飼料中黃曲霉毒素危害及常見檢測方法

張富剛，孫書剛，李建偉，陳國信，蘇瑞

（河北省滄州青縣農(nóng)業(yè)局，河北滄州 062650）

飼料中黃曲霉毒素危害及常見檢測方法

張富剛，孫書剛，李建偉，陳國信，蘇瑞

（河北省滄州青縣農(nóng)業(yè)局，河北滄州 062650）

黃曲霉毒素主要是由黃曲霉、寄生曲霉產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物，是目前發(fā)現(xiàn)的毒性、致癌性較強(qiáng)的天然有毒物。本文主要從黃曲霉毒素的化學(xué)性質(zhì)、對畜、禽的危害、以及常見檢測方法進(jìn)行了闡述。

黃曲霉毒素；飼料；危害；檢測方法

黃曲霉毒素是一種毒性非常強(qiáng)的物質(zhì)，它能夠破壞人及動物的肝臟組織，嚴(yán)重時可導(dǎo)致肝癌甚至死亡。黃曲霉毒素主要是由黃曲霉、寄生曲霉產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物，是目前發(fā)現(xiàn)的毒性、致癌性較強(qiáng)的天然有毒物。隨著人們生活水平的提高，黃曲霉毒素的危害也逐漸引起老百姓的關(guān)注。專家、學(xué)者對黃曲霉毒素的研究也越來越深入，本文從黃曲霉毒素的來源、化學(xué)性質(zhì)、對畜禽的危害以及檢測方法四方面進(jìn)行了闡述。

1 黃曲霉毒素的主要來源

黃曲霉毒素是由黃曲霉、寄生曲霉等霉菌產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物。如果糧食未能及時曬干或存儲不當(dāng)，則較易被黃曲霉污染，產(chǎn)生黃曲霉毒素。黃曲霉毒素最易污染玉米、花生等制品,其次是小麥、高粱,豆粕較不易被黃曲霉污染。

2 黃曲霉毒素的化學(xué)結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)

黃曲霉毒素，英文縮寫AFT，分子式為C17H12O6，是一類毒性非常強(qiáng)的二氫呋喃香豆素衍生物，能夠溶于很多種有機(jī)溶劑,但不溶于正己烷、石油醚、乙醚,微溶于水。黃曲霉毒素化學(xué)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，加熱至268～269℃時，才會發(fā)生分子結(jié)構(gòu)的變化。

黃曲霉毒素化學(xué)結(jié)構(gòu)式

目前，黃曲霉毒素已經(jīng)發(fā)現(xiàn)并確定的有20余種，飼料遭受黃曲霉毒素污染后，檢測可見黃曲霉毒素B1、B2、G1和G2四種。其中兩種黃曲霉毒素B1、B2被飼喂家禽和家畜后，經(jīng)過生理代謝轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)變成的黃曲霉毒素M1和M2主要從尿液和乳汁中排出，也有部分殘留在畜、禽肉中。在受黃曲霉毒素污染的飼料中，以黃曲霉毒素B1的毒性最大，同時其含量也最多，故將黃曲霉毒素B1作為飼料質(zhì)量監(jiān)管中黃曲霉毒素項目的主要監(jiān)測指標(biāo)。

3 黃曲霉毒素對畜、禽的危害

飼喂畜、禽含有黃曲霉毒素的飼料后，常見畜、禽的采食量減少但體重增加,其對動物的危害程度與飼喂畜、禽的品種、日齡、接觸黃曲霉毒素的劑量、時間長短密切相關(guān)。黃曲酶毒素能夠在畜、禽體內(nèi)蓄積，長期攝入會產(chǎn)生嚴(yán)重的影響。有學(xué)者給1d肉雞飼喂黃曲霉毒素含量為0.75mg/kg的日糧，28d后發(fā)現(xiàn)其體重增加但采食量明顯下降。同時，肉雞飼喂黃曲霉毒素含量為1mg/kg的日糧，7d后，肉雞生長未發(fā)現(xiàn)顯著變化，21d后，肉雞體重增加但采食量明顯下降。豬對黃曲霉毒素非常敏感。當(dāng)飼喂黃曲霉毒素含量為20～200mg/t的飼料時，豬的采食量明顯下降，生產(chǎn)性能降低。當(dāng)飼喂黃曲霉毒素含量為1000～5000mg/t，會發(fā)生黃曲霉毒素嚴(yán)重中毒，產(chǎn)生包括呼吸在內(nèi)的嚴(yán)重影響，有研究顯示，當(dāng)飼料中黃曲霉毒素含量為2.0mg/kg時，豬體重減少到29.7kg，而對照組為33.7kg。黃曲霉毒素可以透過胎盤屏障轉(zhuǎn)移到胎兒，引起胎兒畸形，導(dǎo)致產(chǎn)仔數(shù)減少、死胎等。個別母畜飼喂黃曲霉毒素飼料會引起急性中毒發(fā)生流產(chǎn)。就反芻動物方面，飼喂奶牛的飼料中黃曲霉毒素的含量要非常低，這是因為黃曲霉毒素不僅會降低奶牛的生產(chǎn)性能和體質(zhì)，還會經(jīng)過奶牛的生理代謝，使牛奶中產(chǎn)生代謝產(chǎn)物黃曲霉毒素M1，威脅人體健康。肉牛采食黃曲霉毒素污染嚴(yán)重的飼料，會使其生長速度下降,同時使成年牛得肝臟受損。

4 黃曲酶毒素的檢測

檢測黃曲霉毒素的方法有很多種,有薄層色譜法、高效液相色譜法、酶聯(lián)免疫法等。

4.1 薄層色譜法

薄層色譜法常用于半定量測定黃曲霉毒素實驗。由于黃曲霉毒素具有熒光性，將樣品經(jīng)過提取、濃縮后，采用單向或雙向展開法，使其在薄層板上分離，設(shè)置波長365nm的紫外光照射，會產(chǎn)生藍(lán)紫色熒光，據(jù)此定量。薄層色譜法操作簡單易行、儀器試劑來源方便，但是由于樣品中可能含有其他熒光物質(zhì)的干擾會造成測定誤差。

4.2 高效液相色譜法

高效液相色譜法可以分離分析各種黃曲霉毒素，該此方法具有靈敏度高、分離能力強(qiáng)、特異性好、測定結(jié)果準(zhǔn)確可靠等優(yōu)點。目前己廣泛地用于黃曲霉毒素的測定。高效液相色譜法雖然具有快速、靈敏度高、準(zhǔn)確、自動化等優(yōu)點，但儀器價格較貴、操作繁瑣，難以在基層推廣。

4.3 酶聯(lián)免疫法

酶聯(lián)免疫法是檢測黃曲霉毒素最常用的方法，它具有檢測靈敏、操作簡單、耗時較短、測定結(jié)果較為準(zhǔn)確的優(yōu)點，常用于半定量實驗。通常黃曲霉毒素酶聯(lián)免疫試劑盒采用固相直接競爭性酶聯(lián)免疫原理。即微孔中包被對黃曲霉毒素具有高親和力的抗體，黃曲霉毒素酶標(biāo)物與標(biāo)準(zhǔn)品或樣品中的黃曲霉毒素競爭結(jié)合微孔中包被的抗體。孵育一定的時間后，傾倒微空中的液體，并進(jìn)行洗滌。加入底物，溶液變?yōu)樗{(lán)色，加入酸性終止液，溶液變?yōu)辄S色。使用酶標(biāo)儀在450nm下檢測OD值。根據(jù)試劑盒中標(biāo)準(zhǔn)品的OD值、樣品OD值來計算含量。

5 小結(jié)

隨著人們對食品安全的認(rèn)識逐漸提高，食品中黃曲霉毒素的危害已廣泛被大家接受，而飼料是否含有黃曲霉毒素在一定程度上直接影響了食品的安全。飼料一旦遭到黃曲霉毒素的污染，不僅影響飼料本身的營養(yǎng)價值，還影響畜、禽的生產(chǎn)性能，同時黃曲霉毒素還會在畜、禽體內(nèi)殘留，導(dǎo)致畜、禽中毒，人們誤食此類肉食將嚴(yán)重影響身體健康。因此，在飼料安全生產(chǎn)中，黃曲霉毒素所帶來的危害及檢測方法應(yīng)引起我們獸醫(yī)工作者嚴(yán)密的關(guān)注。

[1]于炎湖主編.飼料毒物學(xué)附毒物分析.農(nóng)業(yè)出版社，1992.

[2]馮建蕾.黃曲霉毒素的危害和防制.中國畜牧獸醫(yī)，2005（12）.

[3]卿全中.黃曲酶毒素對家禽生產(chǎn)性能和健康的影響.中國飼料，2000（3）∶35～37.

[4]魏金濤，等.飼料中霉菌的生長和產(chǎn)毒.飼料工業(yè)，2005（19）∶53～55.

10．3969/J.ISSN．1671-6027．2015．09.007