羊痘診斷及防治措施

鄭德彪　金嘉旻　施銘煜　韓奇宏　陸宇超　毛愛民

(1.無錫市濱湖區(qū)胡埭街道畜牧獸醫(yī)站,江蘇無錫 214021; 2.無錫市動物疫病預防控制中心,江蘇無錫 214021; 3.無錫市惠山區(qū)堰橋街道獸醫(yī)站,江蘇無錫 214021)

羊痘診斷及防治措施

鄭德彪1金嘉旻2施銘煜3韓奇宏2陸宇超2毛愛民2

(1.無錫市濱湖區(qū)胡埭街道畜牧獸醫(yī)站,江蘇無錫 214021; 2.無錫市動物疫病預防控制中心,江蘇無錫 214021; 3.無錫市惠山區(qū)堰橋街道獸醫(yī)站,江蘇無錫 214021)

羊痘是由羊痘病毒（Capripoxviurs，CPV）感染山羊和綿羊而引起的一種熱性、急性、接觸性傳染病，患畜以發(fā)熱、全身性起痘為典型特征。OIE將該病列為A類動物傳染病，我國也將其列為Ⅰ 類動物疫病。本文從羊痘病原及流行概況、癥狀與病變特征、診斷方法、疫苗研究概況等幾個方面闡述了羊痘的防治技術研究進展，并提出羊痘預防措施和治療措施，對控制羊痘的發(fā)生和流行具有重要的參考意義。

羊痘 疫苗研究 診斷方法 預防措施

羊痘（Sheeppox and goatpox，SGP）又稱綿羊痘或山羊痘，是由羊痘病毒屬（Capripoxvirus，CPV）的綿羊痘病毒（Sheeppoxvirus，SPPV）或山羊痘病毒（Goatpox virus，GTPV）引起的羊的一種急性、熱性、接觸性傳染病。其主要表現(xiàn)為發(fā)熱、無毛或少毛的皮膚和黏膜上出現(xiàn)丘疹和皰疹為特征。典型病例初期為痘疹，最后干結脫落而痊愈，人也可偶感山羊痘[1]，是所有動物痘病中最為嚴重的一種，有較高的死亡率，能造成巨大的經濟損失。有該病的國家和地區(qū)的易感動物及其相關產品被世界各國列為嚴格限制進出的對象，嚴重影響國際貿易和養(yǎng)羊業(yè)的發(fā)展。世界上許多地區(qū)有該病發(fā)生的報道，如印度、尼日利亞、希臘等。我國的江蘇、廣東、貴州、山東、浙江、廣西、甘肅、黑龍江、福建等地均有該病發(fā)生，有的地區(qū)呈暴發(fā)流行。羊痘病毒（SGPV）還可作為生物武器，成為世界恐怖分子威脅世界和平的有力手段，被美國疾病控制中心（CDC）劃歸到Ⅱ類危險病毒。世界動物衛(wèi)生組織（OIE）將該病列為法定通報傳染病，我國將其列為Ⅰ類動物疾病[2]。

1 羊痘簡介

1.1 羊痘病原

羊痘病毒是痘病毒科、脊索動物痘病毒亞科、羊痘病毒屬。羊痘病毒屬包括山羊痘病毒（GTPV）、綿羊痘病毒（SP PV）和牛皮膚疙瘩病病毒（LSDV）；羊痘病毒基因組為線性雙股DNA，全長約為150kb，共有147個開放閱讀框，是唯一在細胞質內復制的有囊膜的雙股DNA病毒。

1.2 易感動物

羊痘病毒可以感染各種年齡、性別、品種的羊，但羔羊、泌乳羊及老年羊更易感且癥狀嚴重。另外山羊痘病毒也能引起野兔和馴鹿發(fā)病。

1.3 傳播方式

主要通過呼吸道傳播，也可經損傷的皮膚、黏膜侵入機體，經常是由于感染動物與易感動物直接的、親密的接觸后發(fā)生；試驗證明通過昆蟲的叮咬可傳播山羊痘。另外，通過皮內、靜脈以及皮下接種，可以引起易感動物的感染。

2 羊痘的癥狀與病變特征

2.1 主要癥狀

潛伏期一般為6～8d，長的達16d；體溫驟升至41℃～42℃，精神不振，食欲減退，拱腰發(fā)抖[1]；典型的臨床病變?yōu)槠つw黏膜出現(xiàn)痘疹。病羊全身均可能發(fā)生痘疹，特別是在口唇、尾根、乳房等少毛或無毛的部位最易發(fā)現(xiàn)。痘疹開始為紅斑，1～2d后形成突出于皮膚表面的痘疹，隨后痘疹逐漸擴大變成灰白色或淡紅色的半球狀的隆起結節(jié)，質地較硬。痘疹有兩種變化，一種逐漸變?yōu)樗挘鐭o繼發(fā)感染，則結痂脫落。如有繼發(fā)感染，則形成膿瘡。另一種直接結痂脫落，痂皮脫后流下星狀疤痕；對于易感羊群，感染率為75%～100%，死亡率為10%～58%。

2.2 主要病理變化

全身皮膚痘疹是最為顯著的臨床剖檢變化；呼吸系統(tǒng)：咽喉、氣管、支氣管和肺臟表面出現(xiàn)大小不一的痘斑，有時在咽喉、氣管、可見痘斑破潰形成潰瘍，而在肺臟可見有大片的肝變區(qū)，還可觀察到紫紅色或黃色圓形痘斑，直徑0.3～0.5cm，心外膜有大頭針大小的出血點和較大的出血斑。消化系統(tǒng)：唇、舌、瘤胃和皺胃黏膜上有大量白色的痘斑，質地堅硬。有時痘斑破潰形成潰瘍，在痘疹集中部位皮下可見到不規(guī)整的斑點狀出血或黃色膠凍樣滲出物。真胃、十二指腸、回腸黏膜呈出血性炎癥，腸系膜淋巴結水腫；全身淋巴結，特別是頜下淋巴結、肺門淋巴結高度腫脹，切面多汁，有時可見周邊出血；腎臟有多發(fā)性灰白色結節(jié)出現(xiàn)。

3 羊痘診斷檢測方法

3.1 臨床診斷

典型的感染會引起牲畜明顯的臨床癥狀，根據這些特征可對羊痘病做出初步診斷。

3.2 病原診斷方法

3.2.1 電鏡觀察

采取病羊皮膚和黏膜的丘疹和水皰病料做成切片負染后直接在電鏡觀察病毒粒子是診斷羊痘的常用方法，但在發(fā)病區(qū)往往沒有這樣的設備，難以滿足快速診斷的需要[3]。

3.2.2 病毒培養(yǎng)

病毒培養(yǎng)有較高的特異性，羊痘病毒可在牛、綿羊、山羊源的組織培養(yǎng)細胞上生長，原代或次代羔羊睪丸細胞和羔羊腎細胞最為敏感[4]。很多研究表明在不同地點和不同時間分離獲得的羊痘病毒株，對各種細胞培養(yǎng)物的敏感性不盡一致。因此，在由病料初代分離羊痘病毒時，最好多用幾種細胞培養(yǎng)物。羊痘病毒在細胞培養(yǎng)物中生長緩慢，病毒培養(yǎng)比較耗時、費力，不適合進行快速診斷。

3.3 血清學方法

3.3.1 傳統(tǒng)血清學方法

有病毒中和試驗（VNT）、熒光抗體試驗（FAT）、瓊脂擴散試驗（AGID）、免疫電泳（IE）、對流免疫電泳（CIE）、反向被動血凝試驗（RPHA）、乳膠凝集試驗（LAT）、單向輻射狀溶血試驗（SRH）、單輻射免疫擴散和酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）等[ 5 - 6]。

3.3.2 ELISA方法

酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）因其操作便利、快速、敏感、特異性強，便于自動化，能檢測群體特異性抗體而倍受青睞。目前國外已建立了許多種檢測SGPV 抗原或抗體的ELISA 方法。

3.3.3 應用特異性重組蛋白建立的方法

P32 蛋白是SGPV 共有的特異性很強的具有免疫原性的結構蛋白，可用于診斷與預防，是目前羊痘研究領域的熱點之一。研究結果表明，全長P32 蛋白可溶性最大，且在ELISA 中的反應性最好，但由于其跨膜區(qū)對細胞的毒性，使其表達量低，很難純化到重組P32 蛋白[7]。國內外研究者多以截去跨膜區(qū)的P32 基因為研究對象，研究其重組蛋白的用途。雖然以重組P32 為基礎建立的ELISA 方法具有高度的特異性，與正痘病毒和副痘病毒沒有交叉反應，但由于在ELISA 中的反應性最好的全長P32 表達量低，因此其推廣受限。

3.4 分子生物學方法

用PCR 方法可以簡單、快速、特異地從組織培養(yǎng)上清液、活組織樣品中檢測出SGPV 的DNA 片段，還可以通過對PCR產物的酶切分析進行CPV 種的鑒定。

4 預防措施

4.1 飼養(yǎng)管理

羊圈內要經常清掃，定期消毒，通風良好，陽光充足，經常保持干燥。保證羊吃飽喝足。冬天注意防寒保暖，夏天防高溫，消滅蚊蠅，為羊提供一個舒適的環(huán)境，提高抗病能力。

4.2 檢疫

新引入的羊要隔離21d，經觀察和檢疫后證明完全健康的方可與原有的羊群混養(yǎng)，不從疫區(qū)購羊。

4.3 預防接種

羊痘雞胚化弱毒疫苗：它對綿羊的毒力顯著地減弱，并且保持了優(yōu)良的免疫原性。在尾內面或腋下無毛部皮內接種0.5m1，接種后第4d部分羊就可以產生免疫力，至第6d可全部獲得堅強免疫力。免疫期可持續(xù)1～1.5年。

羊痘組織細胞苗：對綿羊完全無害，注射動物不擴散本病，因產生免疫力快，可用于緊急接種，已廣泛使用，免疫期＞1年。

4.4 加強消毒滅源

在發(fā)現(xiàn)羊群有癥狀病例和可疑病例時，應立即與健康羊群隔離，對圈舍和環(huán)境進行消毒，對健康羊群進行緊急免疫，對病死羊深埋或作其他無害化處理，嚴防病原擴散。

5 治療措施

尚無特效藥治療，常采用對癥治療等綜合性措施。對于口腔有病變的羊，應給予柔軟飼料，飲用清潔水。為防止口腔黏膜繼發(fā)感染，促進糜爛的愈合，可用1%的醋酸液、2%的硼酸液或1%的來蘇水沖洗口腔。有潰瘍時，可用1%的硫酸銅溶液、1%的明礬溶液或0.1%的高錳酸鉀溶液沖洗。皮膚發(fā)生痘疹，局部可用0.1%的高錳酸鉀溶液洗滌，擦干后抹紫藥水或碘甘油等。惡性山羊痘采用新砷礬納明治療[8]。

康復羊血清治療用康復羊血治療可明顯增強病羊的免疫力。治療量：每只成年羊10～20m1，小羊5～10m1，皮下注射。發(fā)病早期治療效果較好，若已進入膿皰期則加大劑量。另外，在進行對癥治療的同時，要適當使用青、鏈霉素等藥物進行輔助治療，以防繼發(fā)感染。

[1] 路秀英，李占國，張云艷.羊痘的防控技術[J].中國畜牧獸醫(yī)文摘，2013，29（8）：87-88.

[2] 王開功，虞天德，張大權，等.貴州省首次暴發(fā)山羊痘的診斷研究[J].動物醫(yī)學進展，2003，24（4）：116 - 118.

[3] 陳軼霞.羊痘診斷技術進展[J].安徽農業(yè)科學，2008，36（34）：15008-15009.

[4] BABIUKS，PARKYNG，COPPSJ，et a1 .Evaluation of an ovine testis cell line（OA3 .Ts）for propagation of capripoxvirus isolates and development of animmunostainingtechnique for viral plaque visualization[J] .J Vet Diagn Invest，2007，19（5）：486- 491 .

[5] RAOT VS，NEGI BS，BANSAL MP.Use of purified soluble antigens of sheeppoxvirus inserodiagnoss[J] .IndianJournal of Animal Sciences，1997，（67）：642 -645 .

[6] RAO T V S，NEGI B S，BANSAL MP.Development and standardization of arapid diagnosis test for sheep pox[J] .IndianJ Comp Microbiol Immunol InfectDis，1997，18（1）：47 - 51 .

[7] 陳軼霞，鄭亞東，竇永喜，等.羊痘病毒P32 蛋白基因的克隆與原核表達[J].動物醫(yī)學進展，2007，28（1）：31- 34.

[8] 劉小芳，劉慧.羊痘的診斷和治療技術[J].河南畜牧獸醫(yī)，2010，31（6）：48-49.