藥品微生物限度檢查不合格的原因及預(yù)防措施

蒲艷

摘要：眾所周知，藥品不同于其他商品，國(guó)家對(duì)藥品的控制非常嚴(yán)格，各項(xiàng)指標(biāo)都要合格才允許出廠，微生物限度檢查就是其中之一。近年來(lái)，新版GMP為了更好的保證藥品的質(zhì)量，對(duì)微生物限度的檢查也越來(lái)越嚴(yán)格，藥品生產(chǎn)企業(yè)也加大力度，嚴(yán)格把關(guān)，一旦微生物限度檢查不合格，就要立即分析其原因，并要時(shí)刻做好預(yù)防措施，避免不合格的發(fā)生。

關(guān)鍵詞：藥品微生物 限度檢查不合格 原因 預(yù)防措施

中圖分類號(hào)：R927 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672-3791（2015）02（a）-0000-00

引言

微生物限度檢查法是檢查非規(guī)定滅菌制劑及其原料、輔料受微生物污染程度的方法。檢查項(xiàng)目包括細(xì)菌數(shù)、霉菌數(shù)、酵母菌數(shù)及控制菌檢查。藥品檢驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)不合格現(xiàn)象，大多出現(xiàn)在每個(gè)劑型的初次配制后，原因有很多。通過(guò)多年在藥品生產(chǎn)與檢驗(yàn)工作中的學(xué)習(xí)，總結(jié)出了一些藥品微生物限度檢查不合格的原因及預(yù)防措施。

1.藥品微生物限度檢查不合格的原因

1.1生產(chǎn)設(shè)備

經(jīng)常使用的生產(chǎn)設(shè)備清洗不徹底，滅菌不充分，這些都會(huì)使生產(chǎn)的藥品受到污染。

1.2生產(chǎn)工序

在藥品生產(chǎn)中，要經(jīng)過(guò)配料、制粒等許多個(gè)環(huán)節(jié)，會(huì)受到各種因素的影響，容易使藥品的質(zhì)量發(fā)生改變。如濕度太大，不利于制粒，也易使微生物繁殖；滅菌方法不當(dāng)，會(huì)使微生物限度檢查受到影響。

1.3 中藥材

中藥制劑多以生藥材粉制備。生藥材粉沒(méi)有經(jīng)過(guò)消毒處理，所以在對(duì)微生物限度檢查過(guò)程中，常會(huì)出現(xiàn)不合格現(xiàn)象。

1.4 人員

生產(chǎn)操作人員在藥品生產(chǎn)過(guò)程中及微生物檢驗(yàn)員在微生物檢查過(guò)程中，如果操作不當(dāng)都有可能污染藥品，導(dǎo)致藥品微生物限度檢查不合格。

1.5檢驗(yàn)方法

微生物檢驗(yàn)方法出現(xiàn)了錯(cuò)誤導(dǎo)致無(wú)法得出真實(shí)的結(jié)果。

1.6環(huán)境

藥品生產(chǎn)的潔凈區(qū)和藥品檢驗(yàn)的微生物限度檢查室及操作臺(tái)的環(huán)境監(jiān)測(cè)必須符合規(guī)定，環(huán)境監(jiān)測(cè)的項(xiàng)目包括沉降菌檢測(cè)和懸浮粒子檢測(cè)等，如果有一項(xiàng)不合格，都有可能導(dǎo)致微生物限度檢查不合格。

2.藥品微生物限度檢查不合格的預(yù)防措施

（1）藥品生產(chǎn)的潔凈區(qū)和藥品檢驗(yàn)的微生物限度檢查室，必須定期消毒，如采用臭氧滅菌等。潔凈室每次使用完畢清潔干凈；生產(chǎn)期間，每周臭氧消毒一次。對(duì)藥品的生產(chǎn)設(shè)備和檢驗(yàn)設(shè)備每月交替使用0.2%新潔爾滅溶液和75%乙醇溶液進(jìn)行日常擦拭消毒。擦拭操作臺(tái)和墻壁的絲光毛巾不能混用，并應(yīng)嚴(yán)格分開(kāi)。

（2）控制制備時(shí)間，如提取時(shí)間、攪拌時(shí)間都不能太長(zhǎng)，微生物限度檢驗(yàn)時(shí)間也要控制在1小時(shí)之內(nèi)，以防染菌。

（3）制備含生藥材粉的藥品，應(yīng)對(duì)生藥材粉先進(jìn)行滅菌處理。采用紫外線照射法或高溫干燥法滅菌。

（4）微生物檢驗(yàn)員要確保檢測(cè)方法正確，使菌落計(jì)數(shù)結(jié)果真實(shí)可信。

（5）藥品生產(chǎn)操作人員和檢驗(yàn)人員要嚴(yán)格執(zhí)行GMP操作規(guī)程，上崗前進(jìn)行培訓(xùn)。建立牢固的無(wú)菌觀念，不要認(rèn)為微生物限度范圍比較寬，因此操作馬虎，這樣容易造成供試品的再次污染，不能真實(shí)的反映供試品的染菌情況。所以檢驗(yàn)者在檢驗(yàn)過(guò)程中的每一個(gè)環(huán)節(jié)，每一個(gè)操作，都要認(rèn)真謹(jǐn)慎，對(duì)樣品負(fù)責(zé)。

（6）檢驗(yàn)者每次操作前的消毒處理必須徹底，不留死角，對(duì)檢驗(yàn)所用器具根據(jù)材料的性質(zhì)進(jìn)行相應(yīng)的滅菌，每年對(duì)干熱滅菌法和濕熱滅菌法所使用的設(shè)備進(jìn)行驗(yàn)證，干熱滅菌法一般用電熱恒溫干燥箱滅菌，采用生物指示劑枯草芽孢桿菌孢子進(jìn)行驗(yàn)證；濕熱滅菌法一般用高壓蒸汽滅菌器滅菌，采用生物指示劑嗜熱脂肪桿菌孢子進(jìn)行驗(yàn)證。打開(kāi)藥品包裝的工具，如剪刀等也應(yīng)消毒，檢驗(yàn)用的器具應(yīng)清洗干凈，再滅菌，吸管放液時(shí)不得接觸液面，樣品必須放盡。這些環(huán)節(jié)都有可能污染藥品，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)誤差，所以要根據(jù)具體情況建立科學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，正確熟練的掌握無(wú)菌操作。

（7）化驗(yàn)室無(wú)菌室的操作間內(nèi)不應(yīng)安裝下水道，照明燈應(yīng)嵌在天花板內(nèi)，室內(nèi)墻壁應(yīng)平整光滑，室內(nèi)溫濕度、壓差和潔凈級(jí)別應(yīng)準(zhǔn)確無(wú)誤，凈化工作臺(tái)的潔凈度屬于B級(jí)，無(wú)菌室屬于C級(jí)，固體制劑車間潔凈區(qū)屬于D級(jí)，定期檢測(cè)化驗(yàn)室凈化工作臺(tái)、無(wú)菌室和車間潔凈區(qū)的沉降菌和懸浮粒子，還應(yīng)每年一次連續(xù)三次進(jìn)行沉降菌、懸浮粒子檢測(cè)，測(cè)試人員必須穿戴符合環(huán)境潔凈度的無(wú)菌服。靜態(tài)測(cè)試時(shí)，室內(nèi)測(cè)試人員不得多于二人。檢測(cè)結(jié)果不合格時(shí)不得使用，重新消毒，再次檢驗(yàn)合格后，方可使用。

（8）微生物檢驗(yàn)必須要有標(biāo)準(zhǔn)菌株且生物學(xué)特征必須典型穩(wěn)定，并對(duì)菌種的保存與管理制定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，對(duì)菌種的購(gòu)買、保存、領(lǐng)用、確認(rèn)試驗(yàn)以及銷毀進(jìn)行詳細(xì)記錄。

（9）現(xiàn)在培養(yǎng)基配制大多使用干粉培養(yǎng)基，使用方便，但極易吸潮，故需妥善保存，用后需將蓋蓋緊，并存放于陰涼、干燥處，保證培養(yǎng)基的質(zhì)量，若出現(xiàn)結(jié)塊現(xiàn)象，請(qǐng)勿使用。新鮮配制的培養(yǎng)基應(yīng)在2℃～25℃避光保存，但不得凍結(jié)，保存時(shí)間不得過(guò)3周。每一批培養(yǎng)基均要進(jìn)行適應(yīng)性檢查試驗(yàn)。為了避免因過(guò)度受熱造成培養(yǎng)基質(zhì)量下降和微生物污染，固體培養(yǎng)基的再融化只允許一次。

（10）高壓蒸汽滅菌法是最常用最有效的濕熱滅菌方法，要選擇合格的壓力蒸氣滅菌器，操作人員還必須了解高壓蒸汽滅菌器的原理并按標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作，要注意排盡鍋內(nèi)的冷空氣，否則雖然壓力達(dá)到，溫度卻達(dá)不到要求，滅菌就可能不徹底。每次滅菌時(shí)，都要用壓力蒸汽滅菌化學(xué)指示卡對(duì)滅菌效果進(jìn)行監(jiān)測(cè)，將化學(xué)指示卡放置于玻璃缸等容器內(nèi)，以免影響對(duì)化學(xué)指示卡監(jiān)測(cè)結(jié)果的測(cè)定。經(jīng)過(guò)一個(gè)滅菌周期處理后，指示色塊顏色的深度達(dá)到或超過(guò)指示卡標(biāo)準(zhǔn)色塊的顏色，表示所達(dá)到的溫度和濕度持續(xù)時(shí)間已滿足滅菌所需條件應(yīng)放入必要的監(jiān)視指標(biāo)。

（11）菌落數(shù)計(jì)數(shù)時(shí)，當(dāng)菌落生長(zhǎng)小而密集時(shí)，極易發(fā)生誤差，應(yīng)仔細(xì)觀察，要分清供試品顆粒、培養(yǎng)基沉淀物、氣泡，如肉眼看不清，可用放大鏡或顯微鏡直接觀察或挑取可疑物涂片鏡檢，也可以適當(dāng)延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間進(jìn)一步觀察。

（12）藥典規(guī)定菌落蔓延生長(zhǎng)成片，不宜計(jì)數(shù)。這是由于平皿濕度過(guò)大，使菌落蔓延。預(yù)防措施是用開(kāi)蓋干燥法或換陶瓦蓋法。

（13）不同的培養(yǎng)時(shí)間對(duì)樣品細(xì)菌總數(shù)計(jì)數(shù)結(jié)果也有影響，樣品經(jīng)24h培養(yǎng)后，有的菌落很小，容易漏掉，培養(yǎng)48h后，菌落就會(huì)變大，而且還有新長(zhǎng)出來(lái)的菌落，培養(yǎng)72h后，菌落數(shù)一般增加不多，但會(huì)變大，影響結(jié)果的觀察計(jì)數(shù)。培養(yǎng)24h和培養(yǎng)48h計(jì)數(shù)結(jié)果有明顯差異，后者合格率明顯降低，所以在規(guī)定的培養(yǎng)環(huán)境下，應(yīng)嚴(yán)格遵守培養(yǎng)時(shí)間，保證樣品中菌落總數(shù)的準(zhǔn)確性。

3 總結(jié)

當(dāng)今社會(huì)，隨著人們生活水平的日益提高，醫(yī)藥領(lǐng)域也備受關(guān)注，做好藥，做放心藥是重中之重，新版GMP對(duì)藥品質(zhì)量的管理力度日益加大，藥品的微生物限度檢查是保證藥品質(zhì)量的重要指標(biāo)，實(shí)驗(yàn)者要有高度的職業(yè)道德和科學(xué)態(tài)度，嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程操作，減少或避免實(shí)驗(yàn)中可能造成的誤差，使微生物檢查結(jié)果真實(shí)可信。

參考文獻(xiàn)：

1《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版

2《藥品GMP指南》