猴頭菌對(duì)酒精造成的胃粘膜損傷和肝損傷保護(hù)作用的評(píng)價(jià)*

魏 巍，許曉燕，余夢(mèng)瑤，江 南，羅 霞

（四川省中醫(yī)藥科學(xué)院中藥細(xì)胞與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室，四川 成都 610041）

猴頭菌對(duì)酒精造成的胃粘膜損傷和肝損傷保護(hù)作用的評(píng)價(jià)*

魏 巍，許曉燕，余夢(mèng)瑤，江 南，羅 霞**

（四川省中醫(yī)藥科學(xué)院中藥細(xì)胞與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室，四川 成都 610041）

評(píng)價(jià)猴頭菌H10的水提物對(duì)酒精造成的胃粘膜損傷和肝損傷的保護(hù)作用。采用95%乙醇造成大鼠急性胃粘膜損傷，測(cè)定胃粘膜損傷指數(shù)；采用50%乙醇造成小鼠急性肝損傷，測(cè)定小鼠血清甘油三脂、極低密度脂蛋白、門冬氨酸轉(zhuǎn)移酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶含量，測(cè)定小鼠肝組織中丙二醛、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶含量。猴頭菌中劑量組和大劑量組能明顯降低乙醇造成的大鼠胃粘膜損傷指數(shù)；猴頭低劑量組能明顯降低小鼠肝損傷動(dòng)物血清VLDL含量，中劑量能夠降低ALT、VLDL、MDA含量，高劑量組能夠降低ALT、AST、VLDL、TG、MDA含量及提高SOD、GSH-Px活性。猴頭菌對(duì)酒精造成的胃粘膜損傷和肝損傷具有保護(hù)作用。

猴頭菌；胃粘膜損傷；肝損傷；保護(hù)作用

Key worlds:Hericium erinaceus;gastric mucosal injury;liver injury;protective effect

隨著我國(guó)人民生活條件的不斷提高，人均酒精的消費(fèi)量顯著增加。然而過量飲酒對(duì)消化、心血管和中樞神經(jīng)系統(tǒng)等均會(huì)造成嚴(yán)重的損傷，其中最先損傷的器官就是胃和肝。胃是乙醇最先接觸的重要臟器，過量飲酒或長(zhǎng)期飲酒后可以引起胃黏膜急性或慢性損傷，臨床上常引起急性胃炎、慢性胃炎或是胃潰瘍。乙醇經(jīng)胃腸吸收后絕大部分在肝臟進(jìn)行代謝，長(zhǎng)期或是反復(fù)的肝損傷可致使肝臟脂肪發(fā)生變性引起肝硬化甚至肝癌。雖然大多數(shù)人知道過度飲酒對(duì)人體的危害，但是由于我國(guó)悠久“飲酒文化”的影響，以及工作的需要，很多人“被迫”飲酒，酒精造成的胃病、肝病成為了某些行業(yè)的職業(yè)病，發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，因此開發(fā)一個(gè)能保護(hù)因過量飲酒造成肝、胃損傷的功能產(chǎn)品具有重要意義。

猴頭菌 [Hericium erinaceus(Rull ex F.)Pers.]是擔(dān)子菌門猴頭菌科真菌，是我國(guó)傳統(tǒng)的藥食兩用真菌。《中華本草》記載猴頭菇性平味甘，利五臟，助消化，主治消化不良、神經(jīng)衰弱、身體虛弱[1]，臨床上有用于治療胃病[2-3]、肝病[4]的報(bào)道。猴頭菌H10是四川省中醫(yī)藥科學(xué)院中藥細(xì)胞與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室課題組經(jīng)多年選育獲得的農(nóng)藝性狀和內(nèi)在品質(zhì)均較為優(yōu)異的新材料，本研究以H10為研究對(duì)象，評(píng)價(jià)其提取物對(duì)酒精造成的胃粘膜損傷和肝損傷的保護(hù)作用。

1 材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 試驗(yàn)藥物

猴頭菌H10，為實(shí)驗(yàn)室選育的新材料，產(chǎn)自四川省德陽市，洗凈烘干后，粉碎過10目篩?；亓魈崛?次，合并濾液，減壓濃縮后噴霧干燥，得率為29.1%，采用硫酸-蒽酮法測(cè)定提取物中多糖含量為22.5%。

1.1.2 試劑

甘油三脂測(cè)定試劑盒、門冬氨酸轉(zhuǎn)移酶測(cè)定試劑盒、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定試劑盒購(gòu)自四川麥克生物技術(shù)科技股份有限公司；小鼠極低密度脂蛋白ELISA試劑盒購(gòu)自武漢華美生物工程有限公司；丙二醛測(cè)試盒、超氧化物歧化酶測(cè)試盒、谷胱甘肽過氧化物酶測(cè)試盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

乙醇、甲醛等為市售分析純。

1.1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SD大鼠和昆明種小鼠由四川省中醫(yī)藥科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：SK（川）2013-19。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 酒精引起的大鼠胃黏膜損傷

SD大鼠40只（180 g～200 g），隨機(jī)分為空白組、模型組和給藥組（猴頭菌低、中、高劑量組分別給予猴頭菌提取物0.87 g·kg-1、1.74 g·kg-1和3.48 g·kg-1，相當(dāng)于原猴頭子實(shí)體3 g·kg-1、6 g·kg-1、12 g·kg-1），每組8只，雌雄各半，空白組和模型組給予同等體積的蒸餾水，連續(xù)灌胃30 d，實(shí)驗(yàn)前一天禁食不禁水24 h，除正常組外各組灌胃95%乙醇1 mL·只-1，1 h后處死動(dòng)物，暴露完整胃，結(jié)扎幽門，灌注5 mL10%甲醛溶液，固定20 min，然后沿胃大彎剪開，洗凈胃內(nèi)容物，展開胃粘膜，在肉眼下用游標(biāo)卡尺測(cè)量出血點(diǎn)或出血帶的長(zhǎng)度和寬度，按表1標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)分，計(jì)算損傷抑制率（P），公式[5]為：

P= (V1-V2)/V1×100%

式中：V1表示模型組損傷分值；V2表示給藥組損傷分值。

表1 評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)Tab.1 Grading standard

總積分=出血點(diǎn)分值+長(zhǎng)度分值+（寬度分值×2）。

1.2.2 酒精引起急性酒精性肝損傷

昆明種小鼠50只（18 g～22 g） 隨機(jī)分為空白組、模型組和給藥組（給藥組劑量與實(shí)驗(yàn)1.2.1相同），每組10只，雌雄各半，空白組和模型組給予同等體積的蒸餾水，連續(xù)灌胃30 d，末次經(jīng)口給予受試物20 min后，除正常組外其余各組一次灌胃給予50%（w·w-1）乙醇，劑量為12 mL·kg-1體重，空白組給予同等體積的蒸餾水，禁食16 h后，取血清和肝臟，按照試劑盒方法測(cè)定各指標(biāo)[6]。

1.2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

數(shù)據(jù)分析采用t檢驗(yàn)，P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1猴頭菌提取物對(duì)酒精引起的大鼠胃黏膜損傷的影響

空白組大鼠胃粘膜光澤紅潤(rùn)，無損傷。乙醇灌胃后模型組，黏膜表面出現(xiàn)糜爛、出血、條索狀壞死（如圖1箭頭所示），與胃縱軸平行。預(yù)先給予不同劑量胃猴頭菌提取物后，粘膜損傷明顯減輕，見圖1。

猴頭菌提取物中劑量組和大劑量組能明顯降低乙醇造成的大鼠胃粘膜損傷指數(shù)，其中中劑量組與模型組比較P＜0.05，大劑量與模型組比較P＜0.01，見圖2。

圖2 大鼠胃粘膜損傷指數(shù)Fig.2 The rat gastric mucosal lesion index

2.2猴頭菌提取物對(duì)急性酒精肝損傷小鼠血清中ALT、AST活性和VLDL、TG含量的影響

猴頭水提液對(duì)小鼠急性酒精肝損傷血清中ALT、AST活性和VLDL、TG含量的影響見表2。

表2 猴頭水提液對(duì)小鼠急性酒精肝損傷血清中ALT、AST活性和VLDL、TG含量的影響（x±s,n=10）Tab.2 Effects on serum ALT and AST activities,VLDL and TG contents in ethanol-induced mouse liver injury

小鼠注射乙醇造模后，血清中ALT和AST活性明顯升高，模型組與空白組比較均有極顯著差異（P＜0.01），血清中VLDL、TG含量明顯升高，與模型組比較分別具有顯著性和極顯著性差異（P＜0.05，P＜0.01）。猴頭菌低劑量組血清VLDL含量明顯降低，與模型組比較具有顯著性差異（P＜0.05），猴頭菌中劑量組ALT活性和VLDL含量降低，與模型組比較具有顯著性差異（P＜0.05）；猴頭菌高劑量組ALT、 AST活性和VLDL、TG含量均降低，與模型組比較AST活性的降低具有極顯著差異（P＜0.01），VLDL、TG含量降低具有顯著性差異（P＜0.05）。

2.3猴頭菌提取物對(duì)急性酒精肝損傷小鼠肝勻漿MAD含量、SOD和GSH-Px活性的影響

猴頭水提液對(duì)小鼠急性酒精肝損傷肝勻漿中MAD含量、SOD和GSH-Px活性的影響見表3。

表3 猴頭菌提取物對(duì)小鼠急性酒精肝損傷肝勻漿中MAD含量、SOD和GSH-Px活性的影響（x±s,n=10）Tab.3 Effects on liver MAD content,SOD and GSH-Px activities in ethanol-induced mouse liver injury

小鼠注射乙醇造模后，小鼠肝勻漿液中的SOD和GSH-Px活性明顯降低，模型組與空白組比較具有顯著性差異（P＜0.05），小鼠肝勻漿中MAD含量明顯升高，模型組與空白組比較具有極顯著性差異（P＜0.01）。猴頭菌中劑量組能夠使小鼠勻漿液中明顯升高的MAD含量降低，與模型組比較具有顯著性差異（P＜0.05）。猴頭菌高劑量組能使小鼠勻漿液中明顯降低SOD和GSH-Px活性升高，與模型組比較有顯著性差異（P＜0.05），且能使明顯升高的MAD含量降低，與模型組比較具有顯著性差異（P＜0.05）。

3 討論

高濃度的酒精能直接引起胃黏膜上皮細(xì)胞的變性壞死，另外乙醇分子中既有疏水性的烴基，又含親水性的羥基，可以破壞黏膜的防御系統(tǒng)[7]，引起胃粘膜下血管內(nèi)皮損傷，使血管擴(kuò)張，小血管破裂，粘膜下出血。粘膜上皮和血管內(nèi)皮損傷后會(huì)產(chǎn)生大量炎癥介質(zhì)，引起中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，進(jìn)一步加重粘膜損害[8]。有報(bào)道表示猴頭菌臨床上用于治療慢性萎縮性胃炎、慢性淺表性胃炎、胃竇炎等的效果顯著，本文從動(dòng)物實(shí)驗(yàn)上也證明了這一點(diǎn)，但是對(duì)于其在胃粘膜損傷的保護(hù)作用基質(zhì)上的研究還較少，還需要深入研究。

機(jī)體大量攝入乙醇后，在乙醇脫氫酶的催化下大量脫氫氧化，導(dǎo)致三羧循環(huán)障礙和脂肪酸氧化減弱而影響脂肪代謝，造成α-磷酸甘油增多而促進(jìn)TG合成[9]，ALT和AST主要存在于肝細(xì)胞的胞漿和線粒體內(nèi)，當(dāng)肝細(xì)胞受到損傷或是細(xì)胞膜通透性增加時(shí)AST和ALT會(huì)釋放進(jìn)入血液造成其在血清中濃度增加[10]，因此乙醇造成的肝損傷主要表現(xiàn)為TG和VLDL含量增加以及AST和ALT水平的升高。本文研究發(fā)現(xiàn)猴頭菌提取物能降低血清TG和VLDL含量，以及AST和ALT水平，說明猴頭菌具有調(diào)節(jié)乙醇造成的脂代謝紊亂的作用以及保護(hù)肝細(xì)胞的作用。另外乙醇在肝臟的代謝過程會(huì)引起細(xì)胞的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，削弱抗氧化系統(tǒng)[11]，造成肝組織的氧化損傷，而猴頭菌多糖在體內(nèi)具有較好的抗氧化作用[12-13]，對(duì)乙醇造成的氧化損傷具有保護(hù)作用。

綜上，猴頭菌H10的提取物，在保護(hù)酒精造成的胃粘膜損傷和肝損傷兩方面均具有較好的保護(hù)作用，具有開發(fā)成為養(yǎng)胃保肝保健品和藥品的潛力。

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[5]國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局.對(duì)胃粘膜損傷有輔助保護(hù)功能評(píng)價(jià)方法[Z].2012-05-01.

[6]國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局.對(duì)化學(xué)命性肝損傷有輔助保護(hù)功能評(píng)價(jià)方法（修訂稿）[Z].2011-09-30.

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野生菌電商節(jié)探索“互聯(lián)網(wǎng)＋”新模式

當(dāng)下正是野生菌上市高峰，“野生菌王國(guó)”云南計(jì)劃為野生菌舉辦電商節(jié)，通過多個(gè)電商平臺(tái)銷售云南牛肝、松露、虎掌菌等野生菌。此舉旨在通過改變傳統(tǒng)營(yíng)銷模式，探索云南野生食用菌產(chǎn)業(yè)“互聯(lián)網(wǎng)＋”發(fā)展模式上的突破，推動(dòng)云南野生菌產(chǎn)業(yè)的提質(zhì)升級(jí)。據(jù)了解，云南野生菌資源豐富，全省野生食用菌種類達(dá)882種，2014年產(chǎn)量達(dá)8萬t，實(shí)現(xiàn)產(chǎn)值67.8億元。2014年當(dāng)?shù)刂鳟a(chǎn)區(qū)農(nóng)民人均野生菌收入超過1000元，最高的農(nóng)戶達(dá)到12萬元，主產(chǎn)區(qū)農(nóng)戶野生菌收入占家庭收入的30%～70%。在“互聯(lián)網(wǎng)＋”時(shí)代，云南食用菌產(chǎn)業(yè)緊跟時(shí)代發(fā)展步伐，實(shí)現(xiàn)線上線下共同發(fā)展，著力發(fā)揮產(chǎn)業(yè)富民效應(yīng)，打造云南特色野生菌亮點(diǎn)產(chǎn)業(yè)。

中國(guó)食用菌商務(wù)網(wǎng) 2015.07.03

Protective Effect Study of Hericium erinaceus on Ethanol-induced Gastric Mucosal Lesion and Liver Injury

WEI Wei,XU Xiao-yan,YU Meng-yao,JIANG Nan,LUO Xia
（Cellular and Molecular Lab of Chinese Materia Medica,Sichuan Academy of Chinese Medicine Sciences,Chengdu 61000,China）

The protect effects of Hericium erinaceus water extract on ethanol-induced gastric mucosal lesion and liver injury were investigated.The gastric mucosal lesion of rat was induced by 95%ethanol,and the lesion index was measured.The liver injury of mice was induced by 50%ethanol,and the triglycerides(TG),very low density lipoprotein(VLDL),aspartate transaminase(AST),alanine aminotransferase(AST)content in serum were measured,the malondialdehyde (MDA),superoxide dismutase(SOD),glutathione peroxidase(GSH-Px)content in liver tissue were measured.The middle dose and high dose of H.erinaceus could reduce the lesion index of gastric mucosal.The low dose of H.erinaceus could reduce VLDL content.The middle dose of H.erinaceus could reduce ALT,VLDL,MDA content.The high of H.erinaceus could reduce ALT,AST,VLDL,TG, MDA content and improve the activities of SOD and GSH-Px.Hericium erinaceus water extract can protective gastric mucosal and liver from ethanol damage.

S646.9

A

1003-8310（2015）04-0072-04

10.13629/j.cnki.53-1054.2015.03.017

菌類藥材研究與開發(fā)四川省科技創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)（2011JTD0021）；以精深加工為核心的食藥用菌產(chǎn)業(yè)關(guān)鍵技術(shù)集成與產(chǎn)業(yè)化（成財(cái)教〔2013〕265）；四川省精深加工研究崗位建設(shè)項(xiàng)目（川農(nóng)業(yè)（2009）75號(hào)）；四川省十二五育種攻關(guān)項(xiàng)目（2011NZ0098-12-04）；四川省重大科技計(jì)劃項(xiàng)目（2012NZ0003）；四川藏區(qū)和攀西地區(qū)名貴食藥用菌可持續(xù)利用關(guān)鍵技術(shù)研究與應(yīng)用（2013NZ0029）。

魏?。?982-），男，博士，助理研究員，主要從事藥用菌研究。E-mail:21822546@qq.com

**通信作者：羅霞（1974-），女，博士，研究員，主要從事藥用菌研究。E-mail:lx1443_cn@sina.com

2015-05-15