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    黑龍江省3種地榆屬藥用植物總皂苷的含量測定※

    2015-12-28 09:05:58孟令鍇張朝立韓婼伊
    中國藥物經(jīng)濟學(xué) 2015年1期
    關(guān)鍵詞:垂穗小白花總皂苷

    李 麗 孟令鍇 張朝立 韓婼伊 李 潔

    黑龍江省3種地榆屬藥用植物總皂苷的含量測定※

    李 麗1孟令鍇2張朝立2韓婼伊2李 潔1

    目的 測定黑龍江省3種地榆屬植物總皂苷的含量。方法 以地榆皂苷Ⅰ為對照品,紫外分光光度法在323 nm處測定總皂苷含量。結(jié)果 地榆、小白花地榆、垂穗粉花地榆中總皂苷含量分別為6.57%、6.44%、5.38%。結(jié)論 該方法速度快、準確、靈敏、重現(xiàn)性好,結(jié)果可靠,為系統(tǒng)開發(fā)、利用該屬藥用資源提供了堅實基礎(chǔ)。

    地榆;小白花地榆;垂穗粉花地榆;總皂苷;含量測定

    中藥地榆作為藥用已有2 000多年的歷史,始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,具有涼血止血、解毒斂瘡的功效[1-2]。黑龍江省地榆屬資源主要有地榆(Sanguisorba officinalis L.)、小白花地榆[Sanguisorba parviflora(Maxim.)Takeda]、垂穗粉花地榆(Sanguisorba tenuifolia Fish.ex Link)等物種[3]。地榆主要含有鞣質(zhì)及皂苷類成分,其所含皂苷類成分能明顯促進細胞因子刺激的骨髓細胞體外增殖[4]。黑龍江省地榆屬資源豐富,本實驗旨對該地區(qū)地榆屬植物總皂苷成分含量進行測定,為進一步開發(fā)利用黑龍江省地榆屬植物提供基礎(chǔ)。

    1 儀器與試劑

    地榆皂苷Ⅰ對照品(成都瑞芬思生物科技有限公司生產(chǎn),批號 101209);地榆、小白花地榆、垂穗粉花地榆(采于牡丹江市牡丹峰、橫道河子及北山風(fēng)景區(qū),經(jīng)鑒定分別為薔薇科地榆屬地榆、小白花地榆、垂穗粉花地榆);紫外可見分光光度計(美國瓦里安公司)。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 測量波長的選擇 精密稱取2 mg已干燥恒重的地榆皂苷Ⅰ對照品,以濃硫酸定容至50 ml,70 ℃水浴40 min,用紫外分光光度計,190~400 nm范圍內(nèi)掃描,該體系在紫外323 nm處有特征吸收峰。

    2.2 總皂苷含量測定

    2.2.1 對照品溶液配制 精密稱取5.02 mg地榆皂苷Ⅰ于25 ml容量瓶中,加濃硫酸定容,超聲溶解,置70 ℃水浴加熱40 min,冷卻至室溫,即得。

    2.2.2 供試品溶液的配制 精密稱取3種地榆藥材粉末各250 mg,分別置于50 L燒杯中,各加入25 ml甲醇,超聲提取30 min,將濾液濃縮至干后,30%的氨試液15 ml溶解,加入水飽和正丁醇,充分振搖,靜置,分層,重復(fù)正丁醇萃取操作,合并萃取液,減壓濃縮。殘渣用適量濃硫酸超聲溶解,并轉(zhuǎn)移至100 ml容量瓶中,加濃硫酸定容至刻度,70 ℃水浴40 min,冰水浴中冷卻至室溫,得3種供試品溶液。

    2.2.3 方法學(xué)考察

    2.2.3.1 標準曲線的建立 精密吸取地榆皂苷Ⅰ對照品儲備液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 ml分別置于5 ml容量瓶中,加入濃硫酸稀釋定容至刻度,備用。分別精密吸取上述各濃度對照品溶液2 ml,按紫外分光光度法,測定OD323nm(波長323 nm處吸光度值),得線性回歸方程:Y=0.048X+0.2977,r=0.9980。線性范圍為20.08~160.64 μg/ml。

    2.2.3.2 精密度試驗 精密吸取對照品儲備液(0.0201 mg/ml)2 ml,重復(fù)測定6次,測定OD323nm,RSD=0.68%(n=6)。表明儀器精密度良好。

    2.2.3.3 對照品穩(wěn)定性試驗 取對照品溶液(0.0201 mg/ml)2 ml,放置0、1、2、4、8 h,測定OD323nm, RSD=0.89%。表明對照品溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

    2.2.3.4 樣品重復(fù)性試驗 取 250 mg小白花地榆藥材樣品平行5份,照制備供試品溶液方法,測定OD323nm,RSD=1.43%。表明該方法重復(fù)性良好。

    2.2.3.5 加樣回收率試驗 精密稱取已測知含量的小白花地榆藥材樣品6份,分別精密加入一定量對照品溶液,按照樣品制備與測定方法測定,計算回收率,見表1。

    表1 回收率測定結(jié)果

    結(jié)果如表1所示,地榆皂苷Ⅰ的加樣回收率為99.13%,RSD值為1.42%,表明該方法的準確度良好。

    2.2.3.6 樣品測定 精密稱取250 mg 3種地榆屬藥材樣品,各測定平行3份,照制備供試品溶液方法制備藥材樣品溶液,測定OD323nm值,計算各樣品平均含量,見表2。

    表2 3種地榆屬植物總皂苷含量結(jié)果

    3 討論

    通過對反應(yīng)溫度與反應(yīng)時間進行優(yōu)化,發(fā)現(xiàn)反應(yīng)溫度為70 ℃、反應(yīng)時間為40 min時,吸光度不再升高,可得到完全反應(yīng)。采用紫外分光光度法測定地榆屬植物中總皂苷含量,以濃硫酸為顯色試劑,反應(yīng)條件為反應(yīng)溫度70 ℃,反應(yīng)時間40 min,該方法簡便、準確、靈敏、重現(xiàn)性好。測定結(jié)果顯示,3種野生地榆屬植物總皂苷含量中,地榆最高,小白花地榆次之,垂穗粉花地榆最低,此結(jié)果可為下一步開發(fā)利用地榆屬植物提供了理論依據(jù),為黑龍江省野生地榆屬資源的開發(fā)打下基礎(chǔ)。

    [1]孫星衍,孫星翼.神農(nóng)本草經(jīng)[M].北京∶商務(wù)印書館,2005∶94-94.

    [2]沈保安.中國常用中草藥[M].合肥∶安徽科學(xué)技術(shù)出版社,2005∶481-481.

    [3]國家中醫(yī)藥管理局.中華本草[M].上?!蒙虾?茖W(xué)技術(shù)出版社, 2009∶2896-2897.

    [4]高小平,吳建明,鄒文俊,等.地榆促造血作用的有效部位篩選[J].中國天然藥物,2006,4(2)∶137-140.

    Determination of Total Saponins in Three Medicinal Plants Sanguisorba in Heilongjiang Province

    Li Li Meng Lingka Zhang Chaoli Han Ruoyi Li Jie

    Objective To determine 3 Sanguisorba saponins content of plants in the Heilongjiang province.Methods Using ziyuglycoside I as standard sample,UV spectrophotometry was applied to the determination of total saponins content in 323 nm.Results The total saponins containing of S. officinalis was 7.57%,The total saponins containing of S.parviflora was 6.44%,The total saponins containing of S.tenuifolia tenuifolia was 5.38%.Conclusion This method is fast,reproducible and reliable results,it lay solid foundation for developing and utilizing medical resource of Sanguisorba.

    Sanguisorba officinalis L.;Sanguisorba parviflora(Maxim.)Takeda;Sanguisorba tenuifolia Fish.ex Link; Total saponins;Quantitative Determination

    R927.2

    A

    1673-5846(2015)01-0023-02

    1牡丹江醫(yī)學(xué)院附屬紅旗醫(yī)院,黑龍江牡丹江 157011

    2牡丹江醫(yī)學(xué)院,黑龍江牡丹江 157011

    黑龍江省衛(wèi)生廳科研項目(2013201);牡丹江醫(yī)學(xué)院科研項目(ZS201307);黑龍江省大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計劃項目(201410229025)

    李麗(1963-),碩士研究生,主任,主治醫(yī)師。研究方向:年輕急性淋巴細胞白血病治療臨床研究。E-mail:13836309723@163.com

    李潔(1982-),碩士研究生,主治醫(yī)師。研究方向:年輕急性淋巴細胞白血病治療臨床研究。E-mail:mdlbaby@163.com

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