16個(gè)杏鮑菇菌株的生物學(xué)特性及親緣關(guān)系研究*

羅孝坤，尚陸娥，陳觀玉，劉紹雄，郭永紅，2**

（1.云南省供銷合作社科學(xué)研究所，云南 昆明 650223；2.云南省食用菌工程技術(shù)研究中心，云南 昆明 650223）

16個(gè)杏鮑菇菌株的生物學(xué)特性及親緣關(guān)系研究*

羅孝坤1，尚陸娥1，陳觀玉1，劉紹雄1，郭永紅1，2**

（1.云南省供銷合作社科學(xué)研究所，云南 昆明 650223；2.云南省食用菌工程技術(shù)研究中心，云南 昆明 650223）

對(duì)16個(gè)不同杏鮑菇菌株的菌絲拮抗作用、菌絲生長特性、生物學(xué)效率及子實(shí)體性狀特征進(jìn)行比較研究。研究結(jié)果表明，杏鮑菇栽培品種比較混亂，同種異名、同名異種的現(xiàn)象較為嚴(yán)重，同種異名的菌株間生物學(xué)特性表現(xiàn)出顯著差異。杏01（杏鮑菇-1）、杏13（杏F）兩個(gè)菌株的菌絲生長較快，長勢較好，菌絲濃密，原基分化快，栽培周期短；出菇產(chǎn)量高，生物學(xué)效率均大于70%；菌蓋大小適中，菌柄長且粗壯，子實(shí)體個(gè)體大，單菇重量大，組織致密，子實(shí)體各項(xiàng)性狀優(yōu)良。因此，菌株杏01與杏13可作為杏鮑菇優(yōu)良菌株進(jìn)行示范推廣。

杏鮑菇；拮抗作用；生物學(xué)特性；親緣關(guān)系

杏鮑菇 [Pleurotus eryngii（DC.ex.Fr.)Quel.]，又名刺芹側(cè)耳，菌肉肥厚，營養(yǎng)豐富，具有杏仁香味和鮑魚味，故稱杏仁鮑魚菇[1]。其子實(shí)體色澤雪白，質(zhì)地脆嫩，素有“平菇王”的美譽(yù)[2]，是近年來引進(jìn)開發(fā)的一種集食用、藥用、保健于一體的珍稀食用菌品種。研究表明，杏鮑菇營養(yǎng)豐富，食用價(jià)值高，具有提高人體免疫力、抗癌、降血壓、降血脂、潤腸胃、抗氧化等功效[3-7]。近年來，隨著市場需求量的增加，杏鮑菇生產(chǎn)發(fā)展十分迅速，栽培規(guī)模不斷擴(kuò)大，杏鮑菇栽培已從季節(jié)性栽培向工廠化栽培轉(zhuǎn)變[8]。工廠化栽培能對(duì)栽培環(huán)境條件（如：溫度、濕度、光照、CO2濃度）進(jìn)行更準(zhǔn)確的控制，使產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量更加穩(wěn)定[9-10]。由于工廠化栽培設(shè)施一次性投資較大，工廠化栽培菌株要求菌株具有菌絲生長快、生長周期短、產(chǎn)量高、品質(zhì)優(yōu)的特性。目前，優(yōu)良菌種的缺乏仍是制約產(chǎn)業(yè)發(fā)展的主要問題，因此，篩選出周期短、高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)的菌株有助于發(fā)展杏鮑菇的規(guī)模化、工廠化栽培。本文對(duì)16個(gè)杏鮑菇菌株的生物學(xué)特性及親緣關(guān)系進(jìn)行比較研究，明確各菌株的親緣關(guān)系，分析比較各菌株的菌絲生長特性、生物學(xué)效率及子實(shí)體性狀特征，為杏鮑菇工廠化栽培優(yōu)良菌種的選育提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1供試菌株

供試杏鮑菇菌株情況見表1。

表1 供試杏鮑菇菌株Tab.1 The tested strains of Pleurotus eryngii

1.2試驗(yàn)配方

一級(jí)種（母種）配方：PDA培養(yǎng)基，去皮馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂20g，蒸餾水1000 mL，pH自然。

二級(jí)種（原種） 配方：棉籽殼40%、細(xì)木屑35%、麥麩20%、石灰1.5%、石膏粉1.0%、普鈣1.0%、白糖1.5%。

杏鮑菇栽培料配方：玉米芯25%、麥麩20%、棉籽殼21%、木屑28%、石灰2.0%、石膏2.0%、普鈣1.0%、白糖1.0%。加入0.08%的多菌靈。菌包干重0.3 kg，含水量60%。

1.3試驗(yàn)方法

1.3.1 菌絲拮抗試驗(yàn)

將不同菌株活化后，在同一平板上按“品”字形接種3個(gè)菌株，25℃下培養(yǎng)，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)，觀察菌絲間的拮抗反應(yīng)情況。

1.3.2 菌絲生長特性試驗(yàn)

一級(jí)菌種（母種）：每個(gè)品種接10支試管，放入25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，觀察并記錄各個(gè)菌株母種菌絲的顏色、長勢、滿管時(shí)間、疏密度、平均生長速度等情況。

二級(jí)菌種（原種）：在一級(jí)種的基礎(chǔ)上，每個(gè)品種接30瓶二級(jí)種，放在25℃恒溫培養(yǎng)室培養(yǎng)，觀察并記錄各個(gè)菌株原種菌絲的顏色、長勢、滿瓶時(shí)間、平均生長速度等情況。

1.3.3 出菇試驗(yàn)

（1）出菇袋的培養(yǎng)

將接好菌的出菇袋搬進(jìn)20℃～25℃的培養(yǎng)室內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)室要求通風(fēng)、清潔、黑暗，空氣相對(duì)濕度保持60%～70%，每隔10 d左右翻堆1次，使發(fā)菌一致，一般40 d左右滿袋，培養(yǎng)中記錄各個(gè)品種長滿菌袋的時(shí)間。

（2）催蕾

后熟培養(yǎng)：菌絲滿袋后，繼續(xù)培養(yǎng)10 d～15 d左右，使菌絲達(dá)到生理成熟才能進(jìn)入出菇房。

催蕾管理：菌絲達(dá)到生理成熟后，菌包便可移入已消毒的育菇房降溫催蕾，先去掉過濾棉蓋，拉高套環(huán)，使栽培包袋口成錐形氣室，當(dāng)有原基出現(xiàn)時(shí)，原基分化出菇柄、菇蓋，去掉套環(huán)，出菇袋口打開，加強(qiáng)通風(fēng)，每天通風(fēng)2次～3次，每次30 min，保持空氣新鮮。溫度保持12℃～15℃，早中晚在地面上澆水3次，保持空氣相對(duì)濕度90%～95%。在此階段，需要少量的散射光刺激，一般7 d～8 d形成原基，原基發(fā)生后，經(jīng)過2 d～3 d就可以分化成菇蕾。

（3）疏蕾管理

菇蕾長到2 cm左右時(shí)，菌袋出菇一般保留2個(gè)～3個(gè)菇蕾，才能發(fā)育成柄長、柄粗、外形美觀、品質(zhì)優(yōu)良的子實(shí)體，其余菇蕾用刀或用手清除掉。

（4）子實(shí)體生長階段管理

杏鮑菇以棍棒形、保齡球形為首選育菇對(duì)象。育菇室內(nèi)通過地面灑水或向空氣中噴霧化水的方式保持濕度在85%～90%，原則上少量多次，切勿直接向菇體上噴水，防止子實(shí)體變黃、腐爛。溫度應(yīng)保持在13℃～16℃，溫度高于18℃容易受到假單胞桿菌污染，出菇期間及時(shí)調(diào)整通風(fēng)量，通風(fēng)太少則菌蓋小，菌柄粗；通風(fēng)太強(qiáng)則菌蓋大，菌柄細(xì)。子實(shí)體生長發(fā)育階段需要一定散射光照，以促使其整齊生長。

（5）采收

一般現(xiàn)蕾后15 d左右，當(dāng)菌柄長至10 cm，菌蓋達(dá)4 cm～5 cm時(shí)即可采收。采收時(shí)，一手握緊菌袋，一手握緊菌柄，輕輕一扭便可采下，做到輕采輕放，勿損傷菇蓋。

2 結(jié)果與分析

2.1不同杏鮑菇菌株菌絲拮抗試驗(yàn)

拮抗試驗(yàn)是鑒定菌株間遺傳差異的傳統(tǒng)方法，菌絲之間的拮抗反應(yīng)是菌株間不同遺傳特性的重要表現(xiàn)，表明不同菌株分別屬于不同親和群。結(jié)果見表2。

表2 不同菌株菌絲的拮抗作用Tab.2 The antagonistic action of different strains on stock culture

由表2可以看出，杏01、杏05、杏11、杏13、杏14菌株兩兩之間都沒有明顯拮抗作用，屬于一個(gè)親和群，其中杏01與杏11是來源地不同的同一品種；杏01、杏05、杏11、杏14兩兩沒有拮抗作用，可能是同種異名的菌株，杏13與杏01、杏11拮抗作用不明顯，說明杏13與杏01、杏11菌株的親緣關(guān)系較近；菌株杏02與杏04沒有拮抗作用，屬于一個(gè)親和群，可能是同一個(gè)種；菌株杏03、杏06、杏09、杏10、杏15兩兩之間都沒有明顯拮抗作用，屬于一個(gè)親和群，親緣關(guān)系很近，其中杏06和杏09可能是來源地不同的同一品種，杏03、杏10、杏15與杏06、杏09可能為同種異名的菌株；杏02與杏15為來源不同的相同品種名稱菌株，但2個(gè)菌株有明顯的拮抗作用，說明這兩個(gè)菌株的親緣關(guān)系較遠(yuǎn)，可能是同名異種的菌株；杏07、杏08、杏12和杏16菌株各自為一個(gè)親和群。

2.2菌絲生長特性試驗(yàn)

16個(gè)杏鮑菇菌株一級(jí)種菌絲生長特性見表3。

由表3可以看出，16個(gè)菌株菌絲顏色均為潔白色，菌株污染率均為0，菌株的滿管時(shí)間為9 d～12 d。杏01、杏04、杏05和杏09菌株的滿管時(shí)間最短為9 d，菌絲的平均生長速度最快，為0.84 cm·d-1；杏02、杏07和杏15菌株的滿管時(shí)間最長，為12 d，菌絲平均生長速度也最慢，為0.63 cm·d-1，與其他菌株相比有顯著差異。從菌絲長勢來看，杏01、杏04、杏09、杏10、杏12、杏13、杏15、杏16菌株的菌絲長勢旺盛，菌絲濃密，杏02、杏07菌絲長勢弱，菌絲稀疏。16個(gè)杏鮑菇菌株二級(jí)種菌絲生長特性見表4。

表3 不同菌株一級(jí)種菌絲生長特性Tab.3 The growth conditions of different strains on stock culture

表4 不同菌株二級(jí)種菌絲生長特性Tab.4 The growth conditions of different strains on pre-culture spawn

由表4可以看出，16個(gè)菌株菌絲顏色均為潔白色，污染率最低的是菌株杏01、杏04、杏05、杏10、杏11、杏13，污染率為0；菌株杏07、杏16的污染率最高，為10%。從菌絲長勢來看，菌株杏02、杏03、杏14的菌絲長勢一般，其余菌株菌絲長勢較好。16株杏鮑菇二級(jí)種的滿瓶時(shí)間為31 d～45 d，滿瓶時(shí)間最短的是杏01，為31 d，菌絲的平均生長速度也最快，為0.41 cm·d-1；滿瓶時(shí)間最長的是杏08、杏16，為45 d，菌絲平均生長速度最慢，分別為0.27 cm·d-1、0.24 cm·d-1，與其他菌株相比有顯著差異。

2.3不同杏鮑菇菌株出菇特性比較

不同杏鮑菇菌株生物學(xué)效率比較見表5。

由表5可以看出，16個(gè)杏鮑菇菌株中，接種至原基分化時(shí)間為55 d～59 d，原基分化最快的是菌株杏01、杏13、杏14，為55 d，杏08、杏16原基分代最慢，為59 d；栽培周期最短的是杏01、杏12、杏13，采收時(shí)間為70 d，杏10最長，為76 d。從子實(shí)體產(chǎn)量和生物學(xué)效率來看，杏01、杏11、杏13三個(gè)菌株的生物轉(zhuǎn)化率大于60%，其中杏01、杏13菌株的平均產(chǎn)量和生物學(xué)效率最高，平均產(chǎn)量分別為0.221 kg和0.213 kg，生物學(xué)效率均大于70%，分別為73.62%和71.00%，方差分析表明，這兩個(gè)菌株的生物學(xué)效率明顯高于其他菌株，差異顯著。杏05、杏08、杏10、杏12菌株的生物轉(zhuǎn)化率大于50%。杏02、杏03、杏04、杏06、杏07、杏09、杏14、杏15、杏16九個(gè)菌株的生物學(xué)效率低于50%，生物學(xué)效率最低的是杏04，平均產(chǎn)量為0.110 kg，生物學(xué)效率僅為36.82%。不同杏鮑菇菌株子實(shí)體性狀比較情況見表6。

表5 不同杏鮑菇菌株生物學(xué)效率比較Tab.5 The fruiting yield of different strains of Pleurotus eryngii

表6 不同杏鮑菇菌株子實(shí)體性狀的比較Tab.6 The agronomic characters of different strains of Pleurotus eryngii

由表6可以看出，16個(gè)杏鮑菇菌株中，杏鮑菇菌株01、杏02、杏05、杏06、杏09、杏11和杏13子實(shí)體組織致密，子實(shí)體硬，其中菌株杏01、杏06、杏09、杏13菌蓋大小適中，菌柄長且粗壯，子實(shí)體個(gè)體大，單菇重量大，子實(shí)體各項(xiàng)性狀優(yōu)良。

綜合16個(gè)杏鮑菇菌株生物學(xué)效率和子實(shí)體性狀，菌株杏01、杏13生物學(xué)效率高，子實(shí)體性狀好，栽培周期短，明顯優(yōu)于其他菌株，可作為優(yōu)良菌株進(jìn)行栽培推廣。

3 結(jié)論與討論

杏鮑菇菌株拮抗試驗(yàn)表明，16個(gè)杏鮑菇菌株中，相同品種名稱的菌株有明顯的拮抗作用，不同品種名稱的菌株卻沒有產(chǎn)生拮抗作用或拮抗作用不明顯，說明了目前杏鮑菇栽培品種比較混亂，同種異名、同名異種的現(xiàn)象較為嚴(yán)重。16個(gè)菌株分為7個(gè)親和群，相同親和群中如菌株杏14、杏05與杏01、杏11、杏13的菌絲特性和生物學(xué)效率存在顯著差異，可能是在栽培過程中菌種轉(zhuǎn)代次數(shù)過多或在保藏過程中引起了菌種的退化，這一結(jié)果與王振河等[11]的研究結(jié)果相符。

杏鮑菇菌株菌絲生長特性及出菇試驗(yàn)表明，杏01、杏13兩個(gè)菌株的菌絲生長較快，長勢較好，菌絲濃密，原基分化快，栽培周期最短；出菇產(chǎn)量較高，生物學(xué)效率均大于70%，菌蓋大小適中，菌柄長且粗壯，子實(shí)體個(gè)體大，單菇重量大，組織致密，子實(shí)體各項(xiàng)性狀優(yōu)良。在工廠化栽培中，較短的栽培周期可以節(jié)約成本，提高經(jīng)濟(jì)效益。本試驗(yàn)篩選出的菌株杏01和杏13，栽培生長周期短，子實(shí)體產(chǎn)量較高，性狀良好，可以用于工廠化栽培。但在應(yīng)用于大規(guī)模工廠化栽培前，應(yīng)進(jìn)一步進(jìn)行中試，摸索其最適的栽培環(huán)境參數(shù)，優(yōu)化栽培工藝，從而獲得更高的經(jīng)濟(jì)效益。

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Biological Characteristic and Phylogenetic Relationship of 16 Pleurotus eryngii Strains

LIU Shao-xiong1,SHANG Lu-e1,CHEN Guan-yu1,LUO Xiao-kun1,GUO Yong-hong1,2
(1.Acadamic Insitute of Yunnan Federation of Supply and Marketing Cooporatives,Kunming 650223,China; 2.Yunnan Edible Fungi Biotechnology and Engineering Research Center,Kunming 650223,China)

The hyphae antagonism,hyphae growth characteristics,biological efficiency and fruit body morphology of 16 different strains of Pleurotus eryngii were comparatively studied,the results showed that P.eryngii varieties were confused,and phenomenon of different species with the same names and different names with the same species were seriously,strains of different names with the same species showed significant differences on biological characteristics.P.eryngii No.1 and P.eryngii No.13 were better than others,because their hyphae grew faster,better and thicker,and fast primordium differentiation led to short cultivation period.At the same time,their mushroom yield were also higher than others,and biological efficiency were greater than 70%.Cap size was moderate,stipe looked long and thick,and fruiting body was big and heavy,dense organization,fruiting body traits were superiored.On the whole,based on so many advantages,P.eryngii No.1 and P.eryngii No.13 could be used wildiy as good P.eryngii strains.

Pleurotus eryngii;antagonistic action;biological characteristic;phylogenetic relationship

A

1003-8310（2015）04-0025-06

10.13629/j.cnki.53-1054.2015.04.006

**基金項(xiàng)目：云南省社會(huì)發(fā)展科技計(jì)劃項(xiàng)目（2012CF009）。

劉紹雄（1987-），男，碩士，研究實(shí)習(xí)員，主要從事食用菌栽培技術(shù)研究。E-mail:305475365@qq.com

**通信作者：郭永紅（1964-），女，碩士，研究員，從事食用菌栽培、保鮮加工研究。E-mail:guoyonghong64@126.com

2015-05-05