3種國(guó)產(chǎn)戊型肝炎抗體檢測(cè)試劑的比較

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·個(gè)案與短篇·

3種國(guó)產(chǎn)戊型肝炎抗體檢測(cè)試劑的比較

常靜霞，王潔，張怡青，汪茂榮△

(解放軍第八一醫(yī)院全軍肝病中心，江蘇南京 210002)

戊型病毒性肝炎是由戊肝病毒(HEV)感染引起的傳染病，糞-口途徑傳播是其主要的傳播方式，亦見(jiàn)于輸血和垂直傳播，主要表現(xiàn)為急性肝功能損害。戊肝雖為急性自限性疾病，但其病死率高于甲肝型肝炎和乙型肝炎，在我國(guó)成(收稿日期：2015-06-25)

年人急性病毒性肝炎中已占首位[1]。近年來(lái)，戊肝感染人群在多個(gè)地區(qū)呈上升的趨勢(shì)。因此，做好戊型肝炎的預(yù)防顯得非常重要，戊肝診斷試劑的重要性亦越來(lái)越突出。

戊型肝炎的實(shí)驗(yàn)室診斷主要包括免疫電鏡法檢測(cè)糞便中HEV，酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)和蛋白印跡法檢測(cè)血清中抗-HEV IgM和IgG抗體，巢式逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法檢測(cè)糞便和血清中HEV RNA[2]。在戊型肝炎潛伏期及疾病早中期，患者糞便和血清中?？蓹z出病毒RNA，是戊型肝炎確診的最可靠指標(biāo)[3]。但因其操作方法的局限性，難以在臨床廣泛開(kāi)展。由于ELISA簡(jiǎn)便、快速，在臨床上應(yīng)用最為廣泛。而HEV IgM和IgA抗體通常在人體感染HEV后3~4周出現(xiàn)，因此，抗-HEV IgM陽(yáng)性是近期感染HEV的指標(biāo)。此后約1周即可檢測(cè)到抗-HEV IgG。抗-HEV IgG可長(zhǎng)期存在，至少10年以上。單純抗-HEV IgG陽(yáng)性只能說(shuō)明既往感染或急性感染的恢復(fù)后期[4]。如果兩者同時(shí)陽(yáng)性則更加支持診斷，因此同時(shí)檢測(cè)HEV IgM和HEV IgG可大大減少HEV感染的漏檢率。隨著HEV診斷試劑的開(kāi)發(fā)創(chuàng)新和廣泛應(yīng)用，戊型肝炎的檢出率明顯增加。但是由于HEV的非免疫優(yōu)勢(shì)表位在不同的基因型間存在差異，或因重組抗原不能正確折疊，使不同的診斷試劑在檢測(cè)人群戊肝抗體時(shí)相互間差異較大，結(jié)果不一致的情況時(shí)有發(fā)生。為了分析比較不同診斷試劑的可靠性，我們對(duì)國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上應(yīng)用較廣的3種國(guó)產(chǎn)試劑作了比較，報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料隨機(jī)選取本肝病研究所診治的100例患者，所有患者均同時(shí)進(jìn)行抗HAV-IgM、抗-HCV IgG、抗-HEV IgM和IgG檢測(cè)，診斷符合2000年全國(guó)傳染病與寄生蟲(chóng)病學(xué)和肝病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]。

1.2試劑抗-HEV IgM和IgG試劑分別由北京現(xiàn)代高達(dá)生物技術(shù)有限責(zé)任公司、由北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)股份有限公司、北京華大吉比愛(ài)生物技術(shù)有限公司提供，均為ELISA法，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)要求操作。

2結(jié)果

3種戊肝抗體試劑的檢測(cè)結(jié)果比較見(jiàn)表1。

表1　　3種戊肝抗體試劑的檢測(cè)結(jié)果比較

3討論

近年來(lái)，雖然我國(guó)的公共衛(wèi)生條件明顯改善，并且加強(qiáng)了水源管理，戊型肝炎僅呈小流行和散發(fā)發(fā)生[6]，但戊肝已成為散發(fā)性急性肝炎的主要致病因素[7]。而且戊肝的主要危害人群已經(jīng)不再局限于青壯年，在兒童和老年人中所占比例有所升高，且有可能進(jìn)展為重型肝炎[8]。最近的調(diào)查表明，我國(guó)普通人群抗HEV IgG陽(yáng)性率為20.0%～40.0%，抗-HEV IgM每年新增感染率約為3.5%[1]。但是目前國(guó)內(nèi)的戊肝診斷試劑的銷量?jī)H為甲型肝炎試劑的1/5，提示仍有大量的戊肝病例被漏診。因此，靈敏度高、特異性好的戊型肝炎診斷試劑對(duì)病毒性肝炎防治非常重要[9]。隨著近年對(duì)戊肝基礎(chǔ)研究及臨床研究的深入，以及診斷技術(shù)不斷提高和普及，戊肝的危害逐漸受到重視。有報(bào)道[10]95%抗-HEV IgM在3個(gè)月內(nèi)消失，因?yàn)榭?HEV IgM在體內(nèi)存在時(shí)間較短，單純檢測(cè)抗-HEV IgM容易產(chǎn)生假陰性。而IgG出現(xiàn)較IgM晚，單純IgG陽(yáng)性，只能說(shuō)明既往感染或急性感染的恢復(fù)后期，故同時(shí)檢查抗-HEV IgM和IgG，對(duì)戊肝的陽(yáng)性檢出率提高明顯。

表1可以看出高達(dá)試劑的敏感度最低，而現(xiàn)代試劑的敏感度相對(duì)較高，特異度則無(wú)差別。有報(bào)道[11]稱HEV RNA檢測(cè)是臨床戊型肝炎診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，但操作要求高，難以在臨床普遍應(yīng)用。本實(shí)驗(yàn)以抗-HEV IgM和IgG同時(shí)陽(yáng)性作為戊肝確診標(biāo)準(zhǔn)，吳旺社[12]曾研究報(bào)道抗-HEV IgM和IgG的陽(yáng)性比為2∶3，兩抗體均陽(yáng)性約占6%，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與其基本一致。但是由于沒(méi)有進(jìn)行HEV RNA檢測(cè)確認(rèn)，且沒(méi)有后續(xù)隨訪調(diào)查，有可能造成漏檢，故本實(shí)驗(yàn)不作為3家試劑的質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。事實(shí)上，有文獻(xiàn)報(bào)道過(guò)萬(wàn)泰試劑的檢測(cè)結(jié)果較為理想[2-3]，因?yàn)楸緦?shí)驗(yàn)所做相關(guān)研究較少，故在此對(duì)各診斷試劑的優(yōu)劣不做比較，僅為本實(shí)驗(yàn)室選擇試劑時(shí)提供參考。

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推進(jìn)POCT網(wǎng)絡(luò)化管理提升其在院內(nèi)質(zhì)量管理水平

日前，四川大學(xué)華西醫(yī)院實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)科江虹教授、首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院實(shí)驗(yàn)診斷中心張國(guó)軍主任、解放軍302醫(yī)院檢驗(yàn)科毛遠(yuǎn)麗主任、天津市臨床檢驗(yàn)質(zhì)控中心及天津市胸科醫(yī)院檢驗(yàn)科張連祥主任、天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院檢驗(yàn)中心門(mén)劍龍主任、盛京醫(yī)院檢驗(yàn)科劉勇主任、安貞醫(yī)院袁慧主任、浙江邵逸夫醫(yī)院檢驗(yàn)科劉志偉主任、重慶新橋醫(yī)院檢驗(yàn)科蒲曉允主任、浙江慈林醫(yī)院檢驗(yàn)科陳剛主任、廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院急診科林珮儀主任等參加了在成都舉辦的“醫(yī)院床旁檢測(cè)(POCT)管理沙龍”，就POCT管理系統(tǒng)建設(shè)中的問(wèn)題與挑戰(zhàn)進(jìn)行了積極探討。

POCT操作流程是傳統(tǒng)診斷流程的精簡(jiǎn)版。作為創(chuàng)新性建立醫(yī)院內(nèi)部血糖管理的血糖儀血糖室間質(zhì)評(píng)(EQA)模式的先行者，張國(guó)軍教授分享了北京天壇醫(yī)院POCT管理模式實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。目前，北京天壇醫(yī)院已建立起較為完整的POCT院內(nèi)管理文件體系，已制定明確的操作規(guī)范?；跒獒t(yī)院選擇使用血糖儀提供參考，委員會(huì)以羅氏診斷ACCU-CHEK Inform II System等主要品牌血糖儀為研究對(duì)象，深入分析并得出可靠的院內(nèi)POCT血糖比對(duì)結(jié)果。

江虹教授分享了華西醫(yī)院在提升POCT質(zhì)量管理、形成POCT網(wǎng)絡(luò)化管理寶貴經(jīng)驗(yàn)，采用集中培訓(xùn)和深入臨床科室培訓(xùn)，確保所有人員培訓(xùn)上崗、合格上崗、授權(quán)上崗，從標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)程序(SOP)文件制定與培訓(xùn)到分析前質(zhì)量要求及操作流程、室內(nèi)質(zhì)控和結(jié)果記錄規(guī)范，均進(jìn)行規(guī)范化操作管理；使用羅氏診斷cobas？ IT 1000進(jìn)行檢測(cè)程序質(zhì)控，以實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)科為主完成儀器間比對(duì)。此外，華西醫(yī)院使用羅氏診斷POCT網(wǎng)絡(luò)化管理軟件cobas?IT 1000，對(duì)全院血?dú)夥治鰞x器進(jìn)行統(tǒng)一網(wǎng)絡(luò)化監(jiān)管構(gòu)建起POCT網(wǎng)絡(luò)化管理系統(tǒng)，幫助克服了許多妨礙POCT發(fā)展的瓶頸和難題，實(shí)現(xiàn)了提高報(bào)告質(zhì)量、規(guī)范儀器操作、統(tǒng)一設(shè)備管理的目標(biāo)。

與會(huì)專家一致認(rèn)可，將POCT納入醫(yī)院質(zhì)量管理體系中將對(duì)檢驗(yàn)科及臨床醫(yī)生工作大有裨益。建議從源頭上加強(qiáng)耗材管理和質(zhì)控，在院內(nèi)設(shè)立POCT管理委員會(huì)，最終形成理想的POCT院內(nèi)流程，實(shí)現(xiàn)真正的POCT網(wǎng)絡(luò)化管理。

專家共議中國(guó)糖化血紅蛋白檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)化與一致性

日前，在上海召開(kāi)的羅氏診斷亞太區(qū)HbA1c交流會(huì)上，北京醫(yī)院老年醫(yī)學(xué)研究所、衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心主任陳文祥研究員，復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院檢驗(yàn)科主任潘柏申教授，同院內(nèi)分泌科主任高鑫教授與多位國(guó)內(nèi)外糖尿病、檢驗(yàn)及內(nèi)分泌領(lǐng)域?qū)＜夜餐接懥薍bA1c在糖尿病管理方面的價(jià)值、中國(guó)HbA1c檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)化進(jìn)展及挑戰(zhàn)。

潘柏申教授指出：“HbA1c檢測(cè)生物變異性較小、能更好地反映長(zhǎng)期血糖水平和慢性并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn)，相對(duì)不受急性血糖波動(dòng)影響，是糖尿病管理的重要指標(biāo)之一?！蹦壳埃糠謬?guó)家已將HbA1c作為篩查糖尿病高危人群和診斷的重要指標(biāo)。隨著20世紀(jì)90年代起，美國(guó)國(guó)家血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)化計(jì)劃(NGSP)以及國(guó)際臨床化學(xué)協(xié)會(huì)(IFCC)參考系統(tǒng)和參考物質(zhì)的確立，全球HbA1c檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)化進(jìn)一步推進(jìn)。

根據(jù)《中國(guó)2型糖尿病防治指南(2013年版)》，糖尿病防治重點(diǎn)立足于三級(jí)預(yù)防，盡早開(kāi)展糖尿病篩查。高鑫教授指出：“由于我國(guó)將HbA1c作為糖尿病診斷指標(biāo)的資料相對(duì)不足，檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)化程度不夠等，《指南》暫不推薦將HbA1c作為糖尿病診斷指標(biāo)，但對(duì)于采用標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)方法，并有嚴(yán)格質(zhì)量控制、正常參考值在 4.0%～6.0% 的醫(yī)院，HbA1c≥6.5% 可作為診斷糖尿病參考。”

陳文祥研究員表示：“HbA1c檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可比是糖尿病診療工作的基本需要。我國(guó)相關(guān)工作起步稍晚，但近年來(lái)檢測(cè)質(zhì)量明顯提高，在開(kāi)展HbA1c室間質(zhì)評(píng)計(jì)劃(EQA/PT)、推動(dòng)NGSP水平I或II實(shí)驗(yàn)室認(rèn)證及一致化、建立與實(shí)施參考系統(tǒng)、開(kāi)展教育活動(dòng)以及制定行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)方面作了諸多努力?！?/p>

此外，為進(jìn)一步推動(dòng)中國(guó)HbA1c檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)化，復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院聯(lián)合交通大學(xué)附屬瑞金醫(yī)院內(nèi)分泌代謝病研究所、交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院糖尿病研究所共同開(kāi)展了上海HbA1c一致性計(jì)劃(SHGHP)。

羅氏診斷是率先經(jīng)美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)批準(zhǔn)用于糖尿病診斷的HbA1c產(chǎn)品制造商，亦是當(dāng)前率先成為IFCC標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)的廠商代表。Tina-quant？ HbA1c Gen.3產(chǎn)品精密度高，具有獨(dú)特的抗變異體及抗衍生物干擾能力，擁有NGSP和IFCC溯源性證書(shū)，可保證高準(zhǔn)確度檢測(cè)結(jié)果。

(收稿日期：2015-07-15)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.01.075

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：C

文章編號(hào)：1673-4130(2016)01-0146-02

通訊作者△，E-mail:maorongwang@126.com。