大腸癌和肝癌術(shù)后“異病同證”的代謝組學(xué)研究＊

魏 濱，呼雪慶，宋雅楠，李曉燕，蔡菲菲，季 青，，羅運(yùn)權(quán)，王文海，蘇式兵＊＊

（1.上海中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)復(fù)雜系統(tǒng)研究中心 上海 201203；2. 上海中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)附屬曙光醫(yī)院上海 201203；3.上海市第七人民醫(yī)院 上海 200137）

大腸癌和肝癌術(shù)后“異病同證”的代謝組學(xué)研究＊

魏 濱1，呼雪慶1，宋雅楠1，李曉燕1，蔡菲菲1，季 青1，2，羅運(yùn)權(quán)2，王文海3，蘇式兵1＊＊

（1.上海中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)復(fù)雜系統(tǒng)研究中心 上海 201203；2. 上海中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)附屬曙光醫(yī)院上海 201203；3.上海市第七人民醫(yī)院 上海 200137）

目的：本文主要探討大腸癌和肝癌術(shù)后肝腎陰虛證、脾虛證和濕熱證“異病同證”的血漿共同代謝物及其代謝機(jī)制。方法：對大腸癌和肝癌術(shù)后肝腎陰虛證、脾虛證、濕熱證和隱證的血漿代謝物譜進(jìn)行代謝組學(xué)（GC-MS）檢測，采用主成分分析（PCA）方法尋找其“異病同證”的共同代謝物，并通過KEGG數(shù)據(jù)庫分析代謝通路。結(jié)果：大腸癌和肝癌術(shù)后肝腎陰虛證共同的代謝物是甘氨酸，尿素，色氨酸和丙氨酸，其代謝調(diào)控以氨基酸的降解為主；脾虛證共同的代謝物是甘氨酸、尿素、色氨酸、葡萄糖、賴氨酸和肌醇，氨基酸的降解和糖類的分解功能受到影響；濕熱證的共同代謝物是甘氨酸、尿素、色氨酸、葡萄糖、丙酸、甘露醇、山梨醇和賴氨酸，以影響糖類物質(zhì)分解和供能過程為主要特征。結(jié)論：代謝組學(xué)方法是研究“異病同證”的有效工具之一。大腸癌、肝癌術(shù)后在肝腎陰虛證、脾虛證和濕熱證各有其共同的代謝物以及代謝機(jī)制。

大腸癌 肝癌 術(shù)后 證候 異病同證 代謝組學(xué)

大腸癌是常見的惡性腫瘤之一。目前手術(shù)是大腸癌主要治療方案，但手術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移率高達(dá)50%左右[1]。肝癌是世界范圍內(nèi)第五大惡性腫瘤，發(fā)病率居惡性腫瘤第3位，每年肝癌死亡人數(shù)達(dá)20萬以上，死亡人數(shù)居惡性腫瘤第3位，新發(fā)肝癌病例中55%發(fā)生于中國[2-4]。肝癌的主要治療方法是手術(shù)切除，但是患者預(yù)后大多不佳。有些患者生存超過5年，大多數(shù)患者一年內(nèi)復(fù)發(fā)，很快就會(huì)死亡[5，6]。中醫(yī)經(jīng)歷數(shù)千年的發(fā)展，在惡性腫瘤治療領(lǐng)域自成體系，數(shù)千年的歷史檢驗(yàn)說明中醫(yī)治療的合理性。中醫(yī)認(rèn)識疾病、治療疾病、評價(jià)療效的基礎(chǔ)是證候[7]。現(xiàn)代中醫(yī)臨床實(shí)踐表明，在“病證結(jié)合”、“方證相應(yīng)”、“辨證施治”的理論指導(dǎo)下，中醫(yī)藥治療惡性腫瘤等復(fù)雜難治性疾病具有明顯的特色優(yōu)勢[8]。

代謝組學(xué)是一種高通量組學(xué)平臺，可獲得大量的數(shù)據(jù)信息，利用生物信息學(xué)技術(shù)和各種統(tǒng)計(jì)方法對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，以尋找生物體代謝物變化的規(guī)律[9，10]。代謝組學(xué)是研究體內(nèi)分子量1 000以內(nèi)的小分子的內(nèi)源性代謝物，如氨基酸、核酸和有機(jī)物等[11]。其主要研究的樣品有機(jī)體組織和機(jī)體分泌液如唾液、尿液等。代謝組學(xué)的分析技術(shù)平臺主要有：超高液相色譜法（Ultra High Performance Liquid Chromatography，UP-IC）、液相色譜（Liquid Chromat-Ogram，LC）、毛細(xì)管電泳一質(zhì)譜聯(lián)用（Capillary Electro-Phoresis Mass Spectrometry，CE-MS）、和氣相色譜（Gas Chromatography，GC）等[11]。目前在各種腫瘤的診斷、治療、療效評價(jià)的方面廣泛應(yīng)用代謝組學(xué)[12]。代謝組學(xué)把整個(gè)人體作為研究對象與中醫(yī)學(xué)的整體觀非常契合[13]。本研究采集肝癌、大腸癌術(shù)后患者樣本和中醫(yī)臨床證候信息，闡明中醫(yī)“異病同證”的代謝模式、代謝物及各病證的代謝機(jī)制，從機(jī)體代謝調(diào)控角度，為大腸癌和肝癌術(shù)后證候診斷及其代謝調(diào)控機(jī)制分析提供客觀的依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 藥品與試劑

氫氧化鈉、氯甲酸乙酯、吡啶、無水硫酸鈉和無水乙醇以上皆為分析純，L-2-氯苯丙氨酸購于上海瀛正科技有限公司；標(biāo)準(zhǔn)品尿素和對苯二甲酸購于上海源葉生物科技有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國Agilent公司，型號： 6890/5975B）；微型漩渦混合器（美國Scientific Industries公司，型號：Vortex-Genie 2）；氣相毛細(xì)管色譜柱（美國Agilent公司，型號：DB-5 MS）；離心機(jī)（德國Eppendorf公司，型號：Centrifuge 5415R、Centrifuge 5702R）；數(shù)控超聲儀（昆山市超聲儀器有效公司，型號：KQ-250DB）。

1.3 方法

1.3.1 血樣采集及前處理

采取受試者的血樣，離心后分裝，置于-80℃冰箱保存待用。在實(shí)驗(yàn)前2 h取出血漿樣品，在20℃下解凍，在12 000 rpm的轉(zhuǎn)速下離心10 min，取出上清液進(jìn)行衍生化前的處理。使用兩步衍生化的方法，在吡啶和乙醇的催化作用下，血清經(jīng)ECF的衍生，氯仿的萃取和無水硫酸鈉的干燥后，取出上清液待GC/ MS分析。

1.3.2 色譜-質(zhì)譜（GC-MS）檢測

（1）色譜條件

進(jìn)樣口溫度：280℃；進(jìn)樣量：1.0 μL；不分流進(jìn)樣，載氣：99.999%高純氦；流速：1.0 mL·min-1；口溫度：260℃；色譜柱：DB-5MS毛細(xì)管柱，色譜柱升溫程序見表1。

（2）質(zhì)譜條件

離子源溫度：230 ℃；四級桿溫度：150 ℃；溶劑延遲：5 min；電子碰撞電離電壓：70 eV；質(zhì)譜全掃描范圍（m/z）：30-550。

1.3.3 數(shù)據(jù)提取

原始數(shù)據(jù)經(jīng)Agilent MSD工作站自帶軟件轉(zhuǎn)化為NetCDF格式后，導(dǎo)入R軟件采用XCMS工具箱＊＊ http://meltin.scripps.edu/download/處理。經(jīng)基線校正，峰辨識等計(jì)算過程，導(dǎo)入Simca-P 11.5軟件進(jìn)行多維統(tǒng)計(jì)分析，運(yùn)用模式識別技術(shù)進(jìn)行數(shù)據(jù)的可視化處理。

1.3.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本實(shí)驗(yàn)先采用非監(jiān)督的主成分分析（PCA）來考察大腸癌和肝癌間總體代謝分布狀況，用來觀察各組間一般的聚集、分離和偏出。我們使用變量權(quán)重（VIP）大于1.5為閾值表示多維統(tǒng)計(jì)上的有意義的差異代謝物；VIP小于1為閾值表示多維統(tǒng)計(jì)上的有意義的共同代謝物。為了驗(yàn)證多維統(tǒng)計(jì)結(jié)果，采用t檢驗(yàn)，P＜0.05認(rèn)為在單維上有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。在同時(shí)滿足VIP小于1和單維統(tǒng)計(jì)P＞0.05的代謝物，為有意義的共同代謝物。

1.4 研究對象

1.4.1 納入標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)

（1）納入標(biāo)準(zhǔn)

本研究納入對象是門診及住院的原發(fā)性肝癌（以下簡稱肝癌）和大腸癌手術(shù)后患者。肝癌患者為手術(shù)、介入或射頻等局部治療后理化檢查無轉(zhuǎn)移病灶者，有細(xì)胞學(xué)檢查或手術(shù)后病理學(xué)證實(shí)符合肝癌的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)[14]；大腸癌患者為手術(shù)后理化檢查無轉(zhuǎn)移病灶者，大腸癌診斷由手術(shù)后病理證實(shí)符合大腸癌臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)[15]。病理診斷由上海中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)附屬曙光醫(yī)院病理科醫(yī)生完成?；颊吣挲g在18-75歲，男女不限，卡氏評分（Karnofsky）≥60分，預(yù)計(jì)生存3個(gè)月以上，并簽訂了知情同意書。

（2）排除標(biāo)準(zhǔn):

排除標(biāo)準(zhǔn)為：①不符合納入標(biāo)準(zhǔn)者；②有嚴(yán)重心、腎、造血系統(tǒng)疾患及其它影響藥物評價(jià)因素者；③有精神障礙疾病者；④消化道梗阻者；⑤使用非本項(xiàng)目規(guī)定藥物者；⑥依從性差者。

表1 GC/MS色譜柱升溫程序

1.4.2 證候觀察和判別

證候觀察在收集患者樣本時(shí)通過望聞問切四診收集臨床信息。根據(jù)《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》，經(jīng)兩位副主任或主任醫(yī)師辨證一致者，確定為4種證型：①肝腎陰虛證：脅肋疼痛、腰膝酸軟，潮熱、盜汗，口干咽燥、苔少或光剝，脈細(xì)；②脾虛證：腹脹納少、食后脹甚，肢體倦怠、神疲乏力、少氣懶言，形體消瘦、或肥胖浮腫，舌苔淡白；③濕熱證：發(fā)熱、身熱不揚(yáng)，頭痛而重、身重而痛，口苦，胸痞，尿黃而短，舌質(zhì)紅、舌苔黃膩，脈濡數(shù)；④隱證（無證可辨者）：患者無主訴，無明顯癥狀和體征。

2 結(jié)果

2.1 大腸癌和肝癌術(shù)后各證候代謝模式的比較

本文采用GC-MS代謝譜聯(lián)用技術(shù)，進(jìn)行了大腸癌和肝癌術(shù)后患者（大腸癌術(shù)后肝腎陰虛證9例、脾虛證10例、濕熱證16例、隱證13例；肝癌術(shù)后肝腎陰虛證15例、脾虛證11例、濕熱證11例、隱證10例）和50例健康者的血漿代謝組的檢測，通過PCA方法分別對肝腎陰虛證、脾虛證、濕熱證和隱證建立模型，可以找到變量權(quán)重系數(shù)（VIP）小于1.0的共同代謝物。結(jié)果如圖1所示，大腸癌術(shù)后和肝癌術(shù)后在肝腎陰虛（圖1A）、脾虛證（圖1B）、濕熱證（圖1C）和隱證（圖1D）都不能明顯分離。

圖1 大腸癌術(shù)后和肝癌術(shù)后不同證候代謝模式的比較

2.2 異病同證代謝物分析

如表2所示，研究發(fā)現(xiàn)肝腎陰虛證在大腸癌和肝癌術(shù)后的共同代謝物是甘氨酸、尿素、L-色氨酸和丙氨酸，其中甘氨酸、尿素和色氨酸在大腸癌和肝癌術(shù)后的水平高于隱證；脾虛證在大腸癌和肝癌術(shù)后的共同代謝物是甘氨酸、尿素、葡萄糖、L-賴氨酸、肌醇和L-色氨酸，其中甘氨酸、尿素、肌醇的水平高于隱證，色氨酸的水平低于隱證；濕熱證在大腸癌和肝癌術(shù)后的共同代謝物是丙酸、甘氨酸、尿素、葡萄糖、甘露醇、山梨醇、賴氨酸和L-色氨酸，其中在大腸癌、肝癌術(shù)后濕熱證中甘氨酸、尿素、葡萄糖、賴氨酸、山梨醇和甘露醇的水平高于隱證；隱證在大腸癌和肝癌術(shù)后的共同代謝物是甘氨酸、尿素、葡萄糖、甘露醇、山梨醇和賴氨酸，其中甘氨酸、尿素、賴氨酸和甘露醇的水平高于健康者，色氨酸、葡萄糖和山梨醇的水平低于健康者。

表2 大腸癌和肝癌術(shù)后肝腎陰虛證、脾虛證、濕熱證和隱證的共同代謝物

圖2 肝癌和大腸癌術(shù)后各證型的代謝通路

大腸癌和肝癌術(shù)后各證候與隱證及隱證和健康者代謝物峰面積的比值表明，大腸癌和肝癌術(shù)后肝腎陰虛證的甘氨酸、尿素和色氨酸相較于隱證峰面積都是增加的。脾虛證的甘氨酸、尿素和肌醇相較于隱證峰面積都是增加的。濕熱證的甘氨酸、尿素、葡萄糖、山梨醇、賴氨酸和甘露醇相較于隱證峰面積都是增加的。隱證的甘氨酸、尿素、賴氨酸和甘露醇相較于健康者峰面積都是增加的，而色氨酸、葡萄糖和山梨醇相較于健康者峰面積都是減少的。雖然甘氨酸在肝腎陰虛證、脾虛證、濕熱證和隱證中都增加，但是肝腎陰虛證和脾虛證增加的幅度低于隱證增加的幅度，而濕熱證的高于隱證的。尿素在肝腎陰虛證、脾虛證和濕熱證中增加的幅度小于隱證增加的幅度。賴氨酸在濕熱證中增加的幅度大于隱證的。甘露醇在濕熱證中增加的幅度小于隱證增加的幅度。

2.3 代謝通路分析

本文根據(jù)上述的共同代謝物，分析了各證候的的代謝通路。如圖2所示共產(chǎn)生4個(gè)通路：①大腸癌和肝癌術(shù)后的濕熱證影響人體的糖代謝，并且以影響糖類物質(zhì)分解和供能過程為主要特征（糖酵解和TCA是實(shí)現(xiàn)人體能量供給的重要通路），以及氨基酸的轉(zhuǎn)化和降解，嘌呤代謝也受到濕熱證的影響；②大腸癌和肝癌術(shù)后肝腎陰虛證擾動(dòng)區(qū)域以氨基酸代謝為主，并且側(cè)重于氨基酸的降解；③大腸癌和肝癌術(shù)后脾虛證主要影響氨基酸的降解和糖類的分解功能；④大腸癌和肝癌術(shù)后隱證主要影響氨基酸的轉(zhuǎn)化和糖類的分解。

3 討論

在代謝組學(xué)應(yīng)用于中醫(yī)證候的研究中，盧嫣等[16]發(fā)現(xiàn)，2-(羥基亞氨基)-丙酸、L-同型半胱氨酸、十六酸、二鳥嘌呤核苷四磷酸是腎系疾病中肝腎陰虛證的共同代謝物。陳磊等[17]在大鼠的脾虛證模型中發(fā)現(xiàn)較之正常組乳酸、?；撬帷⒋吸S嘌呤的含量升高，谷氨酸、鯊肌醇的含量降低。王穎等[18]在脾虛證的代謝組學(xué)研究中發(fā)現(xiàn)較之正常組，葡萄糖、丙氨酸、甘氨酸、脂類的含量下降，乳酸、蘇氨酸和谷氨酰胺的含量升高。趙鐵等[19]在強(qiáng)直性脊柱炎的濕熱證研究中發(fā)現(xiàn)較之正常組，α-羥基丁酸、磷酸和甘露糖血清中均明顯升高，而乙醇胺則明顯下。Li等[20]研究了小鼠氣虛血瘀模型的尿液代謝組學(xué)發(fā)現(xiàn)甲酸鹽、肌酐與正常組相比有明顯異常。Chen等[21]研究了GC-MS分析的探討腎陽虛證發(fā)現(xiàn)經(jīng)氫化可的松造模后的腎陽虛模型組動(dòng)物尿液的代謝譜圖與對照組相比發(fā)生明顯的差異。郭孜等[22]通過GC-MS分析發(fā)現(xiàn)乙肝后肝硬化患者不同中醫(yī)證候間的差異性尿代謝物與能量代謝和氨基酸代謝等通路相，其中在濕熱內(nèi)蘊(yùn)證與肝腎陰虛證之間存在支鏈氨基酸的差異。目前，越來越多的證據(jù)表明代謝組學(xué)在中醫(yī)證候的標(biāo)志物的尋找方面扮演重要的角色，并且在中醫(yī)理論的指導(dǎo)下，代謝組學(xué)的方法可以用來評估臨床證候及鑒定潛在生物標(biāo)志物[23，24]。但是，在大腸癌和肝癌術(shù)后的肝腎陰虛證、脾虛證、濕熱證和隱證中尚無代謝組學(xué)的研究。因此，本文利用代謝組學(xué)的方法對大腸癌和肝癌術(shù)后異病同證開展研究。

隱證是在臨床上沒有任何病理性特征的一類特殊的類型。本文在收集大腸癌和肝癌術(shù)后病例時(shí)，加入了隱證組作為篩選證候標(biāo)志物時(shí)去除疾病的因素；在篩選證候的標(biāo)志物時(shí)，與隱證的標(biāo)志物取交集這樣就可以去除疾病的因素。這種利用隱證組來篩選證候標(biāo)志物的方法在國內(nèi)尚無人報(bào)道。

在大腸癌和肝癌術(shù)后的異病同證的代謝組學(xué)分析中發(fā)現(xiàn)肝腎陰虛證、脾虛證、濕熱證和隱證在大腸癌和肝癌術(shù)后的比較中可以區(qū)分，為了尋找大腸癌和肝癌術(shù)后異病同證的共同的特征代謝物，本文去除各個(gè)證型中PCA分析VIP值大于1的差異代謝物后，進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，4個(gè)證候在大腸癌術(shù)后和肝癌術(shù)后的比較中不能區(qū)分。其中肝腎陰虛共同的代謝物是甘氨酸，尿素，色氨酸和丙氨酸；脾虛證共同的代謝物是甘氨酸、尿素、色氨酸、葡萄糖[25]、賴氨酸和肌醇；濕熱證的共同代謝物是甘氨酸、尿素、色氨酸、葡萄糖、丙酸、甘露醇[26]，山梨醇和賴氨酸；隱證的共同代謝物是甘氨酸、尿素、甘露醇、葡萄糖、山梨醇和賴氨酸。

比較其代謝通路可以發(fā)現(xiàn)，在大腸癌和肝癌術(shù)后的肝腎陰虛證擾動(dòng)區(qū)域以氨基酸代謝為主，并且側(cè)重于氨基酸的降解；脾虛證中以氨基酸的降解[8]和糖類的分解功能受到影響；濕熱證影響人體的糖代謝[27]，并且以影響糖類物質(zhì)分解和供能過程為主要特征（糖酵解和TCA是實(shí)現(xiàn)人體能量供給的重要通路），且氨基酸的轉(zhuǎn)化和降解，嘌呤代謝也受到濕熱證的影響；隱證中的代謝主要是氨基酸的轉(zhuǎn)化和糖類的分解。

本研究結(jié)果說明代謝組學(xué)方法是研究“異病同證”的有效工具之一。然而，研究僅采用了GC-MS方法，由于GC-MS比較適合于揮發(fā)性代謝物的檢測，對檢測的代謝物有一定的局限性。進(jìn)一步的研究還可以采用LC-MS及核磁共振（Magnetic Resonance Image，MRI）等方法，開展非揮發(fā)性代謝物檢測及分析，將有助于發(fā)現(xiàn)更多的代謝物，更加有利于分析其特征代謝物及其代謝機(jī)制。目前，本研究尚未進(jìn)一步定量驗(yàn)證大腸癌和肝癌術(shù)后肝腎陰虛證、脾虛證、濕熱證和隱證差異代謝物，今后將進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量，定量檢測其共同代謝物的含量，分析這些代謝物能否對辯證起到輔助診斷的作用。

由于中醫(yī)藥精準(zhǔn)醫(yī)療是在中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下，應(yīng)用基因組、蛋白組和代謝組等系統(tǒng)生物學(xué)技術(shù)、生物信息技術(shù)，大數(shù)據(jù)分析和挖掘技術(shù)等，結(jié)合患者生活環(huán)境和臨床數(shù)據(jù)和中醫(yī)“望、聞、問、切”四診信息，實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)的病證分類和診斷，制定具有個(gè)性化的健康維護(hù)、疾病預(yù)防、診療和康復(fù)方案，并闡明其療效和安全性機(jī)制的新型中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)療[28]。因此，以代謝組等組學(xué)技術(shù)為基礎(chǔ)探討大腸癌和肝癌術(shù)后患者的辨證施治個(gè)體化精準(zhǔn)治療，揭示其證候的本質(zhì)，為中醫(yī)的精確診斷和治療提供依據(jù)，是提高大腸癌和肝癌術(shù)后康復(fù)及轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)預(yù)防的研究課題之一。

1 Litle V R, Warren R S, Moore D N, et al. Molecular cytogenetic analysis of cytokeratin 20-labeled cells in primary tumors and bone marrow aspirates from colorectal carcinoma patients. Cancer, 1997, 79(9): 1664-1670.

2 羅政,饒建,殷蔚伯.放療在原發(fā)性肝癌治療中地位和現(xiàn)狀.中華放射腫瘤學(xué)雜志,2006,15(4):345-346.

3 Parkin D M, Bray F, Ferlay J, et al. Global cancer statistics, 2002. CA Cancer J Clin, 2005,55(2):74-108.

4 Bruix J, Sherman M. Practice guidelines committee, American association for the study of liver diseases. Hepatology, 2005, 42(12): 1208-1236.

5 Kudo M, Matsui O, Izumi N, et al. Surveillance and diagnostic algorithm for hepatocellular carcinoma proposed by the Liver Cancer Study Group of Japan: 2014 update. Oncology, 2014, 87(Suppl 1): 7-21.

6 張秋云,車念聰,高連印.錢英辨治肝癌術(shù)后臨床經(jīng)驗(yàn).北京中醫(yī)藥,2010,12(3):905-906.

7 蘇式兵,胡義揚(yáng),趙立平,等.慢性乙型病毒性肝炎中醫(yī)證候生物學(xué)基礎(chǔ)的研究思路.中國中西醫(yī)結(jié)合雜志,2011,31(2):252-255.

8 陳可冀,宋軍.病證結(jié)合的臨床研究是中西醫(yī)結(jié)合研究的重要模式.世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化,2006,8(2):1-5.

9 Hood L, Heath J R, Phelps M E, et al. Systems biology and new technologies enable predictive and preventative medicine. Science, 2004, 306(5696): 640-643.

10 Nicholson J K, Wilson I D. Opinion: Understanding 'global' systems biology: Metabonomics and the continuum of metabolism. Nat Rev Drug Discov, 2003, 2(8): 668-676.

11 郭孜,王文玉,戴建業(yè),等.乙肝后肝硬化證候的尿代謝組學(xué)研究.世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化,2012,14(1):1282-1287.

12 劉健,萬磊,黃傳兵,等.代謝組學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)在中醫(yī)藥科研中的應(yīng)用.世界中西醫(yī)結(jié)合雜志,2013,8(2):190-193.

13 羅和古,陳家旭.代謝組學(xué)技術(shù)與中醫(yī)證候的研究.中國中醫(yī)藥信息雜志,2007,14(5):3-5.

14 中國抗癌協(xié)會(huì)肝病專業(yè)委員會(huì).原發(fā)性肝癌的臨床診斷與分期標(biāo)準(zhǔn).中華肝病雜志,2001,9(6):324.

15 中華醫(yī)學(xué)會(huì)外科學(xué)分會(huì)胃腸外科學(xué)組,中華醫(yī)學(xué)會(huì)外科學(xué)分會(huì)結(jié)直腸肛門外科學(xué)組,中國抗癌協(xié)會(huì)大腸癌專業(yè)委員會(huì),等.結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移診斷和綜合治療指南(V2016).中華胃腸外科雜志,2016,19(7):721-730.

16 盧嫣,蘇哲苓,楊莉,等.腎系疾病肝腎陰虛證血液代謝組學(xué)初探.上海中醫(yī)藥雜志,2015,49(3):10-13.

17 Wang X, Zhang A, Sun H. Future perspectives of Chinese medical formulae: Chinmedomics as an effector. OMICS, 2012,16(14):414-421.

18 王穎,王輝,鄭小偉.基于核磁共振技術(shù)的脾氣虛證、脾陽虛證血漿代謝組學(xué)研究.中華中醫(yī)藥雜志,2013,28(8):2270-2274.

19 趙鐵,殷婷婷,張英澤,等.基于代謝組學(xué)的強(qiáng)直性脊柱炎和痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎濕熱證共性特征研究.中醫(yī)雜志,2013,54(7):592-596.

20 Li L, Wang J N, Ren J X, et al. Metabonomics analysis of the urine of rats with Qi deficiency and blood stasis syndrome based on NMR techniques. Chin Sci Bull, 2007,52(22):3068-3073.

21 Chen M, Zhao L, Jia W. Metabonomic study on the biochemical profiles of a hydrocortisone-induced animal model. J Proteome Res，2005,4(6):2391-2396.

22 郭孜,王文玉,戴建業(yè),等.乙肝后肝硬化證候的尿代謝組學(xué)研究.世界科學(xué)技術(shù)-中藥現(xiàn)代化,2012,14(1):1282-1287.

23 Wang X, Wang Q, Zhang A, et al. Metabolomics study of intervention effects of Wen-Xin-Formula using ultra high-performance liquid chromatography/mass spectrometry coupled with pattern recognition approach. J Pharm Biomed Anal, 2013,16(14):22-30.

24 李青雅,蘇式兵.系統(tǒng)生物學(xué)在中醫(yī)藥研究的應(yīng)用.世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化,2008,10(4):1-6.

25 殷婷婷,趙春杰,張英澤,等.風(fēng)濕性疾病濕熱證實(shí)質(zhì)的脂質(zhì)組學(xué)研究.中華中醫(yī)藥雜志,2013,33(19):210-213.

26 朱潔.基于代謝組學(xué)的慢加急（亞急）性乙肝肝衰竭濕熱證的證候研究.武漢:湖北中醫(yī)藥大學(xué)碩士學(xué)位論文, 2013.

27 陳磊,向歡,邢婕,等.補(bǔ)中益氣湯干預(yù)脾虛證模型大鼠脾臟1H NMR代謝組學(xué)機(jī)制研究.藥學(xué)學(xué)報(bào),2014,49(9):1320-1325.

28 陳健,陳啟龍,蘇式兵.中醫(yī)藥精準(zhǔn)醫(yī)療的思考與探索.世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化,2016,18(4):557-562.

A Metabolomic Research on “The Same TCM Syndrome” in the Postoperative Patients with Liver Cancer and Colorectal Cancer

Wei Bin1, Hu Xueqing1, Song Yanan1, Li Xiaoyan1, Cai Feifei1, Ji Qing1,2, Luo Yunquan2, Wang Wenhai3, Su Shibing1
(1. Research Center for Traditional Chinese Medicine Complexity System, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine, Shanghai, 201203, China; 2. Shuguang Hospital, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine, Shanghai, 201203, China; 3. The Seventh People's Hospital of Shanghai, Shanghai, 20013, China)

This study aimed to investigate the common metabolites in the same syndrome in traditional Chinese medicine (TCM) in postoperative patients with liver cancer (PLC) and colorectal cancer (PCC) underlying its metabolic mechanisms. Plasma metabolic profiles in PCC and PLC patients with liver- and kidney-yin deficiency syndrome (LKYDS)， spleen deficiency syndrome (SDS)， dampness heat syndrome (DHS) and latent syndrome (without any obvious TCM symptoms and signs) were detected using gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). The common metabolites of the same TCM syndrome in different diseases were identified via principal component analyses (PCA)， while the metabolic pathways were analyzed by means of KEGG database. As a result，glycine， urea， tryptophan and alanine were altered in the PCC and PLC patients with LKYDS and were involved in the degradation of amino acid; Glycine urea， lysine， tryptophan glucose and inositol were the metabolites in the patients with SDS and could affect the degradation and the decomposition process of amino acids and sugars; Glycine glucose， urea， acid tryptophan， sorbitol and mannitollysine were the common metabolites in the patients with DHS and influenced the process of carbohydrates’ decomposition and energy supply. It was conclusion that metabolomics was effective on exploring the material basis of the “same syndrome in different diseases” in TCM. The PCC and PLC patients shared some altered metabolites in the same TCM syndrome.

Liver cancer， colorectal cancer， postoperation， the same TCM syndrome in different diseases， TCM syndrome， metabolomics

10.11842/wst.2016.09.012

R2-031

A

（責(zé)任編輯：朱黎婷，責(zé)任譯審：朱黎婷）

2016-07-12

修回日期：2016-08-25

＊ 國家自然科學(xué)基金委重點(diǎn)項(xiàng)目（81330084）：基于系統(tǒng)生物學(xué)的原發(fā)性肝癌和大腸癌“異病同證”和“異病同治”的研究，負(fù)責(zé)人：蘇式兵。上海市衛(wèi)生和計(jì)劃委員會(huì)科研課題資助項(xiàng)目(20134173)：固腸方保護(hù)腸屏障功能減少大腸癌術(shù)后轉(zhuǎn)移的臨床研究，負(fù)責(zé)人：王文海；浦東新區(qū)衛(wèi)生系統(tǒng)重點(diǎn)學(xué)科群建設(shè)項(xiàng)目(PWZxq2014-12)：肝癌和大腸癌的辯證施治研究，負(fù)責(zé)人：王文海。

＊＊ 通訊作者：蘇式兵，本刊編委，教授，博士生導(dǎo)師，主要研究方向：中醫(yī)藥系統(tǒng)生物學(xué)。