白番紅花球莖醇提取物的鎮(zhèn)痛抗炎作用研究

高紅艷　楊元華　劉靜　程媛媛　韓汝春　楊曉絨

【摘要】目的：探討白番紅花球莖醇提取物的鎮(zhèn)痛抗炎作用。方法：采用小鼠醋酸扭體法觀察白番紅花球莖醇提取物的鎮(zhèn)痛作用；采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹法觀察白番紅花球莖醇提取物的抗炎作用。結(jié)果：白番紅花球莖醇提取物高、中、低劑量組能顯著減少醋酸所致小鼠的扭體次數(shù)，與空白對(duì)照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；白番紅花球莖醇提取物高劑量組能顯著抑制二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹度，與空白對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：白番紅花球莖醇提取物有明顯的鎮(zhèn)痛作用，高劑量有一定的抗炎作用。

【關(guān)鍵詞】白番紅花；鎮(zhèn)痛；抗炎；扭體法；醇提取物

【中圖分類(lèi)號(hào)】R285.5【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號(hào)】1007-8517（2016）03-0008-02

白番紅花（Crocus alatavicus Regel et Sem）是鳶尾科番紅花屬的多年生草本植物，與番紅花是同科同屬植物。白番紅花主要分布在新疆伊犁地區(qū)各縣的山坡上（海拔1200～3000m），地產(chǎn)資源豐富。白番紅花球莖是哈薩克族民間的常用藥物，常搗碎放入馬奶子中服用，用于治療風(fēng)寒濕痹、跌打腫痛、腰腳無(wú)力等疾病。目前白番紅花的研究?jī)H限于植物形態(tài)和生藥鑒定方面[1-3]，對(duì)該藥的藥效學(xué)研究未見(jiàn)報(bào)道。實(shí)驗(yàn)對(duì)白番紅花球莖醇提取物進(jìn)行了鎮(zhèn)痛、抗炎作用的初步研究，為其臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1材料與儀器

1.1藥材與試劑白番紅花球莖采于新疆伊犁察布查爾錫伯自治縣海拔1500m的山坡上，經(jīng)新疆維吾爾自治區(qū)藥品檢驗(yàn)所主任藥師劉勇民鑒定為鳶尾科番紅花屬白番紅花；阿司匹林（批號(hào)：BJ14404，拜耳醫(yī)藥保健有限公司）；所用試劑均為分析純。

1.2動(dòng)物實(shí)驗(yàn)用昆明小鼠，SPF級(jí)，雌雄兼有，體重18～22g，由新疆醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，許可證號(hào)：SCXK（新）2013-001，雌性未產(chǎn)無(wú)孕，自由攝食和飲水，室溫保持18～22℃，相對(duì)濕度40%～70%，實(shí)驗(yàn)前適應(yīng)3d。

1.3儀器FA2104電子天平（上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司）；RE-2000A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）；SHZ-D（Ⅲ）循環(huán)水式真空泵（上海衛(wèi)凱儀器設(shè)備有限公司）；電熱恒溫水浴鍋（北京永光明醫(yī)療儀器廠）；打孔器；注射器；小鼠灌胃器等。

2方法

2.1樣品制備稱取一定量的白番紅花球莖粗粉，加10倍量的60%乙醇回流提取2次，用16層紗布過(guò)濾，合并濾液，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上回收濃縮至無(wú)醇味，得濃稠液，然后定容到每ml相當(dāng)于1g生藥藥液備用。

2.2小鼠醋酸扭體法鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)參照文獻(xiàn)[4-9]取小鼠，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，每組10只。即空白對(duì)照組：生理鹽水組；陽(yáng)性對(duì)照組：阿司匹林（0.3g/kg）組；白番紅花球莖的醇提取物高、中、低劑量組（5、2.5、1.25 g/kg）。分別按小鼠體質(zhì)量（0.2ml/10g）灌胃給藥，1次/d，連續(xù)給藥7d。末次給藥30min后，腹腔注射0.6%冰醋酸溶液0.2ml/只，觀察并記錄15min內(nèi)各小鼠扭體次數(shù)，計(jì)算扭體抑制率。

扭體抑制率=（對(duì)照組平均扭體次數(shù) - 給藥組平均扭體次數(shù)）/對(duì)照組平均扭體次數(shù)×100%。

2.3二甲苯致小鼠耳廓腫脹法抗炎實(shí)驗(yàn)參照文獻(xiàn)[4-9]取小鼠，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，每組10只。即空白對(duì)照組：生理鹽水組；陽(yáng)性對(duì)照組：阿司匹林（0.3g/kg）組；白番紅花球莖的醇提取物高、中、低劑量組（5、2.5、1.25g/kg）。分別按小鼠體質(zhì)量（0.2ml/10g）灌胃給藥，1次/d，連續(xù)給藥7d。末次給藥1h后，分別于小鼠右耳兩面涂二甲苯25μl，左耳對(duì)照，15min后將小鼠頸椎脫臼處死，沿耳廓基線剪下兩耳，用6mm打孔器分別在兩耳相同部位打下圓耳片，用電子天平稱重，以兩耳片重量之差為腫脹度，并計(jì)算各組腫脹抑制率。

腫脹度抑制率=（對(duì)照組平均腫脹度 - 給藥組平均腫脹度）/對(duì)照組平均腫脹度×100%。

2.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)均以（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3結(jié)果

3.1對(duì)醋酸扭體法致小鼠疼痛的影響由表1可知，灌胃給予白番紅花球莖醇提取物后，給藥組高、中、低劑量組和陽(yáng)性對(duì)照組均能顯著降低小鼠扭體次數(shù)，與空白對(duì)照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），其中高劑量組（5g/kg）尤為明顯，說(shuō)明白番紅花球莖醇提取物具有明顯的鎮(zhèn)痛作用，并隨劑量增大鎮(zhèn)痛作用增強(qiáng)。

3.2對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響由表2可知，灌胃給予白番紅花球莖醇提取物后，給藥組高劑量組和陽(yáng)性對(duì)照組能明顯抑制二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹度，髙劑量組、陽(yáng)性對(duì)照組與空白對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），說(shuō)明高劑量組有一定的抗炎作用。

表1白番紅花球莖醇提取物對(duì)醋酸扭體法致小鼠疼痛的影響（x±s，n=10）組別劑量/g·kg-115min內(nèi)扭體數(shù)/次扭體抑制率/%空白對(duì)照組-26.37±7.76-阿司匹林0.310.03±11.07*61白番紅花球莖醇提取物高劑量組512.50±12.95*52白番紅花球莖醇提取物中劑量組2.514.11±13.60*46白番紅花球莖醇提取物低劑量組1.2514.11±11.48*46注：與空白對(duì)照組比較：*P<0.05。表2白番紅花球莖醇提取物對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響（x±s，n=10）組別劑量/g·kg-1腫脹度/mg腫脹度抑制率/%空白對(duì)照組-3.513±2.046-阿司匹林0.31.629±1.095*53白番紅花球莖醇提取物高劑量組51.686±0.660*52白番紅花球莖醇提取物中劑量組2.52.075±0.70340白番紅花球莖醇提取物低劑量組1.252.543±0.94527注：與空白對(duì)照組比較，*P<0.05。4討論

實(shí)驗(yàn)采用小鼠醋酸扭體法觀察白番紅花球莖醇提取物的鎮(zhèn)痛作用；采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹法觀察白番紅花球莖醇提取物的抗炎作用，結(jié)果表明，在小鼠醋酸扭體法的鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)中，白番紅花球莖醇提取物的高、中、低劑量組、陽(yáng)性對(duì)照組均與空白組比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），說(shuō)明白番紅花球莖醇提取物具有明顯的鎮(zhèn)痛作用，并隨劑量增大鎮(zhèn)痛作用增強(qiáng)；在二甲苯致小鼠耳廓腫脹的抗炎試驗(yàn)中，高劑量組、陽(yáng)性對(duì)照組與空白組比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），說(shuō)明高劑量有一定的抗炎作用，而中、低劑量抗炎作用不明顯，提示我們?cè)诳寡鬃饔梅矫?，用藥劑量要大一點(diǎn)。白番紅花球莖是哈薩克族民間常用的藥材，本實(shí)驗(yàn)為白番紅花球莖在民間臨床應(yīng)用提供了一定的理論依據(jù)。

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（收稿日期：2015.12.15）