• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    紫丹銀屑顆粒對銀屑病模型小鼠的HaCaT細胞周期和血清IL-2、TNF-α的影響

    2016-01-13 03:24:58李偉妮,李忠原,崔文
    藥學(xué)研究 2015年3期
    關(guān)鍵詞:銀屑病顆粒小鼠

    紫丹銀屑顆粒對銀屑病模型小鼠的HaCaT細胞周期和血清IL-2、TNF-α的影響

    李偉妮1,李忠原1,崔文2,王平3,孫虎3,李百開1

    (1.煙臺東誠大洋制藥有限公司,山東 煙臺 265500;2.青島大學(xué)附屬醫(yī)院,山東 青島 266003;

    3.山東省中醫(yī)藥研究院,山東 濟南 250014)

    摘要:目的探討紫丹銀屑顆粒對銀屑病樣小鼠模型的治療作用和作用機制,為臨床應(yīng)用提供參考。方法將試驗動物隨機分為正常對照組、模型對照組、紫丹銀屑高、中、低劑量組及陽性對照組,每組10只,灌胃給藥。采用流式細胞分析儀分析紫丹銀屑顆粒對HaCaT細胞周期的影響(在96孔板上依次設(shè)定紫丹銀屑顆粒2、4、8、16、32 g·L-1組,維A酸片8 g·L-1組,空白細胞組);采用動物體內(nèi)實驗,觀察紫丹銀屑顆粒對銀屑病小鼠模型血清中白介素-2、腫瘤壞死因子含量的影響。結(jié)果體外試驗顯示,與模型組比較,紫丹銀屑顆粒高、中劑量組細胞增殖數(shù)量顯著減少,有顯著性差異(P<0.05);體內(nèi)試驗顯示,與模型組比較,紫丹銀屑顆粒高、中劑量組S期細胞數(shù)量顯著減少,有顯著性差異(P<0.05)。結(jié)論紫丹銀屑顆粒能夠顯著抑制人永生化表皮細胞增殖,并顯著降低模型動物血清白介素-2、腫瘤壞死因子的含量,這可能是紫丹銀屑顆粒治療銀屑病的作用機制之一。

    關(guān)鍵詞:紫丹銀屑顆粒;HaCaT細胞;白介素-2;腫瘤壞死因子;小鼠

    作者簡介:李偉妮,女,研究方向:中藥學(xué),E-mail:liweini@163.com

    通訊作者:王平,女,副研究員,研究方向:中藥藥理,Tel:0531-82949812,E-mail:wangpingjinan@163.com

    中圖分類號:R965文獻標識碼:A

    Effect on the HaCaT cell generation cycle and serum IL-2,TNF-α of

    psoriasis sample model mice treating by Zidanyinxie Particle

    LIWei-ni1,LIZhong-yuan1,CUIWen2,WANGPing3,SUNHu3,LIBai-kai1

    (1.YantaiDongchengDayangPharmaceuticalCo.,Ltd.,Yantai265500,China;2.TheAffiliated

    HospitalofQingdaoUniversity,Qingdao266003,China;3.DepartmentofPharmacology,

    ShandongAcademyofChineseMedicine,Jinan250014,China)

    Abstract:ObjectiveTo investigate the effect and mechanism of Zidanyinxie Particle for mice psoriasis sample.MethodsAll the mice were randomly divided into normal control group,model group,Zidanyinxie Particle high dosage group,Zidanyinxie Particle middle dosage group,Zidanyinxie Particle small dosage group,and positive control group,each group had 10 mice,gavaged.Prepared serum containing drug,concentration was Zidanyinxei Particle 2,4,8,16,32 g·L-1,Tretinoin Tablets 8 g·L-1.In vitro test,to detect the effect of Zidanyinxie Particle in HaCaT cell generation cycle;In vivo test,after giving relevant drugs,to observe serum IL-2 and TNF-α of vaginal epithelial pathological model mice.ResultsIn vitro experiments,compared with model control group,cell proliferation was significantly reduce in the Zidanyinxie Particle high dosage group,Zidanyinxie Particle middle dosage group,P<0.05.In vivo studies,compared with normal control group,the number of mitotic vaginal epithelial cells were significantly increased in model group,P<0.05,and compared with model control group,the number of mitotic vaginal epithelial cells were significantly decreased in Zidanyinxie Particle high dosage group,Zidanyinxie Particle middle dosage group,P<0.05.ConclusionZidanyinxie Particle could inhibited the proliferation of HaCaT cell and reduced the Serum IL-2,TNF-α content of mice model significantly,this may be one of the mechanisms of Zidanyinxie Particle in treating psoriasis.

    Key words:Zidanyinxie Particle;HaCaT cell;IL-2;TNF-α;Mice

    銀屑病是一種皮膚科常見的易反復(fù)發(fā)作的疾病,被世界衛(wèi)生組織定為十大頑疾之一。臨床表現(xiàn)為周身或者局部皮膚白色鱗屑,病理學(xué)表現(xiàn)為表皮細胞過度增殖及異常分化,炎癥細胞浸潤,真皮血管增生[1,2]。銀屑病根治困難,容易復(fù)發(fā),病程遷延日久,肌膚失養(yǎng),摧殘身體,給患者帶來極大的心理和生理負擔(dān),臨床迫切需要開發(fā)相應(yīng)的治療藥物。紫丹銀屑顆粒,是根據(jù)臨床經(jīng)驗方開發(fā)的新藥,用于治療血虛風(fēng)燥所致的銀屑病。通過體外細胞試驗和體內(nèi)動物試驗對其作用機理進行了探討,分析紫丹銀屑顆粒對人永生化表皮細胞(HaCaT細胞)周期的影響,觀察紫丹銀屑顆粒對銀屑病小鼠模型血清中白介素-2(IL-2)、腫瘤壞死因子(TNF-α)含量的影響。

    1試驗材料

    1.1試驗動物ICR小鼠,SPF級,110只,雌性,體重18~22 g,購自中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院動物研究所,動物許可證號:SCXK(京)2009-0007。

    1.2試驗藥物紫丹銀屑顆粒(生產(chǎn)批號:110602,煙臺東誠大洋制藥公司);維A酸片(生產(chǎn)批號:H10970054,山東良福制藥有限公司);秋水仙堿(生產(chǎn)批號:111103,西雙版納藥業(yè)有限責(zé)任公司);己烯雌酚(生產(chǎn)批號:100318,天津金耀氨基酸有限公司)。

    1.3試驗試劑HaCaT細胞(北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院細胞資源中心);IL-2試劑盒(上海邦奕生物科技有限公司); TNF-α試劑盒(上海富眾生物科技發(fā)展有限公司);胎牛血清(美國GLBCO公司);細胞周期及凋亡檢測試劑盒(RNase+PI,南京凱基生物科技公司);RPM1640培養(yǎng)基(美國GLBCO公司)。

    1.4試驗儀器超凈工作臺(蘇州凈化設(shè)備儀器廠);HF151UVCO2培養(yǎng)箱(上海力新實業(yè)有限公司); BIO-RAD680酶標儀(美國BIO-RAO公司);TDL-5臺式離心機(上海安亭科學(xué)儀器廠);DNP-9052型電熱恒溫培養(yǎng)箱(上海驚宏實驗設(shè)備有限公司);FAC scalibur流式細胞分析儀及軟件(美國B&D公司)。

    2試驗方法

    2.1體外試驗

    2.1.1HaCaT細胞培養(yǎng)HaCaT細胞用含有10%胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基37 ℃、5% CO2、飽和濕度條件下傳代培養(yǎng),選對數(shù)生長期細胞進行試驗。

    2.1.2紫丹銀屑顆粒含藥血清的制備取50只雌性小鼠,隨機分為5組,每組10只,分別為正常對照組、紫丹銀屑顆粒低、中、高劑量組、維A酸片組。參考《藥理實驗方法學(xué)》[3]中人與小鼠之間的劑量換算方式,折算小鼠的給藥量,分別設(shè)置紫丹銀屑顆粒高劑量組(2.16 g·kg-1)、紫丹銀屑顆粒中劑量組(1.08 g·kg-1)、紫丹銀屑顆粒低劑量組(0.54 g·kg-1),維A酸片組(2.70 g·kg-1),正常對照組給予等體積的蒸餾水。連續(xù)灌胃給藥5 d,每日1次。末次給藥0.5 h后,摘眼球取血,棄去第1滴血液。血液靜置1 h,3 000 rpm,離心5~10 min,取血清,56 ℃、30 min滅活,0.22 μm微孔濾膜除菌分裝,稀釋成10%濃度的含藥血清。

    2.1.3紫丹銀屑顆粒對HaCaT細胞周期的影響將對數(shù)生長期的HaCaT細胞按照每毫升2×105的濃度接種于96孔板上,依次設(shè)定為紫丹銀屑顆粒2、4、8、16、32 g·L-1組,空白細胞組,維A酸片8 g·L-1組,每組3個復(fù)孔。藥物干預(yù)48 h后,消化貼壁生長的HaCaT細胞收集于EP管中,用預(yù)冷的PBS吹勻,再以2 000 rpm,離心15 min,棄去上清液,加入4 ℃預(yù)冷75%乙醇3 mL,固定30 min后再次離心,重懸,用流式細胞儀測定細胞周期。試驗結(jié)果進行組間統(tǒng)計分析。

    2.2體內(nèi)試驗

    2.2.1建立銀屑病動物模型將60只雌性小鼠,隨機分為6組,分別為正常對照組、模型對照組、紫丹銀屑顆粒高劑量組(2.16 g·kg-1)、紫丹銀屑顆粒中劑量組(1.08 g·kg-1)、紫丹銀屑顆粒低劑量組(0.54 g·kg-1),維A酸片組(2.70 g·kg-1),每組10只。除正常對照組以外小鼠均腹腔注射己烯雌酚,每次0.2 mg,每天1次,連續(xù)3 d。

    2.2.2紫丹銀屑顆粒對銀屑病動物模型血清IL-2、TNF-α的影響從造模第4天開始,各給藥組分別給予相對應(yīng)的藥液,正常對照組與模型對照組給予等體積的蒸餾水,連續(xù)給藥5 d。于試驗第9天灌胃后2 h后各組小鼠腹腔注射秋水仙堿2 mg·kg-1,使有絲分裂停止于中期。4 h后各組小鼠摘眼球取血,離心后,取血清,分別檢測血清IL-2、TNF-α的數(shù)值,試驗結(jié)果進行組間統(tǒng)計分析。

    3試驗結(jié)果

    3.1體外試驗中各組HaCaT細胞周期比較 試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)細胞的各個周期發(fā)生了改變。與模型組比較,紫丹銀屑顆粒高、中劑量組S期細胞數(shù)量顯著減少,有顯著性差異(P<0.05);與維A酸組的細胞數(shù)量接近,P>0.05,結(jié)果見表1。

    表1 各組小鼠HaCaT細胞周期比較

    注:與正常對照組比較,*P<0.05;與模型組比較,▲P<0.05

    3.2各組血清中IL-2、TNF-α含量結(jié)果試驗結(jié)果顯示,與模型對照組相比,紫丹銀屑顆粒高、中、低劑量組均能夠顯著降低造模大鼠血液中IL-2、TNF-α的含量,其中高劑量試驗結(jié)果有非常顯著性差異(P<0.01),中劑量試驗結(jié)果有顯著性差異(P<0.05),結(jié)果見表2。

    表2 紫丹銀屑顆粒對小鼠血清IL-2、TNF-α的含量

    注:與正常對照組比較,*P<0.05;與模型對照組比較,▲P<0.05,▲▲P<0.01

    4討論

    銀屑病是一種由于多種因素參與的慢性免疫性皮膚病,其致病機理復(fù)雜,發(fā)病率高。主要的病理改變?yōu)榻琴|(zhì)增厚,角化不全,表現(xiàn)為皮膚銀白色鱗屑,屬于中醫(yī)“白疕”范疇[4,5]。中醫(yī)學(xué)認為銀屑病的病因病機為血熱內(nèi)蘊、陰血耗傷,生風(fēng)致燥,肌膚失養(yǎng),則起白屑。即本病病因在血,病位在肌表。在長期的治療過程中,發(fā)現(xiàn)銀屑病患者大都畏寒喜熱,同時伴有口干舌燥,心煩易怒等,故認為銀屑病久病出現(xiàn)陽虛寒凝,陰血耗傷,氣滯血瘀,使皮膚失于濡養(yǎng)而發(fā)病[6,7]。 紫丹銀屑顆粒,由紫硇砂、決明子、附子(制)、干姜、桂枝、白術(shù)、白芍、黃芪、丹參、降香等10味中藥組成,具有溫養(yǎng)活血、養(yǎng)血祛風(fēng)、潤燥止癢的功效[8],臨床治療銀屑病療效確切。體外試驗結(jié)果顯示,紫丹銀屑顆粒具有顯著抑制HaCaT細胞過度增殖, 促使細胞的自然生長平衡,最終維持表皮層的穩(wěn)定。同時,紫丹銀屑顆粒能夠降低小鼠血清IL-2、TNF-α含量的含量,從而減輕銀屑病發(fā)病后的炎癥反應(yīng)。本研究為臨床合理用藥提供了參考。

    參考文獻:

    [1]鄭明警,馬麗俐.大青葉等清熱藥對HaCaT細胞增殖的影響[J].浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志,2013,23(4):262.

    [2]韓玲.銀屑病藥效學(xué)動物模型及其在中藥新藥研究中應(yīng)用的思考[J].中藥藥理與臨床,2006,22(6):73-75.

    [3]徐淑云,卞如濂,陳修.藥理實驗方法學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1982.

    [4]鹿見香,李锘,樸珉貞,等.祛銀顆粒對角質(zhì)形成細胞生長因子誘導(dǎo)的HaCaT細胞增殖及分泌TNF-α的影響[J].中國中醫(yī)急癥,2014,23(6):1025-1028.

    [5]康爾恂,李新宇,鄭家潤.角質(zhì)形成細胞生長因子對HaCaT細胞增殖的影響[J].中國麻風(fēng)皮膚病雜志,2006,22(2):108-110.

    [6]封紹奎,雷鵬程,萬俊增.皮膚性病學(xué)[M].北京:中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)出版社,2000.

    [7]常立新,劉小雷,張銘杰,等.百應(yīng)膠囊治療銀屑病的實驗性藥效學(xué)研究[J].中國藥物與臨床,2009,9(4):327.

    [8]陶萍,聶洪邵,徐晴嬌,等.紫丹銀屑顆粒治療銀屑病的臨床觀察[J].齊魯藥事,2010,29(6):372-373.

    猜你喜歡
    銀屑病顆粒小鼠
    Efficacy and safety of Mianyi granules (免疫Ⅱ顆粒) for reversal of immune nonresponse following antiretroviral therapy of human immunodeficiency virus-1:a randomized,double-blind,multi-center,placebo-controlled trial
    尋常型銀屑病治驗1則
    小鼠大腦中的“冬眠開關(guān)”
    要讓顆粒都歸倉
    心聲歌刊(2019年1期)2019-05-09 03:21:32
    米小鼠和它的伙伴們
    疏風(fēng)定喘顆粒輔料的篩選
    中成藥(2017年4期)2017-05-17 06:09:29
    Avp-iCre轉(zhuǎn)基因小鼠的鑒定
    尋常型銀屑病合并手指Bowen病一例
    鈣泊三醇倍他米松軟膏在銀屑病治療中的應(yīng)用
    妊娠與銀屑病
    自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91 | av又黄又爽大尺度在线免费看| 亚洲人成网站在线观看播放| 最近的中文字幕免费完整| 国产综合精华液| 丰满人妻一区二区三区视频av| 91久久精品电影网| 欧美激情久久久久久爽电影| 国产成人a区在线观看| 97在线人人人人妻| 亚洲最大成人手机在线| 亚洲自偷自拍三级| 国产精品久久久久久精品电影| 91aial.com中文字幕在线观看| av网站免费在线观看视频| 午夜福利高清视频| 纵有疾风起免费观看全集完整版| .国产精品久久| 亚洲av二区三区四区| 久久久久国产网址| 久久久久久久久久成人| 久久久精品免费免费高清| 久久久欧美国产精品| 日本一本二区三区精品| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 久久久色成人| 久久久色成人| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | 国产一区二区三区av在线| 国产精品福利在线免费观看| av网站免费在线观看视频| 亚洲精品aⅴ在线观看| 久久久久久九九精品二区国产| 九九在线视频观看精品| 大陆偷拍与自拍| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 国产精品一区二区在线观看99| 老司机影院毛片| 亚洲经典国产精华液单| 精品酒店卫生间| 另类亚洲欧美激情| 国产精品人妻久久久久久| 国产欧美日韩精品一区二区| av专区在线播放| 国产在线男女| 男人添女人高潮全过程视频| 一级毛片aaaaaa免费看小| 免费av观看视频| 熟女av电影| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 国产久久久一区二区三区| 成人二区视频| 嘟嘟电影网在线观看| 91精品国产九色| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 18禁动态无遮挡网站| 高清在线视频一区二区三区| 国产久久久一区二区三区| 国产高清三级在线| 亚洲av成人精品一区久久| 涩涩av久久男人的天堂| 亚洲精品日本国产第一区| 亚洲欧美清纯卡通| 99久久精品国产国产毛片| 国内精品宾馆在线| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 少妇高潮的动态图| 内地一区二区视频在线| 中文字幕亚洲精品专区| 高清毛片免费看| 国产成人精品一,二区| 国产精品人妻久久久久久| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 啦啦啦啦在线视频资源| 日韩一区二区三区影片| 99热全是精品| 欧美 日韩 精品 国产| 国产69精品久久久久777片| 如何舔出高潮| 精品人妻一区二区三区麻豆| 久热这里只有精品99| 91精品一卡2卡3卡4卡| 成人午夜精彩视频在线观看| 国产色婷婷99| 国产大屁股一区二区在线视频| 观看免费一级毛片| 一级爰片在线观看| 夜夜爽夜夜爽视频| 人妻 亚洲 视频| 欧美激情国产日韩精品一区| 在线精品无人区一区二区三 | 91精品一卡2卡3卡4卡| 亚洲无线观看免费| 中国美白少妇内射xxxbb| 欧美激情国产日韩精品一区| 亚洲经典国产精华液单| 在线看a的网站| 寂寞人妻少妇视频99o| 午夜日本视频在线| av免费观看日本| 日韩中字成人| 爱豆传媒免费全集在线观看| 一本色道久久久久久精品综合| 美女国产视频在线观看| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 丰满人妻一区二区三区视频av| 91久久精品国产一区二区三区| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 最近手机中文字幕大全| 久久久久网色| 久久精品国产亚洲网站| 特大巨黑吊av在线直播| 久久精品国产亚洲av天美| 国产伦精品一区二区三区四那| 91精品一卡2卡3卡4卡| 白带黄色成豆腐渣| 成人毛片a级毛片在线播放| 免费看a级黄色片| 看非洲黑人一级黄片| 亚洲国产欧美在线一区| 免费大片18禁| 国产成人a∨麻豆精品| 一本久久精品| 午夜激情福利司机影院| 亚洲成人一二三区av| 真实男女啪啪啪动态图| 欧美高清成人免费视频www| 久久女婷五月综合色啪小说 | 99久久中文字幕三级久久日本| 亚洲av福利一区| 最近中文字幕高清免费大全6| 99久久精品国产国产毛片| 性色av一级| 九九爱精品视频在线观看| 又爽又黄a免费视频| 日韩电影二区| 国产欧美日韩精品一区二区| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 中文天堂在线官网| 精品久久久久久久久亚洲| 777米奇影视久久| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 在线免费十八禁| 熟妇人妻不卡中文字幕| 亚洲图色成人| 亚洲人成网站在线观看播放| 三级经典国产精品| 日韩人妻高清精品专区| 久久久久精品久久久久真实原创| 国产成人精品婷婷| 午夜亚洲福利在线播放| 大片免费播放器 马上看| 2021少妇久久久久久久久久久| 国产成人aa在线观看| 亚洲va在线va天堂va国产| 免费在线观看成人毛片| 乱码一卡2卡4卡精品| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 国产有黄有色有爽视频| 26uuu在线亚洲综合色| a级毛片免费高清观看在线播放| av卡一久久| 久久久久性生活片| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 亚洲,一卡二卡三卡| 在线 av 中文字幕| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 国产探花在线观看一区二区| 免费大片黄手机在线观看| 亚洲av欧美aⅴ国产| 视频区图区小说| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 亚洲精品影视一区二区三区av| 99热6这里只有精品| 黄色欧美视频在线观看| 最近中文字幕2019免费版| 国产精品国产三级专区第一集| 精品人妻偷拍中文字幕| 国产午夜福利久久久久久| 亚洲av二区三区四区| 男女边摸边吃奶| 97超视频在线观看视频| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 国产 精品1| 久久久久久久亚洲中文字幕| 久久久久国产网址| 神马国产精品三级电影在线观看| 国产伦精品一区二区三区视频9| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 老司机影院成人| 丝瓜视频免费看黄片| 国产伦在线观看视频一区| 寂寞人妻少妇视频99o| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 亚洲精品国产成人久久av| 成年人午夜在线观看视频| 久久久a久久爽久久v久久| 黄色日韩在线| 日韩精品有码人妻一区| 久久精品久久精品一区二区三区| 亚洲欧美日韩另类电影网站 | 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 晚上一个人看的免费电影| 人妻 亚洲 视频| 三级国产精品欧美在线观看| 精品国产三级普通话版| 舔av片在线| 亚洲四区av| 日本三级黄在线观看| 亚洲欧美日韩东京热| 亚洲精品,欧美精品| 国产av不卡久久| 成人无遮挡网站| 亚洲国产成人一精品久久久| 中文资源天堂在线| 亚洲精品自拍成人| 99热网站在线观看| 日韩强制内射视频| 69av精品久久久久久| 麻豆乱淫一区二区| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 少妇高潮的动态图| 欧美日韩在线观看h| 欧美精品国产亚洲| av国产久精品久网站免费入址| 婷婷色av中文字幕| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 1000部很黄的大片| 成人国产av品久久久| 高清欧美精品videossex| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 国产伦精品一区二区三区四那| 亚洲电影在线观看av| av国产免费在线观看| 国产黄a三级三级三级人| 免费观看的影片在线观看| 国产乱人偷精品视频| 久久精品国产亚洲av涩爱| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 国产av不卡久久| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 成人亚洲精品av一区二区| 看黄色毛片网站| 亚洲,欧美,日韩| 成年女人看的毛片在线观看| 成人国产麻豆网| 久久人人爽av亚洲精品天堂 | 99九九线精品视频在线观看视频| 听说在线观看完整版免费高清| 亚洲欧美一区二区三区国产| 精品一区二区三卡| 欧美精品一区二区大全| 最近最新中文字幕免费大全7| 天天躁日日操中文字幕| 午夜精品国产一区二区电影 | 国产亚洲5aaaaa淫片| 高清av免费在线| 久久国内精品自在自线图片| 亚洲美女搞黄在线观看| 国产精品99久久久久久久久| 亚洲精品自拍成人| 久久人人爽人人爽人人片va| 毛片女人毛片| 日本一本二区三区精品| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 又大又黄又爽视频免费| 国产av国产精品国产| 一级av片app| 久久精品国产亚洲av涩爱| 街头女战士在线观看网站| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 男人爽女人下面视频在线观看| 一级爰片在线观看| 在线观看av片永久免费下载| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 一区二区三区四区激情视频| 久久99热6这里只有精品| av专区在线播放| 日日啪夜夜撸| 国产精品精品国产色婷婷| 国产中年淑女户外野战色| 日韩电影二区| 永久免费av网站大全| 搡女人真爽免费视频火全软件| av在线播放精品| 欧美极品一区二区三区四区| 免费大片黄手机在线观看| 日本色播在线视频| 色播亚洲综合网| 熟妇人妻不卡中文字幕| 99精国产麻豆久久婷婷| 最近最新中文字幕免费大全7| 亚洲四区av| 国产毛片在线视频| 国产精品无大码| 99九九线精品视频在线观看视频| 极品教师在线视频| 国产精品.久久久| 看非洲黑人一级黄片| 性插视频无遮挡在线免费观看| 亚洲久久久久久中文字幕| 免费看不卡的av| 亚洲最大成人中文| 插逼视频在线观看| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 蜜臀久久99精品久久宅男| 亚洲精品成人久久久久久| 久久久久久久久大av| 久久精品综合一区二区三区| 国产黄片视频在线免费观看| 六月丁香七月| 在线免费十八禁| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 久久久久久久亚洲中文字幕| 亚洲欧美成人精品一区二区| 国产成人精品福利久久| 在线a可以看的网站| 天堂中文最新版在线下载 | 亚洲av欧美aⅴ国产| 久久99精品国语久久久| 草草在线视频免费看| 国产精品三级大全| 久久精品久久精品一区二区三区| 免费观看无遮挡的男女| 婷婷色综合www| 乱系列少妇在线播放| 香蕉精品网在线| 真实男女啪啪啪动态图| 全区人妻精品视频| 亚洲精品色激情综合| 国产人妻一区二区三区在| 久久久欧美国产精品| 亚洲欧美日韩无卡精品| 日本av手机在线免费观看| 成年av动漫网址| 久久久久久久久久人人人人人人| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 国产高清有码在线观看视频| 久久久久久久久久久丰满| 九九在线视频观看精品| 国产成年人精品一区二区| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 国产色婷婷99| 久久热精品热| 激情五月婷婷亚洲| 婷婷色av中文字幕| 黄色日韩在线| 国产成年人精品一区二区| 乱系列少妇在线播放| 国产精品99久久久久久久久| 26uuu在线亚洲综合色| 亚洲国产精品成人综合色| 精品人妻一区二区三区麻豆| 成人毛片60女人毛片免费| 最近最新中文字幕免费大全7| 2021少妇久久久久久久久久久| 国产在线男女| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 国产av国产精品国产| 国产高清三级在线| 国产精品一区二区性色av| 欧美另类一区| 欧美成人精品欧美一级黄| 夫妻性生交免费视频一级片| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 丰满少妇做爰视频| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 久久精品人妻少妇| 99九九线精品视频在线观看视频| 国产精品蜜桃在线观看| 亚洲性久久影院| 精品一区二区免费观看| 男人爽女人下面视频在线观看| 赤兔流量卡办理| 99热国产这里只有精品6| av国产久精品久网站免费入址| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 欧美三级亚洲精品| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 一本一本综合久久| 精品一区二区三卡| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 青春草亚洲视频在线观看| 成人二区视频| 在线a可以看的网站| 爱豆传媒免费全集在线观看| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 少妇的逼水好多| 久久99精品国语久久久| 国产综合精华液| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 黄色日韩在线| 黑人高潮一二区| 丝袜脚勾引网站| 成人欧美大片| 亚洲自拍偷在线| 久久6这里有精品| 国产在线一区二区三区精| 看十八女毛片水多多多| av免费在线看不卡| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 在线播放无遮挡| 97超碰精品成人国产| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 黄色一级大片看看| 天堂中文最新版在线下载 | 熟女电影av网| 亚洲精品日韩在线中文字幕| eeuss影院久久| 日韩av免费高清视频| 精品久久久久久久久av| 大片免费播放器 马上看| 下体分泌物呈黄色| 国产精品久久久久久精品古装| 久久久精品免费免费高清| 成人亚洲精品一区在线观看 | 国产 精品1| 十八禁网站网址无遮挡 | 综合色av麻豆| 成年人午夜在线观看视频| 人人妻人人看人人澡| 免费观看a级毛片全部| 久久韩国三级中文字幕| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 欧美精品一区二区大全| 久久人人爽av亚洲精品天堂 | 亚洲va在线va天堂va国产| 日韩欧美一区视频在线观看 | 亚洲av免费在线观看| 久久久久性生活片| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 精品久久久久久久末码| 中文字幕久久专区| 少妇人妻一区二区三区视频| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 亚洲自拍偷在线| 嫩草影院入口| 国产色爽女视频免费观看| 成人毛片a级毛片在线播放| 综合色丁香网| 97在线人人人人妻| 成年女人看的毛片在线观看| av一本久久久久| 久热久热在线精品观看| 天堂中文最新版在线下载 | 人妻系列 视频| av.在线天堂| 观看美女的网站| 国产一区有黄有色的免费视频| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 春色校园在线视频观看| 成人免费观看视频高清| 有码 亚洲区| 欧美极品一区二区三区四区| 亚洲一区二区三区欧美精品 | 国产成人精品福利久久| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 久久99精品国语久久久| 国产精品熟女久久久久浪| 天天一区二区日本电影三级| 国产亚洲91精品色在线| 嫩草影院入口| 欧美日本视频| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 亚洲国产成人一精品久久久| 精品人妻偷拍中文字幕| 能在线免费看毛片的网站| 黄色配什么色好看| 听说在线观看完整版免费高清| 成人综合一区亚洲| 99久久精品热视频| 日韩电影二区| 久久久久久久久久久免费av| 国产一区二区亚洲精品在线观看| av线在线观看网站| 亚洲成人精品中文字幕电影| 亚洲国产色片| 精品国产露脸久久av麻豆| 国精品久久久久久国模美| av专区在线播放| 日日撸夜夜添| 午夜精品国产一区二区电影 | 97超视频在线观看视频| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 亚洲熟女精品中文字幕| 亚洲人与动物交配视频| av.在线天堂| 亚洲国产最新在线播放| 久久精品国产亚洲av涩爱| 在线观看国产h片| 成人一区二区视频在线观看| 免费av毛片视频| 熟妇人妻不卡中文字幕| 日本午夜av视频| 欧美丝袜亚洲另类| 亚洲第一区二区三区不卡| 大片免费播放器 马上看| 久久鲁丝午夜福利片| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 亚洲最大成人中文| 久久久久久国产a免费观看| tube8黄色片| www.色视频.com| 99热这里只有精品一区| 欧美日韩视频精品一区| 少妇熟女欧美另类| 三级国产精品欧美在线观看| av国产久精品久网站免费入址| 精品酒店卫生间| av国产精品久久久久影院| 欧美人与善性xxx| 久久久精品94久久精品| 日韩电影二区| 欧美精品国产亚洲| 国产综合懂色| 七月丁香在线播放| 亚洲精品一区蜜桃| 又大又黄又爽视频免费| 又爽又黄无遮挡网站| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 男人爽女人下面视频在线观看| 日本免费在线观看一区| 一级毛片我不卡| 欧美日韩综合久久久久久| 卡戴珊不雅视频在线播放| 国产成人一区二区在线| 国产av不卡久久| 老女人水多毛片| 亚洲国产精品专区欧美| 亚洲国产精品国产精品| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 少妇被粗大猛烈的视频| 免费看av在线观看网站| 亚洲真实伦在线观看| 日韩 亚洲 欧美在线| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 国内精品宾馆在线| 欧美xxⅹ黑人| 亚洲精品日本国产第一区| 大话2 男鬼变身卡| 国产精品嫩草影院av在线观看| av.在线天堂| 日本一二三区视频观看| 免费观看在线日韩| 97热精品久久久久久| 大陆偷拍与自拍| 日韩免费高清中文字幕av| 国产精品久久久久久久电影| 毛片女人毛片| 久久女婷五月综合色啪小说 | 91精品国产九色| 亚洲成人中文字幕在线播放| 婷婷色av中文字幕| 91aial.com中文字幕在线观看| 久久精品久久久久久久性| 亚洲自拍偷在线| 国产视频内射| 欧美日韩在线观看h| 婷婷色av中文字幕| 欧美日韩精品成人综合77777| 欧美成人精品欧美一级黄| 3wmmmm亚洲av在线观看| 欧美极品一区二区三区四区| 日本午夜av视频| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 看非洲黑人一级黄片| av线在线观看网站| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 国产日韩欧美在线精品| 五月玫瑰六月丁香| 一级毛片aaaaaa免费看小| 高清av免费在线| 可以在线观看毛片的网站| 国产成人精品婷婷| 日韩欧美一区视频在线观看 | 91狼人影院| 国产av国产精品国产| h日本视频在线播放| 美女内射精品一级片tv| 国产av码专区亚洲av| 亚洲精品国产av成人精品| 麻豆久久精品国产亚洲av| 97精品久久久久久久久久精品| 午夜日本视频在线| 国产精品一二三区在线看| 久久国产乱子免费精品| 欧美极品一区二区三区四区| 又大又黄又爽视频免费| 新久久久久国产一级毛片| 七月丁香在线播放| 精品久久久噜噜| 久久人人爽人人爽人人片va| 看黄色毛片网站| 免费观看性生交大片5| 免费av不卡在线播放| 久久久色成人| 亚洲精品视频女| 国产亚洲一区二区精品| 日韩欧美精品v在线| 久久人人爽人人片av| 只有这里有精品99| 国产视频内射| 美女主播在线视频| 亚洲不卡免费看| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 真实男女啪啪啪动态图| 麻豆国产97在线/欧美| 97超碰精品成人国产| 久久精品久久精品一区二区三区| 亚洲成色77777| 国产亚洲精品久久久com|