蒙藥特潤舒都樂對正常小鼠巨噬細胞吞噬功能的影響

烏日娜王純潔

（1.內(nèi)蒙古錫林郭勒職業(yè)學院，內(nèi)蒙古錫林浩特 026000；

2.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學，內(nèi)蒙古呼和浩特 010070）

蒙藥特潤舒都樂對正常小鼠巨噬細胞吞噬功能的影響

烏日娜1王純潔2

（1.內(nèi)蒙古錫林郭勒職業(yè)學院，內(nèi)蒙古錫林浩特 026000；

2.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學，內(nèi)蒙古呼和浩特 010070）

目的：觀察和探討蒙藥特潤舒都樂的作用機理與調(diào)節(jié)巨噬細胞吞噬功能的相關(guān)性。方法：對30只ICR小鼠隨機分為空白組，模型組，特潤舒都樂組，每組各10只。除空白組外，其余各組采用腹腔注射大腸桿菌方法復制蒙醫(yī)“粘疫”熱癥模型。特潤舒都樂組于造模后2h灌特潤舒都樂0.1 ml/10 g，每日2次，連續(xù)5d。于末次灌胃2h后處死小鼠，抽取腹腔洗液，離心，計數(shù)巨噬細胞數(shù)。與5%雞紅細胞懸液孵育45min，固色，染色，油鏡下記數(shù)，計算吞噬百分率和吞噬指數(shù)。結(jié)果：模型組與空白組比較腹腔巨噬細胞游出數(shù)量明顯增加（P＜0.05），吞噬指數(shù)較空白組有顯著性差異（P＜0.05）；特潤舒都樂組與模型組比較巨噬細胞游出數(shù)量無顯著性差異（P＞0.05），腹腔巨噬細胞吞噬百分率及吞噬指數(shù)明顯提高（P＜0.05）。結(jié)論：特潤舒都樂明顯增加腹腔巨噬細胞的吞噬功能，特潤舒都樂的治療作用可能與巨噬細胞吞噬功能有關(guān)。

蒙藥 特潤舒都樂 作用機理 巨噬細胞吞噬功能

蒙藥特潤舒都樂已被證實具有抗發(fā)炎的效用，但尚未有研究針對蒸煮后之蒙藥特潤舒都樂是否具有活性做進一步分析。本研究先對蒙藥特潤舒都樂萃取物活性進行分析，再利用細胞模式進行免疫活性分析，探討蒙藥特潤舒都樂是否仍具抗發(fā)炎之功效，以蒙藥特潤舒都樂喂飼乳羊的可行性評估。對30只ICR小鼠隨機分為空白組，模型組，特潤舒都樂組，每組各10只。除空白組外，其余各組采用腹腔注射大腸桿菌方法復制蒙醫(yī)“粘疫”熱癥模型，進行臨床實驗，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

對30只ICR小鼠隨機分為空白組，模型組，特潤舒都樂組，每組各10只。除空白組外，其余各組采用腹腔注射大腸桿菌方法復制蒙醫(yī)“粘疫”熱癥模型。

1.2 處理方法

除空白組外，其余各組采用腹腔注射大腸桿菌方法復制蒙醫(yī)“粘疫”熱癥模型。特潤舒都樂組于造模后2h灌特潤舒都樂0.1 ml/10 g，每日2次，連續(xù)5d。于末次灌胃2h后處死小鼠，抽取腹腔洗液，離心，計數(shù)巨噬細胞數(shù)。與5%雞紅細胞懸液孵育45min，固色，染色，油鏡下記數(shù)，計算吞噬百分率和吞噬指數(shù)。

2 結(jié)果

模型組與空白組比較腹腔巨噬細胞游出數(shù)量明顯增加（P＜0.05），吞噬指數(shù)較空白組有顯著性差異（P＜0.05）；特潤舒都樂組與模型組比較巨噬細胞游出數(shù)量無顯著性差異（P＞0.05），腹腔巨噬細胞吞噬百分率及吞噬指數(shù)明顯提高（P＜0.05）。

圖1 空白組、模型組與特潤舒都樂組乳腺組織病理變化

3 討論

隨著我國人民健康自我意識逐漸增加，對于成分為天然植物的中草藥的需求量日益增加，國內(nèi)中草藥制藥業(yè)便迅速發(fā)展，各大中藥制藥廠每個月至少產(chǎn)出兩百噸以上的蒙藥特潤舒都樂廢棄量，大量蒙藥特潤舒都樂主要利用于有機肥料之基質(zhì)。蒙藥特潤舒都樂的主要成分為粗纖維與碳水化合物，如可利用反芻動物瘤胃中的微生物來分解纖維，將蒙藥特潤舒都樂進行消化與破壞，并有效的降解，將可增加其附屬效益。各種中草藥分離之多醣已被證實均對于體內(nèi)與體外有免疫調(diào)節(jié)之影響，因此具有潛力開發(fā)作為免疫調(diào)節(jié)劑。多醣可活化免疫反應，其借著活化巨噬細胞，也連帶活化B 細胞與其他免疫細胞。發(fā)炎反應是先天免疫重要之部分，借著活化NF-κB 而調(diào)控下游信息傳遞因子，使促發(fā)炎激素產(chǎn)生并表現(xiàn)。適量的釋放出促發(fā)炎激素可幫助先天性免疫反應而抵擋外來病原體，反之持續(xù)性表現(xiàn)會引起急性發(fā)炎反應之產(chǎn)生，例如敗血癥甚至導致死亡。隨著地球暖化，尤其為熱帶地區(qū)，家畜之飼養(yǎng)環(huán)境溫度相對增加，造成動物熱緊迫，進而食欲減少、生產(chǎn)變差、健康也相對影響，抵抗力較差，疾病感染性增加。

而小鼠巨噬細胞株RAW264.7 凍細胞方式為從細胞培養(yǎng)箱取出欲凍之細胞，并以玻璃吸管去除DMEM 培養(yǎng)基，將已將細胞培養(yǎng)液加入10% DMSO并另外再添加10% 胎牛血清混勻之DMEM，并將細胞打散且分裝1ml 于冷凍小管中，直接冰置-80 oC 至隔天，最后再放入液態(tài)桶保存中。

將蒙藥特潤舒都樂進行消化與破壞，并有效的降解，將可增加其附屬效益。研究顯示蒙藥特潤舒都樂的根部富含大量多醣與指標成分阿魏酸與蒿本內(nèi)酯，蒙藥特潤舒都樂蒸煮后湯汁對腸胃道具保健功能，亦有抗發(fā)炎之功效。然而，蒙藥特潤舒都樂蒸煮后藥渣與藥渣進行青貯保存所殘留之指標成分含量與抗發(fā)炎之功效尚未任何報告，故本實驗為以高效液相層析先分析蒙藥特潤舒都樂與藥渣青貯中殘存之指標成分含量，并利用小鼠巨噬細胞RAW264.7 探討是否具有細胞毒性與其抗發(fā)炎之可能，以作為后續(xù)反芻動物喂飼試驗的基礎(chǔ)。 巨噬細胞中含有大量的溶酶體、吞噬體和殘余體，因此用臺藍或墨汁注射到實驗動物體內(nèi)，可以見到巨噬細胞內(nèi)聚集很多藍色或黑色的顆粒，用這種方法可以來標識巨噬細胞，用淀粉肉湯刺激實驗動物形成較多的巨噬細胞。本實驗顯示，特潤舒都樂明顯增加腹腔巨噬細胞的吞噬功能，特潤舒都樂的治療作用可能與巨噬細胞吞噬功能有關(guān)。

［1］黃麗華，王純潔，敖日格樂，等. 蒙藥特潤舒都樂浸膏對脂多糖刺激RAW264.7細胞分泌炎性因子的影響［J］.細胞與分子免疫學雜志，2013，（4）：387-389.

［2］納仁高娃，王純潔，黃麗華.蒙藥特潤舒都樂提取物抗炎作用研究［J］.動物醫(yī)學進展，2013，（5）：67-70.

［3］郭婧，王純潔，蘇迅，等.正交法篩選治療奶牛乳腺炎蒙藥復方中最佳抗炎免疫成分復方的研究［J］.黑龍江畜牧獸醫(yī)，2015，（5）：147-149.