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    慢性乙型肝炎病毒感染者基因型分布及與HBV M關(guān)系的初步探討

    2015-12-29 07:35:26高海彥張會(huì)玲王文斌李艷萍
    衛(wèi)生職業(yè)教育 2015年7期
    關(guān)鍵詞:武威載量B型

    高海彥,張會(huì)玲,王文斌,楊 楊,李艷萍

    (1.武威市涼州醫(yī)院,甘肅 武威 733000;2.武威市中心血站,甘肅 武威 733000)

    慢性乙型肝炎病毒感染者基因型分布及與HBV M關(guān)系的初步探討

    高海彥1,張會(huì)玲1,王文斌1,楊 楊2,李艷萍1

    (1.武威市涼州醫(yī)院,甘肅 武威 733000;2.武威市中心血站,甘肅 武威 733000)

    目的 探討慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者基因型分布及與乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物(HBV M)的相互關(guān)系。方法采用特異性引物聚合酶鏈反應(yīng)PCR(FQ-PCR)法,檢測(cè)3 400例乙型肝炎患者HBV-DNA,并對(duì)1 380例病毒復(fù)制大于103copies/ul者,進(jìn)行ALT、AST、HBV M、HBV基因型檢測(cè)。結(jié)果 1 380份血清中共檢出C型1 108例(80.3%),主要分布于乙型肝炎后肝硬化(LC)和原發(fā)性肝癌(HCC)患者中;B型247例(17.9%),主要分布于乙型肝炎病毒攜帶者(ASC)中;B+C混合型25例(1.8%)。不同HBV基因型在HBV-DNA載量、HBeAg、HBeAb上存在顯著性差異,ALT、AST比較無(wú)顯著性差異。結(jié)論 武威地區(qū)HBV基因型主要以C型為主,C型HBV-DNA、HBeAg陽(yáng)性率顯著高于B型,且與較嚴(yán)重的肝臟損傷有關(guān),是影響疾病進(jìn)程的重要因素。

    慢性乙型肝炎;基因型;乙型肝炎病毒

    乙型肝炎病毒(HBV)感染是一個(gè)全球公共衛(wèi)生問(wèn)題。目前全球大約有4億HBV感染者,幾乎1/3的人曾感染過(guò)HBV,這在發(fā)展中國(guó)家尤為突出。僅我國(guó)就有1.5億HBV感染者,其中2 000萬(wàn)人為慢性乙型肝炎患者,每年因此導(dǎo)致大約50萬(wàn)人死亡。肝細(xì)胞癌(HC)在癌癥死亡原因中已躍升為第四位,而HBV感染為其主要病因,根據(jù)HBV全基因組序列異質(zhì)性≥8%S基因序列異質(zhì)性≥4%,將HBV分為A~H8種基因型[1],不同HBV基因型感染者的臨床表現(xiàn)均有差別。本研究旨在了解本地區(qū)HBV感染者基因型分布及與乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物(HBV M)、肝臟疾病的關(guān)系。

    1 材料和方法

    1.1 標(biāo)本來(lái)源

    選取我院2009—2012年武威籍門診或住院患者,共3 400例,應(yīng)用特異性引物聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)法進(jìn)行血清HBV-DNA定量檢測(cè)。選取HBV-DNA大于103copies/ul者1 380例,應(yīng)用PCR法進(jìn)行血清基因型檢測(cè)及HBV M、ALT、AST檢測(cè)。1 380例患者中乙型肝炎病毒攜帶者(ASC)300例,慢性乙型肝炎(CHB)488例,乙型肝炎后肝硬化(LC)380例和原發(fā)性肝癌(HCC)212例。其中男性705例,女性675例,年齡11~75歲,平均(39.0±2.1)歲,排除其他肝炎病毒導(dǎo)致肝臟病變的疾病。診斷均符合2000年修訂的《病毒性肝炎防治方案》。

    1.2 儀器和試劑

    HBV-DNA測(cè)定使用ABI公司的DE-7500熒光定量PCR儀;HBV基因型測(cè)定使用美國(guó)PE公司生產(chǎn)的基因擴(kuò)增儀PE9600型;試劑、引物及探針均由上??迫A生物工程股份有限公司提供;HBV M檢測(cè)使用上海榮盛公司生產(chǎn)的試劑;ALT、AST檢測(cè)使用日立7600-020,試劑由寧波瑞源公司提供。所有操作均按試劑說(shuō)明書進(jìn)行。

    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

    使用SPSS 14.0軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn),P<0.05為有顯著性差異。

    2 結(jié)果

    2.1 基因型分布狀況

    在1 380例HBV感染者中,檢出C型1 108例(80.3%),B型247例(17.9%),B+C混合型25例(1.8%),未檢出其他型。

    2.2 HBV基因型與臨床表型的關(guān)系

    不同臨床表型HBV感染者的基因型分布見表1。B和C基因型在不同臨床表型中分布差異有顯著性(P<0.01),且隨ASC、CHB、LC和HCC病情加重,C基因型的分布逐漸增加,B基因型的分布逐漸下降。在原發(fā)性肝癌患者中未檢出B+C混合型基因。

    表1 不同臨床表型HBV感染者的基因型分布[n(%)]

    2.3 HBV基因型與HBV-DNA載量、HBeAg、HBeAb、ALT、AST的關(guān)系

    C型HBV-DNA載量顯著高于B型(P<0.01),HBeAg陽(yáng)性率顯著高于B型;B型HBeAb陽(yáng)性率顯著高于C型;二者ALT、AST雖無(wú)顯著性差異(P>0.05),但C型仍高于B型(見表2)。

    表2 HBV基因型與HBV-DNA載量、HBeAg、HBeAb、ALT、AST的關(guān)系(±s)

    表2 HBV基因型與HBV-DNA載量、HBeAg、HBeAb、ALT、AST的關(guān)系(±s)

    HBV-DNAHBeAgHBeAb基因型 (log值)陽(yáng)性[n(%)]陽(yáng)性[n(%)] ALT(u/L) AST(u/L) C型6.98±2.38739(66.7)369(33.3)158±89112±72 B型5.34±1.97151(61.1)89(36.0)147±92102±82 B+C型6.85±1.8714(56.0)11(44.0)151±65107±75

    3 討論

    (1)不同地區(qū)人群感染HBV的基因型構(gòu)成存在差異[2]。國(guó)外一些資料顯示:基因型A、D主要分布在美國(guó)和歐洲,基因型B、C主要分布在東亞及東南亞,E型多分布在非洲,F(xiàn)型多分布在南美洲,G型僅在法國(guó)與美國(guó)有單個(gè)病例報(bào)道,這種地域分布在一定程度上反映了HBV的起源和傳播[3、4]。國(guó)內(nèi)也有資料顯示:我國(guó)HBV基因型以B、C為主,南方主要是B型,北方主要是C型[5、6]。本研究表明武威地區(qū)HBV基因型以C型為主,占80.3%,符合武威地處于我國(guó)北方的地理特點(diǎn),反映了病毒變異后進(jìn)化的結(jié)果。

    (2)本研究顯示,隨著ASC、CHB、LC和HCC疾病程度的加重,C基因型的分布逐漸增加,B基因型的分布逐漸下降;C型HBV-DNA載量顯著高于B型;C型HBeAg陽(yáng)性率顯著高于B型;B型HBeAb陽(yáng)性率顯著高于C型。表明:①C型具有較強(qiáng)的致病性,易引起較嚴(yán)重的肝損傷,發(fā)展為肝硬化和肝癌的可能性更大。②不同基因型HBV的復(fù)制能力、毒力及致病性的強(qiáng)弱不同。③C型HBV復(fù)制活躍,易形成持續(xù)病毒血癥,不易發(fā)生e抗原系統(tǒng)血清轉(zhuǎn)換。這與Kao報(bào)道的C基因型HBV感染更易發(fā)展為肝硬化和肝癌及HBV基因前C區(qū)nt1896G→A突變主要見于B基因型相一致[7]。國(guó)內(nèi)也有許多關(guān)于C基因型感染對(duì)肝臟損傷程度嚴(yán)重的報(bào)道。

    (3)Zumbika[8]研究發(fā)現(xiàn),B+C混合型在重度慢性乙型肝炎和肝硬化中占有相當(dāng)大的比例,認(rèn)為混合型可能和嚴(yán)重的肝臟疾病相關(guān),本研究檢測(cè)到的B+C混合型都在無(wú)癥狀攜帶者、慢性肝炎患者中,表明同型基因型在不同地域其致病能力不同。是否將來(lái)更容易發(fā)展為肝硬化、肝癌有待進(jìn)一步研究。

    綜上所述,武威地區(qū)乙型肝炎病毒基因型主要以C型為主,C型病毒載量及致病性更強(qiáng),與較嚴(yán)重的肝臟損傷有關(guān)。B+C混合型與嚴(yán)重的肝臟損傷是否相關(guān),有待進(jìn)一步訪研究證實(shí)。

    [1]殷繼明.慢性乙型肝炎患者HBV基因型和亞型分布調(diào)查[J].實(shí)用肝病雜志,2010,13(1):19-22.

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    [3]Yuen M F,Sablon E.Epidemiological study of hepatitis B virus genotypes,core promoter and precore mutations of chronic hepatitis B infection in Hong Kong[J].Hepatololog,2004(41):119.

    [4]Jazayeri M S.Hepatitis B virus genotypes core gene vaiability and ethnicity in the Pacific region[J].J Hepatol,2004(41):139.

    [5]夏國(guó)良.乙型肝炎病毒基因型和血清亞型在我國(guó)部分地區(qū)的分布及其特點(diǎn)[J].中華流行病學(xué)雜志,2001,22(5):348-351.

    [6]雷延昌.慢性乙型肝炎病毒基因型與拉米夫定療效關(guān)系的研究[J].中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志,2005,13(2):109-112.

    [7]Kao J H.Genotypes and clinicalphenotypes of hepatitisB virus in patients with chronic hepatitisB virus infection[J].J Clin Microbiol,2002,40(4):1207-1209.

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    R512.6+2

    B

    1671-1246(2015)07-0142-02

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