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    乙二胺四乙酸依賴性假性血小板減少的分析

    2016-02-26 05:38:47崔俊林
    關(guān)鍵詞:乙二胺四乙酸血小板

    崔俊林,曹 娟

    (1.鐘祥市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,湖北鐘祥 431900;2.臺州恩澤醫(yī)療集團(tuán)(中心)路橋醫(yī)院檢驗(yàn)科,浙江臺州 318050)

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    ·臨床研究·

    乙二胺四乙酸依賴性假性血小板減少的分析

    崔俊林1,曹娟2

    (1.鐘祥市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,湖北鐘祥 431900;2.臺州恩澤醫(yī)療集團(tuán)(中心)路橋醫(yī)院檢驗(yàn)科,浙江臺州 318050)

    摘要:目的探討乙二胺四乙酸依賴性假性血小板減少(EDTA-PTCP)的原因及鑒別要點(diǎn)和防范措施,減少或防止誤診誤治。方法對2013年1~12月鐘祥市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科發(fā)現(xiàn)的3例EDTA-PTCP患者分別用乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝管、肝素抗凝管和枸櫞酸鈉抗凝管采集靜脈血,而后用全自動血液分析儀分別測定血小板數(shù)量,并用毛細(xì)血管血進(jìn)行血小板手工計(jì)數(shù),且制作EDTA-K2抗凝血涂片和毛細(xì)血管血涂片,并用瑞氏染色鏡檢。結(jié)果EDTA-K2抗凝血的機(jī)測血小板結(jié)果均很低(<50×109/L),血小板直方圖存在曲皺、尾部上翹、拖尾、無擬合曲線等異常;枸櫞酸鈉抗凝血和肝素抗凝血機(jī)測結(jié)果正常,血小板直方圖也正常;手工計(jì)數(shù)血小板數(shù)量正常,且涂片可見分布正常。3例均明確為EDTA-PTCP。結(jié)論EDTA-K2抗凝劑可引起血小板聚集,造成血小板假性減少。用全自動血細(xì)胞分析儀檢測EDTA-K2抗凝血時,若出現(xiàn)血小板減低而患者無出血傾向、血栓形成等相關(guān)血小板減少癥時,應(yīng)進(jìn)一步進(jìn)行人工計(jì)數(shù)、血涂片復(fù)查和更換抗凝劑等方法復(fù)檢,以減少或避免誤診誤治。

    關(guān)鍵詞:血小板;乙二胺四乙酸;假性血小板減少

    目前,全自動血液分析儀在臨床檢驗(yàn)工作中廣泛應(yīng)用,乙二胺四乙酸(EDTA)是國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(ICSH)推薦的血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)的抗凝劑。它的原理是能與血液中的鈣離子結(jié)合成螯合物,而使鈣離子失去凝血作用,從而阻止血液凝固。但其偶可誘導(dǎo)血小板發(fā)生體外聚集,血細(xì)胞自動分析儀又不能加以識別,導(dǎo)致血小板計(jì)數(shù)低于實(shí)際值,而出現(xiàn)假性血小板減少現(xiàn)象,即EDTA依賴性假性血小板減少癥(EDTA-PTCP),易造成誤診誤治,甚至引發(fā)醫(yī)療糾紛[1-2]。鐘祥市人民醫(yī)院2013年1~12月共發(fā)生3例EDTA-PTCP,現(xiàn)結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)分析報(bào)道如下。

    1資料和方法

    1.1一般資料本組3例,男2例,女1例,其中2例男性為接受健康體檢者,1例女性為擇期剖宮產(chǎn)手術(shù)的住院患者。3例患者均無皮膚黏膜出血、紫癜等明顯出血傾向。乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝的靜脈血用全自動血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)均發(fā)現(xiàn)PLT<50×109/L,但末梢血涂片染色后鏡檢發(fā)現(xiàn)血小板分布正常,而且用肝素抗凝真空采血管、枸櫞酸鈉抗凝真空采血管重抽后血液分析儀計(jì)數(shù)和末梢血手工計(jì)數(shù)的血小板數(shù)量均在正常范圍。

    1.2儀器和試劑Sysmex XE-2100 全自動血細(xì)胞分析儀及其配套試劑,德國賽力斯BE-XRM血凝儀及配套試劑,EDTA-K2真空采血管、枸櫞酸鈉抗凝真空采血管及肝素抗凝真空采血管(均由浙江康是醫(yī)療器械有限公司生產(chǎn)),SP-1000i 推片機(jī),OLYMPUS-BX41顯微鏡,Neubauer 計(jì)數(shù)盤,載玻片(由天津玻璃廠生產(chǎn)),手工計(jì)數(shù)血小板稀釋液及瑞氏染液均參照《全國臨床檢驗(yàn)操做規(guī)程》[3]由本實(shí)驗(yàn)室配制。

    1.3臨床排查 仔細(xì)查體觀察患者有無皮膚、黏膜出血,排除血小板減少的相關(guān)性疾病,檢測凝血酶原時間(PT)、活化部分凝血活酶時間(APTT)、纖維蛋白原(FIB)、凝血酶時間(TT)。

    1.4血小板復(fù)查

    1.4.1儀器法 分別用EDTA-K2抗凝管、肝素抗凝管和枸櫞酸鈉抗凝管采患者靜脈血2 mL,充分混勻,嚴(yán)格按照操作規(guī)程,在30 min內(nèi)應(yīng)用Sysmex XE-2100全自動血細(xì)胞分析儀分別測定血小板。血小板的參考范圍是(100~300)×109/L。

    1.4.2手工法取毛細(xì)血管血20 μL按《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》(3版)的操作方法進(jìn)行血小板手工計(jì)數(shù)。

    1.4.3瑞氏染色分別用患者毛細(xì)血管血涂片1 張,EDTA-K2抗凝靜脈血涂片1 張,用瑞氏染液染色,在顯微鏡下觀察血小板分布情況。

    2結(jié)果

    本組均排除采血不當(dāng)、抗凝劑與血液混勻不均導(dǎo)致的血小板減少。查體發(fā)現(xiàn)3例均無皮膚、黏膜出血,且凝血功能檢測正常。EDTA-K2抗凝靜脈血用儀器法檢測的血小板數(shù)量仍很低(<50×109/L),且血小板直方圖存在曲皺、尾部上翹、拖尾、無擬合曲線等異常,散點(diǎn)圖也有異常情況,血涂片顯示血小板聚集、巨大血小板、血小板衛(wèi)星現(xiàn)象等。枸櫞酸鈉抗凝靜脈血和肝素鋰抗凝靜脈血用儀器法檢測的血小板數(shù)量都處于正常范圍,且血小板直方圖圖形正常。用手工法計(jì)數(shù)的毛細(xì)血管血小板數(shù)量也處于正常范圍,并且毛細(xì)血管血涂片顯示血小板分布正常,血小板2~4個聚集或散在分布,未見明顯片狀聚集現(xiàn)象。EDTA-K2抗凝血涂片顯示,血小板大量聚集,成簇甚至成片,偶見散在在分布。根據(jù)上述結(jié)果,明確3例均為EDTA-PTCP,詳見表1。

    表1  3例患者的血小板檢測結(jié)果(×109/L)

    3討論

    3.1EDTA-PTCP的病理機(jī)制EDTA-PTCP的病理機(jī)制并不是很明確,目前認(rèn)為EDTA-PTCP的發(fā)生可能與血小板表面存在某種隱匿性抗原有關(guān)[4-5]。由于EDTA鹽可導(dǎo)致血小板活化,血小板形態(tài)發(fā)生改變,致使血小板表面某種隱匿性抗原表位構(gòu)象改變,這些活化的血小板與存在于血漿中的自身抗體結(jié)合后,激活了細(xì)胞膜中某些能活化血小板纖維蛋白原受體的活性物質(zhì),促使血小板與纖維蛋白原聚集成團(tuán);也有研究資料表明,EDTA-PTCP是由于EDTA鹽抗凝時可誘導(dǎo)血小板互相聚集,堆積發(fā)生衛(wèi)星現(xiàn)象(血小板圍繞在單核細(xì)胞或淋巴細(xì)胞周圍呈現(xiàn)衛(wèi)星現(xiàn)象)[6],致使全自動血細(xì)胞分析儀不能確認(rèn)血小板而計(jì)數(shù)偏低[7]。

    3.2防范EDTA-PTCP的措施在日常檢驗(yàn)工作中,對EDTA 抗凝的標(biāo)本進(jìn)行血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)時出現(xiàn)血小板減少的現(xiàn)象,必須認(rèn)真查看并分析其血小板直方圖,看有無擬合曲線或血小板聚集警告提示,并制作血涂片染色鏡檢,觀察有無血小板聚集成堆或成簇的現(xiàn)象。對于PLT<50×109/L的患者,應(yīng)及時和臨床醫(yī)生溝通,在了解患者無紫癜且無出血癥狀與體征,凝血功能正常的情況下,要重新采樣復(fù)查,并進(jìn)行不同的方法比對,如末梢血手工稀釋計(jì)數(shù)、枸櫞酸鈉和肝素抗凝血計(jì)數(shù),同時制作血涂片瑞氏染色,顯微鏡下觀察血小板是否有聚集現(xiàn)象,獲得準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),避免因?yàn)镋DTA鹽作為抗凝劑造成的血小板假性減少的情況。當(dāng)然,這種情況發(fā)生率極低。一旦發(fā)生,會給臨床醫(yī)生帶來錯誤指導(dǎo),就會給患者增加一些臨床不必要的檢查,甚至出現(xiàn)誤診、誤治現(xiàn)象。因此,檢驗(yàn)人員一定要有高度的責(zé)任心,提高檢驗(yàn)質(zhì)量,避免上述情況的發(fā)生。

    參考文獻(xiàn)

    [1]蔣乃,曹改娟.乙二胺四乙酸鹽抗凝劑致假性血小板減少1例[J].解放軍醫(yī)藥雜志,2011,23(1):37-39.

    [2]張茹,張濤.如何減少乙二胺四乙酸抗凝劑依賴性假性血小板減低[J].臨床誤診誤治,2010,23(2):134-135.

    [3] 葉英嬡,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操做規(guī)程[M].3 版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:11.

    [4] 周小棉,鄒曉. 假性血小板減少癥研究進(jìn)展[J]. 中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2007,30(9):1065-1067.

    [5] 樂家新,叢玉隆,王海,等. Sysmex XE-2100 血細(xì)胞分析儀血涂片復(fù)檢規(guī)則的應(yīng)用研究[J]. 現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2010,25(1):30-36.

    [6] Zandecki M,Genevieve F,Gerard J,et al.Spurious counts and spuriousresults on haematoloy analysers:Areview.Part I platelets[J].Int J LabHematol,2007,29(1):14-20.

    [7] 宓慶梅,施巍宇,郝婉瑩,等.EDTA依賴性血小板減少癥1例[J].中華檢驗(yàn)雜志,2004,27(7):719-720.

    (收稿日期:2015-07-25)

    DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.01.049

    文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A

    文章編號:1673-4130(2016)01-0105-02

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