HBV病毒復(fù)制機(jī)制及慢性乙型肝炎藥物靶點(diǎn)

赫曉林, 黃建煒, 許瑞安, 崔秀靈

(1.廈門市海洋與基因工程藥物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，華僑大學(xué)生物醫(yī)學(xué)學(xué)院、分子藥物研究院 分子藥物教育部工程研究中心；2.廈門市疾病預(yù)防與控制中心， 福建 廈門　361021)

HBV病毒復(fù)制機(jī)制及慢性乙型肝炎藥物靶點(diǎn)

赫曉林1, 黃建煒2, 許瑞安1, 崔秀靈1

(1.廈門市海洋與基因工程藥物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，華僑大學(xué)生物醫(yī)學(xué)學(xué)院、分子藥物研究院 分子藥物教育部工程研究中心；2.廈門市疾病預(yù)防與控制中心， 福建 廈門361021)

中國(guó)圖書分類號(hào)：R-05；R373.21；R512.62；R978.7

摘要：乙型肝炎病毒 (HBV) 感染是一種嚴(yán)重影響公共衛(wèi)生與人體健康的全球性流行性疾病，盡管乙肝防治已有很大提高，但仍缺乏高效的藥物與手段。研究表明，肝損傷、肝衰竭程度與HBV及宿主免疫系統(tǒng)相互作用存在復(fù)雜關(guān)系。因而詳細(xì)地探明HBV生命周期和感染過程，為研究HBV藥物靶點(diǎn)和制定新的抗病毒策略提供前期堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)，意義重大。該文詳細(xì)介紹HBV病毒復(fù)制機(jī)制，并系統(tǒng)地闡述近年來新發(fā)現(xiàn)的和潛在的藥物靶點(diǎn)，為制備新型的抗HBV藥物提供參考。

關(guān)鍵詞：乙型肝炎病毒；病毒復(fù)制；作用靶點(diǎn)；裝配；NTPC；核心蛋白

乙肝病毒 (HBV) 是迄今所有已知可感染人體并具有獨(dú)立復(fù)制能力的雙鏈DNA病毒中最小且最有效的病毒，僅含3.2 kb，屬于嗜肝DNA病毒科。HBV可以引發(fā)急性和慢性肝炎，后者又可發(fā)展為肝硬化乃至肝癌。HBV感染呈全球性，全球約20億人曾感染過HBV，其中3.5多億人為慢性HBV感染患者，每年約有786 000人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和原發(fā)性肝細(xì)胞癌 (HCC)[1]。美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局已批準(zhǔn)兩個(gè)Ⅰ型干擾素和5個(gè)核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑用于乙肝的治療，但臨床效果仍然十分有限。雖然預(yù)防乙型肝炎的疫苗在很大程度上減少了慢性乙肝的發(fā)生，但疫苗接種覆蓋率存在巨大的地域差異性，美國(guó)高達(dá)90%，而南亞僅占56%[1]。防治指南先后強(qiáng)調(diào)了抗病毒是治療乙肝的重中之重，因而詳細(xì)闡明HBV的復(fù)制機(jī)制，并以此為基礎(chǔ)，尋找高效低毒的抗病毒作用靶點(diǎn)已成為防治工作者的研究重心，并可為新藥研究發(fā)現(xiàn)奠定堅(jiān)實(shí)的前期基礎(chǔ)。

1乙型肝炎病毒復(fù)制機(jī)制

HBV一旦進(jìn)入人體，病毒包膜表面上抗原大蛋白 (LHBs) N端27~46位氨基酸就與肝細(xì)胞膜上的鈉離子-牛磺膽酸協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 (NTPC)[2]結(jié)合，病毒顆粒通過受體介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞，再由細(xì)胞微管系統(tǒng)轉(zhuǎn)運(yùn)至核孔復(fù)合物。HBV病毒是240個(gè)由兩個(gè)核心蛋白(core protein, CP)以一定的夾角形成的二聚體亞單位，以一定的空間順序結(jié)合形成的對(duì)稱的20面體。病毒的CP經(jīng)未知磷酸化機(jī)制暴露核內(nèi)定位信號(hào)，與核孔復(fù)合物結(jié)合而脫去衣殼，HBV DNA進(jìn)入核內(nèi)，病毒顆粒由內(nèi)吞到入核這一過程需要細(xì)胞內(nèi)GTP激酶信號(hào)通路的參與。HBV DNA再經(jīng)目前機(jī)制未明的修復(fù)正鏈缺口轉(zhuǎn)變成超共價(jià)閉合環(huán)狀DNA (cccDNA)。有研究在穩(wěn)定轉(zhuǎn)染HBV DNA和DHBV DNA的細(xì)胞株中分離到去蛋白rcDNA (protein free-rcDNA, PF-RC)，并證明PF-RC是rcDNA到cccDNA轉(zhuǎn)變過程的中間體，可能是在胞質(zhì)核衣殼內(nèi)，通過某種具有絲氨酸蛋白酶活性的物質(zhì)切斷P蛋白酪氨酸殘基與負(fù)鏈5′ 端磷酸基團(tuán)間的磷酸二酯鍵形成的，rcDNA去蛋白化激發(fā)部分核衣殼解聚，暴露核定位信號(hào)，通過核孔復(fù)合體介導(dǎo)PF-RC轉(zhuǎn)運(yùn)到核內(nèi)，然后由宿主細(xì)胞相關(guān)酶把PF-RC轉(zhuǎn)化成cccDNA。用siRNA抑制核轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白β1表達(dá)或表達(dá)功能缺陷的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白β1，均導(dǎo)致胞質(zhì)PF-RC積聚，而胞核內(nèi)PF-RC及cccDNA減少。細(xì)胞RNA多聚酶Ⅱ以cccDNA為模板，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生mRNA。病毒DNA聚合酶 (即P蛋白) 結(jié)合于pgRNA (前基因組RNA，也是3.5kb mRNA) 5′ 端的莖環(huán)結(jié)構(gòu)，促使pgRNA包裹入核心顆粒中，P蛋白TP區(qū)第63位酪氨酸殘基上的羥基與GTP共價(jià)結(jié)合引發(fā)合成5′-GAAT-3′ 的四聚DNA引物，P蛋白與該引物轉(zhuǎn)位到pgRNA3′ 端DR1區(qū)，以pgRNA為模板轉(zhuǎn)錄合成互補(bǔ)性負(fù)鏈DNA，同時(shí)DNA聚合酶的RNAse H (核糖核酸酶H) 切割模板pgRNA，僅保留5′ 端完整的DR1片段，與該片段互補(bǔ)的短小RNA脫離并附著在負(fù)鏈5′ 端，引導(dǎo)正鏈合成。當(dāng)合成延伸到負(fù)鏈5′ 端時(shí)，DNA聚合酶模板切換至負(fù)鏈3′ 端繼續(xù)合成正鏈DNA，形成松弛環(huán)狀DNA (rcDNA)，再移去共價(jià)結(jié)合在負(fù)鏈5′ 端的病毒聚合酶和正鏈5′ 端的短鏈RNA低聚物 (用于啟動(dòng))，就形成了cccDNA。正鏈合成啟動(dòng)時(shí)，核心顆粒結(jié)構(gòu)改變，成為成熟的核心顆粒，可與表面抗原相互識(shí)別，以芽生的方式形成完整病毒顆粒。包裹著衣殼的HBV-DNA再由膜包裹后分泌到細(xì)胞外，也可以重新脫去衣殼進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)，以維持細(xì)胞核內(nèi)cccDNA的數(shù)量(Fig 1)[3]。

2藥物作用靶點(diǎn)及抗HBV策略

就理論而言，病毒復(fù)制的各個(gè)階段都有可能成為藥物靶點(diǎn)。故針對(duì)病毒的吸附、穿入、脫殼、生物合成及裝配分泌各階段特點(diǎn)，選擇相應(yīng)的有效藥物去阻斷其生命周期，從而實(shí)現(xiàn)抑制乙肝病毒繁殖、擴(kuò)散。

2.1病毒復(fù)制藥物靶點(diǎn)

2.1.1吸附吸附 (adsorption) 是指病毒附著于易感細(xì)胞的表面，它是感染的起始期。細(xì)胞與病毒相互作用最初是偶然碰撞和靜電作用，這是可逆的聯(lián)結(jié)，隨后的特異性吸附是非常重要的。Yan等[2]對(duì)乙肝病毒結(jié)合受體的肽段 (Pre-S1的2至48氨基酸)[4-5]進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，并將其作為探針，用中國(guó)科學(xué)家1980年發(fā)現(xiàn)的樹鼩為肝細(xì)胞來源，得到原代培養(yǎng)的樹鼩肝細(xì)胞 (PTH)，應(yīng)用強(qiáng)有力的現(xiàn)代生物化學(xué)技術(shù)，尋找結(jié)合Pre-S1肽段的蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)了鈉離子-?；悄懰釁f(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)多肽 (NTCP)。NTCP在肝臟內(nèi)起著轉(zhuǎn)運(yùn)膽酸和鈉離子的作用，膽汁鹽及其衍生物就有可能發(fā)展成為潛在藥物[6]，乙型肝炎和丁型肝炎病毒正是利用這一正常蛋白，與之結(jié)合并發(fā)揮作用。我們可以設(shè)計(jì)可溶性受體結(jié)合物，以防止病毒與受體的結(jié)合，有文獻(xiàn)報(bào)道環(huán)胞霉素及其衍生物可以阻斷HBV與NTCP的相互作用[7]。亦有文獻(xiàn)報(bào)道HBV易感細(xì)胞表面表達(dá)NTCP受體，而非易感細(xì)胞不表達(dá)。此外，HSPGs作為共受體在人體內(nèi)普遍存在，非特異性與HBV病毒作用[3]。與此同時(shí),HepG2-hNTCP-C4細(xì)胞株的構(gòu)建有助于探索抑制HBV進(jìn)入宿主細(xì)胞的新型抗HBV藥物[8]。

2.1.2穿入和脫殼穿入 (penetration) 是指病毒核酸或感染性核衣殼穿過細(xì)胞膜進(jìn)入胞質(zhì)。HBV是包膜病毒，以融合形成內(nèi)吞體的方式進(jìn)入細(xì)胞，隨著內(nèi)吞體pH的降低，包膜蛋白構(gòu)象發(fā)生變化，病毒包膜與內(nèi)吞體膜融合，釋放到細(xì)胞質(zhì)中。內(nèi)吞作用、內(nèi)吞體與HBV病毒包膜的融合已被提議作為潛在的用藥途徑[9]。脫殼的具體過程不得而知，但病毒進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)后，發(fā)生衣殼蛋白磷酸化，可以針對(duì)這一點(diǎn)通過抑制衣殼蛋白磷酸化來阻斷感染。

Fig 1　Model of hepatitis B virus life cycle in hepatocytes

2.1.3生物合成生物合成 (biosynthesis) 是指病毒核酸復(fù)制和病毒蛋白質(zhì)合成的過程，酶在該過程起著關(guān)鍵性作用，因而針對(duì)病毒酶的抗病毒藥物也一直是防治研究的重點(diǎn)之一，通過競(jìng)爭(zhēng)性地與酶結(jié)合來抑制病毒復(fù)制。目前，臨床應(yīng)用和正在開發(fā)階段的抗HBV藥物多是DNA聚合酶抑制劑，因其對(duì)cccDNA無明顯影響，停藥后多出現(xiàn)反彈，可能是cccDNA異常穩(wěn)定或者DNA聚合酶抑制劑效能低，這就需要尋求高效DNA聚合酶抑制劑，并深入研究cccDNA合成的生化機(jī)制，尋找可行的分子靶點(diǎn)。cccDNA是HBV復(fù)制的中間體，是HBV mRNA和pgRNA的合成模板，也是HBV持續(xù)感染的關(guān)鍵因素，是病毒活躍復(fù)制狀態(tài)的重要指標(biāo)，是HBV生活周期的核心部分。在乙肝相關(guān)性HCC中，cccDNA與X蛋白相互作用、相互影響，cccDNA可能通過增加X蛋白的表達(dá)并通過其作用而致癌，X蛋白也調(diào)控著cccDNA的轉(zhuǎn)錄，使得HBV的復(fù)制處于活躍狀態(tài)[10]。X蛋白的作用越來越受到重視，但迄今仍缺少突破性的發(fā)現(xiàn)。最近對(duì)非編碼RNA的研究十分活躍，研究顯示非編碼RNA在細(xì)胞周期發(fā)揮的作用遠(yuǎn)遠(yuǎn)超乎人類以前的認(rèn)知， 或許為探索cccDNA調(diào)控提供新的思路[11]。

2.1.4裝配(或組裝)新合成的病毒核酸和病毒核心蛋白在感染細(xì)胞內(nèi)組合成病毒顆粒的過程稱為裝配或組裝 (assembly)。病毒顆粒的裝配是由病毒和細(xì)胞的蛋白，以及病毒pgRNA參與的復(fù)雜的多分子相互作用的過程，而核心蛋白的作用尤為突出。核心蛋白C末端魚精蛋白樣區(qū)150~183位高精氨酸區(qū)域，核心蛋白第5螺旋區(qū)的113和117位氨基酸的負(fù)電荷和C端155、162和170位絲氨酸的磷酸化在病毒pgRNA的殼體化和病毒復(fù)制過程中起著重要作用[12]。HBV包膜蛋白的前S1區(qū)、胞質(zhì)側(cè)SLOOP區(qū)與核心蛋白亞單位的釘突之間可以相互作用，有研究表明，表面刺突根部環(huán)樣凹槽處和核衣殼表面的小孔附近，可能是病毒核衣殼同包膜蛋白的結(jié)合位點(diǎn)[13]。為以包膜過程為作用靶點(diǎn)的抗病毒藥物設(shè)計(jì)提供強(qiáng)有力的證據(jù)。

研究發(fā)現(xiàn)，小分子bis-ANS可以和一個(gè)自由核心蛋白二聚體結(jié)合，改變核心蛋白的幾何形狀，進(jìn)而影響衣殼裝配，這類小分子可能代表一類新型抗病毒劑[14]。與改變構(gòu)成二聚物兩個(gè)核心蛋白夾角的bis-ANS原理不同，Stray等[15]發(fā)現(xiàn)的二氫嘧啶類(HAP)化合物可誘導(dǎo)活化核衣殼的裝配，裝配成異常的不穩(wěn)定的非核衣殼顆粒，并加速正常核衣殼顆粒的降解，例如Bay41-4109和Bay39-5493，研究表明它們并沒有影響二聚物的形成，只是改變了二聚物之間的夾角。亞氨糖類化合物N-DNJ、N-DGJ也可使病毒核衣殼的數(shù)量大大減少，但其分子作用機(jī)制尚不清楚，推測(cè)該類化合物可能同HAP、bis-ANS具有相似的作用機(jī)制。苯丙烯酰胺類化合物AT-61和AT-130可能是通過加快HBV核心顆粒的裝配速度，抑制了前基因組pgRNA裝配入殼[16]。Yang等[17]發(fā)現(xiàn)一種非核苷類化合物可以抑制pgRNA與乙肝核心抗原(HBcAg)的結(jié)合，從而抑制pgRNA裝配入殼。此外，HBV是自組裝，不需要支架蛋白(包括分子伴侶)輔助裝配，但有研究表明，分子伴侶熱激蛋白90可通過與HBV核心蛋白二聚體結(jié)合促進(jìn)HBV病毒顆粒的產(chǎn)生[18](Fig 2)。

2.1.5分泌從HBV病毒內(nèi)產(chǎn)生病毒顆粒和其它物質(zhì)的過程叫分泌(secretion)。有研究發(fā)現(xiàn)的苯并咪唑類衍生物BM601在不影響乙肝e抗原(HBeAg)、宿主蛋白分泌和細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)的情況下，干擾表面抗原在高爾基體的聚集來抑制病毒顆粒和乙肝表面抗原(HBsAg)的分泌[19]。

Fig 2Representative HBV capsid assembly inhibitors

鑒于HBV為迄今已知所有可感染人體并具有獨(dú)立復(fù)制能力的雙鏈DNA病毒中最小且最有效的病毒，人類經(jīng)過長(zhǎng)期的奮斗，人們逐漸開拓治療的新方略，其中包括：

(1) 用小分子作用于病毒的變構(gòu)效應(yīng)以實(shí)現(xiàn)衣殼蛋白、糖蛋白錯(cuò)配不失為抗病毒良策之一，而且在已發(fā)表的HBV的文章得到佐證。

(2) 在HBV組裝時(shí)，分為兩個(gè)不同領(lǐng)域應(yīng)對(duì)， 把自組裝和組裝調(diào)控分開， 各個(gè)擊破。調(diào)控是在變構(gòu)水平上進(jìn)行，即調(diào)控分子構(gòu)象的變化，細(xì)胞周期一般是蛋白改變其活動(dòng)，這些蛋白是由效應(yīng)分子誘導(dǎo)的；調(diào)控過程還需要病毒和宿主因子參與。阻隔調(diào)控是一個(gè)理想的抗病毒治療的目標(biāo)，而目前直接實(shí)現(xiàn)對(duì)病毒組裝物理化學(xué)性質(zhì)的調(diào)控仍處于初始探索階段。

(3) 成核過程是成核單元先形成成核核心，在足夠成核單元存在下裝配成功；如果成核單元形成成核核心的過程過快，導(dǎo)致余下的成核單元裝配不順利；也有可能在成核過程中，成核單元結(jié)合不牢固[20]。

(4) 研究發(fā)現(xiàn)，陽(yáng)離子細(xì)胞穿透肽 (CPP) 及其脂肪共軛域 (CatLip) 可以攜帶不帶電荷的生物活性分子進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。使用感染和轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)CatLip肽能引起包膜蛋白的積累，導(dǎo)致PreS/S結(jié)構(gòu)域發(fā)生嚴(yán)重變化，從而抑制鴨乙型肝炎病毒復(fù)制，變性的CPP也為抗病毒治療提供了新靶點(diǎn)[21]。

2.2宿主抗病毒靶點(diǎn)HBV病毒本身沒有細(xì)胞毒性，通過多種機(jī)制降低機(jī)體免疫應(yīng)答，以致不能有效清除病毒，使機(jī)體長(zhǎng)期處于較弱的免疫應(yīng)答，造成肝損傷，肝功能下降，故我們也可以以宿主免疫應(yīng)答過程中的功能蛋白為作用靶點(diǎn)尋找治療方法。

2.2.1纖連蛋白纖連蛋白[22]在HepG2.2.15細(xì)胞中表達(dá)上調(diào)，同時(shí)纖連蛋白可以和HBV以一種物種限制的方式結(jié)合，在用纖連蛋白反義寡核苷酸、纖連蛋白抗體、原兒茶醛 (PA) 抑制纖連蛋白表達(dá)的實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)HBV的數(shù)量隨著纖連蛋白表達(dá)量的減少而降低。此外，還發(fā)現(xiàn)抑制纖連蛋白的表達(dá)可以提高HBV病毒對(duì)抗HBV藥物的敏感性，這樣纖連蛋白可能成為乙肝治療的潛在靶點(diǎn)。

2.2.2蛋白激酶SRPK1和SRPK2研究發(fā)現(xiàn)，蛋白激酶SRPK1和SRPK2是絲氨酸磷酸化的關(guān)鍵激酶，磷酸化過程對(duì)pgRNA的裝配是非常重要的[23]，推測(cè)可能是通過磷酸化核心蛋白來實(shí)現(xiàn)對(duì)HBV復(fù)制的控制。但有研究發(fā)現(xiàn)SRPK1和SRPK2是通過非磷酸化的途徑抑制病毒復(fù)制[24]，而不是磷酸化過程，具體機(jī)制還需深入研究。

2.2.3分子伴侶分子伴侶在細(xì)胞內(nèi)促進(jìn)折疊、成熟、裝配、轉(zhuǎn)運(yùn)，這些過程都要消耗ATP。在一定濃度的熱休克蛋白抑制劑的作用下，病毒的活力不受影響，但病毒復(fù)制對(duì)此很敏感，因?yàn)榘閭H調(diào)節(jié)許多細(xì)胞功能，包括信號(hào)網(wǎng)絡(luò)、細(xì)胞周期和凋亡，病毒可操縱細(xì)胞的分子伴侶，以此利于病毒復(fù)制。熱休克蛋白受到抑制后，可導(dǎo)致病毒聚合酶的降解，減少病毒基因表達(dá)，其作用對(duì)象可以是結(jié)構(gòu)蛋白，也可以是非結(jié)構(gòu)蛋白，例如Hsp90[25]。

2.2.4SBP蛋白從病人體內(nèi)分離的表面抗原在人肝臟cDNA庫(kù)中篩選，發(fā)現(xiàn)一個(gè)新的表面抗原結(jié)合蛋白 (SBP) 和人的IgG重鏈結(jié)構(gòu)相似，其N端結(jié)構(gòu)域和表面抗原結(jié)合，帶負(fù)電荷的SBP N端和帶正電荷的HBsAg結(jié)合，SBP上的Fc片段更容易和?；d體蛋白 (ACP) 上的Fc受體結(jié)合，促進(jìn)ACP攝取HBsAg。實(shí)驗(yàn)也證實(shí)SBP可以促進(jìn)樹突細(xì)胞有效攝取表面抗原，并提高乙肝疫苗的免疫性[26]。

2.3新辟蹊徑Soulis和Boeke首次提出一種新的抗病毒策略：即核衣殼導(dǎo)向的病毒滅活 (capsid targeted viral inactivation，CATI)，并將其用于逆轉(zhuǎn)錄病毒的實(shí)驗(yàn)治療。CATI的基本原理是構(gòu)建一種逆轉(zhuǎn)錄病毒衣殼蛋白，將其與某種對(duì)病毒具有破壞作用的蛋白融合，利用衣殼蛋白自組裝的特性，將該融合蛋白裝配于逆轉(zhuǎn)錄病毒的核衣殼中，發(fā)揮其抗病毒作用。由于乙肝病毒的復(fù)制過程類似于逆轉(zhuǎn)錄病毒，利用CATI原理制備融合蛋白用于治療乙肝病毒的感染，在理論上具有高特異性、高效性、不易出現(xiàn)抗性株以及可采取常規(guī)給藥方法等優(yōu)點(diǎn)，具有誘人的應(yīng)用前景。

新研究發(fā)現(xiàn)一種新的抑制HBV轉(zhuǎn)錄的方法，即將非共軛高親和力的LNA-TFO轉(zhuǎn)運(yùn)入細(xì)胞核，這種方法是最有效且最持久的，該發(fā)現(xiàn)強(qiáng)調(diào)了LNA寡核酸 (鎖核苷酸) 介導(dǎo)的特定序列基因沉默作為抑制病毒的一種新型的潛在的強(qiáng)大工具。

英國(guó)《每日郵報(bào)》網(wǎng)站7月22日?qǐng)?bào)道：科學(xué)家采用基因剪輯技術(shù)，將一種被稱為核酸酶的DNA剪切酶與一種被稱為向?qū)Ш颂呛怂?gDNA)的RNA結(jié)合在一起瞄準(zhǔn)病毒的基因組，實(shí)現(xiàn)首次從人類DNA中“刪除”艾滋病毒，可以考慮將該方法用于HBV DNA的刪除。

3結(jié)語(yǔ)

盡管HBV感染會(huì)引起嚴(yán)重的肝組織病理改變和肝功能損傷，但其本身是沒有細(xì)胞毒作用的。肝組織病理改變和肝功能損傷實(shí)際上是宿主免疫系統(tǒng)與受感染的肝細(xì)胞相互作用的結(jié)果，而這又取決于病毒復(fù)制水平高低和宿主免疫力強(qiáng)弱[27]。這就要求我們既要研究病毒復(fù)制的具體機(jī)制，又要了解病毒進(jìn)入人體后引發(fā)的免疫反應(yīng)，詳細(xì)了解機(jī)體免疫應(yīng)答可幫助我們?cè)敿?xì)了解乙肝的慢性化機(jī)制，抑制乙肝惡化。

綜上所述，人們?cè)趯?duì)慢型HBV感染的治療研究已取得了很大的進(jìn)展，但目前應(yīng)用于臨床的抗病毒藥物和治療方案尚需要進(jìn)一步提高[27-28]。相信隨著人們對(duì)HBV復(fù)制機(jī)制、機(jī)體免疫應(yīng)答機(jī)制的深入了解，將會(huì)發(fā)現(xiàn)更多的藥物作用靶點(diǎn)，為開發(fā)高效低毒的新型藥物指明方向。

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Hepatitis B virus replication mechanisms and drug targets of chronic hepatitis B

HE Xiao-lin1，HUANG Jian-wei2，XU Rui-an1，CUI Xiu-ling1

(1.XiamenKeyLaboratoryofMarineandGeneticEngineeringDrugs，SchoolofBiomedicalScienceandInstituteof

MolecularMedicine,HuaqiaoUniversity&MolecularMedicineEngineeringResearchCenteroftheMinistryofEducation，

XiamenFujian361021,China; 2.XiamenCenterforDiseaseControlandPrevention,XiamenFujian361021,China)

Abstract：Hepatits B virus(HBV) infection is a global epidemic which seriously harms the public health. In spite of the great progress in hepatits B prevention and treatment, there is few effective medicine. Research findings show that liver damage and degree of liver failure are sophisticatedly related to the interaction between HBV and the immune response of host. All these make it important to know the replication mechanism and the contraction process, in order to lay a preliminary solid foundation for studying HBV drug targets and making a new ant-virus strategy. This article aims to summarize HBV viral replication process, while focusing on the latest research findings about drug targets, to find a new kind of anti-HBV drugs, and to explore the underlying mechanism of effective drugs.

Key words：hepatitis B virus；viral replication；drug targets；assembly；NTPC；core protein

通訊作者崔秀靈(1971-)，女，博士，教授，博士生導(dǎo)師，，Tel： 0592-6162996，E-mail：cuixl@hqu.edu.cn

作者簡(jiǎn)介：赫曉林(1988-)，女，碩士，研究方向：海洋天然產(chǎn)物藥物，E-mail：hexiaolin88@126.com;

基金項(xiàng)目：福建省閩江學(xué)者支持計(jì)劃(No 10BS216)；廈門市科技計(jì)劃項(xiàng)目(No 350z20101014)；華僑大學(xué)基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)基金(No JB-GJ1008)；廈門南方海洋研究中心(No 13GYY003NF16)

收稿日期：2014-09-24，修回日期：2014-10-27

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1001-1978(2015)02-0152-05

doi:10.3969/j.issn.1001-1978.2015.02.002