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    經(jīng)皮穴位電刺激對(duì)正畸家兔外周和中樞痛覺調(diào)控物質(zhì)5-羥色胺與P物質(zhì)的影響

    2016-02-04 10:31:25蔡紹祥吳小鳳
    中國老年學(xué)雜志 2016年12期
    關(guān)鍵詞:模型

    賈 瑩 陳 波 蔡紹祥 李 萍 楊 慶 吳小鳳

    (貴州醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院,貴州 貴陽 550004)

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    經(jīng)皮穴位電刺激對(duì)正畸家兔外周和中樞痛覺調(diào)控物質(zhì)5-羥色胺與P物質(zhì)的影響

    賈瑩陳波1蔡紹祥2李萍楊慶1吳小鳳1

    (貴州醫(yī)科大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院,貴州貴陽550004)

    〔摘要〕目的探討經(jīng)皮穴位電刺激(TEAS)療法干預(yù)正畸家兔痛閾變化的作用和可能機(jī)制。方法隨機(jī)將18只雄性家兔平均分為3組,除空白對(duì)照組外,正畸模型組、TEAS組建立正畸牙痛模型,TEAS組用疏密波刺激雙側(cè)兩上頜第一磨牙體表對(duì)應(yīng)“阿是穴”和雙側(cè)“合谷穴”,2次/d,20 min/次,連續(xù)治療2 d后,觀察各組家兔中切牙牙齦痛閾、外周血清和中樞腦脊液5-羥色胺(5-HT)及P物質(zhì)(SP)的含量變化。結(jié)果與正畸模型組比較,TEAS治療抑制了正畸模型家兔中切牙牙齦痛閾的下降(P<0.05);TEAS組家兔血清和腦脊液中釋放的5-HT均較正畸模型組增加(P<0.01,P<0.05);血清中釋放的SP較正畸模型組略減少,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),腦脊液中釋放的SP較正畸模型組增加(P<0.05)。結(jié)論TEAS防治正畸牙痛主要通過提高腦脊液5-HT和SP的含量實(shí)現(xiàn)的,中樞途徑可能是其鎮(zhèn)痛機(jī)制的主要環(huán)節(jié)之一。

    〔關(guān)鍵詞〕經(jīng)皮穴位電刺激;正畸牙痛;痛閾;5-羥色胺;P物質(zhì)

    正畸治療時(shí)幾乎所有患者都會(huì)發(fā)生牙痛癥狀,導(dǎo)致約8%~30%的青少年患者放棄治療〔1〕,故防控正畸時(shí)的牙痛將有利于口腔正畸治療的開展,進(jìn)而有利于成年和老年后的口腔健康。經(jīng)皮穴位電刺激(TEAS)是現(xiàn)代針灸一種新型的鎮(zhèn)痛治療手段,臨床大量運(yùn)用于痛癥治療〔2〕,但目前在口腔正畸疼痛的研究報(bào)道不多。本文旨在檢測(cè)TEAS療法對(duì)正畸模型家兔中切牙牙齦痛閾、血清和腦脊液中痛覺調(diào)控物質(zhì)5-羥色胺(HT)及P物質(zhì)(SP)含量的影響。

    1材料與方法

    1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康標(biāo)準(zhǔn)雄性家兔18只,3~4月齡,體重1.5~2.0 kg,貴州醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,動(dòng)物合格證:SCXK(黔)2012-001。根據(jù)體重將兔子隨機(jī)分為空白對(duì)照組、正畸模型組和TEAS組,每組6只。

    1.2實(shí)驗(yàn)器材電子針治療儀(華佗牌SDZ-Ⅱ型,蘇州醫(yī)療用品有限公司)、微型牙科電動(dòng)打磨機(jī)(90型,韓國電動(dòng)打磨機(jī))、電子測(cè)痛儀(VonFrey2391型,美國IITC公司)、正畸測(cè)力計(jì)(杭州奧杰醫(yī)療器材有限公司)、正畸用鎳欽螺旋拉簧(北京圣馬特科技有限公司)、正畸不銹鋼結(jié)扎絲(廣州安華齒科器材有限公司)、離心管和EP管(海門博陽實(shí)驗(yàn)器材廠)、兔臺(tái)、兔盒、天平秤、手術(shù)器械等(由本校實(shí)驗(yàn)室提供)。

    1.3藥品和試劑硫化鈉(廣州市嘉俊實(shí)驗(yàn)儀器有限公司,生產(chǎn)批號(hào):20110428)、速眠新Ⅱ(吉林省華牧動(dòng)物保健品有限公司,生產(chǎn)批號(hào):20120120),5-HT試劑盒(上海藍(lán)基生物科技有限公司,生產(chǎn)批號(hào):E04H0106),SP試劑盒(上海藍(lán)基生物科技有限公司,生產(chǎn)批號(hào):E04S0703)。

    1.4方法

    1.4.1正畸牙痛動(dòng)物模型的制作〔3〕正畸模型組和TEAS組家兔經(jīng)速眠新麻藥(0.5 ml/kg)肌注麻醉后仰臥固定,在家兔左右上頜切牙和第一磨牙近頸緣處使用微型牙科電動(dòng)打磨機(jī)以長柄金剛砂刃狀石磨一固位淺溝,用結(jié)扎絲將兩上頜切牙8字結(jié)扎,左、右兩側(cè)第一磨牙與同側(cè)切牙之間各用一根鎳欽螺旋拉簧以結(jié)扎絲連接,用正畸測(cè)力計(jì)測(cè)得力值100 g后固定。

    1.4.2治療方法空白對(duì)照組和正畸模型組:常規(guī)自由攝食飲水飼養(yǎng),在TEAS組治療時(shí)同步抓取空白對(duì)照組和正畸模型組家兔固定于兔盒中,2次/d,20 min/次,共處理2 d。TEAS組:將兔子固定在兔盒里,硫化鈉溶液脫去雙側(cè)“合谷”穴〔4〕和兩上頜第一磨牙體表對(duì)應(yīng)“阿是穴”處的毛發(fā),露出皮膚。將電極片貼于穴位皮膚(其中正極貼“合谷”穴,負(fù)極貼“阿是穴”),使用電子針灸儀治療,波形:疏密波,刺激強(qiáng)度:以家兔能耐受的穴位局部肌肉輕微抽搐程度為度,20 min/次,2次/d,共治療2 d。

    1.4.3指標(biāo)檢測(cè)

    1.4.3.1痛閾測(cè)定〔3〕采用VonFrey2391型電子測(cè)痛儀,將探頭放在家兔中切牙的牙齦中間,漸進(jìn)增加壓力,當(dāng)出現(xiàn)嘶叫或扭頭等疼痛反應(yīng)時(shí)停止加力,電子測(cè)痛儀自動(dòng)顯示并保存的最大讀數(shù)值即為痛閾值(單位Gr);每只家兔都測(cè)定3次,每次均間隔60 s左右,取平均值為家兔痛閾值。

    1.4.3.2血清和腦脊液5-HT、SP檢測(cè)經(jīng)耳緣靜脈采血3 ml,3 000 r/min離心15 min,取上層血清約2 ml,置于EP管中-80℃低溫保存。采血后持7號(hào)針刺入家兔小腦延髓池,抽取腦脊液800 μl,注入收集管中,4℃快速低溫3 000 r/min,離心20 min,取上清液400 μl,置于EP管中-80℃低溫保存?zhèn)洳椤?-HT、SP均采用ELISA法檢測(cè),具體按試劑盒法進(jìn)行。

    1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS19.0軟件行單因素方差分析、LSD法和Tamhanes T2法分析。

    2結(jié)果

    2.1TEAS對(duì)正畸模型家兔中切牙牙齦痛閾變化的影響與空白對(duì)照組〔(107.650±14.892)Gr〕比較,正畸模型組〔(74.550±16.980)Gr〕家兔中切牙牙齦痛閾下降(P<0.01);與正畸模型組比較,TEAS組〔(91.383±23.661)Gr〕提高了家兔中切牙牙齦痛閾(P<0.05)。正畸模型組家兔外周血清中釋放的5-HT〔(1 022.284±209.741)ng/ml〕比空白對(duì)照組〔(905.550±115.707)ng/ml〕高,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),TEAS組〔(1 336.864±177.651)ng/ml〕較正畸模型組進(jìn)一步升高(P<0.01);正畸模型組家兔腦脊液中釋放的5-HT〔(77.487±14.758)ng/ml〕比空白對(duì)照組〔(74.711±17.410)ng/ml〕高,但仍無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),TEAS組〔(86.860±15.473)ng/ml〕較正畸模型組也明顯升高(P<0.05)。

    2.2TEAS對(duì)正畸牙痛家兔血清和腦脊液SP變化的影響正畸模型組家兔外周血清中釋放的SP〔(51.084±1.051)pg/ml〕比空白對(duì)照組〔(43.434±2.878)pg/ml〕高(P<0.01),TEAS組〔(50.787±2.178)pg/ml〕較正畸模型組下降,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);正畸模型組家兔腦脊液中釋放的SP〔(51.764±1.879)pg/ml〕比空白對(duì)照組〔(42.044±2.213)pg/ml〕高(P<0.01),TEAS組〔(55.755±2.422)pg/ml〕較正畸模型組更明顯升高(P<0.05)。

    3討論

    正畸佩戴固定矯治器、放置首根弓絲后,最早2~3 h開始發(fā)生疼痛,一般平均發(fā)生4~5 h,在24~48 h疼痛達(dá)到最高峰,72 h后疼痛程度才開始逐漸減輕,可持續(xù)1 w左右,有25%~42%的患者在1 w后仍存在疼痛感〔5〕?,F(xiàn)代研究表明:正畸治療過程中,牙周膜內(nèi)肥大細(xì)胞受到矯治力導(dǎo)致的傷害性機(jī)械刺激,隨即合成并釋放與炎癥有關(guān)的化學(xué)遞質(zhì)和酶,如5-HT、組胺和前列腺素(PGs)等,經(jīng)由牙周Aδ和C神經(jīng)纖維→三叉神經(jīng)節(jié)胞體→三叉神經(jīng)脊束核尾側(cè)亞核→神經(jīng)元換元交叉(至對(duì)側(cè)上行傳遞)→中腦、丘腦→大腦皮層,最終形成痛覺〔5〕。正畸后疼痛呈現(xiàn)規(guī)律性變化的原因與牙周局部生物活性物質(zhì)前列腺素E2(PGE2)、粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)、白細(xì)胞介素(IL)-6和SP的濃度變化相關(guān),其中SP正畸加力后12 h左右濃度升高,24 h后達(dá)到高峰,48 h后開始逐步下降,72 h明顯下降。5-HT在體內(nèi)分布廣泛,主要分布在外周組織細(xì)胞中(腸嗜鉻細(xì)胞和血小板),少部分存在中樞神經(jīng)系統(tǒng)。由于血腦屏障的阻隔,外周5-HT系統(tǒng)可以看作是獨(dú)立于中樞5-HT系統(tǒng)的不同系統(tǒng)。在外周系統(tǒng),5-HT是一種具有很強(qiáng)烈致痛作用的炎癥因子,當(dāng)外周組織發(fā)生損傷時(shí),5-HT能敏化和激活傷害性傳入神經(jīng)纖維,在疼痛的發(fā)生和傳入中發(fā)揮作用。艾灸和針刺等治療均可降低外周5-HT含量、緩解疼痛〔6〕。但在中樞神經(jīng)系統(tǒng),5-HT是一種重要的鎮(zhèn)痛物質(zhì)。參與腦內(nèi)鎮(zhèn)痛的中樞神經(jīng)核團(tuán)主要有中縫大核和中縫背核等,其中,中縫大核的軸突為下行抑制系統(tǒng)的組成部分,中縫背核的軸突組成上行投射纖維,它們均含有豐富的5-HT能神經(jīng)元,用5-HT阻斷劑阻斷5-HT能通路,針刺鎮(zhèn)痛效果均減弱〔4,7〕。此外,中樞及外周5-HT不但參與了針刺鎮(zhèn)痛的即時(shí)效應(yīng),而且參與了較為顯著的后效應(yīng)——針刺能提高大腦皮質(zhì)5和腦干5-HT含量同時(shí)能降低炎癥局部5-HT含量,兩方面作用均能持續(xù)30 min以上〔8〕。SP廣泛分布于各種組織器官內(nèi),具有雙向調(diào)節(jié)疼痛作用:一方面作為一種傷害信息傳入纖維的神經(jīng)遞質(zhì),SP在三叉神經(jīng)脊束核和脊髓背角等部位能對(duì)疼痛傳遞的初級(jí)突觸起易化與促進(jìn)作用,使人體產(chǎn)生痛覺〔9〕。在正畸治療的初期,SP是導(dǎo)致牙齒疼痛不適癥狀的原因之一,SP不僅可介導(dǎo)產(chǎn)生其他內(nèi)源性致痛物質(zhì),而且可直接作用于局部血管,使牙周組織血管擴(kuò)張、血漿外滲、牙髓腔內(nèi)壓上升和微循環(huán)障礙,最終共同導(dǎo)致牙髓感覺神經(jīng)C纖維的興奮性增強(qiáng),興奮閾值降低,牙齒發(fā)生疼痛〔5〕。另一方面,SP在腦內(nèi)則發(fā)揮相反的作用,對(duì)痛覺進(jìn)行調(diào)制,降低對(duì)痛覺的敏感度〔9〕。展淑琴等〔10〕研究中發(fā)現(xiàn)電針能引起大鼠腦內(nèi)許多部位SP表達(dá)陽性細(xì)胞數(shù)明顯增高。此外,SP能提高腦內(nèi)多巴胺的更新率、降低多巴胺水平,降低5-HT更新率、提高5-HT濃度,從而協(xié)同發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用。景向紅等〔11〕證實(shí)大腦皮質(zhì)、丘腦及脊髓背根節(jié)都存在“合谷”穴區(qū)與口面部的感覺傳入投射終止區(qū),且這些投射終止區(qū)在3個(gè)部位均存在重疊或毗鄰關(guān)系,這也許是合谷穴特異性治療面口部疾患的神經(jīng)解剖學(xué)基礎(chǔ)。因此,結(jié)合TEAS疏密波不宜耐受的治法優(yōu)勢(shì)〔2,3〕。綜上,雖然TEAS治療提高外周血清5-HT的含量、維持SP含量穩(wěn)定可能加強(qiáng)外周痛覺傳遞,但由于整體效應(yīng)顯示的是TEAS治療能有效提高正畸牙痛的痛閾,且TEAS同時(shí)提高了腦脊液5-HT和SP的含量,說明TEAS調(diào)節(jié)5-HT和SP防治正畸牙痛可能主要從中樞途徑發(fā)揮作用,中樞鎮(zhèn)痛效應(yīng)強(qiáng)于外周致痛效應(yīng)。

    4參考文獻(xiàn)

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    4郭義.實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)〔M〕.北京:中國中醫(yī)藥出版社,2008:271-5,402-8.

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    11景向紅,蔡虹,逮波,等.“面口合谷收”的形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)〔J〕.中國針灸,2003;23(2):109-10.

    〔2015-10-11修回〕

    (編輯李相軍/滕欣航)

    基金項(xiàng)目:貴州省科學(xué)技術(shù)基金項(xiàng)目(黔科合J字〔2012〕2052號(hào));貴州省科技廳貴州醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合基金項(xiàng)目(黔科合LG字〔2012〕048號(hào))

    通訊作者:陳波(1974-),男,教授,博士,主要從事針灸推拿的基礎(chǔ)與臨床運(yùn)用研究。

    〔中圖分類號(hào)〕R783.5

    〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A

    〔文章編號(hào)〕1005-9202(2016)12-2844-02;

    doi:10.3969/j.issn.1005-9202.2016.12.007

    1貴陽中醫(yī)學(xué)院針灸推拿學(xué)院

    2遵義貝齒藍(lán)天口腔疾病預(yù)防與控制研究所

    第一作者:賈瑩(1975-),女,副教授,碩士,主要從事口腔正畸臨床治療與研究。

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