許 偉,潘麗元
(哈爾濱市職工醫(yī)學(xué)院,黑龍江 哈爾濱 150020)
玉芩蓬口服液為中藥復(fù)方制劑,主要由豬毛菜、玉米須、杜仲炭、黃芩四味中藥組成,具有降低血壓、調(diào)節(jié)血脂、消腫利尿等多方面的藥理作用,但關(guān)于玉芩蓬口服液對免疫功能的影響至今未見報道。本實驗從免疫學(xué)角度探討玉芩蓬口服液對小鼠免疫功能的影響,為臨床應(yīng)用玉芩蓬口服液提供理論依據(jù)。
玉芩蓬口服液由哈藥集團三精制藥有限公司研制,為棕黑色溶液(相當(dāng)于生藥1.0 g/mL)。玉芩蓬口服液的制備按處方量準(zhǔn)確稱取干豬毛菜、干玉米須、杜仲炭、黃芩四味中藥,水煎煮兩次,每次1小時,過濾,合并水煎液,濃縮至每100 ml藥液含生藥100 g,用10 ml安瓿灌注,封口,滅菌即得。植物血凝素(PHA)上海伊華醫(yī)學(xué)科技有限公司產(chǎn)品。昆明種小鼠購自黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)動物中心。
1.2.1 實驗分組
取健康小鼠120只,體重18~22 g。隨機分為三個實驗組,每個實驗組又分4組,每組10只,第1組為空白對照組,生理鹽水0.5 ml/d;第2組、第3組、第4組為玉芩蓬口服液組,劑量分別為每kg體重2、4、8g生藥/d。
第一實驗組4組小鼠經(jīng)灌胃給藥第10天,每鼠稱重,脫頸處死小鼠,取胸腺、脾臟,用濾紙吸干殘血后,用分析天平稱重,分別計算胸腺指數(shù)、脾指數(shù)。
第二實驗組4組小鼠,連續(xù)6天經(jīng)腹腔注射給藥后,腹腔注射鮮牛肉湯1 ml,24小時后,每只小鼠腹腔注射2%雞紅細胞混懸液0.5 ml,30分鐘后,脫頸處死小鼠,腹腔液涂片,瑞氏染色,蒸餾水漂洗晾干。油鏡下計數(shù)200個巨噬細胞中含吞噬雞紅細胞的巨噬細胞數(shù),計算吞噬百分率和吞噬指數(shù)。
第三實驗組4組小鼠,間日肌肉注射PHA0.6ml/10g,同時,每日肌肉注射給藥,連續(xù)3日,末次給藥后48小時,小鼠剪尾、取血、推片、晾干,瑞氏染色,蒸餾水漂洗晾干。油鏡下計數(shù)200個淋巴細胞,計算淋巴細胞轉(zhuǎn)化率。
采用SPSS20.00統(tǒng)計學(xué)軟件進行分析,計量資料采用“x±s”表示,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
結(jié)果見表1。
表1 玉芩蓬口服液對小鼠胸腺指數(shù)、脾指數(shù)的影響(n=10,±s)
表1 玉芩蓬口服液對小鼠胸腺指數(shù)、脾指數(shù)的影響(n=10,±s)
注:與空白對照組比較,*P<0.05,**P<0.01。
分組 劑量(g/kg) 胸腺指數(shù)(mg/g bw) 脾指數(shù)(mg/g bw)空白對照組 — 2.49±0.56 4.15±0.86玉芩蓬口服液低劑量組 2 2.64±0.22 4.38±0.56玉芩蓬口服液中劑量組 4 3.21±0.69* 5.98±1.86*玉芩蓬口服液高劑量組 8 3.76±0.44** 5.52±1.43*
由表1可見,玉芩蓬口服液中、高劑量組與空白對照組比較,能顯著提高胸腺指數(shù)和脾指數(shù)。
結(jié)果見表2。
表2 玉芩蓬口服液對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響(n=10,±s)
表2 玉芩蓬口服液對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響(n=10,±s)
注:與空白對照組比較,*P<0.05,**P<0.01。
分組 劑量(g/kg) 吞噬百分率(%) 吞噬指數(shù)空白對照組 — 24.9±3.87 0.47±0.21玉芩蓬口服液低劑量組 2 28.1±4.83 0.56±0.53玉芩蓬口服液中劑量組 4 33.5±6.10** 0.93±0.52*玉芩蓬口服液高劑量組 8 30.8±5.45* 1.02±0.65*
吞噬百分率=(吞噬紅細胞的巨噬細胞數(shù)/200個巨噬細胞)×100%
吞噬指數(shù)=(被吞噬的雞紅細胞數(shù)/200個巨噬細胞)÷2
實驗結(jié)果顯示,玉芩蓬口服液中、高劑量組組的吞噬百分率、吞噬指數(shù)顯著高于正常對照組,表明玉芩蓬口服液能明顯增強吞噬細胞吞噬功能。
結(jié)果見表3。
表3 玉芩蓬口服液對小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化率的影響(n=10,±s)
表3 玉芩蓬口服液對小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化率的影響(n=10,±s)
注:與空白對照組比較,*P<0.05,**P<0.01。
分組 劑量(g/kg) 淋巴細胞轉(zhuǎn)化率(%)空白對照組 — 61.4±6.23玉芩蓬口服液低劑量組 2 63.4±7.68玉芩蓬口服液中劑量組 4 69.5±8.73*玉芩蓬口服液高劑量組 8 78.6±7.28**
結(jié)果表明,玉芩蓬口服液中、高劑量組能明顯增強小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化率,從而提高機體的細胞免疫功能。
本文主要研究了玉芩蓬口服液對小鼠免疫功能的影響。
胸腺是機體重要的中樞免疫器官,擔(dān)負著誘導(dǎo)T細胞分化成熟的重任。胸腺指數(shù)的提高,預(yù)示著機體成熟T細胞數(shù)量的增加。脾臟是機體內(nèi)最大的外周免疫器官[2],是產(chǎn)生致敏淋巴細胞和抗體的場所之一,并能清除衰老細胞和微生物等物質(zhì),其中的大量T淋巴細胞,B淋巴細胞及巨噬細胞在機體防御和清除功能中有重要作用。本試驗結(jié)果提示,玉芩蓬口服液中、高劑量組對小鼠脾臟和胸腺有明顯的增重作用,與空白對照組相比有顯著差異,證明玉芩蓬口服液可明顯提高機體細胞免疫功能。
在機體免疫系統(tǒng)中,巨噬細胞占有極其重要的地位,它擔(dān)負著吞噬細菌、腫瘤細胞、突變細胞、提呈抗原誘發(fā)特異性免疫應(yīng)答,并參與免疫調(diào)節(jié)等作用。實驗結(jié)果顯示,玉芩蓬口服液中、高劑量組的吞噬百分率、吞噬指數(shù)顯著高于正常對照組,表明玉芩蓬口服液能明顯增強吞噬細胞吞噬功能。同時玉芩蓬口服液中、高劑量組可使小鼠淋巴細胞對PHA的增值反應(yīng)性明顯增強,能明顯增強小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化率。說明玉芩蓬口服液能增強細胞免疫及非特異性免疫功能。
在實驗過程中未見實驗動物有任何不良反應(yīng)。
綜上所述,適量玉芩蓬口服液能明顯增強吞噬細胞吞噬功能,增加胸腺指數(shù),提高小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化率,從而增強機體免疫功能,提示如免疫功能下降或體質(zhì)衰弱者,可口服玉芩蓬口服液來增強免疫功能。
[1] 徐叔云,卞如濂,陳 修.藥理實驗方法學(xué)[M].第三版,人民衛(wèi)生出版社,2005:1456-1457
[2] 鄭武飛.醫(yī)學(xué)免疫學(xué)(第一版)[M].北京,1989:81.