松針提取物對(duì)優(yōu)質(zhì)型青腳麻雞血液生化指標(biāo)、抗氧化能力及免疫功能的影響

劉舉祥，覃小榕,2，韋宗海，顧文松，莫 瓊，唐紅平，葛洪偉,4*

（1.廣西南寧市富鳳農(nóng)牧有限公司，廣西 南寧 530001；2.廣西柳州市柳城縣沙埔鎮(zhèn)水產(chǎn)畜牧獸醫(yī)站，廣西 柳城 545206；3.鎮(zhèn)江天和生物技術(shù)有限公司，江蘇 揚(yáng)中 212214；4.泰州市河橫家禽育種有限公司，江蘇 姜堰 225538）

松針提取物對(duì)優(yōu)質(zhì)型青腳麻雞血液生化指標(biāo)、抗氧化能力及免疫功能的影響

劉舉祥1，覃小榕1,2，韋宗海1，顧文松3，莫 瓊1，唐紅平1，葛洪偉1,4*

（1.廣西南寧市富鳳農(nóng)牧有限公司，廣西 南寧 530001；2.廣西柳州市柳城縣沙埔鎮(zhèn)水產(chǎn)畜牧獸醫(yī)站，廣西 柳城 545206；
3.鎮(zhèn)江天和生物技術(shù)有限公司，江蘇 揚(yáng)中 212214；4.泰州市河橫家禽育種有限公司，江蘇 姜堰 225538）

為研究松針提取物對(duì)優(yōu)質(zhì)型青腳麻雞血液生化指標(biāo)、抗氧化能力和免疫功能的影響，試驗(yàn)選取1日齡優(yōu)質(zhì)型青腳麻雞1 600只為試驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行為期120 d的飼養(yǎng)試驗(yàn)。試驗(yàn)雞群隨機(jī)分為兩組，每組2個(gè)重復(fù)。在飼養(yǎng)過程中，對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧；試驗(yàn)組全程在基礎(chǔ)飼糧中添加松針提取物。結(jié)果表明，飼糧中添加松針提取物能顯著提高血清中谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）的活性、提高總抗氧化能力（T-AOC）、降低血清中丙二醛（MDA）的含量（P＜0.05）；顯著提高IgA、IgG、IgM、補(bǔ)體C3和補(bǔ)體C4含量（P＜0.05）；顯著提高血清中鈣、磷含量，降低血清中膽固醇含量（P＜0.05）。因此，松針提取物能夠顯著改善優(yōu)質(zhì)型青腳麻雞的血液生化指標(biāo)，提高抗氧化能力和免疫功能。

松針提取物；優(yōu)質(zhì)型青腳麻雞；生化指標(biāo)；抗氧化；免疫

由于各類獸用抗生素和化學(xué)合成類藥物在畜禽生產(chǎn)過程中的不規(guī)范使用所導(dǎo)致的問題層出不窮，如細(xì)菌性疾病的耐藥性不斷加大，治療成本加大，殘留在畜禽產(chǎn)品的藥物還將嚴(yán)重危害人類的身體健康，也造成了環(huán)境污染。因此，尋求高效、環(huán)保、安全的抗生素替代產(chǎn)品已成了當(dāng)前畜牧業(yè)工作者研究的熱點(diǎn)和重點(diǎn)[1-2]。

松針含多種成分，包括揮發(fā)油類、粗蛋白質(zhì)、氨基酸、色素、多元酚類、脂肪酸等，具有抗氧化、抗疲勞、抗衰老、抑菌等多種作用，能提高動(dòng)物生產(chǎn)性能[3-4]。因此，本試驗(yàn)利用松針提取物對(duì)優(yōu)質(zhì)型青腳麻雞產(chǎn)蛋性能進(jìn)行試驗(yàn)，探討其對(duì)優(yōu)質(zhì)型青腳麻雞血液生化指標(biāo)、抗氧化能力及免疫功能的影響，以期為優(yōu)質(zhì)型青腳麻雞的健康養(yǎng)殖提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 松針提取物制備

將松針切碎后與一定量95%的乙醇溶液混合，常溫下浸提3 h，抽濾（重復(fù)3次），合并濾液，減壓蒸餾，揮去乙醇，并在真空旋轉(zhuǎn)儀上濃縮（水浴恒溫60℃，水真空），制成相對(duì)密度1.18～1.25的清膏，再與二氧化硅以1∶3進(jìn)行混合（質(zhì)量比），干燥（經(jīng)測(cè)定水分含量＜8.0%），密封備用。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及飼糧

試驗(yàn)選取1日齡優(yōu)質(zhì)型青腳麻雞1 600只，隨機(jī)分為兩組，每組兩個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)400只，試驗(yàn)期120 d。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組飼喂基礎(chǔ)飼糧加松針提取物300 mg·kg-1，基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平

1.3 試驗(yàn)地點(diǎn)和時(shí)間

試驗(yàn)期為2014年6月19日～10月16日，全期為120 d。試驗(yàn)地點(diǎn)為廣西南寧市富鳳農(nóng)牧有限公司丁當(dāng)育種中心。

1.4 飼養(yǎng)管理

所有試驗(yàn)雞全程人工投料，自由采食和飲水；常規(guī)免疫接種；專人負(fù)責(zé)管理，每天專人收集試驗(yàn)雞的采食量、雞群的糞便、呼吸道情況、精神狀態(tài)等相關(guān)數(shù)據(jù)和資料。

1.5 測(cè)定方法

1.5.1 血液抗氧化指標(biāo)測(cè)定

血清中谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、過超氧化物歧化酶（SOD）的活性、總抗氧化能力（T-AOC）和丙二醛（MDA）含量均用PowerWave XS型全波長酶標(biāo)儀比色法測(cè)定，按試劑盒所提供的方法進(jìn)行測(cè)定。

1.5.2 血液免疫指標(biāo)測(cè)定

免疫球蛋白A（IgA）、血清免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、補(bǔ)體C3和補(bǔ)體C4的含量測(cè)定使用RX DAYTONA全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定，按照廠家提供的試劑配制和操作步驟按說明書進(jìn)行。

1.5.3 血清生化指標(biāo)的測(cè)定

在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，各重復(fù)組隨機(jī)抽取試驗(yàn)蛋雞30只，翅靜脈采集血樣，使用離心機(jī)分離血清（3 000 rpm，10 min），分裝入凍存管中于-20℃保存，測(cè)定各項(xiàng)血液指標(biāo)前于4℃冰箱中自然化凍。鈣、磷和膽固醇含量的測(cè)定均用試劑盒配置和操作步驟按說明書進(jìn)行。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)結(jié)果采用SPSS 10.0軟件中One Way ANOVA進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，并進(jìn)行Duncan's多重比較，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 對(duì)抗氧化能力的影響

松針提取物對(duì)抗氧能力的影響見表2。

由表2可知，與對(duì)照組相比，血清中的GSH-Px、SOD和T-AOC分別比對(duì)照組提高51.82 μmol·L-1、34.14和5.5 U·mL-1（P＜0.05）；MDA含量下降5.16 nmol·mL-1（P＜0.05），說明松針提取物能夠顯著提高雞群的抗氧化能力。

2.2 對(duì)免疫功能的影響

松針提取物對(duì)免疫功能的影響見表3。

表2 松針提取物對(duì)抗氧化能力的影響

表3 松針提取物對(duì)免疫功能的影響 g·L-1

由表3可知，試驗(yàn)組與對(duì)照組相比，IgA、IgG、IgM、補(bǔ)體C3和補(bǔ)體C4分別提高0.078 g·L-1、0.106 g·L-1、0.084 g·L-1、0.35 g·L-1和0.038 g·L-1，兩組間差異顯著（P＜0.05）。

2.3 對(duì)血清生化指標(biāo)的影響

松針提取物對(duì)血清生化指標(biāo)的影響見表4。

表4 松針提取物對(duì)血清生化指標(biāo)的影響mmol·L-1

由表4可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組雞群的血清中鈣、磷的含量分別提高0.76和1.15mmol·L-1，兩組間差異顯著（P＜0.05）；試驗(yàn)組血清中膽固醇含量比對(duì)照組下降0.68 mmol·L-1，兩組間差異顯著（P＜0.05）。

3 討論

3.1 對(duì)血清抗氧化能力的影響

松針提取物富含黃酮類化合物，Kwak等研究表明，松針含有的黃酮類化合物具有有效清除氧自由基的作用[5]。李慶明等研究表明，松針具有較強(qiáng)的還原力和抗氧化能力，在抗氧化方面具有巨大的開發(fā)潛力[6]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，松針能顯著提高優(yōu)質(zhì)型青腳麻雞血清中的GSH-Px、SOD含量和提高T-AOC（P＜0.05），顯著降低MDA含量（P＜0.05）。

3.2 對(duì)免疫功能的影響

陳長武等利用白鼠作為試驗(yàn)動(dòng)物，觀察白鼠的存活時(shí)間、連續(xù)游泳時(shí)間，并做免疫器官重量試驗(yàn)，結(jié)果表明，松針提取物能夠提高小鼠SOD的活性，降低老年鼠血清過氧化脂質(zhì)（LPO）含量，表明松針具有抗衰老作用[7]。曾明等以小鼠為試驗(yàn)動(dòng)物研究松針對(duì)小鼠抗疲勞的影響，結(jié)果表明，松針能夠使試驗(yàn)小鼠的SOD和乳酸脫氫酶（LDH）的活性、血紅蛋白（Hb）的含量顯著升高（P＜0.05），表明松針提取物有顯著的抗疲勞和提高免疫功能的作用（P＜0.05）[8]。梁衛(wèi)花研究表明，添加松針提取物飼料添加劑能增加免疫器官指數(shù)，促進(jìn)巨噬細(xì)胞的吞噬功能，提高淋巴細(xì)胞（增殖），對(duì)肉雞的體液免疫和細(xì)胞免疫有明顯促進(jìn)作用[9]。李麗芬等以小鼠為試驗(yàn)動(dòng)物研究松針對(duì)小鼠應(yīng)激能力及免疫功能的影響，進(jìn)而探討松針的抗衰老作用機(jī)制，結(jié)果表明，松針可以提高小鼠在低溫環(huán)境下的耐寒冷能力，降低死亡率；增強(qiáng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬百分率，并且使吞噬指數(shù)提高；還能促進(jìn)正常小鼠胸腺和脾臟重量的增加，與對(duì)照組相比，差異極顯著（P＜0.01）[10]。王偉等以雛雞為試驗(yàn)動(dòng)物研究松針對(duì)雛雞免疫功能和血清膽固醇的影響，結(jié)果表明，松針粉和水煎劑可促進(jìn)T淋巴細(xì)胞的增殖與分化，提高CD3+CD4+和CD3+CD8+T淋巴細(xì)胞含量，協(xié)同疫苗增強(qiáng)特異性免疫，不同程度的降低血清膽固醇水平[11]。唐勝球等、亢娟娟等研究表明，松針粉添加劑能夠促進(jìn)免疫細(xì)胞的增殖和分化，對(duì)雞的免疫器官指數(shù)有一定促進(jìn)作用[12-13]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，松針能顯著提高優(yōu)質(zhì)型青腳麻雞的IgA、IgG、IgM、補(bǔ)體C3和補(bǔ)體C4的含量（P＜0.05），有助于提高優(yōu)質(zhì)型青腳麻雞的免疫功能。

3.3 對(duì)優(yōu)質(zhì)型青腳麻雞血清生化指標(biāo)的影響

鄭曉珂等、王春梅等等研究表明，松針具有抗應(yīng)激、降低膽固醇、降血糖、抑菌等作用[14-15]。鈣、磷是影響蛋品質(zhì)的重要因子，應(yīng)激會(huì)干擾蛋雞體內(nèi)的鈣、磷代謝，造成血清中鈣、磷含量的下降，從而影響蛋雞產(chǎn)蛋性能和蛋品質(zhì)。陸海英等以廣西麻雞為試驗(yàn)動(dòng)物，研究松針提取物對(duì)廣西麻雞產(chǎn)蛋性能的影響，結(jié)果表明，松針提取物能顯著減緩廣西麻雞產(chǎn)蛋后期下降速度（P＜0.05），顯著降低不合格蛋的比率（P＜0.05），這在一定層面上驗(yàn)證了本試驗(yàn)的結(jié)論[16]。膽固醇是類固醇激素合成的前體，應(yīng)激能夠刺激腎上腺素加強(qiáng)，從而增強(qiáng)對(duì)膽固醇的需求。本試驗(yàn)結(jié)果表明，松針提取物能顯著提高血清中鈣、磷的含量（P＜0.05），從而提高雞蛋品質(zhì)，并且能降低膽固醇水平，由此可知，松針提取物可顯著改善優(yōu)質(zhì)型青腳麻雞血清生化指標(biāo)。

4 結(jié)論

松針提取物作為飼料添加劑，能顯著提高優(yōu)質(zhì)型青腳麻雞雞血清生化指標(biāo)、抗氧化能力和免疫能力。

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Effect of Pine Needle PE on Blood Biochemical Indices, Antioxidation and Immunity of Quality Cyan-shank Partridge Chicken

LIU Juxiang1,TAN Xiaorong1,2,WEI Zonghai1,GU Wensong3, MO Qiong1,TANG Hongping1,GE Hongwei1,4*

（1.Guangxi Nanning Fufeng Husbandry Co.,Ltd.,Nanning 530001,China;
2.Shacheng Town Aquatic Animal Husbandry and Veterinary Station of Liucheng Country,Liuzhou 545206,Guangxi China;
3.Zhenjiang Tianhe Bio-technology Co.,Ltd.,Yangzhong 212214,Jiangsu China;
4.Taizhou Heheng Poultry Breeding Co.,Ltd.,Jiangyan 225538,Jiangsu China）

The feeding test was deigned to investigate the effects of pine needle PE on the mechanism of action from antioxidation,immunity and biochemistry of quality cyan-shank partridge chicken.One thousand and six hundred quality cyan-hank partridge chickens were randomly assigned to two groups,each group had two repeats.Control group was provided with basic diet,while test group was fed with basic diets added pine needle PE for 120 days. The results showed that the methods of test group can significantly increased serum GSH-Px,T-AOC and SOD(P＜0.05),and decreased MDA content(P＜0.05),significantly increased IgA,IgG,IgM,Complement C3 and ComplementC4 contents in serum(P＜0.05),increased Ca and P in serum significantly(P＜0.05)and decreased cholesterol(P＜0.05).The conclusion of the study was pine needle PE can effectively improve immune function enhancing the antioxidant capacity and improving serum biochemistry indices.

pine needle PE;quality cyan shank partridge chicken;biochemistry;antioxidantion;immunity

S831.5

A

1001-0084（2015）03-0035-04

2015-02-03

廣西省南寧市興寧區(qū)2014年度科學(xué)研究與技術(shù)開發(fā)項(xiàng)目（2014007）

劉舉祥（1970-），男，廣西平果人，主要從事肉雞標(biāo)準(zhǔn)化養(yǎng)殖。

*通訊作者：高級(jí)畜牧師，E-mail:ghwxyl@163.com。