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    復(fù)方茶湯降血脂功效研究

    2015-12-24 02:25:02譚蓉張聰楊秀芳孔俊豪
    中國(guó)茶葉加工 2015年4期
    關(guān)鍵詞:高血脂癥茶湯復(fù)方

    譚蓉, 張聰, 楊秀芳*, 孔俊豪

    (1.中華全國(guó)供銷合作總社杭州茶葉研究院,浙江杭州 310016;2.浙江省茶資源跨界應(yīng)用技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,浙江杭州 310016)

    由于飲食結(jié)構(gòu)不均衡等原因,我國(guó)高血脂癥(Hyperlipidemia)的發(fā)病率逐年升高,同時(shí)伴隨著動(dòng)脈粥樣硬化、冠心病等多種并發(fā)癥,對(duì)公眾健康造成嚴(yán)重威脅。黑茶屬后發(fā)酵茶,是六大茶類之一,對(duì)高血脂癥等諸多心血管疾病有著其他茶類所不具有的藥理作用[1-3]。六堡茶是著名黑茶品種,原產(chǎn)于廣西,歷史悠久,因其獨(dú)特口味及降脂保健功效而深受市場(chǎng)歡迎[4-10]。

    茶黃素 (Theaflavins, TFs)和兒茶素(Catechins,Cs)亦能夠調(diào)節(jié)血脂[11-12]。絞股藍(lán)[Gynostemma Pentaphgllum (Thunb)Makino]則是治療高血脂癥的名貴中草藥,主要成分為絞股藍(lán)皂苷(Gypenosides, GPs)[13-14]。本研究以茶黃素、兒茶素、絞股藍(lán)皂苷和六堡茶提取物為原料自擬復(fù)方茶湯[15],對(duì)高脂血癥大鼠模型進(jìn)行干預(yù),檢測(cè)分析大鼠各生化指標(biāo)水平,以期為開發(fā)降血脂功能性食品提供技術(shù)參考。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    茶黃素(純度≥20%):浙江派諾生物技術(shù)有限公司;兒茶素(純度≥30%):浙江東方茶業(yè)科技有限公司;絞股藍(lán)皂苷(純度≥35%):自制;六堡茶水提物:中華全國(guó)供銷合作總社杭州茶葉研究院六堡茶研究中心。總膽固醇(TC)試劑盒、甘油三酯(TG)試劑盒、高密度脂蛋白(HDL-C)試劑盒、低密度脂蛋白(LDL-C)試劑盒、天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)試劑盒、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)試劑盒:寧波美康生物科技有限公司。高脂飼料:購(gòu)自浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

    清潔級(jí)雄性SD 大鼠60 只,體重200±20 g,購(gòu)自浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心 (動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào):0008677,許可證號(hào):SCXK (浙)2008-0033)。于室溫23±2℃、相對(duì)濕度50%~70%環(huán)境中飼養(yǎng),自由飲食飲水。

    1.2 試驗(yàn)儀器

    ACCUTE TBA-40FR 全自動(dòng)生化分析儀:東芝三廠醫(yī)療株式會(huì)社;FASCO-3010D 全自動(dòng)血流變儀、EHK 血沉壓積儀:重慶維多科技有限公司;DDL-5 低速冷凍多管離心機(jī):上海安亭科學(xué)儀器廠。

    1.3 試驗(yàn)方法

    1.3.1 分組與給藥

    將大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d后,稱重,禁食12 h后眼眶靜脈叢采血,測(cè)定血清中TC 含量,根據(jù)TC水平隨機(jī)分為6組,每組10 只,即正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽性對(duì)照組(依折麥布1.0 mg/kg)、復(fù)方茶湯低劑量組(18.38 mg/kg)、復(fù)方茶湯中劑量組(36.75 mg/kg)、復(fù)方茶湯高劑量組(55.13 mg/kg)。所有大鼠均給予高脂高糖飼料,自由采食飲水。自造模第l天起,除正常對(duì)照組和模型對(duì)照組灌服蒸餾水外,其余各給藥組分別灌胃給予相應(yīng)劑量的藥物,每日1次,灌胃容積為1 mL/100 g 體重,連續(xù)6周。給藥6周后大鼠禁食12 h,眼眶靜脈叢取血,一份加入肝素制備抗凝血,另一份離心取血清。

    1.3.2 指標(biāo)檢測(cè)

    體重測(cè)定:試驗(yàn)期間每3 d 稱重一次,并根據(jù)體重調(diào)整給藥量。

    血液生化學(xué)指標(biāo)檢測(cè):給藥6周后,全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)大鼠血清血脂生化指標(biāo)(TC、TG、LDL-C、HDL-C),肝功能生化指標(biāo)(AST、ALT)。

    血液流變學(xué)指標(biāo):給藥6周后,肝素抗凝管接取4 mL 全血,立即輕搖試管,防止血液凝固。采血后立即測(cè)定血流變各項(xiàng)指標(biāo),采用FASCO-3010D 全自動(dòng)血流變儀檢測(cè)6個(gè)不同切變率(200 s-1,150 s-1,50 s-1,30 s-1,3 s-1,1 s-1)下的全血粘度(ηb),血漿粘度(ηp);采用 EHK 血沉壓積儀測(cè)紅細(xì)胞壓積(HCT)、血沉;計(jì)算求各切變率(200 s-1,150 s-1, 50 s-1)下的全血還原粘度(BRV),卡松粘度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)(AI)、紅細(xì)胞變形指數(shù)(TK)、紅細(xì)胞剛性指數(shù)(RI)、紅細(xì)胞電泳時(shí)間(EI)數(shù)值等。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

    采用SPSS 18.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行ANOVA 單因素方差分析,計(jì)量資料數(shù)據(jù)以±S表示

    2 結(jié)果與分析

    2.1 復(fù)方茶湯對(duì)高血脂癥大鼠體重的影響

    與正常對(duì)照組相比,在造模39 d后,模型對(duì)照組大鼠體重顯著增加。與模型對(duì)照組相比,給藥42 d 后低劑量(18.38 mg/kg)組、中劑量(36.75 mg/kg)組大鼠體重顯著降低;給藥39 d后高劑量(55.13 mg/kg)組大鼠體重顯著降低;說明復(fù)方茶湯能夠抑制高血脂癥大鼠體重上升,攝入高劑量的復(fù)方茶湯甚至能使高血脂癥大鼠體重低于正常水平,見圖1。

    2.2 復(fù)方茶湯對(duì)高血脂癥大鼠血脂的影響

    與正常對(duì)照組相比,在高脂造模6周后,模型對(duì)照組大鼠血清TC、LDL-C 含量顯著升高 (P<0.01)。與模型對(duì)照組相比,復(fù)方茶湯低劑量(18.38 mg/kg)組、中劑量(36.75 mg/kg)組大鼠血清TC 含量顯著降低(P<0.01);試驗(yàn)茶湯的三個(gè)劑量組大鼠血清 TG、LDL-C 含量顯著降低 (P<0.05),HDL-C 含量升高(P<0.01);說明復(fù)方茶湯能有效緩解大鼠高血脂癥狀,使其血脂指標(biāo)恢復(fù)正常水平,見表1。

    圖1 復(fù)方茶湯對(duì)高血脂癥大鼠體重的影響Fig.1 Effect of compound tea beverage on body weight of hyperlipidemic rats

    表1 復(fù)方茶湯對(duì)高血脂癥大鼠血脂指標(biāo)的影響(單位:mmol/L)Table 1 Effects of compound tea beverage on serum lipid level of hyperlipidemic rat(Unit:mmol/L)

    2.3 復(fù)方茶湯對(duì)高血脂癥大鼠肝功能指標(biāo)的影響

    與正常對(duì)照組相比,模型對(duì)照組大鼠血清AST 活性顯著升高;表明高脂高糖飼料對(duì)大鼠肝功能造成了一定損傷并影響其機(jī)能。與模型對(duì)照組相比,試驗(yàn)茶湯低劑量(18.38 mg/kg)組、高劑量(55.13 mg/kg)組大鼠血清AST 活性顯著降低(P<0.05),表明復(fù)方茶湯能夠修復(fù)高脂高糖飲食造成的肝功能損傷,使其恢復(fù)至正常水平,見表2。

    表2 復(fù)方茶湯對(duì)高血脂癥大鼠肝功能指標(biāo)的影響(單位:U/L)Table 2 Effects of compound tea beverage on liver function index of hyperlipidemic rat(Unit:U/L)

    2.4 復(fù)方茶湯對(duì)高脂血癥大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)的影響

    表3 復(fù)方茶湯對(duì)高脂血癥模型大鼠ηb 的影響(單位:mpa.s)Table 3 Effect of compound tea beverage on ηb level in hyperlipidemic rat(Unit:mpa.s )

    表4 復(fù)方茶湯對(duì)高脂血癥模型大鼠BRV、ηp、卡松粘度的影響Table 4 Effect of compound tea beverage on BRV,ηp and ηc level in hyperlipidemic rat

    表5 復(fù)方茶湯對(duì)AI、TK、RI、EI、紅細(xì)胞壓積、血沉的影響Table 5 Effect of compound tea beverage on AI、TK、RI、EI,hematocrit and ESR level in hyperlipidemic rat

    如表3、4所示,與正常對(duì)照組相比,模型對(duì)照組大鼠各項(xiàng)血流變指標(biāo)均無明顯改變。與模型對(duì)照組相比,試驗(yàn)中劑量組大鼠低切變率下(1 s-1)全血粘度、50 s-1切變率下全血還原粘度、卡松粘度均顯著降低,表明攝入中劑量的復(fù)方茶湯能夠改善高血脂癥大鼠的血液粘度。如表5所示,與正常對(duì)照組相比,模型對(duì)照組大鼠血沉指數(shù)上升。與模型對(duì)照組相比,試驗(yàn)低劑量組大鼠紅細(xì)胞變形指數(shù)、紅細(xì)胞剛性指數(shù)顯著上升,表明攝入低劑量的復(fù)方茶湯也能一定程度上改善高血脂癥大鼠的血液流變性。

    3 討論

    采用高脂高糖喂養(yǎng)建立高脂血癥動(dòng)物模型,模型大鼠血清TC、LDL-C 含量顯著升高,說明高脂血癥模型造模成功;同時(shí)發(fā)現(xiàn)其血清AST 活性和肝臟指數(shù)明顯升高,顯示出該模型發(fā)生了一定程度的肝損傷,推測(cè)可能為脂肪肝病理改變。因此,本研究中采用高脂高糖喂養(yǎng)建立的高脂血癥動(dòng)物模型,伴隨一定程度肝損傷。

    血脂是血漿中性脂肪(甘油三酯和膽固醇)和類脂(磷脂、糖脂、固醇、類固醇)的總稱。甘油三酯直接參與機(jī)體能量代謝,膽固醇能夠合成細(xì)胞漿膜、類固醇激素和膽汁酸;機(jī)體內(nèi)的膽固醇來源于食物攝取及生物合成。食物中的膽固醇(包括游離型和酯化型)被消化液中的膽固醇酯酶水解為游離膽固醇后被吸收,隨后在小腸粘膜中被膽固醇?;D(zhuǎn)移酶(ACAT)催化并重新酯化,形成膽固醇酯,最后與載脂蛋白結(jié)合形成乳糜微粒,經(jīng)由淋巴系統(tǒng)進(jìn)入血循環(huán)[16]。因此現(xiàn)代醫(yī)學(xué)將TC、TG、LDL-C、HDL-C 作為評(píng)價(jià)血脂的指標(biāo)[17]。試驗(yàn)中,復(fù)方茶湯的三個(gè)劑量均能降低大鼠血清TG、LDL-C 水平,升高HDL-C 水平;低、中劑量能降低血清TC 含量。試驗(yàn)表明復(fù)方茶湯具有明顯的降血脂藥效作用,其中低劑量降脂作用較優(yōu)。

    肝臟是人體合成內(nèi)源性甘油三酯及膽固醇的主要場(chǎng)所,同時(shí)也是脂肪酸進(jìn)行β氧化最活躍的部位[18]。 谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)存在于肝細(xì)胞的細(xì)胞核及線粒體中,當(dāng)肝細(xì)胞受損時(shí),肝細(xì)胞內(nèi)的ALT、AST 釋放入血,故血清ALT、AST 活性升高。因此,血清這兩種酶的活性升高成為肝功能受損的特異性指標(biāo)。試驗(yàn)中復(fù)方茶湯的低、高劑量能降低大鼠血清AST 活性,說明其具有一定的保肝作用。

    血液流變學(xué)的異常與高脂血癥的發(fā)生與發(fā)展有密切的關(guān)系[19]。血液是懸浮液系統(tǒng),血液粘度是血流量的倒數(shù),表征血液流動(dòng)的阻力,是反映血粘滯程度的重要指標(biāo)。全血粘度包括高切變率(粘度200 s-1、粘度 150 s-1)、中切變率(粘度 50 s-1、粘度30 s-1)、低切變率(粘度 3 s-1、粘度 1 s-1)下的血液表觀粘度值。卡松粘度是血液在無限大切變率下的表觀粘度值。高切變率下的全血粘度與卡松粘度相關(guān),反映紅細(xì)胞的變形性的大??;低切變率下的全血粘度與卡松屈服應(yīng)力相關(guān)性顯著,反映紅細(xì)胞的聚集性,血沉及血沉方程K 值也可反映紅細(xì)胞聚集性的高低。紅細(xì)胞壓積又稱紅細(xì)胞比積,紅細(xì)胞壓積增加,常導(dǎo)致全血粘度增加,呈現(xiàn)血液高粘滯綜合癥。由于血液粘度受紅細(xì)胞壓積的影響,全血還原粘度是為了消除紅細(xì)胞壓積的影響,比較不同血樣的粘度。血漿粘度的特點(diǎn)是不隨著切變率的變化而變化,血漿粘度升高,全血粘度增高。試驗(yàn)中復(fù)方茶湯的中劑量能降低大鼠低切變率下(1 s-1)全血粘度、50 s-1切變率下全血還原粘度、卡松粘度等,說明復(fù)方茶湯具有一定的改善血液粘度的作用,有助于改善高血脂癥狀,但該作用還需進(jìn)一步應(yīng)用高粘血癥動(dòng)物模型來深入研究。

    綜上所述,本研究中復(fù)方茶湯能夠顯著降低高脂血癥大鼠血清 TC、TG、LDL-C 含量,升高HDL-C 含量;降低AST 活性;減輕大鼠體重。因此,該復(fù)方茶湯具有一定的調(diào)節(jié)血脂和保肝作用,其中低劑量降脂保肝作用較優(yōu)。日常生活中,除注意膳食平衡,加強(qiáng)體育鍛煉外,飲用該復(fù)方茶飲,對(duì)調(diào)節(jié)血脂具有一定功效。

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