孔忠希
摘 要:目的:研究野菊花中黃酮類化合物對(duì)免疫調(diào)節(jié)及肝保護(hù)的作用。方法:制備小鼠免疫性肝損傷模型,按照高、中、低三種劑量進(jìn)行給藥,共分為12組,觀察不同藥物劑量對(duì)免疫性肝損傷的影響情況。結(jié)果:實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,模型組ALT(54.8±6.3)、AST(69.5±4.3)、IFN-Y(164.2±4.2)、IFN-ɑ(170.5±5.1)均高于空白組(20.4±2.3)、(19.2±5.7)、(132.8±1.6),模型組肝臟指數(shù)(5.6±0.6)、MDA(2.7±0.3)與空白組(4.8±0.2)、(1.3±0.1)存在明顯差異,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論:野菊花中的活性部分能夠起到雙向免疫調(diào)節(jié)作用,花中黃酮類化合物具有肝保護(hù)作用。
關(guān)鍵詞:野菊花 黃酮類 肝保護(hù)
中圖分類號(hào):R9 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1672-3791(2015)02(b)-0000-00
黃酮類化合物是一種植物在自然生長(zhǎng)過(guò)程中產(chǎn)生的一些次級(jí)代謝產(chǎn)物,廣泛存在于蔬果和藥用植物中,黃酮類化合物對(duì)免疫功能的研究越來(lái)越受到重視,其在NK細(xì)胞、T、B淋巴細(xì)胞以及嗜酸性、嗜堿性粒細(xì)胞的調(diào)節(jié)功能已經(jīng)得以證實(shí)[1-2]。本文主要對(duì)野菊花中黃酮類化合物對(duì)免疫調(diào)節(jié)和肝保護(hù)作用進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究,現(xiàn)報(bào)道如下。
1資料與方法
1.1實(shí)驗(yàn)資料
對(duì)野菊花各部位進(jìn)行提取,F(xiàn)CI-A/B/C部位各濃度藥物以丙二醇和DMSO溶解后,加入羧甲基纖維素鈉,丙二醇含量為20%,DMSO含量為1%;選用健康小鼠作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,共72只,體重在20g左右;實(shí)驗(yàn)試劑包括谷草轉(zhuǎn)氨酶測(cè)定試劑盒、谷丙轉(zhuǎn)氨酶測(cè)定試劑盒、丙二醛測(cè)定試劑盒、小鼠腫瘤壞死因子ɑ和Y干擾素酶聯(lián)免疫分析試劑盒;借助移液槍、離心機(jī)、切片機(jī)、溫育箱、分析天平、雙波長(zhǎng)酶標(biāo)儀及光學(xué)顯微鏡等儀器來(lái)輔助完成實(shí)驗(yàn)。
1.2實(shí)驗(yàn)方法
①實(shí)驗(yàn)分組。各部位按照高、中、低三種劑量進(jìn)行給藥,共分為12組,每組6只小鼠,具體如下:FCI-A高劑量、中劑量和低劑量組,分別給藥20mg/10g,10mg/10g,5mg/10g;FCI-B高劑量、中劑量和低劑量組,分別給藥30mg/10g,16mg/10g,6mg/10g;FCI-C高劑量、中劑量和低劑量組,分別給藥60mg/10g,30mg/10g,10mg/10g;其余3組為空白組、模型組和陽(yáng)性組。②制備小鼠免疫性肝損傷模型。分組后進(jìn)行灌胃給藥,連續(xù)給藥1周,首日和第2d各給藥2次,分上下午,其余5d各給藥1次,最后1d給藥后,除空白組禁食不禁水12h,尾注射PBS(20mg/kg)外,其余各組禁食不禁水14h,尾注射Con A(20mg/kg)。③摘眼球采血并保存,借助離心機(jī)分離血清待測(cè),離心機(jī)調(diào)至1500rpm/min,時(shí)間為10min,保存溫度為-20℃。④處死小鼠,剖腹取肝臟進(jìn)行稱重,找到病變部位,放置于4%甲醛中固定,其余部分保存待用,測(cè)量肝組織MDA含量。實(shí)驗(yàn)檢測(cè)中,各項(xiàng)生化指標(biāo)需嚴(yán)格按照試劑盒操作規(guī)范進(jìn)行,制作病理切片進(jìn)行觀察[3]。
1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
以SPSS16.0軟件對(duì)所獲數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,用(±s)表示數(shù)據(jù),定量資料由轉(zhuǎn)化而來(lái),采用方差檢驗(yàn),P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,F(xiàn)CI-A低劑量組ALT、AST、IFN-Y、IFN-ɑ、肝臟指數(shù)和MDA分別為(40.7±9.4),(29.2±3.1),(189.7±9.8),(176.8±6.9),(4.9±0.2)和(2.1±0.2);FCI-A中劑量組為(45.8±8.3),(39.6±7.4),(178.8±3.6),(132.7±5.6),(5.1±0.3)和(1.4±0.8);FCI-A高劑量組為(37.2±6.8),(22.7±6.4),(170.7±4.2),(139.2±3.4),(5.0±0.4)和(1.4±0.3);從低劑量到中劑量,各指數(shù)有所上升,從中劑量到高劑量,各指數(shù)又開始下降,F(xiàn)CI-B劑量組和FCI-C劑量組也是如此。
通過(guò)對(duì)陽(yáng)性組、空白組和模型組比較分析,陽(yáng)性組的為(21.1±3.1),(20.2±1.2),(178.8±3.6),(154.1±3.3),(5.1±0.1)和(1.3±0.2);空白組為(20.4±2.3),(19.2±5.7),(132.8±1.6),(145.7±2.1),(4.8±0.2)和(1.3±0.1);模型組為(54.8±6.3),(69.5±4.3),(164.2±4.2),(170.5±5.1),(5.6±0.6)和(2.7±0.3)。模型組ALT、AST、IFN-Y、IFN-ɑ均高于空白組,模型組肝臟指數(shù)、MDA與空白組存在明顯差異,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
3 討論
藥用植物中的黃酮類化合物含量較為豐富,本次實(shí)驗(yàn)主要針對(duì)野菊花進(jìn)行研究,結(jié)果顯示,隨著給藥劑量的增加,F(xiàn)CI-A和FCI-B組血清中ALT、AST含量升高的抑制作用由強(qiáng)變?nèi)踉僮儚?qiáng);隨著野菊花劑量的增加,其抑制免疫性肝損傷所致的免疫因子的能力也在增強(qiáng);模型組肝臟指數(shù)(5.6±0.6)、MDA(2.7±0.3)與空白組(4.8±0.2)、(1.3±0.1)存在明顯差異,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。由此證實(shí),野菊花中的活性部分能夠起到雙向免疫調(diào)節(jié)作用,花中黃酮類化合物具有肝保護(hù)作用。
參考文獻(xiàn)
[1]陳園園.野菊花中萜類、黃酮類化合物對(duì)免疫調(diào)節(jié)和肝保護(hù)的協(xié)同作用研究[D].鄭州大學(xué),2012.
[2]梅鈞,湯自豪.藥用植物中黃酮類化合物免疫調(diào)節(jié)作用研究進(jìn)展[J].九江醫(yī)學(xué),2009,13(4):90-92.
[3]陳曉明,倪峰.植物黃酮類化合物對(duì)機(jī)體免疫調(diào)節(jié)作用研究進(jìn)展[J].福建中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2010,14(2):69-70.