烏司他丁對膿毒癥內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)機(jī)制的研究進(jìn)展

郝雪景++蔡國龍++陳進(jìn)++胡才寶

[關(guān)鍵詞] 膿毒癥；烏司他??；內(nèi)皮細(xì)胞

中圖分類號：R54；R978.1

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1009-816X（2015）06-0486-03

doi10.3969/j.issn.1009-816x.2015.06.17

膿毒癥是指明確或可疑感染引起的全身炎癥反應(yīng)綜合征，是目前ICU的主要死亡原因之一。目前廣泛認(rèn)為其發(fā)生發(fā)展與炎癥介質(zhì)的大量釋放、凝血系統(tǒng)過度激活密切相關(guān)，因此，抗炎治療是在該疾病治療中的重要環(huán)節(jié)。烏司他丁是一種廣譜蛋白酶抑制劑，可以抑制多種蛋白酶的活性，減少各種炎性因子的生成和釋放，從而抑制炎癥反應(yīng)。近年來國內(nèi)外一些臨床研究表明烏司他丁可以降低膿毒癥患者的死亡率，但是具體的作用機(jī)制尚不清楚。內(nèi)皮細(xì)胞作為抵御炎癥反應(yīng)侵襲的第一道屏障，在膿毒癥的發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用，本文將針對烏司他丁對膿毒癥患者內(nèi)皮細(xì)胞的可能保護(hù)機(jī)制作一綜述。

1 對炎癥反應(yīng)的影響

膿毒癥發(fā)展過程中機(jī)體免疫系統(tǒng)會釋放如TNF-隊IL-6、IL-4、降鈣素原、C一反應(yīng)蛋白等的炎性介質(zhì)，這些炎癥介質(zhì)一方面相互作用形成復(fù)雜的互動關(guān)系，導(dǎo)致“炎癥瀑布效應(yīng)”，加快膿毒癥的發(fā)展進(jìn)程；另一方面，炎性因子及介質(zhì)直接或間接作用于內(nèi)皮細(xì)胞，使粘附分子表達(dá)增強(qiáng)，導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞和凝血功能障礙，機(jī)體氧代謝障礙。方強(qiáng)等研究顯示烏司他丁可以減少炎性因子的釋放，同時還可以增加抗炎因子IL-10的表達(dá)。與常規(guī)治療組相比，加用烏司他丁后，可以觀察到TNF-a在48h內(nèi)即明顯下降，IL-6的濃度亦有明顯下降，同時IL-10則明顯升高；烏司他丁組28d死亡率（28.6%）明顯低于常規(guī)治療組的死亡率（57.1%）。IL-10可以抑制多種細(xì)胞因子和趨化因子，如IL-6、TNF-a及血小板活化因子（platelet activat-ing factor， PAF）等。烏司他丁能抑制IL-6、IL-8等炎性細(xì)胞因子過度釋放，從而調(diào)節(jié)機(jī)體免疫反應(yīng)，由此減輕致病原引起的機(jī)體炎癥反應(yīng)。

2 對內(nèi)皮細(xì)胞的影響

2.1 粘附分子細(xì)胞黏附在感染、膿毒性休克等病理生理過程中起著重要的作用。生理狀態(tài)下內(nèi)皮細(xì)胞幾乎不表達(dá)黏附分子，而在膿毒癥過程中，在內(nèi)毒素等刺激下可表達(dá)多種黏附分子，通過這些黏附分子，使得被激活的炎癥細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞黏附，穿過內(nèi)皮向炎癥部位趨化游走，并可以損傷內(nèi)皮細(xì)胞導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞的通透性增加，導(dǎo)致組織器官的損傷。在炎癥反應(yīng)中，白細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞被激活，細(xì)胞間粘附分子（I-CAM-1）表達(dá)明顯增加，且ICAM-1的升高又反過來促進(jìn)了白細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞的活化及兩者之間的粘附反應(yīng)，白細(xì)胞黏附于血管內(nèi)皮表面，形成微小栓子，阻塞毛細(xì)血管，導(dǎo)致微循環(huán)障礙。黏附分子表達(dá)數(shù)量的改變是黏附作用調(diào)節(jié)的一個重要方面，烏司他丁可以抑制ICAM-1的表達(dá)，減緩炎癥細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞的黏附，減輕血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷。

2.2 內(nèi)皮細(xì)胞生長因子（VEGF）血管VEGF屬于免疫球蛋白超基因家族，主要由間質(zhì)、基質(zhì)和上皮來源的細(xì)胞通過旁分泌的形式作用于內(nèi)皮細(xì)胞而分泌，直接作用于內(nèi)皮細(xì)胞的生長因子，具有增加微血管通透性等作用。研究發(fā)現(xiàn)VEGF水平與膿毒癥病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)，該研究通過對59例嚴(yán)重膿毒癥患者血清VEGF動態(tài)監(jiān)測，發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重膿毒癥患者血清VEGF水平較健康者明顯升高，并且死亡組較生存組VEGF濃度亦有明顯增加。有研究顯示烏司他丁可以下調(diào)VEGF的表達(dá)數(shù)量，抑制微血管通透性的增高，可以降低膿毒癥過程中的微血管損害；研究中可以看到陽性對照組VEGF[（201.31±57.62） pg/ml]表達(dá)明顯高于烏司他丁治療組[（123.68±25.05）pg/mll，陽性對照組微血管通透性明顯高于烏司他丁組（P<0.05）。

2.3 血管性血友病因子（von willebrand factor， vWF）：vWF是一個大分子血漿糖蛋白，主要來源于血管內(nèi)皮細(xì)胞，其血清濃度變化能夠特異性地反映血管內(nèi)皮細(xì)胞功能的損傷。內(nèi)皮細(xì)胞受到炎癥因子及炎癥介質(zhì)等化學(xué)刺激時，vWF分泌到血液，其濃度變化與內(nèi)皮細(xì)胞受損程度呈正相關(guān)，是內(nèi)皮功能損傷的一個敏感指標(biāo)。有研究顯示在膿毒癥患者血清vWF水平升高，并且vWF濃度變化的程度可能與膿毒癥的預(yù)后有密切關(guān)系。彭環(huán)慶等研究發(fā)現(xiàn)烏司他丁可以下調(diào)膿毒癥患者vWF水平，研究通過檢測56例膿毒癥患者外周血vWF的水平，常規(guī)治療組（102.6±31.3）明顯高于烏司他丁組（80.6±26.3），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。由于患者體內(nèi)影響vWF濃度的因素比較多，機(jī)制復(fù)雜，為了進(jìn)一步驗證烏司他丁對vWF濃度的影響，該實驗利用膿毒癥患者血清作用于體外培養(yǎng)的血管內(nèi)皮細(xì)胞并觀察烏司他丁的干預(yù)作用，結(jié)果表明烏司他丁組培養(yǎng)上清液中vWF濃度下降。

2.4 血栓性調(diào)節(jié)蛋白（thrombomodulin，TM）：TM是分布于血管內(nèi)皮細(xì)胞表面的一種由575個氨基酸和5個主要基團(tuán)組成的膜蛋白。TM具有依賴APC途徑的抗炎及抗凝作用，當(dāng)血管內(nèi)皮細(xì)胞受到損傷時，可以作為監(jiān)測血管內(nèi)皮細(xì)胞功能的重要分子標(biāo)志物。研究發(fā)現(xiàn)烏司他丁可以降低膿毒癥TM水平，研究利用盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)制備膿毒癥模型，隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、烏司他丁組，結(jié)果提示烏司他丁組TM水平[（428.0±10.5）μg/L]低于模型組[（598.0±13.5）μg/L]，高于假手術(shù)組[（303.0±11.5）μg/L]。

2.5 循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞（circulating endothelial cells，CEC）：CEC指能夠在外周血中測得的血管內(nèi)皮細(xì)胞。CEC在正常人血中數(shù)量極少，在炎癥、腫瘤、心血管等血管受到損傷的疾病中，CEC數(shù)量明顯增加。在膿毒癥發(fā)展過程中，血管內(nèi)皮細(xì)胞受到內(nèi)毒素、炎癥因子如TNF-a等因素的刺激后，內(nèi)皮細(xì)胞受損、凋亡加速，脫落至血液。研究發(fā)現(xiàn)膿毒癥早期應(yīng)用烏司他丁可以降低循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞的數(shù)量，延緩內(nèi)皮細(xì)胞活化和損傷，進(jìn)而對內(nèi)皮細(xì)胞有一定程度的保護(hù)作用。

3 對凝血功能的影響

在生理條件下EC主要表現(xiàn)有抗凝及抗血栓形成的特性，并通過表達(dá)各種抗凝物質(zhì)而抗凝。已證實在膿毒癥或者膿毒性休克時，在炎癥介質(zhì)刺激下，內(nèi)皮細(xì)胞則表現(xiàn)為促進(jìn)止血、血栓形成及加強(qiáng)炎癥反應(yīng)等使凝血系統(tǒng)被激活。膿毒癥的早期釋放大量炎性介質(zhì)，如：脂多糖、血栓素A2、IL-6及TNF。中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞被激活，釋放巨噬細(xì)胞分子-1、淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原一l等，經(jīng)內(nèi)皮細(xì)胞膜上的ICAM-1及血管細(xì)胞粘附分子等使白細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞粘附，同時促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)和釋放組織因子，經(jīng)外源性凝血途徑激活凝血系統(tǒng)。受損的內(nèi)皮細(xì)胞會引起血小板粘附聚集和釋放，加劇凝血反應(yīng)及血栓形成，導(dǎo)致組織缺血缺氧，最終發(fā)展為多器官功能障礙綜合征。烏司他丁對廣譜蛋白酶均有抑制作用，如胰蛋白酶等絲氨酸蛋白酶及粒細(xì)胞彈性蛋白酶、透明質(zhì)酸酶等；還具有抑制炎癥介質(zhì)釋放，抗纖溶作用，保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞及血小板功能，減輕全身炎癥反應(yīng)。近年來研究顯示烏司他丁具有抗纖溶、抑制血小板聚集及激活，可以維持血管正常舒縮功能及內(nèi)皮細(xì)胞的完整性，延緩膿毒癥的進(jìn)展。

綜上所述，內(nèi)皮細(xì)胞活化、損傷在膿毒癥的發(fā)生發(fā)展過程中起著重要的作用，已有報道烏司他丁對膿毒癥內(nèi)皮細(xì)胞有保護(hù)作用，但烏司他丁對膿毒癥內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)作用的機(jī)制比較復(fù)雜，目前仍缺乏大規(guī)模、多中心、前瞻性的臨床研究來明確其具體保護(hù)機(jī)制。endprint