綿羊支原體性肺炎防治措施

王興和

（內(nèi)蒙古通遼市科爾沁區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心內(nèi)蒙古通遼028000）

綿羊支原體性肺炎防治措施

王興和

（內(nèi)蒙古通遼市科爾沁區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心內(nèi)蒙古通遼028000）

綿羊支原體性肺炎俗稱綿羊傳染性胸膜肺炎是由綿羊肺炎支原體（Mycoplasma ovipneumoniae，Movi）引起的在綿羊和山羊中普遍流行的接觸性傳染病。該病在世界多個國家和地區(qū)都有報道，我國多個省市也有此病的發(fā)生。本病以高熱、咳嗽、肺間質(zhì)增生性炎癥、肺和胸膜發(fā)生漿液性和纖維素性炎癥為病變特征。本病傳播能力強，感染羊群發(fā)病率高，患羊呈漸進性消瘦且羔羊死亡率較高，給養(yǎng)羊業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。

1　病原學(xué)

綿羊肺炎支原體是介于病毒與細菌之間能夠進行自我復(fù)制，菌體直徑在200 nm左右，無細胞壁的原核微生物。Movi革蘭氏染色呈陰性，不易著色；姬姆薩染色時呈現(xiàn)藍紫色或淡紫色。我們知道大多數(shù)支原體在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)時形成的菌落形態(tài)呈“煎荷包蛋狀”，而Movi在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)時形成的菌落形態(tài)呈獨有的“桑葚狀”不具備大多數(shù)支原體菌落典型的“煎荷包蛋狀”特征。1963年Mackay等人首次從患病的綿羊體內(nèi)成功分離到該支原體，直到 1972年才證明了其致病性，由Carmicheal等人提議將該支原體命名為綿羊肺炎支原體［1，2］。Movi不僅對綿羊有致病性，而且對山羊也有同樣致病性。1979年Linvingston等［3］首次從安哥拉山羊肺中分離出Movi，并報道其對山羊的致病性。

2　流行病學(xué)

支原體在自然界分布廣泛，人、動物、植物和昆蟲等都可攜帶支原體，在土壤和污水中也可檢測到支原體的存在。在我國綿羊支原體性肺炎夏末和秋季最為常見，舍飼羊一年四季都可發(fā)生。解慧梅等［4］對江蘇泰州地區(qū)36家羊場開展支原體性肺炎流行病學(xué)調(diào)查，結(jié)果發(fā)現(xiàn)各羊場羊都存在不同程度的發(fā)病，其中湖羊的發(fā)病率在30%左右，病死率達到60%。2011年寧夏靈武市一養(yǎng)殖戶養(yǎng)山羊119只，綿羊32只，全部發(fā)病，山羊死亡率27%，綿羊死亡率22%，經(jīng)確診為支原體性肺炎［5］。本病在我國內(nèi)蒙古、新疆、四川、甘肅等地均有報道，其傳播性強，感染率高，嚴重威脅著我國養(yǎng)羊業(yè)的發(fā)展。

3　臨床癥狀及病理變化

綿羊肺炎支原體感染羊只后根據(jù)病程和臨床癥狀，可將該病劃分為最急性型、急性型和慢性型三種類型［6］。

最急性型：病羊初期體溫急劇升高，可達41～42℃，目光呆滯，食欲廢絕，呼吸急促，咳嗽，流漿液性鼻液，聽診肺泡呼吸音減弱、消失；病羊常不能站立，臥地不起；可視黏膜發(fā)紺，病程一般為4～5 d，有時甚至不足1 d就死亡。

急性型：大多數(shù)患羊臨床癥狀屬于此種類型，病羊初期體溫升高，出現(xiàn)短而濕的咳嗽，呼吸困難，精神萎靡，食欲下降，有時伴有腹瀉癥狀，患病母羊多數(shù)流產(chǎn)；患羊病程一般為7～14 d。

慢性型：多發(fā)生于夏季，癥狀較輕，高熱不退，背毛雜亂，機體免疫力較低，容易出現(xiàn)并發(fā)癥從而導(dǎo)致死亡。

患羊病變部位主要在胸腔，心包和胸腔積液呈現(xiàn)淡黃色，有漿液性、纖維素性胸膜炎變化，胸膜、肋膜、心包粘連。肺臟纖維素化，初期炎性充血、水腫，后期發(fā)生肝變，但通常是一側(cè)肺葉發(fā)生肝變，很少發(fā)現(xiàn)兩側(cè)肺同時肝變的癥狀。

4　支原體性肺炎的診斷方法

4.1病原的分離培養(yǎng)

人們通常認為病原分離和體外培養(yǎng)的檢測結(jié)果最確實可信，然而支原體不能合成自身所需的多種營養(yǎng)物質(zhì)，在分離培養(yǎng)時對營養(yǎng)的需求較為苛刻，而且代謝速率比細菌低，生長緩慢，所需實驗技術(shù)和操作方法復(fù)雜，在培養(yǎng)過程中很容易被雜菌污染，分離成功率低，因此不適合應(yīng)用此方法做支原體病的常規(guī)檢查。

4.2電鏡觀察

應(yīng)用電鏡檢測支原體是一種快捷簡便的方法，可根據(jù)各支原體獨特的形態(tài)結(jié)構(gòu)，對各類支原體加以區(qū)分。然而電鏡設(shè)備價格昂貴，且需要專業(yè)的技術(shù)人員操作，因此不適合基層臨床疾病的檢測應(yīng)用。

4.3血清學(xué)檢測方法

應(yīng)用血清學(xué)方法進行診斷，要比病原分離方便快捷很多，可節(jié)約大量的時間，其主要包括酶聯(lián)免疫吸附試驗、間接血凝試驗和補體結(jié)合方法等。候相山等［7］利用綿羊肺炎支原體國際標準株Y-98，制備抗原，建立了一種間接ELISA方法，對幾個羊場進行了血清學(xué)調(diào)查，檢測結(jié)果與間接血凝試驗結(jié)果相比更加敏感、檢出率更高。宋蓉［8］利用自己建立的綿羊肺炎支原體固相競爭ELISA抗體檢測方法對46份支原體陰性血清和83份陽性血清進行檢測，檢出陰性血清44份，陽性血清全部檢出。趙萍等［9］應(yīng)用IHA方法檢測65份陽性血清和60份陰性血清，結(jié)果陽性血清檢出率達100%，陰性血清陽性檢測率為0?？梢娧鍖W(xué)檢測有較高的特異性和檢出率，對綿羊支原體性肺炎的診斷和疫情監(jiān)測具有重要的意義。

4.4分子生物學(xué)檢測方法

目前，分子生物學(xué)檢測方法是實驗室檢測支原體常用的方法之一。聚合酶鏈式反應(yīng)（PCR）技術(shù)比常規(guī)病原分離培養(yǎng)法快得多，比血清學(xué)方法更可靠，且可對早期病原菌感染的病料進行檢測。對于檢測類似支原體這種特別難培養(yǎng)的微生物來說，應(yīng)用此方法更為有效。隨著人們對支原體的深入研究，開始根據(jù)支原體保守基因序列設(shè)計引物檢測支原體。儲岳峰等［10］根據(jù)絲狀支原體山羊亞種保守的CAP-21的 195 bp DNA片段和綿羊肺炎支原體16srRNA基因的361 bp DNA片段設(shè)計引物，建立了可同時檢測絲狀支原體山羊亞種和綿羊肺炎支原體的雙重PCR方法，其最低檢測限為0.1 ng的絲狀支原體山羊亞種DNA和0.01 ng的綿羊肺炎支原體DNA，能夠?qū)崿F(xiàn)對這兩種支原體同時快速的鑒定和實驗室診斷。綿羊肺炎支原體和多殺性巴氏桿菌可以導(dǎo)致綿羊出現(xiàn)相似的臨床癥狀，很難從病理剖檢方面進行區(qū)分。馮旭飛等［11］根據(jù)綿羊肺炎支原體hsp70基因和多殺性巴氏桿菌sp6基因分別設(shè)計引物，成功建立了綿羊肺炎支原體和多殺性巴氏桿菌的雙重PCR檢測方法，為臨床上綿羊肺炎支原體和多殺性巴氏桿菌混合感染的快速檢測、鑒定及流行病學(xué)調(diào)查提供了有利的工具。PCR檢測方法目前被廣泛應(yīng)用于支原體的檢測，相信隨著分子生物學(xué)技術(shù)的迅猛發(fā)展，更靈敏、更有效，更有實用價值的PCR檢測方法將會在不久的將來出現(xiàn)。

5　綿羊支原體性肺炎的防治

綿羊支原體性肺炎是一種接觸性傳染病，而且在局部范圍內(nèi)傳播迅速。平時要加強飼養(yǎng)管理，保持圈舍清潔，定期進行消毒，可選擇用1∶200倍稀釋的絡(luò)合碘或有機氯消毒劑帶畜進行圈舍消毒。從沒有該病流行的地區(qū)購進羊只，且一定要隔離觀察后再混群。由于支原體沒有細胞壁會對作用于細菌細胞壁的抗生素產(chǎn)生抵抗力，所以在治療綿羊支原體性肺炎時應(yīng)該選擇針對阻礙DNA或蛋白質(zhì)合成的藥物進行治療，如大環(huán)內(nèi)酯類藥物、喹諾酮類抗生素。李建華等［12］應(yīng)用酒石酸泰樂菌素注射液和左氧氟沙星注射液對患羊進行治療，取得了一定的治療效果。但長期用藥會使支原體產(chǎn)生耐藥菌株，而且也會影響肉質(zhì)，所以應(yīng)用疫苗進行預(yù)防接種是首選方法。李新萍等［13］將1%的綿羊傳染性胸膜肺炎滅活苗加入到滅活的組織液中，用于綿羊的免疫，結(jié)果取得了較好的免疫效果。韓笑等［14］應(yīng)用自制的綿羊肺炎支原體滅活疫苗接種羊只，同樣也取得了良好的免疫保護作用。但由于支原體較難培養(yǎng)，菌產(chǎn)量低，成本高，這些都大大限制了傳統(tǒng)疫苗的發(fā)展，需要研發(fā)新型的支原體疫苗。

6　展望

目前，綿羊支原體性肺炎在我國多個省、市羊群中都有發(fā)生，其傳播速度快、發(fā)病率高，給我國養(yǎng)羊業(yè)造成嚴重的危害。因此，提高養(yǎng)殖戶對該病的認識，研究出快速準確的檢測方法、有效的治療藥物、安全可靠的疫苗是十分必要的。相信隨著分子生物學(xué)研究的不斷深入，上述諸多難題將很快攻克。■（編輯：段勇）

［1］Mackay J M K，Nisbet D I，F(xiàn)oggie A.Isolation of Pleuuropneumonia-like Organisms（Genus Mycolasma）from case of sheep pulmonary adenomatosis.Vet Rec，1963，75（21）:550-551.

［2］Carmicheal L E，George T D，Sullivan N D.Isolation，Propagation for Proliferative Interstitial Ppneumonia.Comell Vet，1972，62（4）: 654-679.

［3］Linvingston C W.Isolation of Mycoplasma Ovipneumoniae from Gosts.Amer.J Vet Rec，1979，40（3）:407-408.

［4］解慧梅，蘇志國，任寶波.泰州地區(qū)羊支原體肺炎流行病學(xué)調(diào)查［J］.江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015，43（3）:194-195.

［5］高蓉，胡永文，馮春梅等.羊支原體肺炎的調(diào)查［J］.中國畜牧獸醫(yī)文摘，2012，28（9）:97.

［6］陸承平.獸醫(yī)微生物［M］.中國農(nóng)業(yè)出版社，2001，360-363.

［7］候相山，王建昌，張永寧等.羊群綿羊肺炎支原體抗體間接ELISA檢測方法的建立［J］.中國畜牧獸醫(yī)，2006，33（6）:4-5.

［8］宋蓉.綿羊肺炎支原體固相競爭ELISA抗體檢測方法的建立［J］.科研畜牧獸醫(yī)，2015，（10）:279.

［9］趙萍，逯忠新，儲岳峰等.綿羊肺炎支原體間接血凝診斷方法的建立［J］.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2008，43（1）:29-32.

［10］儲岳峰，高鵬程，趙萍等.應(yīng)用雙重PCR方法檢測羊支原體肺炎病原［J］.畜牧與獸醫(yī)，2009，41（12）:23-26.

［11］ 馮旭飛，劉霜，張賢寧等.綿羊肺炎支原體和多殺性巴氏桿菌雙重PCR檢測方法的建立及應(yīng)用 ［J］.中國獸醫(yī)科學(xué)，2013，43（12）:1257-1261.

［12］李建華，方超，丁國杰.羊支原體肺炎的臨床癥狀和防治措施［J］.現(xiàn)代畜牧科技，2016，（6）:88.

［13］李新萍，陶岳，林為民等.綿羊支原體肺炎滅活疫苗的研制及其免疫效果的初步觀察［J］.現(xiàn)代畜牧獸醫(yī)，2007，35（8）:47-48.

［14］ 韓笑，岳華，王遠微等.綿羊肺炎支原體滅活疫苗的研制［J］.中國畜牧獸醫(yī)，2011，38（11）:181-183.

10.3969/j.issn.1008-4754.2016.10.019