LC-MS/MS法同時測定復(fù)方鹿角顆粒中13種成分的含量

郝燕勤（赤峰學(xué)院醫(yī)學(xué)院，內(nèi)蒙古 赤峰 024000）

LC-MS/MS法同時測定復(fù)方鹿角顆粒中13種成分的含量

郝燕勤
（赤峰學(xué)院醫(yī)學(xué)院，內(nèi)蒙古 赤峰 024000）

目的 通過使用LC-MS/MS法同時測定復(fù)方鹿角顆粒中13種成分具體含量。方法 建立液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（Liquid chromatography-tandem mass spectrometry，LC-MS/MS），依次分析10個批次的復(fù)方鹿角顆粒樣品并取其平均值作為補骨脂素、異補骨脂素、馬錢苷、淫羊藿苷、柚皮苷、橙皮苷、朝藿定C、寶藿苷Ⅰ、朝藿定A、朝藿定B、紅景天苷、特女貞苷、淫羊藿次苷Ⅱ最終具體含量。結(jié)果 通過采用LC-MS/MS法進行測定，復(fù)方鹿角顆粒中13種成分的具體含量依次為：1.75～2.00 mg/g、2.15～2.60 mg/g、3.75～4.20 mg/g、14.0～15.5 mg/g、0.75～0.80 mg/g、13.5～15.5 mg/g、13.2～14.5 mg/g、0.38～0.40 mg/g、3.75～4.10 mg/g、1.82～2.05 mg/g、3.85～4.40 mg/g、6.75～7.65 mg/g、0.55～0.63 mg/g。結(jié)論 LC-MS/MS法同時測定復(fù)方鹿角顆粒中13種成分具體含量操作簡便、測定時間短、反應(yīng)靈敏度高、結(jié)果真實準(zhǔn)確，能夠為復(fù)方鹿角顆粒質(zhì)量控制工作提供科學(xué)依據(jù)，值得在今后工作中推廣使用。

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法；復(fù)方鹿角顆粒；質(zhì)量控制

復(fù)方鹿角顆粒是當(dāng)前臨床中用于治療慢性心力衰竭的主要藥物之一，在提高患者臨床治療效果的同時，也為臨床工作進一步發(fā)展提供了有利的支持［1-3］。然而，由于該藥物成分復(fù)雜多樣，含量差異將會直接影響藥物質(zhì)量及治療效果，已經(jīng)成為質(zhì)量控制工作所面臨的棘手問題。為此，本次研究針對LC-MS/MS法同時測定復(fù)方鹿角顆粒中13種成分的含量展開深入分析，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料：本次研究中10個批次的復(fù)方鹿角顆粒均購自中國食品藥品檢定研究院。所選儀器為LC-20A高效液相色譜儀（日本Shimadzu公司生產(chǎn)）；4000Q-Trap型液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀（美國安捷倫公司生產(chǎn)）；TG332A微量分析天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)）。

1.2方法：采用TG332A微量分析天平精確量取補骨脂素、異補骨脂素、馬錢苷、淫羊藿苷、柚皮苷、橙皮苷、朝藿定C、寶藿苷Ⅰ、朝藿定A、朝藿定B、紅景天苷、特女貞苷、淫羊藿次苷Ⅱ樣品各10 mg并分別置于單獨量瓶之中。加入甲醇溶液溶解并稀釋至1 mg/mL濃度。隨機抽取各個批次的復(fù)方鹿角顆粒樣品并將其研成粉末，之后精確稱取0.5 g，放置在50 mL容量的錐形瓶之中加入70%甲醇水溶液20 mL，經(jīng)過處理之后利用0.45 μm微孔濾膜取其上清液并稀釋50倍。使用LC-20A高效液相色譜儀提取離子流色譜圖后采用4000Q-Trap型液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀在多反應(yīng)監(jiān)測模式（multiple reaction monitoring，MRM）進行正負離子掃描切換在同一周期同時測定補骨脂素、異補骨脂素、馬錢苷、淫羊藿苷、柚皮苷、橙皮苷、朝藿定C、寶藿苷Ⅰ、朝藿定A、朝藿定B、紅景天苷、特女貞苷、淫羊藿次苷Ⅱ樣品具體含量。

2　結(jié) 果

通過采用LC-MS/MS法進行測定，復(fù)方鹿角顆粒中13種成分的具體含量依次為：1.75～2.00 mg/g、2.15～2.60 mg/g、3.75～4.20 mg/g、14.0～15.5 mg/g、0.75～0.80 mg/g、13.5～15.5 mg/g、13.2～14.5 mg/g、0.38～0.40 mg/g、3.75～4.10 mg/g、1.82～2.05 mg/g、3.85～4.40 mg/g、6.75～7.65 mg/g、0.55～0.63 mg/g。

3　討 論

復(fù)方鹿角顆粒對于慢性心力衰竭病癥具有較好的治療功效已經(jīng)得到了患者及臨床醫(yī)師的廣泛認(rèn)可，使用頻率及范圍得到了大幅提升。然而，盡管現(xiàn)代化醫(yī)學(xué)檢測設(shè)備陸續(xù)在臨床中推廣使用，但是關(guān)于復(fù)方鹿角顆粒多指標(biāo)成分定量的分析與研究在目前而言仍然屬于一個全新的研究課題。眾所周知，中成藥制劑中藥物成分含量劇烈變化將會導(dǎo)致其配比發(fā)生分本性改變，繼而因藥物相生相克而對患者產(chǎn)生不良影響，因而中成藥成分質(zhì)量控制工作成為當(dāng)前社會各界廣泛關(guān)注的焦點問題。為此，本次研究通過建立當(dāng)前臨床檢測工作中比較青睞的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法來對10個批次的復(fù)方鹿角顆粒十三種成分進行定量分析，以明確其具體含量范圍，為質(zhì)量控制以及臨床檢測工作進一步發(fā)展提供科學(xué)依據(jù)［4-9］。

通過采用LC-MS/MS法同時測定復(fù)方鹿角顆粒中十三種成分具體含量后發(fā)現(xiàn)，LC-MS/MS法同時測定復(fù)方鹿角顆粒中13種成分含量操作簡便、測定時間短、反應(yīng)靈敏度高、結(jié)果真實準(zhǔn)確，能夠為復(fù)方鹿角顆粒質(zhì)量控制工作提供科學(xué)依據(jù)，值得在今后工作中推廣使用。

［1］ 劉宏明，張葉，楊福偉，等.高效液相色譜法同時測定小兒解表顆粒中8種成分的含量及主成分分析［J］.中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，2014，11（15）：1302-1305.

［2］ 唐勵靜，文翔昊，李沖，等.HPLC同時測定復(fù)方金銀花顆粒中綠原酸、連翹苷、黃芩苷、漢黃芩素、芹菜素的含量［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2014，24（21）：71-74.

［3］ 賀康洪，張廣春，陳明明，等.RP-HPLC法同時測定復(fù)方黑參顆粒中肉桂酸和次野鳶尾黃素的含量［J］.沈陽藥科大學(xué)學(xué)報，2013，12（4）：264-267.

［4］ 李艷，谷凱，鄭學(xué)燕.人血漿中昂丹司瓊的LC-MS/MS法測定及其藥動學(xué)［J］.中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，2016，47（6）：747-750.

［5］ 周芳妍，劉力.復(fù)方鹿角顆粒的HPLC指紋圖譜研究［D］.上海：上海中醫(yī)藥大學(xué)，2013.

［6］ 候晨艷，高繼光，付爾康.鹿角膠鈣顆粒劑對大鼠實驗性骨質(zhì)疏松癥的研究［J］.中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，2000，17（1）：66-68.

［7］ 金穎成，劉力.復(fù)方鹿角顆粒制備工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及穩(wěn)定性研究［J］.上海：上海中醫(yī)藥大學(xué)，2012.

［8］ 徐冉馳，劉力，徐德生.液-質(zhì)聯(lián)用法同時測定復(fù)方鹿角顆粒中18種氨基酸的含量［J］.中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，2015，35（19）：1719-1723.

［9］ 田婷婷，馬英華，解偉偉，等.LC-MS/MS同時測定藍萼香菜中4種二萜類成分及其聚類分析［J］.中國中藥雜志，2016，41（2）：250-256.

R282.710.3

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1671-8194（2016）23-0039-01