馬齒莧口服液對高脂大鼠LEP、ADPN、TC、TG、ALT、AST水平的影響

牛美蘭　田恒運　馬俊遠(yuǎn)

(黃河科技學(xué)院，河南　鄭州　450063)

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馬齒莧口服液對高脂大鼠LEP、ADPN、TC、TG、ALT、AST水平的影響

牛美蘭田恒運馬俊遠(yuǎn)

(黃河科技學(xué)院，河南鄭州450063)

摘要〔〕目的探討馬齒莧口服液對高血脂大鼠瘦素(LEP)、脂聯(lián)素(ADPN)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)的影響。方法取健康雄性SD大鼠65只， 隨機(jī)分為模型對照組15只和正常對照組、馬齒莧口服液低、中、高劑量組和羅格列酮組，每組10只；正常對照組大鼠給基礎(chǔ)飼料，模型對照組大鼠給高脂飼料，其余組大鼠給高脂飼料同時，進(jìn)行藥物干擾， 喂養(yǎng)12 w后結(jié)束實驗，腹主動脈抽血檢測大鼠血清中TC、TG、ALT、AST的含量，酶聯(lián)吸附方法測LEP 、ADPN。結(jié)果①LEP：羅格列酮組較正常對照組升高，模型對照組、馬齒莧口服液低、中劑量組顯著升高(P<0.01)，馬齒莧口服液高劑量組無差異(P>0.05)；模型對照組較其余組均顯著升高 (P<0.01)； 低劑量組較中劑量升高(P<0.05)，馬齒莧口服液高劑量組、羅格列酮組無差異(P>0.05)；②ADPN：其余組較正常對照組顯著降低(P<0.01)；模型對照組較藥物干預(yù)組顯著降低(P<0.01)；馬齒莧口服液低劑量、中劑量組無差異(P>0.05)，低劑量較高劑量組顯著降低(P<0.01)，馬齒莧口服液高劑量組、羅格列酮無差異(P>0.05)；③TG、TC：馬齒莧口服液低劑量組、模型對照組較其余組顯著升高(P<0.01)；中、高、羅格列酮組降低(P<0.05)；④ALT、AST：馬齒莧口服液低劑量組、模型對照組較正常對照組顯著升高(P<0.01)；中劑量組較高劑量顯著升高(P<0.01)；正常對照組、馬齒莧口服液高劑量、羅格列酮組無差異(P>0.05)。結(jié)論馬齒莧口服液是通過提高大鼠血清中ADPN、降低LEP含量，有效減少高脂大鼠血清TG、TC含量，降低其ALT、AST活性，預(yù)防大鼠高血脂。

關(guān)鍵詞〔〕代謝紊亂；馬齒莧；脂代謝和肝功能

第一作者：牛美蘭(1970-)，女，碩士，副教授，主要從事藥物作用及作用機(jī)制研究。

高血脂作為脂代謝紊亂性疾病，近年發(fā)病率呈上升趨勢。引發(fā)的并發(fā)癥有脈粥樣硬化、狹窄、高血壓、腦溢血等?；瘜W(xué)全成藥物降脂治療盡管有療效，但其副作用諸多且在控制并發(fā)癥方面受到限制。近年有關(guān)馬齒莧抗感染報道較多，本研究利用高脂膳食大鼠觀察馬齒莧口服液對高脂大鼠瘦素(LEP)、脂聯(lián)素(ADPN)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)的影響。

1材料與方法

1.1實驗動物清潔級健康雄性SD大鼠65只，體重130～150 g，清潔級，購自山東省魯抗醫(yī)藥集團(tuán)有限公司，許可證編號為：SCXK魯2014005。

1.2飼料配方基礎(chǔ)飼料：面粉25%、玉米15%、麩皮30%、豆料25%、魚粉2%、骨粉3%，由黃河科技學(xué)院實驗動物中心制備。高脂飼料：75%基礎(chǔ)飼料+15%豬油+5%蔗糖+3.5%膽固醇+1.5%膽酸鈉(膽酸鈉：杭州微生物試劑廠，批號20010122；膽固醇：上海伯奧生物有限公司，批號20091201；玉米油：山東長壽花食品股份有限公司；豬油和蔗糖自備)

1.3儀器設(shè)備由黃河科技學(xué)院實驗中心提供。

1.4藥物、試劑藥物：馬齒莧口服液(馬齒莧30～45份,丹參25～35份 ，決明子10～20份，生山楂10～20份，澤瀉10～15份)，由河南省中醫(yī)藥研究院中藥房制劑室提供；羅格列酮，購自成都恒瑞制藥有限公司，批號009003，臨用前配制成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4 g/L的混懸液。試劑：LEP、ADPN(上海酶聯(lián)生物科技有限公司，貨號：ml002969；ml028534 )TG、TC、AST、ALT試劑盒(中生北控生物科技公司，批號為000025591、000025581、000020016、000020006)。

1.5動物分組與給藥取健康雄性SD大鼠65只， 隨機(jī)分為模型對照組15只和正常對照組、馬齒莧口服液低、中、高劑量組和羅格列酮組，每組10只；正常對照組大鼠給基礎(chǔ)飼料，模型對照組大鼠單給高脂飼料，其余組大鼠給高脂飼料同時，進(jìn)行藥物干擾，給藥劑量依據(jù)人與動物用藥劑量換算公式：大鼠的藥物劑量(mg/kg)=人的給藥物劑量(mg/kg)×W(折合系數(shù))〔1〕，W=6.25，成人一般按60 kg計算，馬齒莧成人生藥劑量為0.6 g·kg-1·d-1，等效劑量的 0.5、1、2 倍作為低、中、高劑量，馬齒莧口服液低、中、高劑量分別給藥112.5，225.0，450.0 g·kg-1·d-1， 2次/d灌胃，羅格列酮組以40 mg·kg-1·d-1，2次/d灌胃；藥物干預(yù)期間，正常對照組大鼠繼續(xù)普通飼料喂養(yǎng)，模型對照組和藥物干預(yù)組繼續(xù)高脂飼料喂養(yǎng)，所有實驗大鼠均飲用生理鹽水，于喂養(yǎng)8、10、 12 w從模型對照組隨機(jī)挑選2只大鼠處死，經(jīng)腹主動脈抽血、離心后檢測大鼠血清中TC、TG、ALT、AST的含量，酶聯(lián)吸附方法測LEP 、ADPN含量。

1.6血清指標(biāo)檢測采用全自動生化分析儀檢測大鼠血清中TC、TG、ALT、AST的含量。酶聯(lián)吸附方法測定血清LEP、ADPN。

1.7統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS17.0軟件行單因素方差分析和t檢驗。

2結(jié)果

2.1大鼠的死亡情況12 w實驗結(jié)束時，給藥組6只大鼠因灌胃操作不當(dāng)而死亡，模型對照組6只大鼠在實驗過程中判定造模是否成功而處死(模型對照組在第8、10、12周各處死2只)。

2.2大鼠血清AST、ALT、TG、TG的含量與正常對照組相比，模型對照組、馬齒莧口服液低劑量組ALT、AST顯著升高(P<0.01)；與模型對照組比較，其余組ALT、AST均顯著降低(P<0.01)；馬齒莧低劑量組較中劑量組、高劑量組、羅格列酮組顯著升高(P<0.01)；中劑量組較高劑量顯著升高(P<0.01)，正常組、高劑量、羅格列酮組無差異(P>0.05)。見表1。馬齒莧口服液低劑量組、模型對照組TG、TC水平較其余組顯著升高(P<0.01)；中、高、羅格列酮組較低劑量組降低有差異(P<0.05)。

表1　實驗大鼠血清ALT、AST、TG、TC、LEP、ADPN水平變化

與正常對照組比較：1)P<0.01；與模型對照組比較：2)P<0.01；與馬齒莧口服液低劑量組比較：3)P<0.05；下表同

2.3血清LEP、ADPN水平變化LEP：羅格列酮組較正常對照組升高(P<0.05)，但模型對照組、馬齒莧口服液低、中劑量組顯著升高(P<0.01)，馬齒莧口服液高劑量無差異(P>0.05)；模型對照組較其余組均顯著升高 (P<0.01)； 低劑量組較中劑量升高(P<0.05)，馬齒莧口服液高劑量組、羅格列酮組無差異(P>0.05)；ADPN：其余組較正常對照組顯著降低(P<0.01)；模型組對照組較藥物干預(yù)組顯著降低(P<0.01)；馬齒莧口服液低劑量、中劑量組無差異(P>0.05)，低劑量較高劑量組顯著降低(P<0.01)，馬齒莧口服液高劑量組、羅格列酮無差異(P>0.05)；見表1。

3討論

長期高脂肪、高蛋白膳食會引起脂肪代謝紊亂，以高血脂(TG/TC)和高血糖升高為主 ，脂肪代謝紊亂對脂肪肝的發(fā)生發(fā)展起重要的作用，所以節(jié)食及減肥是有效預(yù)防和治療高血脂、脂肪肝的關(guān)鍵環(huán)節(jié)〔2〕。本實驗表明馬齒莧水口服液具有較好的降脂效果，而血脂的降低有可能正是改善肝細(xì)胞脂肪沉積的主要原因。且馬齒莧口服液降脂和改善肝細(xì)胞脂肪沉積的效果與藥物的劑量有一定關(guān)系。

血清LEP是由脂肪細(xì)胞分泌的肥胖基因編碼的分泌型激素，與高血脂密切相關(guān)，而高脂膳食或能量過剩均可使LEP水平迅速上升，由此引發(fā)機(jī)體的LEP抵抗，引起LEP不能正常對脂肪、能量代謝的促進(jìn)。張麗等〔3〕的研究認(rèn)為LEP在肥胖、脂肪肝、高血壓、糖尿病等代謝疾病中起著非常重要的作用。Pelleymounter等〔4〕研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)LEP缺陷或低性的小鼠脂肪沉積并發(fā)展成脂肪肝。

研究表明ADPN水平高低與肝臟脂肪變性程度、炎癥和纖維化程度呈負(fù)相關(guān)〔5〕。臨床大量病例證實高脂膳食、藥物損傷、胰島抵抗等原因均可造成ADPN生物活性下降，從而導(dǎo)致肥胖、脂肪肝慢性病變。Yamauchi等〔6〕研究發(fā)現(xiàn)ADPN是通過降低肥胖小鼠TC、TG的濃度，減少胰島素的抵抗；研究提示ADPN可能參與早期肝細(xì)胞損傷的調(diào)節(jié)作用。

現(xiàn)代藥理研究證明，馬齒莧含有豐富的有機(jī)物，作用于全身各個部位，具有抗感染、降脂、抗氧化、抗腫瘤等功效，臨床常有高血脂病人因喜食馬齒莧而病情好轉(zhuǎn)的病例〔7〕。此外，馬齒莧中含有大量的維生素E，能降低低密度脂蛋白，升高高密度脂蛋白，增加TC的吸收率，加速脂質(zhì)的排泄，具有顯著的降脂，預(yù)防動脈粥樣硬化的作用；另外，維生素E還可以通過抗氧化性起到保護(hù)低密度脂蛋白的作用，從而預(yù)防肥胖、高血脂、脂肪肝的形成〔8〕，研究結(jié)果表明，藥食兩用馬齒莧具有良好的降血脂、預(yù)防肝臟脂肪變性的效果。本次實驗發(fā)現(xiàn)馬齒莧口服液可減少高脂大鼠血清LEP和提高ADPN，抑制高脂大鼠TC、TG含量，且劑量與效應(yīng)呈正相關(guān)，由此推測馬齒莧口服液對高脂大鼠產(chǎn)生的高脂有改善作用。推測該實驗結(jié)果能否成為預(yù)防和治療高血脂的重要藥理依據(jù)，此作用機(jī)制還有待在以后的研究中進(jìn)一步證實。

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8周泉城，吳謀成．維生素E對小鼠高血脂預(yù)防作用研究〔J〕.中國糧油學(xué)報,2005;20(3)：66-9．

〔2015-07-21修回〕

(編輯袁左鳴/滕欣航)

基金項目：鄭州市科技局科技攻關(guān)項目(No.20140787)

中圖分類號〔〕R589.2〔

文獻(xiàn)標(biāo)識碼〕A〔

文章編號〕1005-9202(2016)01-0038-02；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.01.017