耐藥結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型的研究進(jìn)展

占玲俊，盧錦標(biāo)，唐軍，陳保文，秦川

1. 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所，北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院比較醫(yī)學(xué)中心，衛(wèi)生部人類(lèi)疾病比較醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，國(guó)家中醫(yī)藥管理局人類(lèi)疾病動(dòng)物模型三級(jí)實(shí)驗(yàn)室，北京 100021； 2. 中國(guó)食品藥品檢定研究院結(jié)核疫苗室，北京 100050

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耐藥結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型的研究進(jìn)展

占玲俊1，盧錦標(biāo)2，唐軍1，陳保文2，秦川1

1. 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所，北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院比較醫(yī)學(xué)中心，衛(wèi)生部人類(lèi)疾病比較醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，國(guó)家中醫(yī)藥管理局人類(lèi)疾病動(dòng)物模型三級(jí)實(shí)驗(yàn)室，北京 100021； 2. 中國(guó)食品藥品檢定研究院結(jié)核疫苗室，北京 100050

摘要：潛伏結(jié)核感染(latent tuberculosis infection, LTBI)復(fù)發(fā)是新發(fā)結(jié)核病的主要來(lái)源，其中耐藥結(jié)核病所占比例較大，使耐藥LTBI復(fù)發(fā)的防控成為結(jié)核病研究的重點(diǎn)。耐藥結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型是開(kāi)展耐藥結(jié)核病防控相關(guān)機(jī)制研究、抗耐藥結(jié)核分枝桿菌藥物和疫苗研究的基礎(chǔ)。目前耐藥結(jié)核分枝桿菌感染動(dòng)物模型缺乏，而已有的結(jié)核分枝桿菌標(biāo)準(zhǔn)株p7Rv潛伏-復(fù)發(fā)感染模型存在缺陷，如小鼠模型的潛伏期荷菌量偏高、復(fù)發(fā)期變異大，而猴模型的潛伏期和復(fù)發(fā)期不可預(yù)測(cè)。模型的可控性差使其應(yīng)用困難，且缺乏可用的免疫學(xué)評(píng)價(jià)指標(biāo)，導(dǎo)致遠(yuǎn)期復(fù)發(fā)無(wú)法預(yù)測(cè)。因此，基于現(xiàn)有p7Rv潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型的制備方法，展望耐藥結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型可能存在的缺陷，通過(guò)選用新的抑菌劑和誘導(dǎo)劑，制備有穩(wěn)定潛伏期、潛伏時(shí)長(zhǎng)適中、復(fù)發(fā)起點(diǎn)和復(fù)發(fā)水平變異小的動(dòng)物模型，是未來(lái)耐藥結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型研究的方向。

關(guān)鍵詞：耐藥結(jié)核分枝桿菌；動(dòng)物模型；耐藥結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染；穩(wěn)定性；可控性

中國(guó)每年新發(fā)結(jié)核病病例占全球第2位，而有效防治潛伏結(jié)核感染(latent tuberculosis infection，LTBI)可減少64%的新發(fā)病例[1]，因此有效防治LTBI復(fù)發(fā)是控制新發(fā)結(jié)核病的關(guān)鍵。在我國(guó)新發(fā)和再發(fā)結(jié)核病患者中，約5.7%和25.6%為耐藥結(jié)核分枝桿菌感染[2]，由此推測(cè)LTBI中耐藥結(jié)核病的比例較高。因此，耐藥LTBI復(fù)發(fā)的防治是結(jié)核病防控的重要任務(wù)，這不僅關(guān)系到國(guó)民生命健康，還關(guān)系到社會(huì)經(jīng)濟(jì)和公共衛(wèi)生問(wèn)題。

LTBI的早期診斷困難，治療一般采用一線藥物，由于治療時(shí)間長(zhǎng)、不良反應(yīng)大，常導(dǎo)致治療完成率不高。通過(guò)研究耐藥結(jié)核分枝桿菌致病機(jī)制，尋找候選靶標(biāo)，研發(fā)抗耐藥結(jié)核分枝桿菌新藥和疫苗并進(jìn)行藥效評(píng)價(jià)，輔助制訂用藥或免疫方案，是未來(lái)耐藥結(jié)核病防控的關(guān)鍵[3]。然而，以上致病機(jī)制、藥物和疫苗研究均依賴耐藥結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型及科學(xué)的評(píng)價(jià)體系。

目前，耐藥結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型罕有報(bào)道。雖然尚無(wú)明確證據(jù)表明結(jié)核分枝桿菌p7Rv與耐藥株的潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型在機(jī)制方面有差異，但在抗耐藥結(jié)核分枝桿菌藥物和治療性疫苗的評(píng)價(jià)方面不能完全用p7Rv潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型替代。此外，目前p7Rv潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型存在缺陷。因此，需研發(fā)新的耐藥結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型?；趐7Rv潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型，可對(duì)耐藥結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型及評(píng)價(jià)體系進(jìn)行分析和展望。

1耐藥結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型的研究現(xiàn)狀

1.1耐藥結(jié)核分枝桿菌感染動(dòng)物模型研究的必要性

目前耐藥結(jié)核分枝桿菌動(dòng)物模型僅有少量報(bào)道，且多限于菌株的毒力研究[4]。唯一批準(zhǔn)上市的抗耐藥結(jié)核分枝桿菌藥物TMC207由于其新的作用機(jī)制，臨床前藥效可在p7Rv模型中間接評(píng)價(jià)[5-6]。結(jié)核分枝桿菌唯一可用疫苗——卡介苗(bacillus Calmette-Guérin，BCG)，不能很好地預(yù)防耐藥結(jié)核分枝桿菌感染。耐藥菌多為北京型菌株[7-8]，耐藥基因多發(fā)生突變，微生物學(xué)性狀也可能發(fā)生改變，因此結(jié)核分枝桿菌標(biāo)準(zhǔn)株制備的動(dòng)物模型不能用于耐藥結(jié)核分枝桿菌致病機(jī)制和疫苗的研究，也不能用于抗耐藥結(jié)核分枝桿菌藥物的研究，耐藥結(jié)核分枝桿菌感染動(dòng)物模型亟需創(chuàng)制。

1.2結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型需具備的特點(diǎn)

理想的結(jié)核分枝桿菌潛伏感染動(dòng)物模型應(yīng)具備以下特點(diǎn)[9-11]：①模型所用的菌株有代表性，如耐異煙肼和利福平的多耐藥菌株，基因型為北京型，毒力與p7Rv接近；②潛伏期無(wú)明顯臨床癥狀；③體內(nèi)有潛伏的結(jié)核分枝桿菌(后期可復(fù)發(fā))，潛伏期穩(wěn)定，持續(xù)時(shí)間2個(gè)月以上，潛伏終點(diǎn)(復(fù)發(fā)起點(diǎn))可預(yù)知；④潛伏后期體內(nèi)菌大量復(fù)制導(dǎo)致結(jié)核病復(fù)發(fā)，復(fù)發(fā)水平較潛伏前期有明顯差異，并與感染后未加抑制劑的對(duì)照組同期水平相當(dāng)。

1.3不同結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型的應(yīng)用缺陷

p7Rv潛伏-復(fù)發(fā)感染模型可在多物種中建立，最常用的是小鼠、豚鼠、兔和猴，每種模型各有優(yōu)缺點(diǎn)，需根據(jù)研究目的選擇不同的動(dòng)物模型。

1.3.1常見(jiàn)結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型在研究中的應(yīng)用小鼠結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染模型被應(yīng)用得最多，其中最著名的是Cornell模型。該模型在結(jié)核分枝桿菌感染后用抗結(jié)核化學(xué)藥物抑制獲得潛伏感染，然后用地塞米松等免疫抑制劑誘導(dǎo)復(fù)發(fā)，感染劑量、化學(xué)藥物組合、藥物劑量、抑制持續(xù)時(shí)間、免疫抑制劑、誘導(dǎo)持續(xù)時(shí)間不同均會(huì)導(dǎo)致潛伏期不同(3~6個(gè)月不等)和復(fù)發(fā)水平不同，而藥物和疫苗評(píng)價(jià)常根據(jù)潛伏期持續(xù)時(shí)間和復(fù)發(fā)水平來(lái)判斷[12-13]。

豚鼠對(duì)結(jié)核分枝桿菌敏感，感染后有典型的結(jié)核肉芽腫病變，可通過(guò)抗結(jié)核化學(xué)藥物治療制備潛伏-復(fù)發(fā)感染模型[3,11,14-16]。 500 cfu結(jié)核分枝桿菌感染豚鼠后2周，給予抗結(jié)核藥物治療4周，停藥后結(jié)核病均自然復(fù)發(fā)。不同抗結(jié)核藥物組合、用藥劑量及治療持續(xù)時(shí)間，均會(huì)導(dǎo)致潛伏期不同[13]。豚鼠潛伏期可持續(xù)2~3個(gè)月，復(fù)發(fā)起點(diǎn)變異較小，復(fù)發(fā)水平較高。

兔對(duì)結(jié)核分枝桿菌較敏感，不易形成自發(fā)的潛伏感染，感染后肺部肉芽腫常形成液化空洞。與豚鼠類(lèi)似，在抗生素作用下，實(shí)驗(yàn)兔可形成較為均一的潛伏-復(fù)發(fā)感染模型，可用于藥物的評(píng)價(jià)研究。

非人靈長(zhǎng)類(lèi)結(jié)核病模型是臨床前藥效學(xué)和致病機(jī)制研究必不可少的。目前，非人靈長(zhǎng)類(lèi)結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染模型的特點(diǎn)是結(jié)核分枝桿菌形成自發(fā)潛伏和復(fù)發(fā)感染，與人的潛伏-復(fù)發(fā)過(guò)程很相似，且復(fù)發(fā)后一般臨床癥狀和結(jié)核肉芽腫結(jié)構(gòu)與人相似。但由于實(shí)驗(yàn)個(gè)體的差異，潛伏期長(zhǎng)短差異較大，數(shù)月至數(shù)年不等，復(fù)發(fā)點(diǎn)不可預(yù)測(cè)，復(fù)發(fā)后病變的差異較大，導(dǎo)致模型難以應(yīng)用，且實(shí)驗(yàn)周期太長(zhǎng)，不利于藥物和疫苗的研究[17-19]。因此，藥物和免疫調(diào)節(jié)劑干預(yù)是制備較為穩(wěn)定的猴結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染模型的研究方向。

1.3.2不同結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型的優(yōu)缺點(diǎn)不同結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型的優(yōu)缺點(diǎn)見(jiàn)表1。

表1不同結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型的優(yōu)缺點(diǎn)

Tab.1Characteristics of different animal models ofMycobacteriumtuberculosislatent-relapse infection

動(dòng)物模型優(yōu)勢(shì)劣勢(shì)小鼠有清楚的遺傳背景,成本較低,有相對(duì)成熟的免疫試劑、定向基因敲除技術(shù),成為優(yōu)先考慮的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物;經(jīng)典Cornell模型,在感染結(jié)核分枝桿菌后,用抗結(jié)核藥物抑制獲得潛伏感染,免疫抑制劑誘導(dǎo)后感染復(fù)發(fā),同組內(nèi)小鼠潛伏感染的起點(diǎn)一致,潛伏期長(zhǎng)短適中,3~6個(gè)月12-13?小鼠對(duì)結(jié)核分枝桿菌感染有一定的抵抗力,臨床表現(xiàn)不明顯;感染后結(jié)核肉芽腫的形成過(guò)程和結(jié)構(gòu)與人并不相同,不能形成壞死性病變(除C3HeB/FeJ小鼠外);潛伏后復(fù)發(fā)的起點(diǎn)不均一,復(fù)發(fā)水平有差異,組內(nèi)小鼠的均一性較差;改進(jìn)型Cornell模型用BCG免疫后感染結(jié)核分枝桿菌,獲得6周潛伏期,但潛伏期組織荷菌量較高5,20?,潛伏期太短,不利于藥物和疫苗的評(píng)價(jià)豚鼠對(duì)結(jié)核分枝桿菌非常易感;結(jié)核肉芽腫結(jié)構(gòu)和層次與人非常相似;對(duì)抗結(jié)核藥物、疫苗反應(yīng)好,可用于藥物和疫苗的評(píng)價(jià)缺乏特異性免疫試劑,不能進(jìn)行深入機(jī)制研究;缺乏結(jié)核病的一般臨床表現(xiàn);不能形成自發(fā)潛伏感染,需在抗結(jié)核藥物作用下制備潛伏-復(fù)發(fā)感染模型兔肺部形成的肉芽腫能發(fā)生壞死和液化,易形成空洞;在抗結(jié)核藥物作用下,潛伏-復(fù)發(fā)感染較均一缺乏相關(guān)免疫試劑;不易形成自發(fā)潛伏感染猴可模擬結(jié)核病的臨床表現(xiàn);可模擬人結(jié)核病的自然潛伏感染過(guò)程;肉芽腫結(jié)構(gòu)與人相似成本高,實(shí)驗(yàn)室空間占位大,限制了使用數(shù)量;自然潛伏-復(fù)發(fā)感染的潛伏期長(zhǎng)短不一,復(fù)發(fā)不可預(yù)測(cè),不利于藥物和疫苗的評(píng)價(jià)

1.4缺乏復(fù)發(fā)預(yù)測(cè)的免疫學(xué)指標(biāo)導(dǎo)致結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型應(yīng)用受限

結(jié)核病治療的唯一療效判定標(biāo)志是治療2個(gè)月后痰培養(yǎng)轉(zhuǎn)陰，遠(yuǎn)期治療效果主要通過(guò)治療結(jié)束后2年內(nèi)結(jié)核病復(fù)發(fā)率來(lái)判斷，實(shí)驗(yàn)期長(zhǎng)不利于藥物評(píng)價(jià)的研究[21]?？菇Y(jié)核治療早期標(biāo)志性免疫學(xué)指標(biāo)不僅可幫助調(diào)整治療策略，減少因治療依從性差導(dǎo)致的耐藥，還可用于判斷抗結(jié)核藥物療效，加速新藥研發(fā)。疫苗評(píng)價(jià)中，早期免疫學(xué)指標(biāo)不僅可預(yù)測(cè)遠(yuǎn)期免疫效果，還能有效指導(dǎo)免疫方案制訂。備受期待的牛津大學(xué)和Aeras公司合作開(kāi)發(fā)的結(jié)核分枝桿菌疫苗MVA85A，一直被認(rèn)為是90年來(lái)BCG接種后最有希望的加強(qiáng)免疫用新疫苗，但其Ⅲ期臨床試驗(yàn)最終宣告不盡人意，原因在于缺乏能預(yù)測(cè)遠(yuǎn)期免疫保護(hù)作用的免疫學(xué)指標(biāo)。

臨床研究報(bào)道，結(jié)核病復(fù)發(fā)相關(guān)的候選免疫學(xué)指標(biāo)有：①結(jié)核分枝桿菌特異性抗原，如Ag85、Ag85B mRNA。②某些可能預(yù)測(cè)治療結(jié)果的免疫學(xué)產(chǎn)物，如新蝶呤(Neopterin)、C反應(yīng)蛋白(C reactive protein，CRP)、可溶性尿激酶受體(soluble urokinase-type plasminogen activator receptor，suPAR)等。③某些基因如RIN3、LY6G6D、TEX264、C14orf2、SOCS3、KIAA201、ASNA1、ATP5G1、NOLA3也可能與結(jié)核病復(fù)發(fā)有關(guān)。聯(lián)合使用多種免疫組分可能提高治療結(jié)果的預(yù)測(cè)價(jià)值，然而大多數(shù)免疫成分治療結(jié)果的遠(yuǎn)期預(yù)測(cè)作用沒(méi)有得到深入研究[21]。

2耐藥結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型研究可能存在的問(wèn)題及解決思路

迄今為止，耐藥結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型未見(jiàn)報(bào)道。因此，基于p7Rv潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型的特點(diǎn)，展望耐藥結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型，分析可能存在的問(wèn)題及改進(jìn)方法，可為今后模型制備提供參考。

2.1缺乏有代表性的標(biāo)準(zhǔn)耐藥結(jié)核分枝桿菌菌株

耐藥結(jié)核分枝桿菌沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)耐藥株，尤其是動(dòng)物模型用的耐藥株。需從臨床流行株的結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群中篩選出有代表性的耐藥表型單克隆株，其還需具備典型的耐藥基因突變位點(diǎn)、基因背景清楚(如北京型)、毒力與p7Rv接近等條件。目前耐藥結(jié)核分枝桿菌動(dòng)物感染用的菌株耐藥表型較明確，其他信息不清楚[4,22]。

2.2耐藥結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型可能不穩(wěn)定

耐藥結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型雖未見(jiàn)報(bào)道，但耐藥菌與p7Rv的動(dòng)物模型應(yīng)有共性。p7Rv潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型不穩(wěn)定，如小鼠模型的潛伏期長(zhǎng)短不一，復(fù)發(fā)水平存在差異；而猴模型在感染初期不能預(yù)測(cè)，經(jīng)長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)才能回溯確定潛伏感染；某些模型潛伏期過(guò)長(zhǎng)(數(shù)月或數(shù)年)，復(fù)發(fā)期無(wú)法預(yù)測(cè)，不利用研究應(yīng)用。因此，可通過(guò)改進(jìn)小鼠、猴等潛伏-復(fù)發(fā)感染模型，使?jié)摲跁r(shí)長(zhǎng)適宜(2~6個(gè)月)，復(fù)發(fā)點(diǎn)可控制，復(fù)發(fā)后病變和荷菌量水平適中，組內(nèi)復(fù)發(fā)差異小。

耐藥結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型缺陷的原因分析顯示，同組內(nèi)動(dòng)物潛伏復(fù)發(fā)差異大，可能是因?yàn)闈摲跗谒拗髅庖吡Σ煌购删坑胁町?，從而?dǎo)致模型不穩(wěn)定、可控性差[23]。通過(guò)改變感染劑量、抑制劑種類(lèi)、抑制時(shí)間等參數(shù)可改變潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型結(jié)果[12]。

2.3微卡聯(lián)合化學(xué)藥物可能使制備的耐藥結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染小鼠和猴模型穩(wěn)定可控

早期天然免疫決定結(jié)核分枝桿菌感染后是潛伏感染還是活動(dòng)性感染[24]，因此早期使用免疫調(diào)節(jié)劑提高宿主的天然免疫力，可使感染往潛伏感染方向發(fā)展。微卡(母牛分枝桿菌提取物)能提高巨噬細(xì)胞功能，從而殺滅結(jié)核分枝桿菌，與化學(xué)藥物聯(lián)用可提高臨床抗結(jié)核的療效[25-26]，但微卡聯(lián)合化學(xué)藥物尚未用于結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型的制備。

化學(xué)藥物能直接抑菌且起效快，但抑菌后動(dòng)物模型的疾病發(fā)展個(gè)體差異大；微卡抑菌作用弱，起效慢，但有望提高宿主天然免疫，從而使感染結(jié)果均一。兩者聯(lián)合用于潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型的建立，有望從內(nèi)到外提高抑菌效果，減少潛伏感染早期的荷菌量差異及機(jī)體免疫狀態(tài)的差異。

2.4在耐藥LTBI模型中篩選早期預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)的免疫學(xué)指標(biāo)

小鼠與猴的LTBI復(fù)發(fā)不可預(yù)測(cè)，原因在于復(fù)發(fā)機(jī)制不清、缺乏預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)的關(guān)鍵指標(biāo)。雖然臨床研究篩選出某些候選的復(fù)發(fā)預(yù)測(cè)分子，但這些候選分子大多并未進(jìn)行深入驗(yàn)證研究[21]。通過(guò)建立耐藥結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型，可在潛伏期和復(fù)發(fā)期不同時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行蛋白譜或轉(zhuǎn)錄譜對(duì)比分析，找到候選指標(biāo)，然后在動(dòng)物模型和人群中進(jìn)行驗(yàn)證，從而找到預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)的指標(biāo)[21]。

3結(jié)語(yǔ)

在非耐藥結(jié)核分枝桿菌p7Rv小鼠Cornell模型和改進(jìn)型的基礎(chǔ)上，借鑒豚鼠p7Rv潛伏-復(fù)發(fā)感染模型的制備思路和方法，總結(jié)前期猴自然潛伏-復(fù)發(fā)感染模型的技術(shù)基礎(chǔ)和經(jīng)驗(yàn)，可創(chuàng)制小鼠、猴等多種動(dòng)物的耐多藥(multidrug resistance，MDR)結(jié)核分枝桿菌的標(biāo)準(zhǔn)化潛伏-復(fù)發(fā)感染模型。其中MDR模型的菌株標(biāo)準(zhǔn)化和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)化是保障模型穩(wěn)定的重要因素，菌株應(yīng)是基因背景和耐藥表型有代表性的流行株(如耐異煙肼和利福平的北京型株)，有典型的耐藥基因突變，毒力與p7Rv接近。

耐藥結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型缺乏，導(dǎo)致結(jié)核病機(jī)制、藥物和疫苗研究無(wú)法順利開(kāi)展。采用新的抑制劑、新的模型制備參數(shù)，有望制備較為穩(wěn)定、可控的耐藥結(jié)核分枝桿菌潛伏-復(fù)發(fā)感染動(dòng)物模型。基于模型可探索預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)的免疫學(xué)指標(biāo)，有望提升模型在藥效學(xué)評(píng)價(jià)中的應(yīng)用價(jià)值。該模型的創(chuàng)制將促進(jìn)耐藥結(jié)核分枝桿菌致病機(jī)制、藥物及疫苗候選靶標(biāo)的研究，促進(jìn)藥物和疫苗的轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究，給耐藥結(jié)核病的防控帶來(lái)新的希望。

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Corresponding author. QIN Chuan, E-mail: Chuanqin@vip.sina.com

·綜述·

The research prospect of animal models of drug-resistantMycobacteriumtuberculosislatent-relapse infection

ZHAN Lingjun1, LU Jinbiao2, TANG Jun1, CHEN Baowen2, QIN Chuan1

1. Institute of Laboratory Animal Science, Chinese Academy of Medical Science (CAMS) & Comparative Medicine Center, Peking Union Medical College; Key Laboratory of Human Disease Comparative Medicine, Ministry of Health; Key Laboratory of Human Diseases Animal Models, State Administration of Traditional Chinese Medicine, Beijing 100021, China; 2. Division of Tuberculosis Vaccines, National Institutes for Food and Drug Control, Beijing 100050, China

Abstract:The new cases of tuberculosis mainly come from the relapse of latent tuberculosis infection (LTBI), and the growing proportion of drug-resistantMycobacteriumtuberculosis(DR-Mtb) among LTBI makes DR-LTBI the key point of tuberculosis prevention and control. The animal model of DR-Mtb latent-relapse infection is the foundation for basic research, anti-DR-Mtb drug development and vaccine evaluation. However, the lack of a DR-Mtb animal model today presents a hurdle. The animal model of latent-relapse infection based on drug-sensitive strain p7Rv still has concerns such as high bacterial loads in the latent phase and large variation in the relapse phase in mice, and unpredicted latent and relapse phases in monkeys. These concerns limit its application. Furthermore, the lack of immune parameters in the evaluation makes the forward relapse unpredicted. The strategies and research progresses on the improvement of the current models are reviewed in this paper.

Key words:Drug-resistantMycobacteriumtuberculosis; Animal model; Drug-resistantMycobacteriumtuberculosislatent-relapse infection; Stability; Controllability

收稿日期：(2015-05-29)

通信作者：秦川

基金項(xiàng)目：“十二五”國(guó)家科技重大專(zhuān)項(xiàng)(2012ZX10004501)