• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    STZ誘導(dǎo)的中老年食蟹猴糖尿病模型的初步分析

    2016-03-06 11:57:36田朝陽王開敏洪傳緒楊穎珊張愛聯(lián)
    海南醫(yī)學(xué) 2016年14期
    關(guān)鍵詞:劑量血糖糖尿病

    田朝陽,王開敏,洪傳緒,楊穎珊,張愛聯(lián)

    (1.海南金港生物技術(shù)股份有限公司,海南 ???571100;2.中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶生物技術(shù)研究所,海南 海口 571101)

    STZ誘導(dǎo)的中老年食蟹猴糖尿病模型的初步分析

    田朝陽1,王開敏1,洪傳緒1,楊穎珊1,張愛聯(lián)2

    (1.海南金港生物技術(shù)股份有限公司,海南 ???571100;2.中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶生物技術(shù)研究所,海南 ???571101)

    目的 初步探討鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)的中老年食蟹猴糖尿病模型造模前后的體重、血糖和血脂等指標(biāo)的變化。方法5只健康中老年食蟹猴,根據(jù)年齡分為兩組:低劑量組(按體質(zhì)量計,50 mg/kg STZ)4只和高劑量組(按體質(zhì)量計,100 mg/kg STZ)1只。通過靜脈快速推注STZ的方法來誘導(dǎo)中老年食蟹猴發(fā)生糖尿病,造模前后對動物體重、血糖和血脂等指標(biāo)進(jìn)行跟蹤檢測。結(jié)果通過靜脈快速推注STZ能夠在短時間內(nèi)快速升高血糖并持續(xù)保持高血糖的狀態(tài),在外源胰島素注射干預(yù)的情況下造模動物最長存活可達(dá)233 d,發(fā)病過程中出現(xiàn)了“三多一少”的糖尿病典型癥狀,并伴有高甘油三酯血癥的發(fā)生。結(jié)論盡管與人類糖尿病的病理過程存在一定差異,造模發(fā)病較為急促,成模率較高,但STZ靜脈注射誘導(dǎo)中老年食蟹猴發(fā)生糖尿病能夠為人類糖尿病的基礎(chǔ)研究及相關(guān)藥效學(xué)評價提供食蟹猴動物疾病模型,仍具有一定的科研應(yīng)用價值。

    食蟹猴;鏈脲佐菌素;糖尿病

    糖尿病(Diabetes mellitus,DM)是一種以糖代謝紊亂為主要表現(xiàn)的內(nèi)分泌代謝疾病,是以多食、多飲、多尿和體重減輕為特點的臨床癥狀[1]。鏈脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)是建立誘導(dǎo)型糖尿病的傳統(tǒng)經(jīng)典方法,通過特異性損傷胰腺β細(xì)胞而被廣泛地應(yīng)用來創(chuàng)建糖尿病動物模型[2]。非人靈長類實驗動物(應(yīng)用最為廣泛的是獼猴屬的實驗食蟹猴)是與人類最為接近的高等級實驗動物,其糖尿病模型能更好地模擬人類糖尿病的病理過程,因而受到廣大科研工作者的重視和歡迎。本文采取STZ靜脈注射的方式誘導(dǎo)實驗食蟹猴產(chǎn)生糖尿病,并對動物體質(zhì)量、血糖和血脂等指標(biāo)進(jìn)行跟蹤與分析,為糖尿病動物模型的建立提供一條研究途徑。

    1 材料與方法

    1.1 實驗動物及分組 實驗食蟹猴共5只,雄性2只,雌性3只。級別:普通級;年齡:5~14歲;體質(zhì)量:3~8 kg;動物生產(chǎn)單位:海南金港生物技術(shù)股份有限公司[SCXK(瓊)2015-0001];實驗于海南金港生物技術(shù)股份有限公司的普通級非人靈長類動物實驗室進(jìn)行[SYXK (瓊)2014-0017];飼養(yǎng)條件:單籠飼養(yǎng),飼喂全價營養(yǎng)顆粒飼料和青飼料,自由飲水。動物實驗前檢測空腹血糖(<4.5 mmol/L)和甘油三酯(<1.0 mmol/L),結(jié)果均在正常范圍內(nèi)。依據(jù)年齡動物分為低劑量組和高劑量組:低劑量組4只,按體質(zhì)量計,給予50 mg/kg STZ;高劑量組1只,按體質(zhì)量計,給予100 mg/kg STZ。

    1.2 主要試劑與儀器 鏈脲佐菌素(STZ)為Sigma公司(美國)產(chǎn)品;檸檬酸由天津耀華化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn);檸檬酸鈉由廣州化學(xué)試劑廠生產(chǎn);氯胺酮由沈陽獸藥廠生產(chǎn);胰島素注射液由??诟轻t(yī)院購置。WP-UP-UV-10型純水機(jī)(四川沃特浦);CT15RT型低溫離心機(jī)(上海天美);安特衛(wèi)便攜式血糖儀及試紙;東芝120全自動生化儀(日本)。

    1.3 糖尿病模型制作 實驗猴禁食>16 h后肌注氯胺酮(按體質(zhì)量計,0.1 mL/kg)全身麻醉,一次性快速靜脈推注STZ(臨用前溶于0.1 mmol/L pH 4.2~4.5檸檬酸緩沖液中,現(xiàn)配現(xiàn)用),劑量為按體質(zhì)量計50 mg/kg和100 mg/kg,靜脈推注時間控制在10 min之內(nèi)完成。

    1.4 檢測指標(biāo)

    1.4.1 體質(zhì)量監(jiān)測 為了觀察STZ誘導(dǎo)實驗食蟹猴糖尿病模型前后體質(zhì)量的變化,定期稱量食蟹猴體質(zhì)量,稱量時間一般在早上動物飼喂前(8:00~8:30)進(jìn)行,記錄稱量結(jié)果,監(jiān)測造模前后體重變化情況。

    1.4.2 血糖監(jiān)測 為了觀察STZ誘導(dǎo)實驗食蟹猴糖尿病模型前后空腹血糖的變化,定期對食蟹猴空腹血糖進(jìn)行監(jiān)測,采血監(jiān)測血糖的時間一般在早上動物飼喂前(8:00~8:30)進(jìn)行,采用安特衛(wèi)便攜式血糖儀及配套試紙條進(jìn)行測定。

    1.4.3 血液生化指標(biāo)的監(jiān)測 為了觀察STZ誘導(dǎo)實驗食蟹猴糖尿病模型血生化指標(biāo)的變化,根據(jù)實驗需要對實驗食蟹猴進(jìn)行采血監(jiān)測,送至中國人民解放軍第187中心醫(yī)院體檢中心檢驗科進(jìn)行血液生化指標(biāo)的檢測。

    1.4.4 胰島素注射干預(yù) 基于動物的健康與代謝需要和延長動物的存活時間,我們會根據(jù)實驗進(jìn)展情況不定期肌注胰島素注射液進(jìn)行干預(yù),干預(yù)時間一般在早上動物空腹血糖監(jiān)測后(8:00~8:30)進(jìn)行。

    2 結(jié) 果

    2.1 5只實驗食蟹猴的存活時間 高劑量組動物存活時間僅有1 d,而低劑量組4只動物最短存活時間為14 d,最長存活時間為223 d。這表明STZ的注射用量跟動物的存活時間有一定的相關(guān)性,用量越大動物存活時間越短,尤其是大劑量注射極易導(dǎo)致動物快速死亡,并且年齡越大對STZ的耐受性越差,所以注射劑量和實驗動物年齡的選擇是采用該方法造模時需要注意的兩個重要事項。在實驗后期每天肌肉注射胰島素0.2 mL(8 U)進(jìn)行干預(yù)以維持代謝穩(wěn)定及動物的長期存活[3],最長可維持動物存活至223 d,見表1。

    表1 5只實驗食蟹猴的存活時間

    2.2 4只存活時間較長實驗食蟹猴的體質(zhì)量變化 STZ誘導(dǎo)實驗食蟹猴糖尿病后導(dǎo)致動物出現(xiàn)糖尿病的典型臨床癥狀“三多一少”(多飲、多食、多尿及日漸消瘦,體質(zhì)量減輕),這點與人類糖尿病的發(fā)病特征較為近似。與此同時,實驗過程中發(fā)現(xiàn)造模動物與一般正常動物在外觀和氣味上存在明顯的差異,造模動物會出現(xiàn)被毛凌亂和體表骯臟,并散發(fā)出異常的氣味,尤其是糖尿病發(fā)病病程后期的動物表現(xiàn)更為明顯。此方法應(yīng)作為后續(xù)糖尿病動物模型建立或篩查的重要臨床觀察指標(biāo),見圖1。

    圖1 4只實驗食蟹猴的體質(zhì)量變化圖

    2.3 4只實驗食蟹猴空腹血糖監(jiān)測結(jié)果 STZ注射誘導(dǎo)后1~2 d即出現(xiàn)空腹血糖值快速上升,遠(yuǎn)高于正常值,直至動物死亡前均保持較高的水平。見圖2。

    圖2 4只實驗食蟹猴的空腹血糖值變化圖

    2.4 3只存活時間較長實驗食蟹猴的血生化檢測結(jié)果 與造模前結(jié)果比較,造模后空腹血糖值和甘油三酯值均顯著升高,見表2。

    表2 3只實驗食蟹猴的血生化檢測結(jié)果(mmol/L)

    3 討 論

    鏈脲佐菌素(STZ)是一種常用的致糖尿病毒素,能選擇性地破壞胰島β細(xì)胞,并已廣泛地用于嚙齒類動物、猴子和其他動物中誘導(dǎo)胰島素依賴型糖尿病[4]。通過靜脈快速注射STZ能夠在較短時間內(nèi)升高血糖,并保持在較高的水平不降低,病程中出現(xiàn)了“三多一少”的糖尿病典型臨床病癥,后期并伴有高甘油三酯血癥的發(fā)生,這些均表明STZ對動物胰腺β細(xì)胞的損傷是不可逆的。這種方法造出的實驗食蟹猴糖尿病模型較為穩(wěn)定,成模率高。

    按體質(zhì)量計,本文采取了100 mg/kg和50 mg/kg STZ注射誘導(dǎo)劑量,前者劑量過大,加上動物年齡較大的原因?qū)е聞游飪H存活1 d,后者劑量較為適宜,誘導(dǎo)后在外源性胰島素注射干預(yù)下最長存活時間可達(dá)223 d。由此表明,STZ劑量的選用及動物年齡等都是需要重點考慮的因素。因為不同年齡的食蟹猴對STZ處理有不同反應(yīng),Koulmanda等[5]在食蟹猴(3~6歲,3~9 kg)的研究中發(fā)現(xiàn),55 mg/kg STZ能成功誘導(dǎo)食蟹猴糖尿病模型,且肝腎毒性很??;徐傳磊等[6]研究表明給4只食蟹猴靜脈注射STZ 45 mg/kg可在第3天出現(xiàn)空腹血糖濃度呈持續(xù)性升高。因此,只有選取了較為合適的注射劑量才能既達(dá)到造模效果又不至于導(dǎo)致動物快速死亡的目的。筆者認(rèn)為,本研究中,STZ誘導(dǎo)的實驗食蟹猴糖尿病造模發(fā)病快,成模率高,成模后動物的狀態(tài)較為穩(wěn)定持久,即使在外源性胰島素注射干預(yù)的情況下也不降低;STZ誘導(dǎo)的實驗食蟹猴糖尿病動物模型在血糖升高的同時也導(dǎo)致脂代謝的紊亂,伴隨高甘油三酯血癥的發(fā)生,這點與人類糖尿病的發(fā)病特征較為近似,針對中老年實驗食蟹猴而言,50 mg/kg的STZ誘導(dǎo)劑量是較為合適的,它能夠在降低動物死亡的情況下保證動物較高的成模率。

    總之,STZ誘導(dǎo)的實驗食蟹猴糖尿病動物模型具有人類糖尿病“三多一少”的典型臨床癥狀,并伴有高甘油三酯血癥的發(fā)生,其缺點是發(fā)病較為急促,與人類糖尿病發(fā)病過程存在著一定的差異,因為人類糖尿病的發(fā)生不是唯一病因所致的單一疾病,而是復(fù)合病因的綜合征,與遺傳、自身免疫及環(huán)境因素有關(guān)[7]。所以如何找尋出一種更符合人類糖尿病發(fā)生發(fā)展過程的實驗食蟹猴糖尿病模型仍需下一步繼續(xù)研究。

    [1]和占龍,魯帥堯,趙遠(yuǎn),等.獼猴自發(fā)性糖尿病的臨床病理學(xué)分析[J].中國獸醫(yī)科技,2001,31(11):40-41.

    [2]梁斌,吳曉云.非人靈長類糖尿病動物模型研究進(jìn)展[J].動物學(xué)研究,2011,32(1):91-96.

    [3]宋英儒,葉偉,黃仲奎,等.食蟹猴糖尿病模型腦部MR檢查的實驗研究[J].中國醫(yī)學(xué)影像技術(shù),2009,25(10):1745-1748.

    [4]鄒春林,王佳茵,黃淑艷,等.不同劑量鏈脲佐菌素誘導(dǎo)青少年食蟹猴糖尿病模型的特性[J].中國科學(xué):生命科學(xué),2012,42(7): 562-571.

    [5]Koulmanda M,Qipo A,Chebrolu S,et al.The effect of low versus high dose of streptozotocin in cynomolgus monkeys(Macaca fascilularis)[J].Am J Transplant,2003,3(3):267-272.

    [6]徐傳磊,陳艷明,徐志勇,等.建立食蟹猴糖尿病模型的研究[J].廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報,2009,26(1):91-94.

    [7]覃雯,唐愛華.糖尿病實驗性動物模型研究概況[J].時珍國醫(yī)國藥, 2007,18(6):1511-1512.

    Primary analysis of streptozotocin-induced diabetes mellitus in middle and old-aged cynomolgus monkeys.

    TIAN Chao-yang1,WANG Kai-min1,HONG Chuan-xu1,YANG Ying-shan1,ZHANG Ai-lian2.1.Hainan Jingang Biotech Co., Ltd,Haikou 571100,Hainan,CHINA;2.Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology,Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences,Haikou 571101,Hainan,CHINA

    ObjectiveTo investigate the changes of body weight,blood glucose and blood lipid of the streptozotocin(STZ)-induced diabetes mellitus in middle and old-aged cynomolgus monkeys.MethodsFive middle and old-aged cynomolgus monkeys were divided into two groups according to the age:low dose group(50 mg/kg STZ,n=4) and high dose group(100 mg/kg STZ,n=1).The two groups were induced by one-dose intravenous injection of streptozotocin.The body weight,blood glucose and blood lipid before and after induction were measured.ResultsIntravenous injection of streptozotocin could increase the food intake volume,water intake volume and urine volume,and decrease the body weight.Two days after the modeling,the fasting glucose was increased and kept a high level until death.Accompanied by the occurrence of hyperlipidemia,the model animals can live for up to 233 days under the intervention of exogenous insulin injection.ConclusionAlthough there are certain differences with diabetes mellitus in human,the incidence of modeling is more rapid and the formation rate is higher than human.The diabetes mellitus cynomolgus models induced by intravenous injection of STZ also have certain application value for human diabetes mellitus basic research and pharmacodynamics evaluation.

    Cynomolgus monkeys;Streptozotocin;Diabetes mellitus

    R-332

    A

    1003—6350(2016)14—2240—03

    10.3969/j.issn.1003-6350.2016.14.002

    2016-03-03)

    2007年海南省重點科技計劃項目(編號:070117)

    田朝陽。E-mail:chaoyangtian@163.com

    猜你喜歡
    劑量血糖糖尿病
    結(jié)合劑量,談輻射
    ·更正·
    糖尿病知識問答
    中老年保健(2022年5期)2022-08-24 02:35:42
    糖尿病知識問答
    中老年保健(2022年1期)2022-08-17 06:14:56
    細(xì)嚼慢咽,對減肥和控血糖有用么
    一吃餃子血糖就飆升,怎么辦?
    糖尿病知識問答
    中老年保健(2021年5期)2021-08-24 07:07:20
    糖尿病知識問答
    90Sr-90Y敷貼治療的EBT3膠片劑量驗證方法
    妊娠期血糖問題:輕視我后果嚴(yán)重!
    媽媽寶寶(2017年3期)2017-02-21 01:22:30
    国产成人福利小说| 亚洲无线观看免费| 麻豆久久精品国产亚洲av| 草草在线视频免费看| 俄罗斯特黄特色一大片| 一进一出抽搐动态| 真人做人爱边吃奶动态| 日韩欧美国产一区二区入口| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 亚洲欧美日韩高清专用| 成人综合一区亚洲| 91久久精品电影网| 色综合站精品国产| xxxwww97欧美| 不卡视频在线观看欧美| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 国产亚洲91精品色在线| 成人av在线播放网站| 天堂网av新在线| 小说图片视频综合网站| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 亚洲黑人精品在线| 别揉我奶头 嗯啊视频| 亚洲色图av天堂| eeuss影院久久| 观看美女的网站| 亚洲成a人片在线一区二区| 久久久久久久久中文| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 国产精品野战在线观看| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 欧美性感艳星| 国产日本99.免费观看| 国产激情偷乱视频一区二区| 国产一区二区三区视频了| 久久中文看片网| 久久久久国内视频| 国产探花在线观看一区二区| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 午夜亚洲福利在线播放| 精品久久久久久成人av| 中文亚洲av片在线观看爽| 久久久成人免费电影| 久久亚洲真实| 久久久久久久亚洲中文字幕| 在线观看av片永久免费下载| 99九九线精品视频在线观看视频| 亚洲欧美精品综合久久99| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 热99在线观看视频| 亚洲最大成人手机在线| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 日韩欧美 国产精品| 国产精品一区二区三区四区久久| 在线免费观看不下载黄p国产 | 国产伦人伦偷精品视频| 国产精品久久久久久久久免| 又紧又爽又黄一区二区| 国产成人福利小说| 欧美3d第一页| 欧美最新免费一区二区三区| 十八禁网站免费在线| 亚洲av免费高清在线观看| 国产精品一区二区免费欧美| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 听说在线观看完整版免费高清| 美女 人体艺术 gogo| 国产在线男女| 美女免费视频网站| 狠狠狠狠99中文字幕| 精品午夜福利视频在线观看一区| 小说图片视频综合网站| 久久久久久国产a免费观看| 乱系列少妇在线播放| a级一级毛片免费在线观看| 日韩精品青青久久久久久| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 国产麻豆成人av免费视频| 在线国产一区二区在线| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 熟女人妻精品中文字幕| 免费看光身美女| 午夜福利欧美成人| 亚洲四区av| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 国产黄色小视频在线观看| 久久久国产成人精品二区| 不卡视频在线观看欧美| 97超视频在线观看视频| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 午夜日韩欧美国产| 午夜福利欧美成人| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 99热网站在线观看| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 日韩欧美三级三区| 热99re8久久精品国产| 在线播放无遮挡| 色在线成人网| 日韩av在线大香蕉| 男女那种视频在线观看| 国产三级中文精品| 校园人妻丝袜中文字幕| 五月玫瑰六月丁香| 美女 人体艺术 gogo| 国产午夜精品论理片| 日本与韩国留学比较| 亚洲av第一区精品v没综合| 亚洲av不卡在线观看| 白带黄色成豆腐渣| 久久精品影院6| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 中国美白少妇内射xxxbb| 亚洲国产精品sss在线观看| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 老司机午夜福利在线观看视频| 黄色一级大片看看| 色吧在线观看| 人妻少妇偷人精品九色| 国产精品不卡视频一区二区| 丰满的人妻完整版| 1024手机看黄色片| 国产免费男女视频| 国产精品人妻久久久影院| 精品人妻熟女av久视频| 日韩精品中文字幕看吧| 亚洲av成人av| 女人被狂操c到高潮| 成年版毛片免费区| 国产精品一及| 国产美女午夜福利| 网址你懂的国产日韩在线| 色吧在线观看| 成年免费大片在线观看| 99久久九九国产精品国产免费| 美女黄网站色视频| 久久99热6这里只有精品| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 深夜精品福利| 免费在线观看成人毛片| 麻豆成人av在线观看| 国产男人的电影天堂91| 老司机福利观看| 国产精品久久久久久久电影| 九九热线精品视视频播放| 干丝袜人妻中文字幕| 一个人看的www免费观看视频| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 最新在线观看一区二区三区| 婷婷亚洲欧美| 亚洲国产欧美人成| 亚洲不卡免费看| av.在线天堂| 丰满乱子伦码专区| 高清在线国产一区| 神马国产精品三级电影在线观看| 中亚洲国语对白在线视频| 成人综合一区亚洲| 一区福利在线观看| 美女 人体艺术 gogo| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 久久久久久久午夜电影| 99久久成人亚洲精品观看| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 亚洲五月天丁香| 精品国内亚洲2022精品成人| 婷婷六月久久综合丁香| 成人性生交大片免费视频hd| .国产精品久久| 精品久久国产蜜桃| 在线播放国产精品三级| av在线观看视频网站免费| 免费人成视频x8x8入口观看| 国产 一区 欧美 日韩| 波多野结衣高清无吗| 丝袜美腿在线中文| 亚洲中文日韩欧美视频| 色噜噜av男人的天堂激情| 亚洲av免费高清在线观看| 久久久久免费精品人妻一区二区| 国产精品一区二区三区四区久久| 99热这里只有精品一区| av天堂在线播放| 中国美女看黄片| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 美女黄网站色视频| 免费看日本二区| 熟女电影av网| 日本a在线网址| 日本一本二区三区精品| 3wmmmm亚洲av在线观看| 99热6这里只有精品| 少妇高潮的动态图| 最近视频中文字幕2019在线8| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 国产亚洲欧美98| 在线观看免费视频日本深夜| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 男插女下体视频免费在线播放| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 亚洲电影在线观看av| 久久精品综合一区二区三区| 中文在线观看免费www的网站| 亚洲av中文av极速乱 | 成人av一区二区三区在线看| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 免费一级毛片在线播放高清视频| 91麻豆精品激情在线观看国产| 三级毛片av免费| 国产黄片美女视频| 天美传媒精品一区二区| 联通29元200g的流量卡| 我的女老师完整版在线观看| 久久精品国产亚洲av天美| 人妻夜夜爽99麻豆av| 岛国在线免费视频观看| 日韩欧美在线乱码| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 性欧美人与动物交配| 动漫黄色视频在线观看| 嫩草影院入口| 伊人久久精品亚洲午夜| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 亚洲美女搞黄在线观看 | 久久久久久大精品| 级片在线观看| www日本黄色视频网| 1024手机看黄色片| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 国产色婷婷99| 少妇被粗大猛烈的视频| 桃色一区二区三区在线观看| 欧美日韩黄片免| 国产高清有码在线观看视频| netflix在线观看网站| 久久久久久伊人网av| 麻豆av噜噜一区二区三区| 国产一级毛片七仙女欲春2| a级毛片免费高清观看在线播放| 精品午夜福利视频在线观看一区| 亚洲真实伦在线观看| 午夜免费激情av| 不卡视频在线观看欧美| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 日韩大尺度精品在线看网址| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 能在线免费观看的黄片| 日本黄色视频三级网站网址| 男女视频在线观看网站免费| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 欧美最黄视频在线播放免费| 精品乱码久久久久久99久播| 亚洲美女搞黄在线观看 | 亚洲av一区综合| 黄色欧美视频在线观看| 久久中文看片网| 欧美成人免费av一区二区三区| 大型黄色视频在线免费观看| 麻豆国产av国片精品| 亚洲色图av天堂| 国产精品精品国产色婷婷| 淫妇啪啪啪对白视频| 久久精品国产自在天天线| 美女 人体艺术 gogo| 亚洲第一区二区三区不卡| 丝袜美腿在线中文| 日本熟妇午夜| 超碰av人人做人人爽久久| 中文字幕久久专区| 久久这里只有精品中国| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 午夜影院日韩av| 麻豆国产av国片精品| av福利片在线观看| 日韩av在线大香蕉| 又黄又爽又免费观看的视频| 一个人免费在线观看电影| 国产精品电影一区二区三区| 丰满的人妻完整版| 色av中文字幕| 成人国产一区最新在线观看| 男人和女人高潮做爰伦理| 伦理电影大哥的女人| 极品教师在线免费播放| 欧美潮喷喷水| 久久人人爽人人爽人人片va| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 91av网一区二区| 午夜激情福利司机影院| 91久久精品电影网| 在线免费十八禁| 日韩中文字幕欧美一区二区| 国产成人影院久久av| 看免费成人av毛片| 在线观看美女被高潮喷水网站| 国产激情偷乱视频一区二区| 精品久久久久久久久av| 乱码一卡2卡4卡精品| 黄片wwwwww| 国产69精品久久久久777片| 国产高潮美女av| 亚洲va在线va天堂va国产| 少妇高潮的动态图| 免费人成视频x8x8入口观看| 少妇高潮的动态图| 免费人成视频x8x8入口观看| 伦理电影大哥的女人| 日本免费a在线| 少妇的逼水好多| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 国内精品久久久久精免费| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 男人狂女人下面高潮的视频| 日韩欧美国产一区二区入口| 一级黄片播放器| 国产高潮美女av| 亚洲四区av| 99视频精品全部免费 在线| 国产精品女同一区二区软件 | 亚洲黑人精品在线| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 波野结衣二区三区在线| 亚洲精华国产精华精| 少妇熟女aⅴ在线视频| 嫩草影院精品99| 国产在线男女| 中文字幕熟女人妻在线| 在线播放无遮挡| a级毛片免费高清观看在线播放| 精品国内亚洲2022精品成人| 精品久久国产蜜桃| 赤兔流量卡办理| 变态另类丝袜制服| 99精品在免费线老司机午夜| 变态另类丝袜制服| 免费一级毛片在线播放高清视频| 麻豆国产97在线/欧美| 国产色婷婷99| 精品久久国产蜜桃| 在线国产一区二区在线| av在线天堂中文字幕| 男女那种视频在线观看| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 联通29元200g的流量卡| 久久久久久久久大av| 国产久久久一区二区三区| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 五月玫瑰六月丁香| 99热精品在线国产| 成年女人永久免费观看视频| 真人做人爱边吃奶动态| 舔av片在线| 人人妻人人看人人澡| 成年女人永久免费观看视频| 18+在线观看网站| 国产精品爽爽va在线观看网站| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产av不卡久久| 成人综合一区亚洲| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 日韩一区二区视频免费看| 天堂√8在线中文| 国内精品久久久久精免费| 精品午夜福利在线看| 精品久久久久久久久久免费视频| 亚洲熟妇熟女久久| 可以在线观看毛片的网站| 精品久久久久久久久av| 18+在线观看网站| 日韩强制内射视频| 国产免费男女视频| 免费搜索国产男女视频| 欧美日韩综合久久久久久 | 搞女人的毛片| 欧美激情在线99| 国内精品一区二区在线观看| 夜夜爽天天搞| 熟女电影av网| 在线免费十八禁| 22中文网久久字幕| x7x7x7水蜜桃| 久久国产乱子免费精品| 日韩欧美在线二视频| avwww免费| 日韩欧美在线二视频| 国产伦精品一区二区三区视频9| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 高清日韩中文字幕在线| 麻豆久久精品国产亚洲av| 久久久色成人| 久久热精品热| aaaaa片日本免费| 亚洲美女黄片视频| 亚洲欧美精品综合久久99| 欧美bdsm另类| 国产综合懂色| 国产成人福利小说| 中国美白少妇内射xxxbb| 亚洲av一区综合| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 毛片一级片免费看久久久久 | av视频在线观看入口| 色综合色国产| 午夜福利视频1000在线观看| 成人av一区二区三区在线看| 欧美色欧美亚洲另类二区| 亚洲美女黄片视频| 内地一区二区视频在线| 国产精品免费一区二区三区在线| 99精品在免费线老司机午夜| 黄色视频,在线免费观看| 搞女人的毛片| 最近最新免费中文字幕在线| 不卡一级毛片| 国内精品久久久久久久电影| 亚洲成人中文字幕在线播放| 欧美国产日韩亚洲一区| 波多野结衣高清作品| 国产精品电影一区二区三区| 18禁在线播放成人免费| 成年版毛片免费区| 久久九九热精品免费| ponron亚洲| 免费在线观看成人毛片| 色噜噜av男人的天堂激情| 久久久久久久久久久丰满 | 99热这里只有精品一区| 亚洲av免费在线观看| 欧美最黄视频在线播放免费| 欧美性感艳星| 亚洲经典国产精华液单| 日本欧美国产在线视频| 亚洲av中文av极速乱 | 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 欧美激情在线99| 女同久久另类99精品国产91| 国产人妻一区二区三区在| 99国产极品粉嫩在线观看| 中出人妻视频一区二区| 久久久久久伊人网av| 国产探花在线观看一区二区| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 日本熟妇午夜| 亚洲欧美清纯卡通| 亚洲精品亚洲一区二区| 成熟少妇高潮喷水视频| 亚州av有码| 成人精品一区二区免费| av视频在线观看入口| 国产视频一区二区在线看| 1024手机看黄色片| 久久人人精品亚洲av| 欧美极品一区二区三区四区| 国产主播在线观看一区二区| 淫妇啪啪啪对白视频| 日韩强制内射视频| 成年版毛片免费区| 精品一区二区三区视频在线| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 99热6这里只有精品| 搡老岳熟女国产| 又爽又黄a免费视频| 变态另类丝袜制服| 伊人久久精品亚洲午夜| 男插女下体视频免费在线播放| 在线观看av片永久免费下载| 欧美成人免费av一区二区三区| 国产91精品成人一区二区三区| 99久久精品一区二区三区| 亚洲性夜色夜夜综合| 又黄又爽又免费观看的视频| 成年人黄色毛片网站| 99国产极品粉嫩在线观看| 校园春色视频在线观看| 88av欧美| 91狼人影院| 嫩草影院入口| 久久久久久九九精品二区国产| 又爽又黄无遮挡网站| 丰满的人妻完整版| 赤兔流量卡办理| 成人午夜高清在线视频| 身体一侧抽搐| 免费看日本二区| 国产精品免费一区二区三区在线| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 99久久无色码亚洲精品果冻| 国产高清视频在线播放一区| 99久国产av精品| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 久久久久九九精品影院| 此物有八面人人有两片| 欧美极品一区二区三区四区| 国产av不卡久久| 内射极品少妇av片p| 午夜免费激情av| 亚洲精品在线观看二区| 色尼玛亚洲综合影院| 亚洲内射少妇av| 国产精品乱码一区二三区的特点| 国内精品宾馆在线| 国产一区二区三区av在线 | 亚洲avbb在线观看| 变态另类丝袜制服| 日韩精品中文字幕看吧| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 亚洲美女黄片视频| 九色国产91popny在线| 亚洲性夜色夜夜综合| av天堂中文字幕网| 一级黄片播放器| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 国产伦精品一区二区三区四那| 欧美激情在线99| 免费在线观看影片大全网站| 精品午夜福利视频在线观看一区| 亚洲av成人av| 黄色配什么色好看| 麻豆成人午夜福利视频| 亚洲成人中文字幕在线播放| 免费观看精品视频网站| 久久6这里有精品| 人妻夜夜爽99麻豆av| 国产v大片淫在线免费观看| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 国产成人一区二区在线| 久久九九热精品免费| 国产一区二区三区av在线 | 直男gayav资源| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 免费无遮挡裸体视频| 国产美女午夜福利| 99久久精品热视频| 在线播放无遮挡| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 日本五十路高清| 国产综合懂色| 日本免费a在线| 国产一区二区三区视频了| 91精品国产九色| 久久精品影院6| 成人国产综合亚洲| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 日本 av在线| 国产在线男女| 午夜老司机福利剧场| 国产av在哪里看| 久久国产精品人妻蜜桃| 午夜亚洲福利在线播放| 免费在线观看影片大全网站| 校园春色视频在线观看| 色综合站精品国产| 欧美区成人在线视频| 成年免费大片在线观看| 亚洲自偷自拍三级| 亚洲最大成人中文| 久99久视频精品免费| 国产高清激情床上av| 色综合婷婷激情| videossex国产| 亚洲美女黄片视频| 中文字幕久久专区| 一个人观看的视频www高清免费观看| 亚洲 国产 在线| 级片在线观看| 欧美日韩乱码在线| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 亚洲美女搞黄在线观看 | 亚洲一区高清亚洲精品| 国产欧美日韩精品亚洲av| 伦理电影大哥的女人| 少妇人妻精品综合一区二区 | 国产一区二区三区视频了| 亚洲av不卡在线观看| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 麻豆成人av在线观看| 免费看av在线观看网站| 九色成人免费人妻av| 亚洲经典国产精华液单| 亚洲成a人片在线一区二区| 精品午夜福利在线看| 色综合色国产| 亚洲欧美激情综合另类| 亚洲18禁久久av| 婷婷亚洲欧美| 在线看三级毛片| 国产高清视频在线观看网站| 看十八女毛片水多多多| xxxwww97欧美| 亚洲av成人av| 亚洲专区国产一区二区| 成人鲁丝片一二三区免费| 国产亚洲91精品色在线| 国产精品98久久久久久宅男小说| xxxwww97欧美| 国产av不卡久久| 一级黄色大片毛片| 夜夜夜夜夜久久久久| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 看十八女毛片水多多多| 桃色一区二区三区在线观看| 国产国拍精品亚洲av在线观看| av天堂中文字幕网| 国产精品伦人一区二区| 色哟哟·www| 免费看av在线观看网站| 麻豆国产97在线/欧美| 日韩精品中文字幕看吧| aaaaa片日本免费| 99久久中文字幕三级久久日本|