達(dá)發(fā)現(xiàn)VEGF-D只在腫瘤細(xì)胞表達(dá)，將樣本進(jìn)行原位雜交檢測發(fā)現(xiàn)其mRNA的表達(dá)也局限在腫瘤細(xì)胞中，與此形成鮮明對比的是VEGFR-3廣泛的分布于淋巴管與血管。接下來，研究者選取105例肝細(xì)胞肝癌標(biāo)本，根據(jù)VEGF-D免疫組化染色的強(qiáng)度分成VEGF-D高表達(dá)與VEGF-D低表達(dá)兩組，高表達(dá)組淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率明顯高于低表達(dá)組。在細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)中，研究者對VEGF-D表達(dá)缺陷的肝細(xì)胞肝癌細(xì)胞系SKHep-1分別進(jìn)行3種處理：轉(zhuǎn)染融合有VEGF-D基因的質(zhì)粒、轉(zhuǎn)染空白質(zhì)粒及不轉(zhuǎn)染處理。然后進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，經(jīng)檢測轉(zhuǎn)染了VEGF-D基因的細(xì)胞可正常表達(dá)VEGF-D而其余兩組則不能，將處理后的3組細(xì)胞系接種到裸鼠，然后處死裸鼠取出腫瘤組織進(jìn)行對比。發(fā)現(xiàn)有VEGF-D表達(dá)的腫瘤組織體積明顯大于其余兩組。將腫瘤組織以LYVE-1為標(biāo)記進(jìn)行免疫組化染色觀察淋巴管的情況，發(fā)現(xiàn)VEGF-D表達(dá)組淋巴管密度明顯高于其余兩組且淋巴管管腔擴(kuò)大。乙肝病毒表面X抗原(HBxAg)是一種反式激活蛋白，它可以通過改變宿主細(xì)胞基因表達(dá)在肝癌發(fā)生中發(fā)揮作用。通過對比HBxAg陽性與陰性的HepG2細(xì)胞發(fā)現(xiàn)陽性細(xì)胞中VEGFR-3的表達(dá)明顯高于陰性細(xì)胞，75%的HBxAg陽性肝細(xì)胞肝癌患者VEGFR-3表達(dá)提高，VEGFR-3表達(dá)水平的提高與HBxAg的表達(dá)及患者的生存率相關(guān)，過表達(dá)VEGFR-3可以強(qiáng)烈刺激培養(yǎng)肝癌細(xì)胞的生長，通過對VEGFR-3基因的抑制可以部分的抑制HBxAg對肝細(xì)胞生長的刺激作用[35]。

4　結(jié)　語

肝癌的轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致肝癌患者死亡率居高不下的一個(gè)重要原因，對其過程進(jìn)行研究闡明其分子機(jī)制找到關(guān)鍵的調(diào)控分子進(jìn)行靶向治療可以有效降低其轉(zhuǎn)移率并且可極大的提高患者生存率。既往研究已經(jīng)對VEGF-C/D/R3信號(hào)軸在眾多腫瘤包括肝癌中的表達(dá)進(jìn)行了一系列的研究，一定程度地闡明了該信號(hào)軸的部分生物學(xué)行為，但在該信號(hào)軸調(diào)控方面的研究仍存在不足，仍需深入探索。

[1] Lafaro KJ，Demirjian AN，Pawlik TM.Epidemiology of Hepatocellular carcinoma[J]. Surg Oncol Clin N Am,2015,24(1):1-17.

[2] Paik JH，Kollipara R，Chu G，et al.FoxOs are lineage-restricted redundant tumor suppressors and regulate endothelial cell homeostasis[J].Cell,2007,128(2):309-323.

[3] Bosch FX，Ribes J，Diaz M,et al.Primary liver cancer: worldwide incidence and trends[J].Gastroenterology, 2004,127(5 Suppl 1):S5-S16.

[4] Ferrar N，Henzel WJ. Pituitary follicular cells secrete a novel heparin-binding growth factors pecific for vascular endothelial cells[J].Biochem Biophys Res Commun,1989,161(2):851-858.

[5] Roberst N，Kloos B，Cassella M，et al.Inhibition of VEGFR-3 acvtiation with the antagonistic antibody more potently suppresscs lymph node and distant metastases than inactivation of VECFR-2[J].Cancer Res, 2006, 66(5):2650-2657.

[6] Taipale J,Makinen T,Arighi E,et al.Vascular endothelial growth factor receptor-3[J].Curr Top Microbiol Immunol,1999,237:85-96.

[7] Cross MJ，Dixelius J，Matsumoto T，et al.VEGF-receptor signal trans- duction[J].Trends Biochem Sci,2003, 28(9):488-494.

[8] Olofsson B,Jeltsch M,Eriksson U,et al.Current Biology of VEGF-B and VEGF- C[J].Curr Opin Biotechnol,1999,10(6):528-535.

[9] Otrock ZK，Makarem JA，Shamseddine AI.Vascular endothelial growth factor family of ligands and receptors:Review[J].Blood Cells Mol Dis,2007,38(3):258-268.

[10] Yamada Y,Shimane M,Nezu J,et al.Molecular cloning of a novel vascular endothelial growth factor，VEGF-D[J].Genomics,1997,42(3):483-488.

[11] Karkkainen MJ,Haiko P,Sainio K,et al.Vascular endothelial growth factor C is required for sprouting of the first lymphatic vessels from embryonic veins[J].Nat Immunol,2004,5(1):74-80.

[12] Manila MM,Ruohola JK,Karpanen T,et al.VEGF-C included lymphangiogenesis is associated with lymph node metastasis in orthotopic MCF-7 tumors[J].Int J Cancer,2002,98(6):946-951.

[13] Stacker SA,Caesar C,Baldwin ME,et al.VEGF-D promotes the metastatic spread of tumor cells via the lymphatics[J].Nat Med,2001,7(2):186-191.

[14] Du LC，Chen XC，Wang D，et al.VEGF-D-induced draining lymphatic enlargement and tumor lymph- angiogenesis promote lymph node metastasis in a xenograft model of ovarian carcinoma[J].Reprod Biol Endocrinol,2014,12:14.

[15] Nahtanson SD，Zarbo RJ，Wachna DL，et al. Microvessels that predict axillary lymph node metastases in patients with breast cancer[J]. Arch Surg,2000,135(5): 586-593.

[16] Su JL，Yang PC，Shih JY，et al. The VEGF-C/Flt-4 axis promotes invasion and metastasis of cancer cells[J]. Cancer Cell,2006,9(3):209-223.

[17] Semenza GL.HIF-1:mediator of physiological and pathophysiological responses to hypoxia[J].J Appl Physiol,2000,88(4):1474-1480.

[18] Ni X，Zhao Y，Ma J,et al.Hypoxia-induced factor-1 alpha upregulates vascular endothelial growth factor C to promote lymphangiogenesis and angiogenesis in breast cancer patients[J].J Biomed Res,2013,27(6):478-485.

[19] Okada K，Osaki M，Araki K，et al.Expression of hypoxia-inducible factor(HIF- 1alpha),VEGF-C and VEGF-D in non-invasive and invasive breast ductal carcinomas[J].Anticancer Res,2005,25(4):3003-3009.

[20] Katsuta M，Miyashita M，Makino H，et al. Correlation of hypoxia inducible factor-lalpha with lymphatic metastasis via vascular endothelial growth factor-C in human esophageal cancer[J].Exp Mol Pathol,2005,78(2):123-130.

[21] Li Y，He J，Zhong D，et al.High-mobility group box 1 protein activating nuclear factor-kB to upregulate vascular endothelial growth factor C is involved in lymphangiogenesis and lymphatic node metastasis in colon cancer[J].J Int Med Res,2015,43(4):494-505.

[22] Lane D，Gray EA，Mathur RS，et al.Up-regulation of vascular endothelial growth factor-C by nicotine in cervical cancer cell lines[J].Am J Reprod Immunol,2005,53(3):153-158.

[23] Deng J，Cui J，Jiang N，et al.STAT3 regulation the expression of VEGF-D in HGC-27 gastric cancer cell[J].Am J Transl Res,2014,6(6):756-767.

[24] Qin TT，Xu GC，Qi JW，et al.Tumor necrosis factor superfamily member 15(Tnfsf15) facilitates lymph- angiogenesis via upregulation of Vegfr3 gene expression in lymphatic endothelial cells[J].J Pathol,2015, 237(3):307-318.

[25] Flister MJ，Wilber A，Hall KL，et al.Inflammation induces lymphangiogenesis through up-regulation of VEGFR-3 mediated by NF-KB and Prox1[J].Blood,2010, 115(2):418-429.

[26] Sun GG，Wang YD，Cui DW，et al.EMP1 regulates caspase-9 and VEGFC expression and suppresses prostate cancer cell proliferation and invasion[J].Tumour Biol,2014,35(4):3455-3462.

[27] Cui Y，Osorio JC，Risquez C，et al.Transforming growth factor-β1 downregulates vascular endothelial growth factor-D expression in human lung fibroblasts via the Jun NH2-terminal Kinase signaling pathway[J].Mol Med,2014,20(1):120-134.

[28] Frewer NC，Ye L，Sun PH，et al.Potential implication of IL-24 in lymphangiogenesis of human breast cancer [J].Int J Mol Med,2013,31(5):1097-1104.

[29] O-charoenrat，Rhys-Evans P，Modjtahedi H，et al.Vascular endothelial factor family members are differentially regulated by c-erbB signaling in head and neck squamous carcinoma cells[J].Clin Exp Metastasis,2000,18(2): 155-161.

[30] Veikkola T，Jussila L，Makinen T，et al.Signalling via vascular endothelial growth factor receptor-3 is sufficient for lymphangiogenesis in transgenic mice[J].EMBO J,2001,20(6):1223-1231.

[31] Jones D，Li Y，He Y，et al.Mirtron microRNA-1236 inhibits VEGFR-3 signaling during inflammatory lymphangiogenesis[J].Arterioscler Thromb Vasc Biol,2012,32(3): 633-642.

[32] Zhuang PY，Shen J，Zhu XD，et al.Prognostic Roles of Cross-Talk between Peritumoral Hepatocytes and Stromal Cells in Hepatocellular Carcinoma Involving Peritumoral VEGF-C, VEGFR-1 and VEGFR-3[J/OL].PloS ONE,2013,8(5):e64598.

[33] Xiang ZL，Zeng ZC，Tang ZY，et al.Nuclear accumulation of CXCR4 and overexpression of VEGF-C and CK19 are associated with a highter risk of lymph node metastasis in hepatocellular carcinoma[J].Chin J Oncol, 2010,32(5):344-349.

[34] Thelen A，Scholz A，Benckert， et al. VEGF-D promotes tumor growth and lymphatic spread in a mouse model of hepatocellular carcinoma[J].Int J Cancer,2008,122(11): 2471-2481.

[35] Lian Z，Liu J，Wu M，et al.Hepatitis B x antigen up-regulates vascular endothelial growth factor receptor 3 in hepatocarcinogenensis[J].Hepatology,2007,45(6):1390- 1399.

Research progress of VEGF-C/D and its receptor VEGFR-3 in the lymphatic metastasis of hepatocellular carcinoma

LI Yi-lin1，WU Xiao-tong2，HUANG Bo3

(1.DepartmentofPathology,SchoolofBasicMedicalScience,DalianMedicalUniversity,Dalian116044,China;2.DepartmentofPathology,HarbinChestHospital,Harbin150056,China; 3.DepartmentofPathology,TumorHospitalofLiaoningProvince,Shenyang110042,China)

Vascular endothelial growth factor (VEGF) family is a large family including VEGF-A/B/C/D/E and Placenta growth factor (PIGF), which play important roles in various pathological and physiological processes. Among them, VEGF-C/D and its receptor VEGFR-3 are mainly involved in the process of lymphatic formation, which could promote the formation of lymphatic vessels and accelerate the growth of lymphatic endothelial cells. So the research about the lymphatic metastasis of liver cancer could improve the survival rate of patients through detect the lymphatic metastasis in early stage.

HCC；VEGF-C；VEGF-D；VEGFR-3；lymphatic metastasis

遼寧省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(2015020265)

李易嶙(1990-)，男，湖南永州人，碩士研究生。E-mail：liyilin1020@163.com

黃 波，主任醫(yī)師。E-mail：huangbo197033@163.com

綜述10.11724/jdmu.2016.04.22

R36

A

1671-7295(2016)04-0402-05

2015-11-25；

2016-05-23)