高原低氧環(huán)境氣虛小鼠腎、骨和腦組織反應(yīng)性變化的分子機(jī)制研究

安方玉 駱亞莉 劉永琦 李應(yīng)東 劉雪松 史旭鋒 高卓越

摘要：目的 觀察高原低壓低氧環(huán)境中小鼠腎、骨、腦組織的適應(yīng)性反應(yīng)分子機(jī)制，探討腎與腦髓的陰陽上下升降互濟(jì)的統(tǒng)一性。方法 將SPF級(jí)小鼠采用隨機(jī)數(shù)字表法分為正常對(duì)照組、模型組。模型組小鼠于低氧艙中模擬高海拔環(huán)境進(jìn)行低氧暴露，連續(xù)21 d。第22日出艙稱重后眼球采血處死小鼠。比色分析法檢測(cè)各組小鼠腦組織乳酸脫氫酶（LDH）及Na+-K+-ATP酶活性。ELISA檢測(cè)各組小鼠腦、骨骼肌組織磷酸果糖激酶（PFK）活性及腎組織促紅細(xì)胞生成素（EPO）及其受體（EPOR）的含量。RT-PCR檢測(cè)各組小鼠腦組織缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）和水通道蛋白（AQP）-4 mRNA表達(dá)，Western blot檢測(cè)腦組織HIF-1α、AQP-1及骨骼肌組織肌紅蛋白（Mb）蛋白表達(dá)。結(jié)果 與正常對(duì)照組比較，模型組小鼠腎組織EPO含量升高，腦組織LDH、PFK活性增強(qiáng)（P<0.05）、HIF-1α和AQP-4的mRNA和蛋白表達(dá)水平升高（P<0.05，P<0.01）；模型組小鼠骨骼肌組織PFK活性增強(qiáng)和Mb蛋白表達(dá)水平升高（P<0.05），腦組織Na+-K+-ATP酶活性和腎組織EPOR含量降低（P<0.05，P<0.01）。結(jié)論 高原低壓低氧環(huán)境小鼠腎、骨和腦組織均發(fā)生了陰陽上下升降互濟(jì)的適應(yīng)性反應(yīng)。

關(guān)鍵詞：高原低氧；分子機(jī)制；腎；骨；腦；小鼠

DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2016.01.014

中圖分類號(hào)：R228 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1005-5304（2016）01-0060-05

Study on Molecular Mechanism of Reactive Changes in Kidney， Skeleton and Brain of Mice Models in High Altitude Hypoxia Environment AN Fang-yu1， LUO Ya-li1， LIU Yong-qi1，2， LI Ying-dong1，2， LIU Xue-song1， SHI Xu-feng3， GAO Zhuo-yue1，2 （1. Provincial-Level Key Laboratory for Molecular Medicine of Major Diseases and Study on Prevention and Treatment of Traditional Chinese Medicine， Gansu University of Chinese Medicine， Lanzhou 730000， China； 2. Key Laboratory of Dunhuang Medicine and Transformation of Ministry of Education and Gansu Province， Lanzhou 730000， China； 3. Clinical College of Gansu University of Chinese Medicine， Lanzhou 730000， China）

Abstract： Objective To observe the molecular mechanism of adaptive response of the kidney and skeleton and brain issues in the high altitude hypoxia； To discuss the unity of yin and yang oscillation relationship of kidney and brain marrow. Methods SPF KM mice were randomly divided into control group and model group according to random number table method. Mice in the model group were exposed to high altitude hypoxia cabin for successive 21 d. On the 22nd day， mice got out of the cabin and their body weight was measured， and then they were put to death through eyeball blood sampling. The activities of lactic LDH and Na+-K+-ATPase in brain tissue were detected by spectrophotometric colorimetry. The PFK activities of brain and skeletal muscle were detected by ELISA. Meanwhile the contents of EPO and EPOR in the kidney were measured by ELISA. The mRNA expressions of HIF-1α and AQP-4 in brain were assessed by RT-PCR. At the same time， the protein expressions of HIF-1α and AQP-1 in brain and the protein expression of Mb in skeletal muscle were detected by Western blot. Results Compared with the normal group， the LDH and PFK in brain tissue and the content of EPO in kidney tissue were all raised in the model

group（P<0.05）. Meanwhile the mRNA expressions of HIF-1α and AQP-4 and the protein expressions of HIF-1α and AQP-1 in brain were all increased in the mice from the model group； the activities of PFK and the protein expression of Mb in skeletal muscle were also raised in the model group. But the activity of Na+-K+-ATPase in brain tissue and the content of EPOR in kidney tissue both decreased in the model group （P<0.05， P<0.01）. Conclusion Adaptive response and the unity of yin and yang oscillation relationship between kidney， skeleton and brain tissue happen in high altitude hypoxia.

Key words： high altitude hypoxia； molecular mechanism； kidney； skeleton； brain； mice

高原地區(qū)低壓、低氧、低溫、強(qiáng)輻射等因素對(duì)人體生理和免疫系統(tǒng)均有明顯的影響，其中，低氧是主要影響因素[1]。中醫(yī)認(rèn)為高原清氣不足（缺氧）、燥寒二氣為主（干燥多風(fēng)、寒冷低溫）。高原低氧多可誘發(fā)機(jī)體出現(xiàn)氣虛、寒凝、血瘀等證，成為高原反應(yīng)及高原病發(fā)生發(fā)展的重要機(jī)制。中醫(yī)認(rèn)為腎主骨生髓，通于腦。腎屬五臟，位于下焦，藏精、主骨生髓；腦屬奇恒之腑，位置最高，為諸陽之會(huì)，主認(rèn)識(shí)。一屬陰，一屬陽，上下升降互濟(jì)，腎精腎水上滋腦髓，腦固攝升提腎氣，相互作用，互生互長(zhǎng)，腎、骨、腦的升降互濟(jì)對(duì)維持機(jī)體平衡健康發(fā)揮關(guān)鍵作用[2]?；诖耍狙芯坑^察了高原低氧環(huán)境中小鼠腎組織、骨骼肌組織、腦組織的反應(yīng)分子機(jī)制，以期為腎與腦髓的上下升降互濟(jì)統(tǒng)一性及中西醫(yī)結(jié)合防治高原反應(yīng)提供細(xì)胞與分子生物學(xué)基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物

KM種小鼠30只，SPF級(jí)，6～8周齡，體質(zhì)量（20±2）g，甘肅中醫(yī)藥大學(xué)科研實(shí)驗(yàn)中心，合格證號(hào)SCXK（甘）2011-0001，并在甘肅中醫(yī)藥大學(xué)科研實(shí)驗(yàn)中心SPF級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)。

1.2 主要試劑與儀器

乳酸脫氫酶（LDH）和Na+-K+-ATP酶檢測(cè)試劑盒，南京建成生物工程研究所，批號(hào)分別為20131026、20131108；小鼠磷酸果糖激酶（PFK）、促紅細(xì)胞生成素（EPO）及其受體（EPOR）precocated ELISA kit檢測(cè)試劑盒，源葉公司，批號(hào)均為20131101A；Trizol Reagent試劑（美國(guó)），批號(hào)47115；GoScriptTM Reverse Transcription System試劑盒和GoTaq qPCR Master Mix試劑盒，Promega，批號(hào)分別為0000079524和0000114742；山羊抗小鼠抗體和山羊抗兔多克隆抗體，ABCAM公司；山羊抗小鼠缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）抗體、水通道蛋白（AQP）-1抗體、肌紅蛋白（Mb）抗體，IMMNUWAY公司。723N型分光光度計(jì)，北京瑞利分析儀器公司；FLYDWC50-IIA低壓氧艙，貴州風(fēng)雷航空軍械有限責(zé)任公司；Bcnchnark Plus連續(xù)波長(zhǎng)酶標(biāo)儀，上海閃譜生物科技有限公司；美國(guó)Quawell Q5000超微量紫外可見分光光度計(jì)，北京鼎國(guó)昌盛生物技術(shù)有限責(zé)任公司；S1000TM Thermal Cycler、Molecular Imager ChemiDocTM XRS+With Image LabTM Software，BIO-RAD；7500 Real Time PCR System，英濰捷基（上海）貿(mào)易有限公司。

1.3 分組與造模

小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周，常規(guī)飲食，自由飲水。采用隨機(jī)數(shù)字表法將小鼠分為正常對(duì)照組、模型組各30只。參考文獻(xiàn)[3-4]方法建立高原低氧小鼠模型，模型組小鼠置低壓氧艙內(nèi)進(jìn)行減壓低氧暴露：以10 m/s 速度上升至3000 m 停留5 min，再以同樣速度上升至4500 m停留3 min，再以10 m/s 速度上升至6000 m，低氧暴露22 h 后，以15 m/s速度降至海平面高度。正常對(duì)照組小鼠常氧環(huán)境中飼養(yǎng)。連續(xù)21 d。

1.4 標(biāo)本制備

末次低氧暴露后，眼球采血處死小鼠，分別摘取腦、腎及骨骼肌組織，用生理鹽水沖洗數(shù)遍后備用。其中，實(shí)驗(yàn)過程中模型組死亡2只。

1.5 指標(biāo)檢測(cè)

1.5.1 腎促紅細(xì)胞生成素及其受體水平測(cè)定 腎組織勻漿按質(zhì)量（g）∶體積（mL）=1∶9加入9倍生理鹽水，冰浴條件下2500 r/min離心10 min，取上清液用生理鹽水按1∶4稀釋成2%組織勻漿備用。ELISA檢測(cè)腎組織EPO和EPOR含量。操作方法按試劑盒說明進(jìn)行，于酶標(biāo)儀450 nm處測(cè)定各孔A值。以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，求出EPO和EPOR線性方程。分別為Y=0.042 3X+0.102 7，r2=0.990 8；Y=0.024 3X+0.158 9，r2=0.991 1。將各樣品A值代入方程求出對(duì)應(yīng)的濃度。

1.5.2 腦組織乳酸脫氫酶、Na+-K+-ATP酶及磷酸果糖激酶活性測(cè)定 腦組織勻漿制備方法同“1.5.1”項(xiàng)。2，4-二硝基苯肼比色法檢測(cè)腦組織LDH活性，無機(jī)磷比色法檢測(cè)腦組織Na+-K+-ATP酶活性，ELISA檢測(cè)腦組織PFK活性，操作方法按試劑盒說明進(jìn)行。其線性方程為：Y=0.001 3X+0.160 6，r2=0.996 3。將各樣品A值代入方程求出對(duì)應(yīng)的濃度。

1.5.3 腦組織缺氧誘導(dǎo)因子-1α和水通道蛋白-4基因表達(dá)檢測(cè) 冰浴條件下用Trizol Reagent試劑抽提腦組織總RNA，用超微量核酸測(cè)定儀檢測(cè)RNA濃度和純度。用GoScriptTM Reverse Transcription System試劑盒合成cDNA第一鏈，按熒光定量 PCR操作說明書進(jìn)行PCR反應(yīng)，反應(yīng)條件：預(yù)變性95 ℃、2 min，變性95 ℃、15 s，退火58 ℃、45 s，延伸60 ℃、1 min。共45個(gè)循環(huán)。每個(gè)樣品各平行3次，數(shù)據(jù)經(jīng)2-ΔΔCt處理后進(jìn)行相對(duì)表達(dá)量分析。其中，β-actin、HIF-1α和AQP-4引物由TaKaRa寶生物工程（大連）有限公司設(shè)計(jì)并合成?；蛐蛄袨椋篐IF-1α上游引物5'-GGACGATGAACATCAAGCA-3'，下游引物5'- AGGAAT GGGTTCACAAATCAGCA-3'，擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度146 bp；AQP-4上游引物5'-TGGAGCCAG CATGAATCCAG-3'，下游引物5'-ACGTTTGAGCTC CACATCAGGAC-3'，擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度157 bp；β-actin上游引物5'-CATCCGTAAAGACCTCTATGCCAC-3'，下游引物5'-ATGGAGCCACCGATCCACA-3'，擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度172 bp。

1.5.4 腦組織缺氧誘導(dǎo)因子-1α和水通道蛋白-1蛋白表達(dá)檢測(cè) 用預(yù)冷的組織蛋白裂解液（RPMI∶PMSF=1∶100）腦組織，提取腦組織總蛋白。用4×上樣緩沖液調(diào)整蛋白濃度為40 μg/20 μL。每孔點(diǎn)樣20 μL，進(jìn)行SDS-PAGE（分離膠12%，濃縮膠5%）電泳后、電轉(zhuǎn)至PVDF膜，用5%脫脂奶粉封閉液封閉2 h。加一抗（山羊抗小鼠HIF-1α抗體、AQP-1抗體和GAPDH抗體），4 ℃孵育過夜。TBST洗膜4次，將膜置于山羊抗兔辣根酶標(biāo)記的二抗中，室溫孵育2 h后，TBST洗膜4次。用ECL化學(xué)發(fā)光顯影后，Bio-Rad凝膠成像儀采集信號(hào)并攝取凝膠圖像。

1.5.5 骨骼肌組織磷酸果糖激酶活性檢測(cè) 骨骼肌組織勻漿制備方法同“1.5.1”項(xiàng)。ELISA檢測(cè)骨骼肌組織PFK活性，按試劑盒說明進(jìn)行。其線性方程為：Y=0.001 2X+0.188 2，r2=0.996 4。將各樣品A值代入方程求出對(duì)應(yīng)的濃度。

1.5.6 骨骼肌組織肌紅蛋白表達(dá)檢測(cè) 蛋白裂解、定量、SDS-PAGE電泳、轉(zhuǎn)膜、封閉、一抗及二抗孵育、ECL顯影及圖像采集等方法均同“1.5.4”項(xiàng)。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以—x±s表示，組間差異采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD分析，若方差不齊時(shí)用Dunnett's法分析。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 高原低壓低氧環(huán)境對(duì)小鼠促紅細(xì)胞生成素及其受體含量的影響

與正常對(duì)照組比較，模型組小鼠腎臟中EPO含量升高（P<0.05），EPOR含量降低（P<0.01）。結(jié)果見表1。

2.2 高原低壓低氧環(huán)境對(duì)小鼠腦組織乳酸脫氫酶、Na+-K+-ATP酶及磷酸果糖激酶活性的影響

與正常對(duì)照組比較，模型組小鼠腦組織LDH活性增強(qiáng)（P<0.05），Na+-K+-ATP酶活性降低（P<0.01），PFK活性增強(qiáng)（P<0.05）。結(jié)果見表2。

2.3 高原低壓低氧環(huán)境對(duì)小鼠腦組織缺氧誘導(dǎo)因子-1α和水通道蛋白-4基因表達(dá)的影響

與正常對(duì)照組比較，模型組小鼠腦組織HIF-1α、AQP-4基因表達(dá)量均增加（P<0.05，P<0.01）。結(jié)果見圖1。

2.4 高原低壓低氧環(huán)境對(duì)小鼠腦組織缺氧誘導(dǎo)因子-1α和水通道蛋白-1蛋白表達(dá)的影響

與正常對(duì)照組比較，模型組小鼠腦組織HIF-1α和AQP-1蛋白表達(dá)量均增加（P<0.01）。結(jié)果見圖2。

2.5 高原低壓低氧環(huán)境對(duì)小鼠骨骼肌組織磷酸果糖激酶活性的影響

與正常對(duì)照組比較，模型組小鼠骨骼肌組織PFK活性增強(qiáng)（P<0.05）。結(jié)果見表3。

2.6 高原低壓低氧環(huán)境對(duì)小鼠骨骼肌組織肌紅蛋白表達(dá)的影響

與正常對(duì)照組比較，模型組小鼠骨骼肌組織Mb蛋白表達(dá)增強(qiáng)（P<0.05）。結(jié)果見圖3。

3 討論

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，主骨生髓，通于腦，腎主藏精，而能生髓，髓居于骨中，骨賴髓以充養(yǎng)。所以，《素問·宣明五氣篇》有“腎主骨”，《素問·陰陽應(yīng)象大論篇》有“腎生骨髓”。腎精充足，則骨髓的生化有源，骨骼得到髓的充足滋養(yǎng)而堅(jiān)固有力。如果腎精虛少，骨髓的化源不足，不能營(yíng)養(yǎng)骨骼，便會(huì)出現(xiàn)骨骼脆弱無力，甚至發(fā)育不良。EPO在胚胎早期由肝臟產(chǎn)生，并逐漸轉(zhuǎn)移至腎臟，出生后主要由腎皮質(zhì)近曲小管管周細(xì)胞分泌，是一種激素樣的糖蛋白。EPO可與腎組織及骨髓中紅系干細(xì)胞表面的紅細(xì)胞生成素受體結(jié)合，刺激紅系干細(xì)胞，促進(jìn)紅系干細(xì)胞增殖、分化和成熟，使紅細(xì)胞數(shù)增多，血紅蛋白含量增加。并能穩(wěn)定紅細(xì)胞膜，增強(qiáng)紅細(xì)胞抗氧能力。紅細(xì)胞是脊椎動(dòng)物體內(nèi)通過血液運(yùn)送氧氣的最主要的媒介，紅細(xì)胞把氧氣運(yùn)輸給人身體組織的各部位，再?gòu)母鞑课贿\(yùn)送出代謝產(chǎn)物二氧化碳，所以紅細(xì)胞是我們?nèi)梭w內(nèi)不可缺少的“運(yùn)輸隊(duì)”，保證組織能量代謝的正常運(yùn)行。EPO系統(tǒng)的研究發(fā)現(xiàn)，不僅為臨床防治血液系統(tǒng)臨床疾病提供了新途徑，也進(jìn)一步為中醫(yī)的腎藏精，精血互生，腎主骨，精生髓理論提供了細(xì)胞生物學(xué)科學(xué)依據(jù)。本研究中發(fā)現(xiàn)，與正常對(duì)照組比較，模型組小鼠腎組織EPO含量升高，提示高原低氧環(huán)境可能通過刺激腎臟分泌EPO促進(jìn)紅細(xì)胞適應(yīng)性增多，從而增強(qiáng)攜氧能力；但模型組小鼠EPOR含量明顯降低，影響了EPO與靶細(xì)胞的有效結(jié)合及其活性的發(fā)揮。

Mb是一種主要分布于心肌和骨骼肌組織的氧結(jié)合血紅素蛋白，是機(jī)體內(nèi)的細(xì)胞儲(chǔ)氧器。在氧分壓相同的情況下，Mb結(jié)合氧的能力比Hb高6倍，其中低氧誘導(dǎo)因子可活化控制Mb合成的基因。因此，Mb在心肌和骨骼肌組織的含量多少，直接影響肌細(xì)胞的攝氧能力，從而影響機(jī)體在缺氧條件下的適應(yīng)能力。研究發(fā)現(xiàn)，世居高原的動(dòng)物和人骨骼肌組織中Mb的含量比平原水平高，原居民與平原動(dòng)物（如大鼠、囊鼠和豚鼠）等在經(jīng)過3100～5000 m海拔高度馴化后，其骨骼肌組織中Mb則會(huì)顯著增加[5]。本研究結(jié)果也表明，高原低氧環(huán)境小鼠骨骼肌組織Mb的蛋白表達(dá)水平明顯增強(qiáng)（P<0.05）。因此可以推測(cè)，機(jī)體對(duì)高原低氧環(huán)境的適應(yīng)機(jī)制可能是通過提高M(jìn)b在體內(nèi)的含量，減慢其轉(zhuǎn)變?yōu)楦哞F肌紅蛋白的速度，從而進(jìn)一步促進(jìn)Mb與氧的結(jié)合來保證滿足機(jī)體在低氧條件下對(duì)氧氣的需求而實(shí)現(xiàn)的。

高原低氧環(huán)境使機(jī)體面臨的最大挑戰(zhàn)是缺氧。在缺氧條件下，機(jī)體要維持正常的生命活動(dòng)，必須需要ATP來為其提供能量。在這種特殊的環(huán)境下，機(jī)體只能通過糖酵解來產(chǎn)生ATP。在糖酵解反應(yīng)中，LDH是進(jìn)入第二反應(yīng)階段的很重要的酶，PFK則是糖酵解反應(yīng)中最為關(guān)鍵的一個(gè)酶。而LDH活性大小與細(xì)胞內(nèi)氧分壓的高低密切相關(guān)。PFK是糖酵解第一反應(yīng)階段最主要的限速酶。在高原低氧環(huán)境下，機(jī)體相對(duì)的ATP不足，ADP過剩，ADP是PFK的變構(gòu)激活劑，能夠增強(qiáng)PFK的活性，從而加速糖酵解。王氏[6]研究發(fā)現(xiàn)，在高原低氧環(huán)境下，與平原組對(duì)照，世居高原者LDH活性增強(qiáng)；王氏等[7]研究也發(fā)現(xiàn)，無氧組PFK活性隨運(yùn)動(dòng)時(shí)間的延長(zhǎng)均逐步增強(qiáng)。本研究結(jié)果顯示，與正常對(duì)照組比較，高原低壓低氧小鼠PFK和LDH活性增強(qiáng)。因此，可以推測(cè)出，在高原低氧環(huán)境下，機(jī)體主要通過增強(qiáng)糖酵解途徑來維持機(jī)體的正常生命活動(dòng)。

腦髓是腦功能活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ)，而能量維持腦功能的實(shí)現(xiàn)是首要條件。ATP是機(jī)體內(nèi)主要能量的直接供給者，其主要功能是維持細(xì)胞膜電位、維持細(xì)胞膜的完整性、參與細(xì)胞的各種代謝，而Na+-K+-ATP酶是一種大分子蛋白，具有ATP酶的活性，當(dāng)胞內(nèi)高Na+或胞外高K+增加時(shí)被激活，它在維持細(xì)胞內(nèi)外離子交換的過程中具有不可替代的作用，并且它可作為判定代謝紊亂及組織損傷恢復(fù)能力的可靠指標(biāo)之一。馬氏等[8]研究發(fā)現(xiàn)，與正常對(duì)照組比較，模擬海拔5000 m減壓缺氧6 h后，隨著心肌細(xì)胞和腦細(xì)胞內(nèi)ATP含量的大幅度下降，存在于心肌和腦細(xì)胞膜上的Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性也顯著下降。本研究結(jié)果表明，與正常對(duì)照組比較，高原低壓低氧小鼠腦組織Na+-K+-ATP酶顯著下降（P<0.01）。因此，在高原低氧環(huán)境下，機(jī)體處于相對(duì)ATP不足的狀態(tài)，導(dǎo)致機(jī)體組織發(fā)生損傷，從而嚴(yán)重影響Na+-K+-ATP酶的活性。

HIF-1是在缺血低氧的刺激下，廣泛分布于機(jī)體組織的一種核轉(zhuǎn)錄因子。HIF-1主要由α亞基和β亞基構(gòu)成的二聚體蛋白質(zhì)，其中，HIF-1α的激活是缺氧反應(yīng)的重要標(biāo)志，也是腦組織缺氧反應(yīng)的重要信號(hào)，無論是在全身缺氧或腦局灶性缺血時(shí)，腦組織中都發(fā)現(xiàn)有HIF-1α的激活。AQP是一組與水通透有關(guān)的細(xì)胞膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，在腦水腫的病理生理中發(fā)揮著重要作用。AQP-4主要分布在腦組織，具有選擇性轉(zhuǎn)運(yùn)水的功能。AQP-1是Aquaporin家族的另一成員，主要分布在血管、腎臟遠(yuǎn)曲小管、眼、耳及腦，其作用是選擇性通透水分子。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與正常對(duì)照組比較，高原低壓低氧模型小鼠腦組織HIF-1α mRNA和蛋白表達(dá)均增強(qiáng)，AQP-4 mRNA表達(dá)和AQP-1蛋白表達(dá)均增強(qiáng)。由此推測(cè)，機(jī)體對(duì)高原低氧環(huán)境的適應(yīng)是通過增強(qiáng)HIF-1α來實(shí)現(xiàn)的，同時(shí)高原低氧環(huán)境可能使機(jī)體啟動(dòng)了內(nèi)源性保護(hù)機(jī)制。

綜上所述，模擬高原低壓低氧環(huán)境復(fù)制氣虛小鼠模型，腎組織、骨骼肌組織、腦組織均發(fā)生了陰陽上下升降互濟(jì)的適應(yīng)性反應(yīng)，其適應(yīng)高原低氧環(huán)境的可能機(jī)制是：在低氧狀態(tài)下，機(jī)體可以促進(jìn)HIF-1α表達(dá)增加，后者又進(jìn)一步調(diào)控糖酵解酶、其他酶類、EPO及Mb等諸多參與氧代謝的下游靶基因轉(zhuǎn)錄，進(jìn)一步增強(qiáng)機(jī)體對(duì)缺氧的耐受力，以保持機(jī)體內(nèi)的氧平衡狀態(tài)。

參考文獻(xiàn)：

[1] 鄧炳楠，李培兵，毛忠，等.單兵供氧器對(duì)高原移居青年心率和SaO2影響的評(píng)價(jià)[J].中國(guó)應(yīng)用生理學(xué)雜志，2015，31（1）：17-18，22.

[2] 竇娟娟，駱文郁，劉永琦.補(bǔ)腎益髓中藥血清孵育骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植防治缺血性腦血管病的理論探討[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2011，22（3）：562-563.

[3] 安方玉，劉永琦，駱亞莉，等.當(dāng)歸不同有效部位對(duì)高原低氧模型小鼠免疫功能的影響[J].中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，2015，22（2）：51-54.

[4] 徐瑜，柳君澤，夏琛.棕櫚酸對(duì)模擬高原低氧大鼠離體腦線粒體解耦聯(lián)蛋白活性及質(zhì)子漏的影響[J].生理學(xué)報(bào)，2008，60（1）：59-64.

[5] 李慶芬.人與動(dòng)物呼吸系統(tǒng)對(duì)高海拔低氧的適應(yīng)[J].生物學(xué)通報(bào)， 1991，26（10）：19.

[6] 王勇.不同海拔地區(qū)人血清乳酸脫氫酶同工酶的研究[J].高原醫(yī)學(xué)雜志，2005，15（4）：59-60.

[7] 王麗艷，張敏，趙曉麗，等.不同運(yùn)動(dòng)方式對(duì)大鼠異檸檬酸脫氫酶和磷酸果糖激酶-1的影響[J].天津醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，17（2）：170-172.

[8] 馬慧萍，焦陽，高榮敏，等.天山雪蓮乙醇提取物對(duì)模擬高原缺氧小鼠生化指標(biāo)的影響[J].中藥材，2014，37（1）：99-103.

（收稿日期：2015-05-27）

（修回日期：2015-10-19；編輯：華強(qiáng)）