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    待孕婦女年齡和獲卵數(shù)對(duì)卵胞漿內(nèi)單精子注射治療結(jié)局的影響

    2016-01-04 07:09:27徐文杰,黃官友,周從容
    關(guān)鍵詞:卵子胚胎年齡

    待孕婦女年齡和獲卵數(shù)對(duì)卵胞漿內(nèi)單精子注射治療結(jié)局的影響*

    **通信作者 E-mail:337191373@qq.com

    網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間:2015-10-13網(wǎng)絡(luò)出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/52.5012.R.20151013.1301.046.html

    徐文杰, 黃官友, 周從容**

    (貴州醫(yī)科大學(xué)附院 生殖中心, 貴州 貴陽(yáng)550004)

    [摘要]目的: 探討卵胞漿內(nèi)單精子注射(ICSI)治療中待孕婦女年齡和獲卵數(shù)對(duì)胚胎質(zhì)量及臨床結(jié)局的影響。方法: 接受ICSI助孕治療的520名待孕婦女,(1)根據(jù)年齡分為≤25歲組(A組)、26~30歲組(B組)、31~34歲組(C組)和≥35歲組(D組),(2)根據(jù)獲卵數(shù)分為≤4枚組(Ⅰ組)、5~10枚組(Ⅱ組)、11~15枚組(Ⅲ組)、16~20枚組(Ⅳ組)和≥21枚組(Ⅴ組);采用ICSI技術(shù)受精,比較ICSI治療周期后不同年齡組間異常受精率、胚胎停育率、優(yōu)質(zhì)胚胎率、胚胎冷凍率、種植率及臨床妊娠率的變化,比較不同獲卵數(shù)組間雌雄原核(2PN)卵裂率、優(yōu)質(zhì)胚胎率、胚胎種植率、胚胎冷凍率、胚胎停育率及臨床妊娠率的改變。結(jié)果: (1)A組和B組的異常受精率及胚胎停育率顯著低于C組和D組(P<0.05),優(yōu)質(zhì)胚胎率和胚胎冷凍率按照A、B、C及D組依次降低(P<0.05),A組和B組種植率和臨床妊娠率高于C組和D組(P<0.05);(2)I組的2PN卵裂率、優(yōu)質(zhì)胚胎率和胚胎種植率明顯低于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ及Ⅴ組(P<0.05);胚胎冷凍率按照Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組及Ⅴ組依次降低(P<0.05);I組的胚胎停育率顯著高于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ及Ⅴ組(P<0.05),而臨床妊娠率則明顯低于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ及Ⅴ組(P<0.05)。結(jié)論: 隨著待孕婦女年齡的增長(zhǎng),胚胎質(zhì)量下降,臨床結(jié)局較差;獲卵數(shù)在11~15枚之間的胚胎質(zhì)量較高、臨床結(jié)局較好。

    [關(guān)鍵詞]卵胞漿內(nèi)單精子注射; 卵子; 胚胎; 年齡; 臨床結(jié)局

    [基金項(xiàng)目]*貴州省衛(wèi)計(jì)委科學(xué)技術(shù)

    [中圖分類(lèi)號(hào)]R714.8[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A

    Effects of Women's Age and Oocyte Number on the Ttreatment

    Outcome of Intracytoplasmic Sperm Injection

    XU Wenjie,HUANG Guanyou,ZHOU Congrong

    (ReproductiveCenter,AffiliatedHospitalofGuizhouMedicalUniversity,Guiyang550004,Guizhou,China)

    Abstract[] Objective: To investigate the effect of women's age and the number of retrieved oocytes on embryo quality and clinical outcome after intracytoplasmic sperm injection(ICSI). Methods: A retrospective study was carried out to analyze the clinical data of 520 women receiving ICSI. (1) According to age,they were divided into less than or equal to 25 years old group(group A),26 to 30 years old group (group B),31 to 34 years old group (group C) and more than or equal to 35 years old group (group D).(2)According to the oocyte number,they were divided into less than or equal to 4 (group Ⅰ), 5 to 10 (group Ⅱ), 11 to 15 (group Ⅲ),16 to 20 (group Ⅳ) and more than or equal to 21 (group V). After the period ICSI treatment, abnormal fertilization rate, embryo diapause rate, good quality embryo rate, embryo freezing rate, embryo implantation rate and clinical pregnancy rate between different age group were compared while 2PN cleavage rate, good quality embryo rate, embryo implantation rate, embryo freezing rate, embryo diapause rate and clinical pregnancy rate between different oocyte number group were compared. Results:(1)Abnormal fertilization rate and embryo diapause rate of group A and group B were lower than those of group C and group D (P<0.05). Among the four groups,good quality embryo rate and embryo freezing rate showed a decreasing trend from group A to group D (P<0.05). Embryo implantation rate and clinical pregnancy rate of group A and group B were higher than those of group C and group D (P<0.05). (2)2PN cleavage rate and good quality embryo rate and embryo implantation rate of group Ⅰ were lower than those of the other groups (P<0.05). Between the five groups,embryo freezing rate showed a decreasing trend from group Ⅰ to Ⅴ (P<0.05). Embryo diapause rate of group Ⅰ was higher than that of the other groups (P<0.05),while clinical pregnancy rate of group Ⅰ was significantly lower than that of the other groups (P<0.05). Conclusion: With the increase of pregnant women's age, embryo quality is decreased and clinical outcome is poor. When the embryo number is between 11 and 15,embryo quality was high and clinical outcome is good.

    [Key words] intracytoplasmic sperm injection; oocyte; embryo; age; clinical outcome

    1992年P(guān)alermo等[1]首次采用卵胞漿內(nèi)單精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI) 技術(shù)獲得妊娠成功,該項(xiàng)技術(shù)迅速在世界范圍內(nèi)推廣,成為男性不育治療史上的一座里程碑。ICSI技術(shù)是將精子直接注入卵胞漿內(nèi)完成受精,降低了對(duì)精子數(shù)量、活動(dòng)率及受精能力的要求[2]。有研究證實(shí),隨著待孕婦女年齡的增長(zhǎng),會(huì)出現(xiàn)卵巢儲(chǔ)備能力下降、激素水平紊亂、超排卵過(guò)程中卵泡發(fā)育不同步等狀況[3]。本文通過(guò)回顧性分析接受ICSI助孕治療的520例待孕婦女的臨床資料,探討待孕婦女的年齡和獲卵數(shù)對(duì)ICSI治療結(jié)局的影響。

    1資料與方法

    1.1 一般資料

    將2013年1月~2014年6月接受ICSI助孕治療的520例待孕婦女進(jìn)行分組:(1)根據(jù)年齡分為≤25歲組(A組)、26~30歲組(B組)、31~34歲組(C組)及≥35歲組(D組),(2)根據(jù)獲卵數(shù)分為≤4枚組(I組)、5~10枚組(Ⅱ組)、11~15枚組(Ⅲ組)、16~20枚組(Ⅳ組)及≥21枚組(Ⅴ組)。ICSI治療周期納入標(biāo)準(zhǔn):代孕婦女丈夫符合以下條件之一者:(1)需行睪丸或附睪穿刺術(shù);(2)所獲精子、精子密度≤1×109/L,或前向運(yùn)動(dòng)精子百分比≤1%,或正常形態(tài)精子≤1%;(3)精子密度為(1~5)×109/L及前向運(yùn)動(dòng)精子百分比≤20%,或精子密度為(1~5)×109/L及正常形態(tài)精子≤3%;(4)精子密度為(6~15)×109/L及前向運(yùn)動(dòng)精子百分比≤10%,或精子密度為(6~15)×109/L及正常形態(tài)精子≤2%;(5)精子密度為≥16×109/L及前向運(yùn)動(dòng)精子百分比≤5%,或精子密度為≥16×109/L及正常形態(tài)精子≤1%。

    1.2 方法

    采用黃體期降調(diào)節(jié)長(zhǎng)方案進(jìn)行超排卵,B超下監(jiān)測(cè)有2個(gè)主導(dǎo)卵泡直徑≥18 mm時(shí)停用促性腺激素(Gn),注射6 000~10 000 IU人絨毛促性腺激素(HCG),36 h后取卵;丈夫于取卵日同時(shí)手淫法取精或經(jīng)睪丸/附睪(TASA/PESA)穿刺取精,通過(guò)密度梯度離心法處理精液,采用ICSI技術(shù)受精。

    1.3 觀察指標(biāo)

    觀察ICSI治療周期后不同年齡組孕婦卵泡的異常受精率、胚胎停育率、優(yōu)質(zhì)胚胎率、胚胎冷凍率、種植率及臨床妊娠率的變化,比較不同獲卵數(shù)組間雌雄原核(2PN)卵裂率、優(yōu)質(zhì)胚胎率、胚胎種植率、胚胎冷凍率、胚胎停育率及臨床妊娠率的改變。優(yōu)質(zhì)胚胎評(píng)判標(biāo)準(zhǔn):將第2天≥3細(xì)胞、評(píng)分評(píng)級(jí)[4]為Ⅰ~Ⅱ級(jí)或第3天≥6細(xì)胞評(píng)分評(píng)級(jí)為Ⅰ~Ⅱ級(jí)的胚胎定為優(yōu)質(zhì)胚胎。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 16.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,采用單因素方差分析,兩兩比較采用t檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料用率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2結(jié)果

    2.1 待孕婦女年齡對(duì)胚胎質(zhì)量和臨床結(jié)局的影響

    A組的獲卵枚數(shù)明顯高于B組、C組和D組,B組和C組明顯高于D組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);A組和B組的異常受精率及胚胎停育率顯著低于C組和D組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),A組和B組、C組和D組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);優(yōu)質(zhì)胚胎率和胚胎冷凍率按照A、B、C及D組依次降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);在種植率和臨床妊娠率方面,A組、B組種植率和臨床妊娠率高于C組和D組, C組高于D組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

    表1 孕婦年齡對(duì)胚胎質(zhì)量和臨床結(jié)局的影響

    2.2 獲卵數(shù)對(duì)胚胎質(zhì)量和臨床結(jié)局的影響

    Ⅰ組的年齡明顯大于Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組和Ⅴ組(P<0.05),2PN卵裂率、優(yōu)質(zhì)胚胎率和胚胎種植率則明顯低于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ及Ⅴ組(P<0.05);胚胎冷凍率按照Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ及Ⅴ組依次降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);Ⅰ組的胚胎停育率顯著高于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ及Ⅴ組,而臨床妊娠率則明顯低于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ及Ⅴ組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

    (1)與Ⅰ組同指標(biāo)比較,P<0.05;(2)與Ⅱ組同指標(biāo)比較,P<0.05;(3)與Ⅲ組同指標(biāo)比較,P<0.05;(4)與Ⅳ組同指標(biāo)比較,P<0.05

    3討論

    雖然ICSI技術(shù)在治療男性不育方面獲得了良好的臨床結(jié)局,但其安全性仍存在爭(zhēng)議。本文從待孕婦女年齡和獲卵數(shù)兩個(gè)影響因素入手,通過(guò)對(duì)比分析相關(guān)臨床資料,探討它們對(duì)ICSI治療效果的影響。

    盡管輔助生殖技術(shù)(ART)降低了年齡對(duì)妊娠的影響,但錯(cuò)過(guò)最佳孕育年齡的高齡不孕婦女,由于多數(shù)存在卵巢功能異常、儲(chǔ)備能力下降、激素水平紊亂、超排卵過(guò)程中卵泡發(fā)育不同步等因素,可能直接導(dǎo)致獲卵數(shù)較低。本研究發(fā)現(xiàn),年齡≤25歲的婦女獲卵數(shù)枚明顯高于其它年齡組(P<0.05),當(dāng)年齡≥35歲時(shí)獲卵數(shù)最低。Dain L等[5]認(rèn)為,卵齡增加可能導(dǎo)致卵母細(xì)胞中的蛋白質(zhì)和mRNA減少,從而增加異常受精率,同時(shí)還會(huì)影響優(yōu)質(zhì)胚胎的形成。本研究數(shù)據(jù)表明,30歲以下患者的異常受精率顯著低于31歲以上患者(P<0.05),優(yōu)質(zhì)胚胎率和胚胎冷凍率A、B、C及D組依次降低(P<0.05),提示隨著年齡的增加,可能因?yàn)槁涯讣?xì)胞的染色體異常率及非整倍體率升高,加大了異常受精的幾率,卵齡的增加也使卵母細(xì)胞質(zhì)量下降,導(dǎo)致優(yōu)質(zhì)胚胎率及胚胎冷凍率減低。現(xiàn)有研究證實(shí),年齡可影響胚胎質(zhì)量,而胚胎質(zhì)量及種植潛能是影響妊娠成功的關(guān)鍵因素。Mateo S等[6]認(rèn)為,妊娠率與胚胎質(zhì)量和發(fā)育速度關(guān)系密切。Yan J等[7]研究發(fā)現(xiàn),移植了8細(xì)胞且融合度好的優(yōu)質(zhì)胚胎,其臨床妊娠率最高。羅燕群等[8]則報(bào)道,當(dāng)有優(yōu)質(zhì)胚胎可移植時(shí),高齡患者中較年輕者(35 ~38 周歲)移植胚胎數(shù)由3枚降至2枚可能不會(huì)降低臨床妊娠率,但可以明顯降低多胎發(fā)生率。本文數(shù)據(jù)顯示,30歲以下患者的胚胎停育率顯著低于31歲以上患者(P<0.05),而在胚胎種植率和臨床妊娠率方面,恰好與胚胎停育率結(jié)果相反(P<0.05),與上述學(xué)者的研究觀點(diǎn)基本一致。

    獲卵數(shù)過(guò)少是否同時(shí)伴有卵子質(zhì)量下降問(wèn)題目前仍存有爭(zhēng)議。本研究的520例ICSI治療周期中,獲卵數(shù)≤4枚組的年齡歲明顯大于其余4組(P<0.05),而2PN卵裂率、優(yōu)質(zhì)胚胎率和胚胎種植率則顯著低于其余4組(P<0.05),并且5組之間的胚胎冷凍率遞增(P<0.05),同時(shí),獲卵數(shù)≤4枚患者的胚胎停育率顯著高于獲卵數(shù)≥5枚的患者(P<0.05),而臨床妊娠率則明顯低于獲卵數(shù)≥5枚的患者(P<0.05), 提示隨著孕齡增加、卵巢儲(chǔ)備能力下降,獲卵數(shù)的降低和卵母細(xì)胞質(zhì)量變差,影響了胚胎結(jié)局和臨床結(jié)局。

    綜上所述,胚胎發(fā)育是一個(gè)多步驟和多因素影響的動(dòng)態(tài)過(guò)程。胚胎質(zhì)量的優(yōu)劣關(guān)系著ICSI助孕治療的臨床結(jié)局。待孕婦女年齡和獲卵數(shù)則是影響ICSI治療效果的關(guān)鍵因素,與胚胎質(zhì)量和臨床結(jié)局息息相關(guān)。

    4參考文獻(xiàn)

    [1] Palermo G,Joris H, Devroey P,et al. Pregnancies after intracytoplasmic injection of single spermatozoon into an oocyte[J].Lancet, 1992 (8810):17-18.

    [2] Alukal J,Lamb D.Intracytoplasmic sperm injection (ICSI) what are the risks? [J].Urol Clin North Am, 2008(2):277-288.

    [3] 梁琳,陳秀娟. 高齡不孕患者不同輔助生育技術(shù)的胚胎發(fā)育情況及妊娠結(jié)局分析[J].中華婦幼臨床醫(yī)學(xué)雜志, 2014(6):770-773.

    [4] 黃國(guó)寧,孫海翔,何方方,等.體外受精-胚胎移植實(shí)驗(yàn)室技術(shù)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社, 2012:240-243.

    [5] Dain L,Auslander R,Dirnfeld M. The effect of paternal age on assisted reproduction outcome[J]. Fetil Steril, 2011(3):1-8.

    [6] Mateo S,Parriego M,Boada M,et al. In vitro development and chromosome constitution of embryos derived from monopronucleated zygotes after intracytoplasmic spem injection[J]. Fetil Steril, 2013(3):897-902.

    [7] Yan J,Li Y,Shi Y,et al. Assessment sex chromosome of human embryos arising from monopronucleated zygotes in In vitro fertilization and intracytoplasmic spem injection cycles of Chinese women[J]. Gynecol obstel, 2010(1):20-23.

    [8] 羅燕群,劉風(fēng)華,易艷紅,等. 年齡、移植胚胎數(shù)量、質(zhì)量與臨床妊娠率的關(guān)系[J]. 生殖醫(yī)學(xué)雜志, 2014(5):361-366.

    (2015-08-02收稿,2015-09-22修回)

    中文編輯: 吳昌學(xué); 英文編輯: 劉華

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