羔羊大腸桿菌病的實驗室診斷與藥敏試驗

柯崢明

（四川省儀隴縣柳埡鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，四川儀隴 637681）

羔羊大腸桿菌病的實驗室診斷與藥敏試驗

柯崢明

（四川省儀隴縣柳埡鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，四川儀隴 637681）

2015年10月，某規(guī)模羊場出現(xiàn)了以精神沉郁、腹瀉、消瘦、運動失調為主要特征的疫癥，為對該發(fā)病羊場進行疫病確診，并為其篩選敏感性的治療藥物。本研究經(jīng)臨床診斷以及實驗室診斷綜合確診為羔羊大腸桿菌病，并通過藥敏試驗篩選出了3種敏感性藥物，為羊場治療措施的制定提供了參考。

羔羊 大腸桿菌病 診斷 藥敏試驗

羔羊大腸桿菌病的病原為致病性大腸桿菌，是一種條件性致病菌。該菌在機體可以正常存在，當機體抵抗力下降或外界不良因素刺激時可以引起發(fā)病，產(chǎn)生腸毒素，導致機體全身菌血癥，發(fā)生腹瀉和敗血癥，嚴重的病例可以全身衰竭而死亡［1］。新生羔羊此類疾病的發(fā)病率很高，病羊的分泌物、排泄物都可以帶菌，向外界排出，常常因污染飼料、飲水等導致嚴重的傳染。該菌對外界的抵抗力不強，加強衛(wèi)生消毒，足夠的紫外線照射及各種消毒藥均可以有效地滅活病菌。羔羊可以通過消化道途徑和呼吸道途徑感染發(fā)病，羔羊感染后常表現(xiàn)腹瀉、腹痛、下痢等，輕者也可以發(fā)生關節(jié)腫脹和關節(jié)炎，嚴重的發(fā)生敗血癥死亡［2］。本研究對臨床一起羔羊大腸桿菌病感染事件進行了診斷，結合藥物敏感性試驗，為發(fā)病羊場提出了綜合防治措施，疫情很快得到了控制，整個診斷與藥敏試驗過程如下：

1 發(fā)病情況

2015年10月，某規(guī)模羊場新生2周羔羊突然發(fā)病，病羊表現(xiàn)腹瀉和白痢，病初體溫升高，隨后發(fā)生腹瀉，病羊精神沉郁，食欲不振，運動失調，極度消瘦，脫水。新生羔羊相繼發(fā)生感染，發(fā)病率高，病后12～24h死亡。調查中發(fā)現(xiàn)飼養(yǎng)場的衛(wèi)生條件較差，飼養(yǎng)密度較大，羊舍通風不良。

2 臨床癥狀

發(fā)病羊表現(xiàn)呼吸困難，體溫升高，精神沉郁，嚴重腹瀉，運動失調，糞便呈液體狀，混有氣泡，有時混有血液，羔羊表現(xiàn)腹痛和脫水，常在感染后一天內死亡。

3 病理變化

剖檢可見胸腔、腹腔和心包腔有纖維素性滲出物，關節(jié)腫大，腸黏膜充血、出血，淋巴結紅腫，肺水腫，腦膜有點狀出血點。

4 實驗室診斷

4.1 細菌分離培養(yǎng)

無菌條件下，采集病死羊的取胸腹腔積液和腸內容物作為臨床組織病料，接種至麥康凱瓊脂和普通營養(yǎng)瓊脂平板，37 ℃培養(yǎng)24h，在麥康凱瓊脂平板上形成光滑整齊的圓形粉紅色菌落，普通營養(yǎng)瓊脂平板上形成白色菌落。

4.2 分離菌株形態(tài)特征觀察

分離菌株經(jīng)革蘭氏染色鏡檢可見革蘭氏陰性球桿菌，兩端鈍圓，無芽孢。

根據(jù)發(fā)病羔羊的發(fā)病情況、臨床癥狀、病理變化、細菌分離培養(yǎng)、分離菌株形態(tài)特征觀察等結果，可以綜合診斷為該羊場發(fā)生了羔羊大腸桿菌病，進一步進行藥敏試驗以控制疫情。

5 藥敏試驗

利用Kirby-Baue菌液涂布法分別進行分離菌株對青霉素、鏈霉素、頭孢噻吩、慶大霉素、氯霉素、環(huán)丙沙星、氧氟沙星、阿米卡星等常規(guī)藥物的敏感性試驗，篩選針對分離菌株的高敏藥物。試驗結果表明分離菌株對青霉素、鏈霉素2種藥物產(chǎn)生了一定的耐藥性，對頭孢噻吩、氧氟沙星、阿米卡星3種藥物敏感性較高。發(fā)病羊場采用頭孢噻吩和氧氟沙星藥物進行治療，疫情很快得到了有效控制，將經(jīng)濟損失降至最低。

6 討論

羔羊大腸桿菌病是目前危害我國養(yǎng)羊業(yè)的重要細菌性傳染病之一，主要感染新生羔羊，該病發(fā)病急、傳播迅速、死亡率高。由于致病菌是大腸桿菌，所以控制本病最關鍵的措施還是在預防，可以在母羊產(chǎn)前30～50d接種大腸桿菌的多血清型制備的滅活疫苗，使新生羔羊出生后獲得母源抗體的保護，通常對本病能起到良好的預防效果［3］。同時加強懷孕母羊的產(chǎn)前和產(chǎn)后護理，使新生羔羊盡快吃到初乳，加強母羊飼料的營養(yǎng)配比，營養(yǎng)均衡，不要突然更換飼料，減少對羔羊的應激。防控羔羊大腸桿菌病最有效的方法還是搞好環(huán)境衛(wèi)生和加強消毒，羊場要保持飼養(yǎng)溫度，寒冷和潮濕常常是本病暴發(fā)的誘因，特別是春、秋換季，乍暖還寒的天氣容易使病菌乘虛而入。羊舍要有充足的光照，保持通風，飼養(yǎng)密度不要太大。羊場需采取嚴格的生物安全措施，防止一切帶菌動物和污染物進入羊舍，進出的人員和物料都要消毒處理。一旦有疑似病羊要盡早確診，早隔離，早治療，病畜要及時隔離，糞便、墊草、墊料要及時清除，健康的動物不要接觸污染的飼料、飲水，在各個環(huán)節(jié)都要注意潛在的污染。病原確診后通過藥敏試驗篩選敏感性藥物進行緊急治療，做好群防群控，污染的墊料、用具等都要消毒處理。

近年來，隨著我國養(yǎng)羊業(yè)的規(guī)?；?、集約化快速發(fā)展，防治藥物的使用亦越來越多，抗菌藥物的盲目、大量濫用所導致的耐藥菌株亦越來越多。蔣培紅等［4］研究表明大腸桿菌濟寧青山羊分離株對多西環(huán)素、鏈霉素、紅霉素、羅紅霉素4種藥物耐藥，而本研究中的分離株對青霉素、鏈霉素2種藥物產(chǎn)生了耐藥性?？梢娊鼛啄甏竽c桿菌地方分離株對常用抗菌藥物已產(chǎn)生了不同程度的耐藥性，應加強重視。

當羊群爆發(fā)本病時，可以用大腸桿菌滅活苗進行緊急免疫接種，疫情能得到有效控制。發(fā)病羊全部隔離，病死羊尸體做無害化處理，焚毀和深埋。病羊通過藥敏試驗使用敏感藥物控制病情，及時補水，補液?？梢造o脈注射少量碳酸氫鈉溶液，防止發(fā)生酸中毒［5］。飼料中可以適量添加益生菌制劑，保持正常的腸道菌群，防止腸道失衡，逐步恢復腸道功能，使病羊逐漸康復。

［1］唐海洪，謝浩標.羔羊大腸桿菌病臨床特點及診治［J］.畜禽業(yè)，2015，（1）：76-77.

［2］武庭斌.高原地區(qū)羔羊大腸桿菌病病因分析及防治措施［J］.畜牧獸醫(yī)雜志，2016，35（1）：123-124.

［3］穆增躍.綜合防治羔羊大腸桿菌病的建議［J］.農(nóng)業(yè)開發(fā)與裝備，2016，（1）：168.

［4］蔣培紅，韓冬，肖真真，等. 濟寧青山羊大腸桿菌病病原分離鑒定［J］.畜牧獸醫(yī)，2016，48（1）：142-143.

［5］寬太吉.羔羊大腸桿菌病的診斷方法及防治措施［J］.中獸醫(yī)學雜志，2015，（8）：30.