負(fù)離子礦物質(zhì)制劑對(duì)蛋雞血清生化及免疫指標(biāo)的影響

■王佳藝 耿春銀 于夢(mèng)影 張 敏 片永泰

（1.延邊大學(xué)，吉林延吉 133000；2.延吉永大天然礦物質(zhì)開發(fā)有限公司，吉林延吉 133000）

在現(xiàn)代規(guī)?；⒓s化的飼養(yǎng)方式下，動(dòng)物受到的各種應(yīng)激因素明顯增多，這將導(dǎo)致動(dòng)物免疫力降低，生產(chǎn)性能下降。近兩年的研究發(fā)現(xiàn)，以納米加工技術(shù)處理的負(fù)離子礦物質(zhì)制劑不僅具有改善動(dòng)物生產(chǎn)性能及產(chǎn)品質(zhì)量的作用[1-4]，還對(duì)動(dòng)物的機(jī)體免疫能力、抗氧化性和抗應(yīng)激能力有顯著的提高效果[5-7]。因此，負(fù)離子礦物質(zhì)制劑是兼具保健作用的一種新型飼料添加劑，其具有較大的開發(fā)應(yīng)用價(jià)值。目前，負(fù)離子礦物質(zhì)制劑對(duì)肉雞[5-6]、豬[7]、牛[8]等血液生化指標(biāo)的已有報(bào)道，但對(duì)蛋雞血清生化及免疫指標(biāo)的影響報(bào)道尚未見報(bào)道。本試驗(yàn)研究旨在前人的工作基礎(chǔ)上，進(jìn)一步研究負(fù)離子礦物質(zhì)制劑對(duì)蛋雞血液生化及免疫指標(biāo)的影響，為其在蛋雞生產(chǎn)中的應(yīng)用及深入的相關(guān)作用機(jī)制的認(rèn)識(shí)奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

本試驗(yàn)所使用的負(fù)離子礦物質(zhì)制劑的組成：硫磺粉46%、鍺礦粉4%、復(fù)合微量元素粉5%、電氣石粉38%、石粉7%。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選用960只健康無病，日齡、體況比較一致的蛋雞，采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，將960只蛋雞隨機(jī)分成A、B、C三組，每組五個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)64只雞（試驗(yàn)設(shè)計(jì)見表1）。試驗(yàn)期共49 d，預(yù)飼期7 d，正式試驗(yàn)期42 d。試驗(yàn)用基礎(chǔ)日糧的組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表2。

表1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

表2 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.3 供試雞的飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)開始前，對(duì)雞舍進(jìn)行全面的消毒。各處理組的各個(gè)重復(fù)在雞舍內(nèi)均勻分布，每日光照時(shí)間滿16 h，自由采食和飲水，每天在5：30、12：00、17：30飼喂。預(yù)飼期為7 d，各試驗(yàn)組雞只所飼喂日糧逐步過渡為試驗(yàn)日糧。

1.4 樣品的采集及測(cè)定

1.4.1 樣品的采集及處理

試驗(yàn)結(jié)束前一天早飼前，從每個(gè)處理的每個(gè)重復(fù)中隨機(jī)選取2只蛋雞，采集蛋雞翼下血液，3 000 r/min離心10 min制備血清，用于相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定。

1.4.2 血液生化指標(biāo)和免疫指標(biāo)的測(cè)定

相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定方法如下：血糖（GLU），葡萄糖氧化酶法；血清尿素氮（BUN），酶兩點(diǎn)動(dòng)力法；甘油三酯（TG），酶比色法；總膽固醇（TC）,CHOD-PAP雙試劑法；谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）的活性，比色法；谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）的活性，賴氏法；高密度脂蛋白的測(cè)定（HDL），清除法；低密度脂蛋白的測(cè)定（LDL），計(jì)算法；血清鈣，采用血清鈣測(cè)定試劑盒(鄰甲酚酞絡(luò)合酮比色法)測(cè)定；血清磷，采用血清磷測(cè)定試劑盒(采用紫外法)測(cè)定；免疫球蛋白IgA、IgM、IgG的測(cè)定，散射速率比濁法，用試劑盒測(cè)定。測(cè)試試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)使用Excel 2013進(jìn)行整理，應(yīng)用SPSS17.0對(duì)整理數(shù)據(jù)做方差分析，并采用Duncan′s檢驗(yàn)法比較各組間差異顯著性，試驗(yàn)數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 添加不同劑量的負(fù)離子制劑對(duì)蛋雞血清生化指標(biāo)的影響（見表3）

由表3可知，C組（0.5%）蛋雞血清中總蛋白的含量較A組（對(duì)照組）提高了15.98%（P＜0.05），白蛋白和球蛋白的含量較A組有升高趨勢(shì)但差異不顯著；隨著負(fù)離子礦物質(zhì)制劑水平的提高，蛋雞血清中的膽固醇含量有下降趨勢(shì)，且B組（0.3%組）和C組（0.5%組）比A組分別降低了4.21%（P＜0.05）、28.74%（P＜0.05）；蛋雞血清中的甘油三酯含量有下降趨勢(shì)，且B組和C組較A組相比分別降低了8.95%（P＜0.05）、37.63%（P＜0.05）；高密度脂蛋白B、C組有升高趨勢(shì)但差異不顯著；B組和C組蛋雞血清中堿性磷酸酶的活性較A組顯著升高，分別升高了20.64%（P＜0.05）和32.24%（P＜0.05），但B組與C組間差異不顯著；蛋雞血清中的血清鈣、血清磷、葡萄糖的含量各組間均無顯著性差異；C組比A組尿素氮的含量降低了15.09%（P＜0.05）。

2.2 添加不同劑量的負(fù)離子制劑對(duì)蛋雞血清免疫指標(biāo)的影響（見表4）

表4 添加試驗(yàn)日糧對(duì)蛋雞血清免疫指標(biāo)的影響（g/l）

由表4可知，C組IgA、IgM的含量較A組分別提高了47.61%（P＜0.05）、31.82%（P＜0.05）；B組及C組蛋雞血清IgG的含量較對(duì)照組有升高趨勢(shì)但差異不顯著（P＞0.05）。

3 討論

3.1 添加不同劑量的負(fù)離子制劑對(duì)蛋雞血清生化指標(biāo)的影響

3.1.1 添加負(fù)離子礦物質(zhì)制劑對(duì)蛋雞血清總蛋白、白蛋白和球蛋白含量的影響

血清總蛋白和白蛋白是肝臟功能和營(yíng)養(yǎng)狀況的重要指標(biāo)，其總體反映了蛋白質(zhì)的吸收、合成和代謝情況。血清球蛋白主要來自于漿細(xì)胞，與免疫有關(guān)。本研究中，添加0.5%負(fù)離子礦物質(zhì)顯著提高了血清總蛋白含量，同時(shí)白蛋白和球蛋白的含量也較對(duì)照組有升高趨勢(shì)。本試驗(yàn)中納米負(fù)離子礦物質(zhì)中含有的鍺和氧化鋅均具有促進(jìn)血清總蛋白含量提高的作用[10]，其提高的機(jī)制可能與改善了蛋雞腸道環(huán)境，提高了肝功能，增強(qiáng)了機(jī)體飼料蛋白質(zhì)的吸收和代謝有關(guān)。此外，負(fù)離子礦物質(zhì)制劑中含有鐵礦粉其對(duì)蛋雞血清中總蛋白的增加也有一定的助力作用。

3.1.2 添加負(fù)離子礦物質(zhì)制劑對(duì)蛋雞血清脂質(zhì)代謝的影響

本試驗(yàn)中，隨著負(fù)離子礦物質(zhì)制劑水平的提高，血清中TG、TC、低密度脂蛋白（LDL）含量呈下降趨勢(shì)，且C組（0.5%組）TG和TC含量顯著低于A組（對(duì)照組），高密度脂蛋白（HDL）呈升高趨勢(shì)，這可能與負(fù)離子礦物質(zhì)制劑中的電氣石、鍺、銅和氧化鋅等有關(guān)。鍺可以增加血清HDL的含量，增加TC的肝臟代謝，從而降低了血清TC的含量。另外，鍺有利于動(dòng)物機(jī)體對(duì)銅的吸收，而銅在降低TC方面有很好的作用，從而使血清TC含量減少。楊利[11]試驗(yàn)結(jié)果指出，Ge-132可有效地修飾鴨的脂質(zhì)方面的代謝，減少血清中TC、TG、蛋黃TC的含量，提高血清HDL水平。于瑞敏等[12]研究了Ge-132對(duì)大鼠脂質(zhì)代謝的影響，結(jié)果得出其能提高HDL/TC的比值。另外，鍺可明顯增強(qiáng)谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性，而GSH-Px活性對(duì)合成膽固醇前體的輔酶有影響，可降低肝臟合成膽固醇，影響血清膽固醇的水平。

3.1.3 添加負(fù)離子礦物質(zhì)制劑對(duì)蛋雞血清谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶和堿性磷酸酶含量的影響

谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）和谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）參與畜禽體內(nèi)的轉(zhuǎn)氨基活動(dòng)，在正常范圍內(nèi)提高其活性，可提高蛋白質(zhì)代謝效率。本試驗(yàn)中添加負(fù)離子礦物質(zhì)制劑的兩組的GPT和GOT活性與對(duì)照組相比呈逐漸升高趨勢(shì)，但沒有達(dá)到顯著水平，說明負(fù)離子礦物質(zhì)制劑可提高這兩種酶的活性，從而提高蛋白質(zhì)代謝效率，但對(duì)肝臟功能無不良影響。王慧明[8]將負(fù)離子制劑加入到日糧中飼喂牛，結(jié)果血液GPT和GOT的變化與本研究結(jié)果一致。

堿性磷酸酶（ALP）是畜禽消化代謝過程中的關(guān)鍵酶，它的活性大小是畜禽機(jī)體的生長(zhǎng)和代謝狀況的標(biāo)志。本試驗(yàn)中添加負(fù)離子礦物質(zhì)制劑的兩組的ALP活性與對(duì)照組相比顯著升高,這可能與負(fù)離子礦物質(zhì)制劑中鋅有關(guān)。鋅是合成ALP所必不可少的金屬離子，ALP的活性與日糧中鋅的多少和機(jī)體內(nèi)鋅的含量密切相關(guān)。負(fù)離子礦物質(zhì)制劑含有一定量的納米氧化鋅，從而提高了蛋雞血清中ALP的活性，這與徐奇友等[13]研究的納米氧化鋅極顯著提高了血清鋅水平和ALP水平結(jié)論一致。

3.1.4 添加負(fù)離子礦物質(zhì)制劑對(duì)蛋雞血清尿素氮、葡萄糖、血鈣和血磷水平的影響

尿素氮是體內(nèi)蛋白質(zhì)和氨基酸代謝的最終生成物，血清中尿素氮的水平完全可以體現(xiàn)畜禽蛋白質(zhì)和氨基酸代謝的基本狀態(tài)。當(dāng)畜禽機(jī)體與氨基酸的代謝相關(guān)的活動(dòng)出現(xiàn)異常情況時(shí)，會(huì)導(dǎo)致血清尿素氮濃度升高。當(dāng)畜禽機(jī)體蛋白質(zhì)的形成數(shù)量較多時(shí)候，血清中的含量就會(huì)減少。本試驗(yàn)表明，負(fù)離子礦物質(zhì)組血清尿素氮含量較對(duì)照組降低，說明負(fù)離子礦物質(zhì)具有促進(jìn)蛋雞體內(nèi)蛋白質(zhì)合成作用，對(duì)腎臟的組織也無損傷。這與李雅茹等[6]研究的硫磺負(fù)離子礦物質(zhì)對(duì)肉雞血清尿素氮有提高的作用結(jié)果一致。

蛋雞血液中的糖大部分是葡萄糖，其是碳水化合物的中間產(chǎn)物，是蛋雞各個(gè)組織器官細(xì)胞的活動(dòng)所需的能量的重要來源。當(dāng)血糖超出正常生理常數(shù)時(shí)，說明蛋雞機(jī)體出現(xiàn)異常。本試驗(yàn)結(jié)果表明，負(fù)離子礦物質(zhì)具有降低血糖作用，且不低于正常值。本試驗(yàn)中隨著負(fù)離子礦物質(zhì)水平的升高，血鈣和血磷含量增加，說明負(fù)離子礦物質(zhì)制劑具有促進(jìn)飼料中鈣離子吸收作用。

3.2 添加不同劑量的負(fù)離子制劑對(duì)蛋雞血清免疫指標(biāo)的影響

本試驗(yàn)表明負(fù)離子礦物質(zhì)添加具有提高血清中IgG、IgA和IgM含量的作用，說明負(fù)離子礦物質(zhì)制劑對(duì)蛋雞自身免疫力提高有積極的促進(jìn)作用。這可能與負(fù)離子礦物質(zhì)制劑中含有鍺元素有關(guān)。有研究指出，鍺對(duì)于畜禽來說，可以起到免疫調(diào)節(jié)的功效，它能夠提高許多免疫細(xì)胞的活性，從而提高機(jī)體自身對(duì)于各種疾病的免疫力。李偉毅[14]用有機(jī)鍺飼喂小鼠，結(jié)果得出鍺能提高B淋巴細(xì)胞抗體產(chǎn)生的能力。唐兆新等[15]的研究表明，鍺可以顯著增加雛雞的血清中IgA和IgM含量。本研究結(jié)論與負(fù)離子礦物質(zhì)添加到肉雞飼料中，對(duì)肉雞免疫指標(biāo)影響的結(jié)論一致[6]。

4 結(jié)論

產(chǎn)蛋期的蛋雞添加0.5%負(fù)離子礦物質(zhì)制劑可以顯著提高血清中總蛋白含量及堿性磷酸酶活性，顯著降低血清中總膽固醇、甘油三酯和尿素氮的含量；同時(shí)，添加0.5%負(fù)離子礦物質(zhì)制劑顯著或極顯著提高了產(chǎn)蛋期蛋雞血清中IgA和IgM的含量，提高了產(chǎn)蛋期蛋雞的免疫力。