• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    凋亡蛋白Smac與食管癌

    2016-01-27 23:08:09陳文慶張依軍蔡三立寇國鋒
    中國實驗診斷學 2016年11期
    關鍵詞:放化療線粒體食管癌

    陳文慶,張依軍,蔡三立,寇國鋒,劉 剛

    (吉林省腫瘤醫(yī)院,吉林 長春130012)

    ?

    *通訊作者

    凋亡蛋白Smac與食管癌

    陳文慶,張依軍,蔡三立,寇國鋒,劉 剛*

    (吉林省腫瘤醫(yī)院,吉林 長春130012)

    食管癌是消化系統(tǒng)常見惡性腫瘤。我國是食管癌的高發(fā)地區(qū),對于中、晚期食管癌患者主要采用以手術為主,放化療為輔的治療方案,但是5年生存率較低,大約20%-40%。然而由于個體差異導致患者產(chǎn)生放化療耐受,從而影響治療效果[1-3]。食管癌的發(fā)生需要多基因的參與,其發(fā)生和發(fā)展過程亦是一種細胞增殖與死亡的動態(tài)平衡。研究表明,重要凋亡因子變化會造成正常細胞凋亡程序紊亂,是腫瘤發(fā)生發(fā)展的一個重要因素,而這種抗凋亡機制也造成了腫瘤晚期對放化療的反應性不佳。第2個線粒體衍生的胱天蛋白酶激活劑(Smac)是一種新型線粒體蛋白質。它是Wang等[4]在2000年從HeLa細胞中分離得到的。分析顯示Smac與蛋白質低pI的IAP直接結合蛋白(DIABLO)兩者的特征完全相同, 后者由Verhagan實驗小組[5]從293T細胞中分離得到,因此這兩種蛋白合稱為Smac/DIABLO。Smac的促凋亡作用包括以下幾方面:阻止了凋亡抑制蛋白家族(IAPs)抑制細胞凋亡的作用;促進腫瘤壞死因子相關的凋亡誘導配體(TRAIL)誘導細胞凋亡;線粒體途徑細胞色素c(Cyt c)和Smac共同啟動線粒體途徑。基于Smac誘導凋亡特性的食管癌治療主要集中在Smac小分子肽、Smac蛋白過表達促凋亡、以Smac為靶點增強食管癌細胞對放化療的敏感性等。因此,深入探討Smac基因與食管癌發(fā)生、發(fā)展的關系,并以此為靶向的基因治療,不但有助于了解食管癌的發(fā)生、發(fā)展,也為未來基因靶向治療的發(fā)展提供理論依據(jù)。

    1 Smac的背景

    Smac染色體基因位于基因組12號長臂,有7個外顯子,總長度為1.5 KB。Smac蛋白的相對分子量為27K,包括239個氨基酸,氨基酸殘基為線粒體靶序列(MTS)位于Smac蛋白肽鏈N末端,這樣就可以使Smac轉入到線粒體,剪切掉MTS后 Smac蛋白就以純二聚體形式存在于線粒體膜間隙內,其總相對分子量也減少為25K,只有此種形式的Smac才具有該活性[6]。Smac表達于成人的多個器官組織,包括睪丸、卵巢、心臟、前列腺、腎臟及正常組織中,在肺臟、腦、胸腺及外周血中也有少量表達;Smac在腎癌、卵巢癌、甲狀腺癌、骨肉瘤和胰腺癌等多種腫瘤中高表達,但也在少數(shù)腫瘤組織中表達降低或缺失[7]。這種表達異常與腫瘤發(fā)生、發(fā)展以及預后有關,且可能是腫瘤放化療耐受的原因之一[8]。

    2 Smac誘導細胞凋亡

    線粒體途徑位于細胞凋亡調控通路的中心,它與死亡受體途徑、內質網(wǎng)應激途徑共同成為細胞主動死亡的的主要途徑其中線粒體途徑在細胞凋亡中最為重要。通常在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展過程中,介導細胞凋亡的相關基因出現(xiàn)異常表達使細胞凋亡處于一種異常狀態(tài)。劉暢等[9]在分析食管鱗癌中Smac表達時發(fā)現(xiàn),在癌組織、正常組織和癌旁組織中Smac陽性表達率分別為92.50%,63.75%和77.50%,而且Smac陽性表達的癌組織細胞凋亡率明顯高于Smac陰性表達的癌組織細胞凋亡率,這說明二者存在正相關。Smac具有顯著的促凋亡活性,涉及到多種機制。

    2.1 Smac可解除IAPs對細胞凋亡的抑制

    由于含有大量的桿狀病毒IAP重復區(qū)(BIR)這種特殊的分子結構使人類的IAPs具備了抗細胞凋亡的活性,Smac蛋白可以與凋亡蛋白caspase-3、-6和-7競爭性的與該重復區(qū)域特異性結合,使其失去了對caspases的抑制,使細胞釋放更多的caspase,誘導了細胞的凋亡[10-12]。Smac抑制IAPs的機制如下:Smac蛋白可以在細胞受到外源刺激時由線粒體釋放入細胞漿,由于位于N末端AVPI四肽序列結構可BIR2和BIR3結合,從而競爭性的阻斷caspase與之的相互作用,阻止了caspase的失活,誘導細胞凋亡。

    2.2 Smac增強TRAIL對凋亡的正向調節(jié)

    激活caspase-8-tBid-Bax的級聯(lián)反應是TRAIL誘導細胞凋亡的途徑之一,caspase-3及tBid的激活是通過TRAIL誘導的Cyt c的釋放以及caspase-8和Bid的加工實現(xiàn)的,在Smac的正向調控下發(fā)揮促凋亡作用的。而且,caspase-8-tBid-Bax級聯(lián)反應導致了更多Smac的釋放,caspases受IAPs的抑制也被解除,從而增強凋亡的發(fā)生[13]。在TRAIL誘導的凋亡途徑中,僅是caspase-8的活化還不足以激活caspase-3,因此,這一過程還需要Smac參與。Ng等[14]的研究結果發(fā)現(xiàn)將編碼Smac的cDNA轉染到前列腺癌細胞(CL-1)中,結果誘導了CL-1細胞發(fā)生了凋亡。

    2.3 Cyt c與 Smac同時釋放

    Smac和Cyt c具有協(xié)同誘導凋亡的作用,是線粒體凋亡通路被釋放到胞漿中兩種關鍵的凋亡因子。caspase-9前體的形成需要多種因子參與,其中包括Cyt c與Apaf-1,而后結合為凋亡小體(apoptosome)。caspase-9通過caspase-3及 -7的激活發(fā)揮促凋亡作用,同時IAPs抑制凋亡的作用被Smac解除,所以,Smac和Cyt c共同釋放到胞漿中,可以發(fā)生協(xié)同促凋亡的作用[15]。

    3 Smac與食管癌治療

    食管癌是我國發(fā)病率較高的惡性腫瘤之一,目前研究表明食管癌的發(fā)生、發(fā)展也與許多凋亡調節(jié)因子紊亂相關[16,17],Smac在食管癌中表達異常,并且與凋亡密切相關,因此大量研究將其作為食管癌治療的靶點,且手段較豐富。

    3.1 Smac小分子肽

    大量實驗結果顯示, Smac蛋白過表達以后,增加了腫瘤細胞對凋亡刺激的敏感性,特別是Smac蛋白N端分離下來的短氨基酸序列也可以與XIAP反應,促進了caspase-9和 -3的活化,同時,對于IAPs過表達的腫瘤細胞,Smac蛋白還能起到殺傷腫瘤細胞的作用[18]。Mizukawa等實驗結果顯示:將與Smac N末端相似的或模擬Smac活性的小分子肽加入到腫瘤細胞后,明顯增強了腫瘤細胞對凋亡的敏感性,體現(xiàn)出明顯的促凋亡作用[19]。

    3.2 Smac蛋白過表達促凋亡

    通常Smac在腫瘤細胞中存在異常表達,而且其作為內源性IAPs的抑制物作用不強,因此,考慮將過表達的Smac導入到細胞中,從而發(fā)揮其促凋亡的作用。劉迎等[20]將Smac基因導入到前列腺癌細胞株PC-3中,大大增加了Smac的表達,使腫瘤細胞停滯在G0/G1期,明顯的抑制了腫瘤細胞生長并促進了腫瘤細胞的凋亡。Du等[21]構建Smac過表達載體,轉染食管癌細胞Eca109后發(fā)現(xiàn),Smac表達顯著增加,而且對細胞凋亡具有凋亡促進作用,而且還發(fā)現(xiàn)與單純順鉑作用比較,凋亡增加的更為顯著。食管癌細胞的凋亡與Smac過度表達密切相關,同時Smac與順鉑在促食管癌細胞凋亡方面表現(xiàn)出協(xié)同效應。

    3.3 Smac相關靶向治療與腫瘤放、化療的協(xié)同作用

    放療和化療是食管癌手術后治療的聯(lián)合方案,而且由于個體差異導致患者產(chǎn)生放化療耐受,從而影響效果。以Smac為靶點促凋亡在多種腫瘤中已經(jīng)體現(xiàn)了顯著的增強放化療敏感性的作用,在食管癌治療中也具有相似的作用。Qin等[22]研究發(fā)現(xiàn),Smac的模擬物LCL161作用于食管鱗狀細胞癌ESCC細胞,細胞增殖能力降低,并誘導細胞凋亡增加,同時能夠導致ESCC細胞對輻射敏感性增強,而且主要通過降低cIAP1表達,促進caspase-8表達,并上調TNFα表達來實現(xiàn)。Xu等[23]通過對食管鱗狀細胞癌患者標本分析發(fā)現(xiàn),Smac在腫瘤中表達明顯下調,而且在化療敏感和化療耐受的患者中存在明顯的差異。而且在ESCC細胞中,化療藥順鉑作用后,Smac和Cyt c從線粒體中釋放出來,caspaes-9和-3被激活,而當Smac被敲除后則能降低順鉑導致的細胞凋亡和線粒體失能,Smac缺乏也導致對應腫瘤對順鉑的耐受。Smac的一種小分子模擬物LB2242則能顯著增強順鉑誘導的細胞凋亡和caspase激活,對Smac缺乏的食管癌細胞具有化療致敏作用。

    4 Smac的研究前景及展望

    Smac蛋白是Cyt c后第二個線粒體蛋白,它對腫瘤的抑制是通過多種途徑實現(xiàn)的。Smac蛋白促進腫瘤凋亡的理論假設是基于腫瘤細胞具備凋亡逃脫能力導致腫瘤細胞無限制增生的特點。實驗證明,一些活性Smac小分子在體內外均能提高腫瘤細胞對化療的敏感性,非常明顯的促進了腫瘤細胞的凋亡,具有廣泛的應用前景。但大量研究結果也指出,過量Smac蛋白對機體正常器官和組織有一定的毒性,所以發(fā)現(xiàn)無毒性的類似Smac蛋白分析活性的替代品等是未來研究的方向。此外,研究表明:Smac治療腫瘤還存在一些應用性問題,如Bartling等[24]發(fā)現(xiàn)Smac在依托泊苷(VP-16)治療肺癌的過程中不發(fā)揮促凋亡作用,提示并不是所有的治療腫瘤手段應用Smac后,都能達到增強其促凋亡效果,這需要更多研究進行篩選,并確定具體的方案。目前針對Smac的靶向治療尚處于初級階段,但其在腫瘤治療領域的潛力是毋庸置疑的。

    [1] Parkin DM,Bray F,Ferlay J,et al.Global cancer statistics,2002 [J].CA Cancer J Clin,2005,55(2):74.

    [2]Das P,Ajani JA.Gastric and gastro-oesophageal cancer therapy [J].Expert Opin Pharmacother,2005,6(16):2805.

    [3]Degterev A,Huang Z,Boyce M,et al.Chemical inhibitor of nonapoptotic cell death with therapeutic potential for ischemic brain injury [J].Nat Chem Biol,2005,1(2):112.

    [4]Du C,Fan GM,Li Y,et al.Smac,a mitochondrial protein that promotes cytochrome c-dependent caspase activation by eliminating IAP inhibition [J].Cell,2000,102(1):33.

    [5]Verhagen A,Ekert P,Pakusch M,et al.Identification of DIABLO,a mammalian protein that promotes apoptosis by binding to and antagonizing IAP proteins [J].Cell,2000,102(1):43.

    [6]Srinivasula SM,Datta P,Fan XJ,et al.Molecular determinants of the caspase-9 romoting activity of Smac/DIABLO and its role in the death receptor pathway [J].J Biol Chem,2000,75(46):36152.

    [7]Chai J,Du C,Wu JW,et al.Structural and biochemical basis of apoptotic activation by Smac/DIABLO [J].Nature,2000,406 (6798):855.

    [8]Yoichi M,Hiroyuki N,Kosuke Y,et al.Down regulatlon of Smac/DIABLO expression in renal cell carcinoma and its prognostic significance [J].Am J Clin Oncol,2005,23(3):448.

    [9]劉 暢,高鳳蘭,赫 欣,等.Smac、Caspase-9在食管癌中的表達及與細胞凋亡的關系 [J].中國臨床解剖學雜志,2013,31(4):457.

    [10]Flanagan L,Sebastia J,P TUFFY L,et al.XIAP impairs Smac release from the mitochondria during apoptosis [J].Cell Death Dis,2010,1:e49.

    [11] Darding M,Feltham R,Tenev T,et al.Molecular determinants of Smac mimetic induced degradation of cIAP1 and cIAP2 [J].Cell Death Differ,2011,(8):1376.

    [12] Hui KK,Kanungoanungo AK,ELIA AJ,HENDERSON JT.Caspase-3 deficiency reveals a physiologic role for Smac/DIABLO in regulating programmed cell death [J].Cell Death Differ,2011,8(11):1780.

    [13] Zhou LL,Zhou LY,Luo KQ,et al.Smac/DIABLO and cytochrome career leased from mitochondria through a similar mechanism during UV-induced apoptosis [J].Apoptosis,2005,10(2):289.

    [14] Ng CP,Bonavida B.X-linked inhibitor of apoptosis (XIAP) blocks apo2 ligand/tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand-mediated apoptosis of protease cancer cells in the presence of mitochondrial activation:sensitization by overexpression of second mitochondria-derived activation of caspase/direct IAP-binding protein with low PI (Smac/DIABLO) [J].Mol Cancer Ther,2002,1(12):1051.

    [15] Ng H,Smith DJ,Nagley P.Application of flow cytometry to determine differential redistribution of cytochrome c and Smac/DIABLO from mitochondria during cell death signaling [J].PLoS One,2012,7(7):e42298.

    [16] Salvesen GS,Duckett CS.IAP proteins:blocking the road to death's door [J].Nat Rev Mol Cell Biol,2002;3(6):401.

    [17] Güner D,Sturm I,Hemmati P,et al.Multigene analysis of Rb pathway and apoptosis control in esophageal squamous cell carcinoma identifi es patients with good prognosis [J].Int J Cancer 2003;103(4):445.

    [18] Fukla S,Wick W,Weller M,et al.Smac agonist sensitizes for Apo-2L/TRAIL or anticancer drug induced apoptosis and induces regression of malignant glioma in vivo [J].Nat Med,2007,8(8):808.

    [19] Mizukawa K,Kawamura A,Sasayama T,et al.Synthetic Smac peptide enhances the effect of etoposide-induced apoptosis in human glioblastoma cell lines [J].J Neurooncol,2006,77(3):247.

    [20]劉 迎,張軼庠,楊江根,等.Smac基因誘導前列腺癌細胞凋亡的實驗研究 [J].臨床泌尿外科雜志,2013,28(1):59.

    [21]Du N,Yang B,Hu LJ,et al.Overexpression of Smac gene enhanced chemotherapeutic sensitivity of esophageal cancer cell line Eca109 to cisplatin [J].Xi Bao Yu Fen Zi Mian Yi Xue Za Zhi,2012,28(4):344.

    [22]Qin Q,Zuo Y,Yang X,et al.Smac mimetic compound LCL161 sensitizes esophageal carcinoma cells to radiotherapy by inhibiting the expression of inhibitor of apoptosis protein [J].Tumour Biol,2014,35(3):2565.

    [23]Xu Y,Zhou L,Huang J,et al.Role of Smac in determining the chemotherapeutic response of esophageal squamous cell carcinoma [J].Clin Cancer Res,2011,17(16):5412.

    [24]Bartling B,Levensohn R,Zhivotovsky B.Endogenously released Smac is insufficient to mediate cell death of human lung carcinoma in response to etoside [J].Exp Cell Res,2004,298(1):83.

    1007-4287(2016)11-1977-03

    2016-01-25)

    猜你喜歡
    放化療線粒體食管癌
    棘皮動物線粒體基因組研究進展
    海洋通報(2021年1期)2021-07-23 01:55:14
    線粒體自噬與帕金森病的研究進展
    生物學通報(2021年4期)2021-03-16 05:41:26
    直腸癌新輔助放化療后,“等等再看”能否成為主流?
    miRNAs在食管癌中的研究進展
    MCM7和P53在食管癌組織中的表達及臨床意義
    食管癌術后遠期大出血介入治療1例
    高危宮頸癌術后同步放化療與單純放療的隨機對照研究
    肝內膽管癌行全身放化療后緩解一例
    晚期NSCLC同步放化療和EGFR-TKI治療的臨床研究進展
    NF-κB介導線粒體依賴的神經(jīng)細胞凋亡途徑
    日韩欧美精品免费久久| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 精品欧美国产一区二区三| 我要看日韩黄色一级片| 免费播放大片免费观看视频在线观看 | 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 国产精品伦人一区二区| 亚洲av熟女| 精品久久久久久电影网 | 国产成人一区二区在线| 午夜爱爱视频在线播放| 国产精品日韩av在线免费观看| 日日啪夜夜撸| 亚洲在久久综合| 高清在线视频一区二区三区 | 热99re8久久精品国产| 一个人免费在线观看电影| 91av网一区二区| 国产精品一区二区在线观看99 | 国产黄片视频在线免费观看| 亚洲欧美日韩无卡精品| 黄色日韩在线| 欧美97在线视频| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 日本爱情动作片www.在线观看| 亚洲伊人久久精品综合 | 精品人妻视频免费看| 日韩欧美 国产精品| 中国美白少妇内射xxxbb| 亚洲美女搞黄在线观看| 最近手机中文字幕大全| 国产成人福利小说| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 亚洲国产精品合色在线| 亚洲在线自拍视频| 久久精品国产亚洲网站| 性色avwww在线观看| 乱人视频在线观看| 我的女老师完整版在线观看| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 亚洲成人av在线免费| 亚洲欧美成人精品一区二区| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 99热这里只有是精品在线观看| 69av精品久久久久久| 欧美性猛交黑人性爽| 看非洲黑人一级黄片| 国产高潮美女av| 国产精品乱码一区二三区的特点| 国产一区有黄有色的免费视频 | 亚洲自偷自拍三级| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 大香蕉97超碰在线| 综合色av麻豆| 日韩大片免费观看网站 | 日日撸夜夜添| 亚洲成人精品中文字幕电影| 寂寞人妻少妇视频99o| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 国产 一区 欧美 日韩| 乱系列少妇在线播放| 美女内射精品一级片tv| 一级毛片久久久久久久久女| 国产高清视频在线观看网站| 精华霜和精华液先用哪个| 午夜福利在线观看免费完整高清在| kizo精华| 国产一区有黄有色的免费视频 | 97人妻精品一区二区三区麻豆| 两个人的视频大全免费| 在线观看66精品国产| 国产亚洲精品av在线| 午夜久久久久精精品| 超碰97精品在线观看| 国产老妇伦熟女老妇高清| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 少妇的逼好多水| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 一级毛片电影观看 | 男女视频在线观看网站免费| 久久久久久伊人网av| 久久久久精品久久久久真实原创| 日本色播在线视频| 3wmmmm亚洲av在线观看| 2022亚洲国产成人精品| 欧美一区二区精品小视频在线| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 国产国拍精品亚洲av在线观看| 国产精品综合久久久久久久免费| 国产伦一二天堂av在线观看| 啦啦啦韩国在线观看视频| 欧美成人午夜免费资源| 99热这里只有是精品在线观看| 精品一区二区三区视频在线| 日本欧美国产在线视频| 校园人妻丝袜中文字幕| 精品久久国产蜜桃| 亚洲内射少妇av| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | av在线观看视频网站免费| 亚洲欧美精品自产自拍| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 18禁在线无遮挡免费观看视频| 国产视频首页在线观看| 久久久精品欧美日韩精品| 国产av不卡久久| 欧美精品国产亚洲| 国产亚洲91精品色在线| 爱豆传媒免费全集在线观看| 久久久成人免费电影| 最新中文字幕久久久久| 日韩中字成人| 国产 一区精品| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 永久免费av网站大全| 亚洲第一区二区三区不卡| 天堂中文最新版在线下载 | av播播在线观看一区| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 男女啪啪激烈高潮av片| 亚洲精品亚洲一区二区| 午夜日本视频在线| 2022亚洲国产成人精品| 久久99精品国语久久久| 欧美日韩在线观看h| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 日韩一本色道免费dvd| 日本与韩国留学比较| 亚洲精品日韩av片在线观看| 日本五十路高清| 哪个播放器可以免费观看大片| 成人三级黄色视频| 日本色播在线视频| 国产精品福利在线免费观看| 人妻夜夜爽99麻豆av| 1000部很黄的大片| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | av国产久精品久网站免费入址| 一级二级三级毛片免费看| 日韩av不卡免费在线播放| 国产免费一级a男人的天堂| 伦理电影大哥的女人| 亚洲av电影不卡..在线观看| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 国产单亲对白刺激| 一级av片app| 久久精品久久久久久久性| 成年免费大片在线观看| 成年免费大片在线观看| 男人狂女人下面高潮的视频| 亚洲人与动物交配视频| 亚洲国产色片| 亚洲国产色片| 大香蕉97超碰在线| 日本欧美国产在线视频| 男人和女人高潮做爰伦理| 插阴视频在线观看视频| 卡戴珊不雅视频在线播放| 亚洲国产精品成人综合色| 精品免费久久久久久久清纯| 一级二级三级毛片免费看| 最近视频中文字幕2019在线8| 成年女人永久免费观看视频| 亚州av有码| 免费av毛片视频| 亚洲伊人久久精品综合 | 在线观看美女被高潮喷水网站| 我要看日韩黄色一级片| 亚洲自偷自拍三级| 97超视频在线观看视频| 日本wwww免费看| 国产伦精品一区二区三区视频9| 在线观看一区二区三区| 深夜a级毛片| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 国产精品福利在线免费观看| 欧美日韩精品成人综合77777| 日日摸夜夜添夜夜爱| 国产视频首页在线观看| 国产精品久久久久久精品电影| 国产探花在线观看一区二区| 免费av毛片视频| 美女cb高潮喷水在线观看| 欧美成人午夜免费资源| 99久久无色码亚洲精品果冻| 观看美女的网站| 一夜夜www| 欧美成人一区二区免费高清观看| 午夜老司机福利剧场| av女优亚洲男人天堂| 麻豆乱淫一区二区| 嘟嘟电影网在线观看| 成年av动漫网址| 一级爰片在线观看| 看片在线看免费视频| 亚洲在久久综合| 国产高清不卡午夜福利| 在线天堂最新版资源| 成人毛片a级毛片在线播放| 日韩一本色道免费dvd| 欧美日本亚洲视频在线播放| 男人舔女人下体高潮全视频| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 国产一区亚洲一区在线观看| 成年女人永久免费观看视频| 一级二级三级毛片免费看| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 午夜精品一区二区三区免费看| a级一级毛片免费在线观看| 中文资源天堂在线| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 国产精品.久久久| 亚洲国产高清在线一区二区三| 国内精品美女久久久久久| 国产精品综合久久久久久久免费| 欧美又色又爽又黄视频| 日韩欧美精品v在线| 久久99热这里只有精品18| 丰满人妻一区二区三区视频av| 黑人高潮一二区| 高清日韩中文字幕在线| 九色成人免费人妻av| 深爱激情五月婷婷| 毛片一级片免费看久久久久| 春色校园在线视频观看| 水蜜桃什么品种好| 韩国高清视频一区二区三区| 99久久人妻综合| 青春草视频在线免费观看| 日韩欧美在线乱码| 久久鲁丝午夜福利片| 日本黄色视频三级网站网址| 成人毛片60女人毛片免费| 久久久午夜欧美精品| 精品国产三级普通话版| 亚洲av成人av| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 一边摸一边抽搐一进一小说| 人妻少妇偷人精品九色| 麻豆av噜噜一区二区三区| 亚洲天堂国产精品一区在线| 国产淫语在线视频| 老司机影院毛片| ponron亚洲| 日本午夜av视频| 国产男人的电影天堂91| 日本爱情动作片www.在线观看| 亚洲最大成人手机在线| 超碰97精品在线观看| 久久久a久久爽久久v久久| 97超碰精品成人国产| 老司机影院毛片| 国产精品国产三级专区第一集| 色综合亚洲欧美另类图片| 国产精品三级大全| 一二三四中文在线观看免费高清| 欧美色视频一区免费| 超碰97精品在线观看| 乱码一卡2卡4卡精品| 美女被艹到高潮喷水动态| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 永久网站在线| 久久精品国产自在天天线| 亚洲内射少妇av| 一区二区三区四区激情视频| 在线免费十八禁| 国产精品蜜桃在线观看| 成人美女网站在线观看视频| 亚洲在久久综合| 亚洲欧美日韩无卡精品| 日韩欧美三级三区| 18禁在线播放成人免费| 春色校园在线视频观看| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 99久久人妻综合| 免费av观看视频| 免费av不卡在线播放| 国产av在哪里看| 国产精品三级大全| videossex国产| 亚洲欧美精品综合久久99| 日韩视频在线欧美| 亚洲精品aⅴ在线观看| 国产一区二区三区av在线| 国产精品三级大全| 欧美成人a在线观看| 国产成人aa在线观看| 国产在视频线在精品| 国产精品国产高清国产av| 日韩av不卡免费在线播放| 国产成人免费观看mmmm| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 欧美xxxx性猛交bbbb| 真实男女啪啪啪动态图| 九草在线视频观看| 又粗又爽又猛毛片免费看| 日韩中字成人| 免费播放大片免费观看视频在线观看 | 只有这里有精品99| 亚洲av男天堂| 搡老妇女老女人老熟妇| 精品无人区乱码1区二区| 国产乱人偷精品视频| 欧美日韩国产亚洲二区| 亚洲欧美精品自产自拍| 久久久成人免费电影| 69av精品久久久久久| 午夜爱爱视频在线播放| 黄色欧美视频在线观看| av天堂中文字幕网| 91aial.com中文字幕在线观看| 亚洲自偷自拍三级| 综合色丁香网| 韩国av在线不卡| 国产乱人偷精品视频| 亚洲最大成人中文| av天堂中文字幕网| 日本色播在线视频| 中国国产av一级| 老司机影院成人| 国产色爽女视频免费观看| 色综合色国产| 免费看a级黄色片| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 午夜福利在线观看吧| 成人亚洲精品av一区二区| 国产伦一二天堂av在线观看| 男人舔奶头视频| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 好男人视频免费观看在线| 国产单亲对白刺激| 97超碰精品成人国产| 边亲边吃奶的免费视频| 国产高清视频在线观看网站| 最后的刺客免费高清国语| 亚洲久久久久久中文字幕| 亚洲欧美成人精品一区二区| 男女啪啪激烈高潮av片| 99在线人妻在线中文字幕| videossex国产| 欧美成人午夜免费资源| 国产毛片a区久久久久| 3wmmmm亚洲av在线观看| 综合色丁香网| 91精品国产九色| 久久精品国产亚洲av涩爱| 国产极品精品免费视频能看的| av福利片在线观看| 亚洲第一区二区三区不卡| 欧美精品一区二区大全| 男人舔奶头视频| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 国产精品国产三级专区第一集| 亚洲乱码一区二区免费版| 哪个播放器可以免费观看大片| 婷婷色综合大香蕉| 精品久久久久久电影网 | 老司机影院成人| 韩国av在线不卡| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 亚洲久久久久久中文字幕| 99久久人妻综合| 亚洲人成网站高清观看| 国产淫语在线视频| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 国产成人午夜福利电影在线观看| 亚洲成av人片在线播放无| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 色噜噜av男人的天堂激情| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 国产成人免费观看mmmm| 午夜福利在线观看吧| 国产综合懂色| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 国产精品,欧美在线| 六月丁香七月| 午夜久久久久精精品| 亚洲欧美精品自产自拍| 变态另类丝袜制服| 亚洲成人久久爱视频| 日韩在线高清观看一区二区三区| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 一个人看的www免费观看视频| 91av网一区二区| 六月丁香七月| 乱码一卡2卡4卡精品| 麻豆久久精品国产亚洲av| 五月玫瑰六月丁香| 国产人妻一区二区三区在| av专区在线播放| 日韩av在线免费看完整版不卡| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 婷婷色av中文字幕| 搞女人的毛片| 在线观看一区二区三区| 久久99热这里只频精品6学生 | 日韩,欧美,国产一区二区三区| 黄片无遮挡物在线观看| 两个人看的免费小视频| 在线观看www视频免费| 80岁老熟妇乱子伦牲交| a级毛片在线看网站| 高清av免费在线| 日韩 亚洲 欧美在线| 赤兔流量卡办理| 久久免费观看电影| 免费av中文字幕在线| 少妇 在线观看| 18+在线观看网站| 男人操女人黄网站| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 在线亚洲精品国产二区图片欧美| av有码第一页| 亚洲av男天堂| 成年人午夜在线观看视频| 赤兔流量卡办理| 亚洲熟女精品中文字幕| 国产1区2区3区精品| 十八禁高潮呻吟视频| 免费观看av网站的网址| 高清av免费在线| 青春草国产在线视频| 国产成人午夜福利电影在线观看| 国产黄频视频在线观看| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 亚洲国产成人一精品久久久| 伦理电影大哥的女人| 精品一区二区三区四区五区乱码 | 国产精品一区二区在线观看99| 最黄视频免费看| 美女福利国产在线| 丁香六月天网| 久久99一区二区三区| 黑人猛操日本美女一级片| 在线观看www视频免费| 日本黄色日本黄色录像| 又大又黄又爽视频免费| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 免费黄频网站在线观看国产| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 精品一区在线观看国产| 国产日韩欧美视频二区| 欧美人与善性xxx| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 嫩草影院入口| 在线免费观看不下载黄p国产| 少妇 在线观看| 99热6这里只有精品| 久久久久国产精品人妻一区二区| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| a级毛片在线看网站| 十分钟在线观看高清视频www| 高清欧美精品videossex| 午夜福利,免费看| 国产成人91sexporn| 亚洲精品国产av成人精品| 免费在线观看完整版高清| 69精品国产乱码久久久| 亚洲欧美清纯卡通| 深夜精品福利| 国产成人91sexporn| 亚洲精品日本国产第一区| 欧美激情国产日韩精品一区| 成人国语在线视频| 少妇 在线观看| av有码第一页| 免费av中文字幕在线| 欧美成人午夜免费资源| 亚洲一区二区三区欧美精品| av卡一久久| 精品一品国产午夜福利视频| 草草在线视频免费看| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 国产有黄有色有爽视频| 亚洲国产欧美在线一区| 国产一级毛片在线| 精品福利永久在线观看| 国产1区2区3区精品| 另类亚洲欧美激情| 日本色播在线视频| 欧美日韩av久久| 亚洲中文av在线| 国产亚洲欧美精品永久| 另类精品久久| 欧美xxⅹ黑人| 日日摸夜夜添夜夜爱| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 午夜久久久在线观看| 亚洲图色成人| 18在线观看网站| 美国免费a级毛片| 不卡视频在线观看欧美| 欧美精品国产亚洲| a级毛色黄片| av.在线天堂| 男男h啪啪无遮挡| 97超碰精品成人国产| 极品人妻少妇av视频| 少妇 在线观看| 久久99一区二区三区| 亚洲欧美清纯卡通| 两个人免费观看高清视频| 久久久久久伊人网av| 狂野欧美激情性bbbbbb| 欧美日韩综合久久久久久| 黄片播放在线免费| 久久毛片免费看一区二区三区| 亚洲国产av影院在线观看| 国产精品一二三区在线看| 高清黄色对白视频在线免费看| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 中文字幕制服av| 免费高清在线观看视频在线观看| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 亚洲国产日韩一区二区| 国产精品免费大片| 另类精品久久| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 嫩草影院入口| 免费大片黄手机在线观看| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 久热这里只有精品99| 777米奇影视久久| 亚洲av在线观看美女高潮| 亚洲熟女精品中文字幕| 一级黄片播放器| 欧美精品一区二区大全| 国产精品久久久久成人av| 90打野战视频偷拍视频| 国产综合精华液| 18+在线观看网站| 九色成人免费人妻av| 免费黄频网站在线观看国产| 亚洲欧洲国产日韩| 久久久久久人人人人人| 国产精品无大码| 热re99久久精品国产66热6| 亚洲av国产av综合av卡| 美女国产高潮福利片在线看| 黑丝袜美女国产一区| 亚洲,一卡二卡三卡| 久久亚洲国产成人精品v| 国产精品免费大片| 国产精品久久久av美女十八| 美女国产视频在线观看| 欧美日韩亚洲高清精品| 超色免费av| 九色亚洲精品在线播放| 男女下面插进去视频免费观看 | 欧美日本中文国产一区发布| 丰满迷人的少妇在线观看| 两个人免费观看高清视频| 久久人人爽人人爽人人片va| 老女人水多毛片| 国产成人91sexporn| 国产在线一区二区三区精| 免费在线观看黄色视频的| 久热久热在线精品观看| 亚洲熟女精品中文字幕| 丰满饥渴人妻一区二区三| freevideosex欧美| 少妇熟女欧美另类| 日韩人妻精品一区2区三区| 黄色视频在线播放观看不卡| 久久99一区二区三区| 亚洲精品日本国产第一区| 大话2 男鬼变身卡| 国产精品熟女久久久久浪| 香蕉丝袜av| 亚洲综合精品二区| 亚洲成人av在线免费| 午夜91福利影院| 成人亚洲欧美一区二区av| 9191精品国产免费久久| 老司机影院毛片| 卡戴珊不雅视频在线播放| 女人久久www免费人成看片| xxxhd国产人妻xxx| 国产在线免费精品| 午夜福利视频精品| 免费av不卡在线播放| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 90打野战视频偷拍视频| 成人无遮挡网站| 99视频精品全部免费 在线| 我要看黄色一级片免费的| 日本黄大片高清| av不卡在线播放| 国产成人精品无人区| 男人爽女人下面视频在线观看| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 亚洲精品av麻豆狂野| 国产欧美亚洲国产| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 黄色一级大片看看| 久久99热这里只频精品6学生| 十八禁网站网址无遮挡| 欧美另类一区| av线在线观看网站| 最黄视频免费看| 亚洲精品456在线播放app| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 人人澡人人妻人| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 精品少妇久久久久久888优播| 国产在线视频一区二区| 久久韩国三级中文字幕| 国产免费现黄频在线看| 99久久综合免费| 精品国产露脸久久av麻豆| 日韩免费高清中文字幕av| 日本-黄色视频高清免费观看|