黏液物質(zhì)染色的檢測操作分析

于立偉

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黏液物質(zhì)染色的檢測操作分析

于立偉

【摘要】探討?zhàn)ひ何镔|(zhì)染色的病理檢測操作，黏液染色方法眾多，愛先藍（AB）和高碘酸的結(jié)合可能是最好的“廣譜黏液”染色，因為它可顯示中性、弱酸性和強酸性黏液物質(zhì)。專門顯示強酸性黏液的染色方法有多種，包括膠體鐵、高鐵二胺以及經(jīng)典的黏液卡紅染色。酸性黏液物質(zhì)由于所含酸根不同，方法各不相同，實踐中宜作多種染色比較鑒別方能取得滿意結(jié)果。

【關(guān)鍵詞】黏液物質(zhì)染色；病理

The pathology testing operation medicine of the mucinous material stain，mucus stain have many method． May be the alcian blue（AB）and periodic acid are the best combination for dye "the broad spectrum of mucus"，because of it can show the neutral，weak acid and strong acid mucus material． There are many ways to show the staining of strong acid mucus． Including colloidal iron，high iron diamine and mucus stuck red stain． Because of different acid radical in the acidic slime substance，take test methods are not same． A variety of comparison of the practice should be identified in order to obtain satisfactory results．

【Key words】 Mucus substance dyeing，Pathology

黏液是人體許多組織細胞都能分泌的一類物質(zhì)，形態(tài)相同但其化學(xué)結(jié)構(gòu)和物理性質(zhì)并不盡相同。黏液染色方法眾多，愛先藍（AB）和高碘酸的結(jié)合可能是最好的“廣譜黏液”染色，因為它可顯示中性、弱酸性和強酸性黏液物質(zhì)［1］。專門顯示強酸性黏液的染色方法有多種，包括膠體鐵、高鐵二胺以及經(jīng)典的黏液卡紅染色。當癌的黏液分泌異常時（常常因為碳水化合物合成不完全），可以通過黏液染色加以推測。以上染色法的原理不盡相同。

1 材料與方法

1.1 材料

收集本院收治的胃、腸黏膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤標本，患者年齡22～68歲，平均（47±2）歲。

1.2 方法

1.2.1 愛先藍-高碘酸-無色品紅法（AB/PAS法） （1）試劑：①愛先藍染液（pH 2.5）：愛先藍8 GX（或8 GS）1 g，冰醋酸3 ml，蒸餾水97 ml，麝香草酚50 mg。②0.5%高碘酸水溶液。③無色品紅液。④0.5%偏重亞硫酸鈉水溶液。（2）操作：①常規(guī)切片脫蠟至水。②用愛先藍液（pH 2.5）染10～20 min，稍水洗。③0.5%高碘酸水溶液氧化5～10 min。④流水沖洗數(shù)分鐘，再用蒸餾水洗。⑤入無色品紅液于暗處并加蓋作用10～20 min。⑥用0.5%偏重亞硫酸鈉水溶液洗3次，每次l min。⑦流水沖洗5～10 min。⑧蘇木素復(fù)染。⑨水洗后常規(guī)脫水、透明、封固［2］。

1.2.2 高鐵二胺-愛先藍-高碘酸無色品紅法 （1）試劑：①高鐵二胺液N.Ⅳ-二甲基-間-苯二胺二鹽酸鹽120 mg，Ⅳ.Ⅳ-二甲基-對-苯二胺二鹽酸鹽20 mg，蒸餾水50 ml，60%三氯化鐵水溶液1.5 ml。將兩種二胺鹽同時溶于蒸餾水，徹底溶解后，加入60%三氯化鐵水溶液，用玻棒輕輕攪勻。此時溶液pH值應(yīng)為1.4～1.5。（2）操作：①常規(guī)切片脫蠟至水。②蒸餾水洗2～3次。③室溫下入高鐵二胺液反應(yīng)18～24 h。④流水沖洗，蒸餾水洗2～3次。⑤以下步驟同AB/PAS法。

1.2.3 Mayer黏液卡紅法 （1）試劑：①Weigert鐵蘇木素，②Mayer卡紅貯備液配方：卡紅（或稱胭脂紅）1 g，氫氧化鋁1 g，無水氯化鋁0.5 g，50%乙醇100 ml。先將卡紅、氫氧化鋁溶解于50%乙醇混合后，再加入無水氯化鋁于水浴中煮沸3～5 min（煮沸時間不足將影響著色力）［3］；冷卻至室溫后過濾，補足50%乙醇水溶液至總量100 ml。用小口砂瓶盛裝，4℃冰箱保存，使用時恢復(fù)至室溫。③Mayer卡紅工作液配方：Mayer卡紅貯備液1份，蒸餾水4份，臨用前配制。（2）操作：①常規(guī)切片脫蠟至蒸餾水。②Weigert鐵蘇木素染5～10 min。③稍水洗，1%鹽酸乙醇分化。④流水沖洗10 min后，入Mayer卡紅工作液染30 min。⑤稍水洗。⑥常規(guī)脫水、透明、封固。

2 結(jié)果

2.1 愛先藍-高碘酸-無色品紅法（AB/PAS法）

酸性黏液物質(zhì)呈藍色，中性黏液物質(zhì)呈紅色，混合黏液物質(zhì)呈紫紅色，細胞核呈藍色［4］。

2.2 高鐵二胺-愛先藍-高碘酸無色品紅法

硫酸化酸性黏液物質(zhì)呈紫棕色至棕黑色，羧基化酸性黏液物質(zhì)呈藍色，中性黏液物質(zhì)呈紅色，混合黏液物質(zhì)呈紫紅色，細胞核呈藍色［4］。

2.3 Mayer黏液卡紅法

上皮性酸性黏液物質(zhì)、新型隱球菌莢膜呈紅至深玫瑰紅色，細胞核呈藍色。

3 討論

而胃的腸腺化生或腸型胃癌的癌細胞則往往分泌酸性黏液。黏液物質(zhì)一般具有以下特性：對異染性染料具有異染性或稱變色反應(yīng)，對堿性染料具有很強的親和力，遇醋酸可發(fā)生沉淀（胃黏膜除外）；可溶于弱堿性溶液［5］。黏液染色方法眾多，愛先藍（AB）和高碘酸的結(jié)合可能是最好的“廣譜黏液”染色，因為它可顯示中性、弱酸性和強酸性黏液物質(zhì)。專門顯示強酸性黏液的染色方法有多種，包括膠體鐵、高鐵二胺以及經(jīng)典的黏液卡紅染色。當癌的黏液分泌異常時（常常因為碳水化合物合成不完全），可以通過黏液染色加以推測。以上染色法的原理不盡相同［6］。銅酞花青染料愛先藍與酸性黏液物質(zhì)含有的羧基或硫酸根結(jié)合形成藍色的不溶性復(fù)合物；高鐵二胺染色則由二胺鹽與硫酸化黏液物質(zhì)結(jié)合形成紫棕色至棕黑色的復(fù)合物，反應(yīng)中的催化劑三氯化鐵可加快染色，并使染液pH降至1.4，從而抑制了羧基化唾液酸黏液與二胺鹽的反應(yīng)；黏液卡紅染色以鋁作媒染劑，卡紅與鋁形成復(fù)合物，再與黏液中的酸性基團結(jié)合而呈玫瑰紅色。總之，酸性黏液物質(zhì)由于所含酸根不同，方法各不相同，實踐中宜作多種染色比較鑒別方能取得滿意結(jié)果。在實際工作中由于HE切片時所見疑有黏液的部分難以確定是酸性或中性，故通常同時作AB、PAS、黏液卡紅等幾類染色，其具體應(yīng)用范圍主要有下述幾方面：（1）一般黏液病變的觀察，如結(jié)締組織、心肌、腎臟等臟器常出現(xiàn)黏液性水腫、黏液變性和黏蛋白增多等。（2）腫瘤的診斷與研究，主要用于鑒別消化道疾病中的黏液變性，尤其是用于胃黏膜腸上皮化生的分型已成為臨床病理的常規(guī)技術(shù)、鑒別印戒細胞與泡沫狀巨噬細胞等。（3）某些腫瘤的鑒別診斷，如黏液瘤、黏液表皮樣癌、滑膜肉瘤等。

參考文獻

［1］ 陳瓊霞，陳瑩，高友晶，等． 快速黏液染色技術(shù)在胃鏡活檢組織中的應(yīng)用［J］． 醫(yī)學(xué)理論與實踐，2013，26（1）: 74-75．

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［6］ 楊輝，劉國卓，張卓，等． 內(nèi)鏡下美藍染色對早期胃癌及癌前病變的診斷價值［J］． 中國中西醫(yī)結(jié)合消化雜志，2006，14（6）: 397-398．

Detection and Analysis of Mucous Substance Dyeing

YU Liwei Department of Pathology，Hegang People's Hospital，Hegang 154101，China

【Abstract】

【中圖分類號】R361

【文獻標識碼】A

【文章編號】1674-9316（2016）05-0177-02

doi:10．3969/j．issn．1674-9316．2016．05．129

作者單位：154101 黑龍江省鶴崗市人民醫(yī)院病理科