響應(yīng)面試驗(yàn)優(yōu)化葡萄籽油提取工藝及其抗氧化性

胡翠珍，李 勝，馬紹英,*，蘇利榮，曹寶臣，周文政，劉 琦

（1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院，甘肅 蘭州 730070；2.甘肅順意生物科技有限公司，甘肅 張掖 743000；3.張掖匯通生物科技有限 公司，甘肅 張掖 743000）

響應(yīng)面試驗(yàn)優(yōu)化葡萄籽油提取工藝及其抗氧化性

胡翠珍1，李 勝1，馬紹英1,*，蘇利榮1，曹寶臣1，周文政2,3，劉 琦1

（1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院，甘肅 蘭州 730070；2.甘肅順意生物科技有限公司，甘肅 張掖 743000；3.張掖匯通生物科技有限 公司，甘肅 張掖 743000）

目的：優(yōu)化葡萄籽油的提取工藝，對(duì)葡萄籽油的抗氧化性進(jìn)行研究。方法：通過響應(yīng)面分析法，對(duì)葡萄籽油的提取工藝進(jìn)行優(yōu)化；比較不同物質(zhì)的抗氧化性，以對(duì)超氧陰離子自由基、羥自由基、亞硝基的清除率和還原能力的大小為檢測(cè)指標(biāo)。結(jié)果：萄萄籽油最佳提取條件為提取溫度58.136 ℃、提取時(shí)間1.703 h、料液比1∶5.627。優(yōu)化后提取的萄萄籽油對(duì)超氧陰離子自由基的清除能力高于同等質(zhì)量濃度的沙棘黃酮；對(duì)羥自由基的清除能力高于抗壞血酸；對(duì)亞硝基的清除能力顯著高于抗壞血酸和沙棘黃酮；還原能力比較中，高于沙棘黃酮和抗壞血酸。結(jié)論：該工藝條件可行，葡萄籽油具有良好的抗氧化性。

葡萄籽；葡萄籽油；響應(yīng)面法；抗氧化性

葡萄約占世界水果總量的23.6%，可用做釀酒、鮮食、加工果汁和其他葡萄制品。我國(guó)葡萄資源豐富，每年用于釀酒鮮食和加工的葡萄達(dá)80萬 t[1]。生產(chǎn)中產(chǎn)生的葡萄廢棄物約占葡萄鮮果總量的20%～30%[2]，其中葡萄籽占整個(gè)葡萄粒質(zhì)量的5%左右[3]。葡萄籽中含有多種營(yíng)養(yǎng)成分，其中6%～22%為葡萄籽油[4]，3.9%為原花青素，白藜蘆醇含量為0.5%～3.5%。另外還含有單寧、葡萄籽蛋白質(zhì)、VE和各種礦物質(zhì)等[5]，具有較高的開發(fā)利用價(jià)值。

目前關(guān)于葡萄籽油的提取方法主要有冷榨法[6]、超聲波輔助提取法[7-8]、超臨界CO2萃取法[9]、有機(jī)溶劑提取法、水酶法[10-11]。本實(shí)驗(yàn)擬利用石油醚作為提取劑，并利用響應(yīng)面法優(yōu)化提取工藝，以期為葡萄籽油的生產(chǎn)提供技術(shù)參考和理論依據(jù)。

自由基能引起多種器官功能異?；蚪M織病變[12]，如癌癥和衰老的發(fā)病機(jī)理與脂質(zhì)過氧化有關(guān)[13]。天然抗氧化劑可以清除體內(nèi)產(chǎn)生過剩的自由基[14]，從而延緩衰老、預(yù)防癌癥。常見的天然抗氧化劑有原花青素、白藜蘆醇、黃酮、VE等[15]。葡萄籽油含有大量的不飽和脂肪酸，其含量占脂肪酸的92%[16]，主要成分亞油酸含量較一般食用油，甚至較藥用核桃油和紅花油含量都高[4,17]。葡萄籽油含有較高的VE，較低的膽固醇，具有抗氧化性[18-19]，可作為優(yōu)質(zhì)的食用油。葡萄籽油具有多種生物學(xué)功效，如降低 血脂、軟化血管、預(yù)防血管硬化、降低血壓、降低血液黏度和防止血栓形成等。本研究擬比較原花青素、白藜蘆醇、沙棘黃酮、抗壞血酸與葡萄籽油的抗氧化性，以期為其開發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

葡萄籽（當(dāng)年收獲）、原花青素（由葡萄籽皮渣中提取，純度為65%） 甘肅順意公司；石油醚（分析純）、抗壞血酸（分析純） 天津光復(fù)精細(xì)化工研究所；活性白土（CAS號(hào)：8515-07-1） 青島玉洲化工有限公司；白藜蘆醇（純度10%） 西安天本生物工程有限公司；沙棘黃酮（純度48%） 實(shí)驗(yàn)室從沙棘中提取。

1.2 儀器與設(shè)備

DT10 00電子天平 上海精密科學(xué)儀器有限公司；HH-4數(shù)顯恒溫水浴鍋 江蘇榮華儀器制造有限公司；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 上海亞榮生化儀器廠；循環(huán)式水浴真空泵鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司；SP-756P紫外-可見分光光度計(jì) 上海光譜公司。

1.3 方法

1.3.1 葡萄籽油的提取

有機(jī)溶劑浸提法：準(zhǔn)確稱取烘干至恒質(zhì)量、質(zhì)量為100 g、粉碎至60目的葡萄籽粉于錐形瓶中，加入適量的石油醚，密封，在恒溫水浴鍋中浸提。倒出提取液，以10∶8（mL/g）液料比加入活性白土，攪拌均勻，抽濾除去雜質(zhì)，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀回收溶劑除去殘留溶劑，直至兩次質(zhì)量差不超過0.002 g為止，得葡萄籽油，冷卻，稱量。葡萄籽油提取率按式（1）進(jìn)行計(jì)算：

1.3.2 單因素試驗(yàn)

表1 單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)Table1 Single-factor design

按照1.3.1節(jié)所述方法提取葡萄籽油，研究不同提取溫度、料液比、提取時(shí)間及提取次數(shù)對(duì)葡萄籽油提取率的影響，每次試驗(yàn)重復(fù)3 次，試驗(yàn)過程中，各因素水平設(shè)計(jì)見表1。

1.3.3 響應(yīng)面試驗(yàn)

在單因素試驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)上，根據(jù)中心組合試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理，以提取溫度、提取時(shí)間、料液比3 個(gè)因素為自變量，設(shè)計(jì)響應(yīng)面試驗(yàn)。分別用A、B、C表示，響應(yīng)面分析因素與水平見表2。

表2 響應(yīng)面分析因素與水平Table2 Independent variables and their levels used in central composite dessiiggnn

1.3.4 超氧陰離子自由基清除率的測(cè)定

依據(jù)程德竹等[20]不同物質(zhì)對(duì)鄰苯三酚自氧化生成超氧陰離子自由基清除的方法改進(jìn)。取0.05 mol/L pH值為9的Tris-HCl緩沖液4.5 mL，置于25 ℃水浴中預(yù)熱20 min，分別加入1 mL試樣和0.4 mL 25 mmol/L的鄰苯三酚溶液，混勻后于25 ℃水浴中反應(yīng)5 min，加入2 mol/L HCl溶液2.0 mL 終止反應(yīng)，以Tris-HCl緩沖液作參比，在320 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度A1，以等體積的蒸餾水代替樣品和鄰苯三酚溶液，測(cè)吸光度A0，計(jì)算清除率。清除率計(jì)算如式（2）所示：

1.3.5 羥自由基清除率的測(cè)定

采用顏軍等[21]的方法改進(jìn)。將7.5 nmol/L硫酸亞鐵溶液、7.5 nmol/L過氧化氫溶液、7.5 nmol/L 70%的水楊酸-甲醇溶液、一定質(zhì)量濃度的試樣按順序加入到試管中，振蕩靜置10 min，以蒸餾水為參比，于510 nm波長(zhǎng)處測(cè)吸光度，代入式（3）計(jì)算清除率。

式中：A0為2 mL硫酸亞鐵＋2 mL水楊酸乙醇溶液＋5 mL蒸餾水＋2 mL過氧化氫吸光度；Ai為2 mL硫酸亞鐵＋2 mL水楊酸乙醇溶液＋5 mL樣品液＋2 mL過氧化氫吸光度；Aj為2 mL硫酸亞鐵＋2 mL蒸餾水＋5 mL樣品液＋2 mL過氧化氫吸光度。

1.3.6 亞硝基清除率的測(cè)定

根據(jù)沈彬等[22]的方法改進(jìn)。準(zhǔn)確量取2 mL 5 mg/L NaNO2溶液6 份，置于20 mL具塞試管中，分別加入不同質(zhì)量濃度的樣品液，在37 ℃恒溫水浴中反應(yīng)10 min，立即加入0.4%對(duì)氨基苯磺酸2 mL，搖勻靜置4 min，加入2.0%鹽酸萘乙二胺溶液1 mL，搖勻，靜置15 min，以等體積的蒸餾水代替NaNO2溶液調(diào)零，于540 nm波長(zhǎng)處測(cè)吸光度，按式（4）計(jì)算樣品液對(duì)亞硝基的清除率：

式中：A0為未添加樣品的吸光度；Ai為樣品的吸光度；Aj為樣品本底的吸光度。

1.3.7 還原能力的測(cè)定

采用黃仁術(shù)等[23]的方法改進(jìn)，測(cè)定還原能力。取不同質(zhì)量濃度的樣品溶液1.25 mL，加入0.2 mol/L、pH 6.6的磷酸鹽緩沖液1.25 mL和0.1%的鐵氰化鉀溶液1.25 mL，50 ℃水浴20 min后迅速冷卻，加入10%三氯乙酸溶液1.25 mL，3 000 r/min離心10 min，取上清液2.5 mL，加蒸餾水2 mL及0.1%三氯化鐵溶液0.5 mL，混勻，放置10 min，于700 nm波長(zhǎng)處測(cè)吸光度。吸光度越大，說明還原能力越強(qiáng)[24]。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

2 結(jié)果與分析

2.1 單因素試驗(yàn)結(jié)果

2.1.1 料液比對(duì)有機(jī)溶劑提取葡萄籽油的影響

圖1 不同料液比條件下葡萄籽油提取率Fig.1 Effect of solid/liquid ratio on grape seed oil yield

由圖1可以看出，料液比在1∶6之前時(shí)，隨著溶劑用量的增加，葡萄籽粉與石油醚接觸面積增加，葡萄籽油提取率增加（可達(dá)14.63%），但當(dāng)料液比達(dá)到1∶7時(shí)，葡萄籽油的提取率隨著溶劑用量的增大并未增加，因此考慮能耗因素，料液比為1∶6時(shí)較適宜。

2.1.2 提取時(shí)間對(duì)有機(jī)溶劑提取葡萄籽油的影響

由圖2可知，葡萄籽油的提取率隨著提取時(shí)間的延長(zhǎng)而增加，2 h達(dá)到最大值為11.44%，隨后，葡萄籽油的提取率開始下降，可能是隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，油脂揮發(fā)，提取率下降，所以選擇2 h的提取時(shí)間為宜。

圖2 不同提取時(shí)間條件下葡萄籽油提取率Fig.2 Effect of extraction time on grape seed oil yield

圖3 不同提取溫度條件下葡萄籽油提取率Fig.3 Effect of extraction temperature on grape seed oil yield

2.1.3 提取溫度對(duì)有機(jī)溶劑提取葡萄籽油的影響由圖3可知，隨著提取溫度的升高，葡萄籽油的提取率也隨之增大，55 ℃時(shí)達(dá)到最大值11.44%，而當(dāng)溫度過高，提取率略有下降，溫度影響提取率的主要原因是石油醚的沸騰和流動(dòng)性，隨著溫度的升高提取黏度減少，擴(kuò)散系數(shù)增加，石油醚與葡萄籽接觸充分，提取率不斷上升，但當(dāng)溫度過高時(shí)，達(dá)到石油醚沸點(diǎn)，石油醚揮發(fā)，溶劑量減少，葡萄籽油的提取率反而下降，因此當(dāng)浸提溫度為55 ℃時(shí)較為適宜。

2.1.4 提取次數(shù)對(duì)有機(jī)溶劑提取葡萄籽油的影響

圖4 不同提取次數(shù)條件下葡萄籽油提取率Fig.4 Effect of extraction number on grape seed oil yield

由圖4可知，隨著提取次數(shù)的增加，葡萄籽油的提取率也隨之增加，葡萄籽油的最大提取率為11.73%。但由于隨著提取次數(shù)的增加，葡萄籽油的提取率并沒有顯著增加，因此考慮能耗因素，選擇1次為最佳提取次數(shù)。

2.2 響應(yīng)面優(yōu)化葡萄籽油的提取工藝

2.2.1 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果

以葡萄籽油提取率為響應(yīng)值設(shè)計(jì)了三因素三水平共20 個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)的響應(yīng)面分析試驗(yàn)，20 個(gè)試驗(yàn)點(diǎn)包括17 個(gè)分析因點(diǎn)和3 個(gè)零點(diǎn)，以隨機(jī)次序進(jìn)行，重復(fù)3 次獲得響應(yīng)值，用Design-Expert 9.0.3對(duì)表3中的試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸分析，擬合二次多項(xiàng)式方程，方程可靠性由R2表示，其統(tǒng)計(jì)學(xué)上的顯著性由F值檢驗(yàn)，影響因素線性效應(yīng)、平方效應(yīng)及其交互效應(yīng)的顯著性由模型系數(shù)的P值檢驗(yàn)。

表3 響應(yīng)面設(shè)計(jì)與試驗(yàn)結(jié)果Table3 Central composite design with experimental values of grape seed oil yield

2.2.2 葡萄籽油提取率預(yù)測(cè)模型方程的建立及顯著性分析

用Design-Expert 9.0.3軟件對(duì)表3中的試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析后得到二階響應(yīng)表面模型方程：Y=14.24＋0.56A－0.31B＋0.33C－0.079AB－0.65AC＋0.66BC－0.67A2－0.51B2－0.63C2。對(duì)回歸方程進(jìn)行方差分析，結(jié)果見表4。

表4 回歸方程顯著性檢驗(yàn)Table4 Analysis of variance of regression equation and signifi cant test

從表4可以看出，模型顯著性檢驗(yàn)P＜0.05，表明該模型具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。失擬項(xiàng)用來表示所用模型與實(shí)驗(yàn)擬合的程度，即二者差異的程度。失擬項(xiàng)P值為0.894 8＞0.05，表明失擬不顯著，該模型能夠較好地描述各因素與響應(yīng)值之間的真實(shí)關(guān)系；模型的校正決定系數(shù)j為0.918 2，說明該模型能解釋約91.82%響應(yīng)值的變化；決定系數(shù)R2=0.957 0，說明該模型擬和程度良好，試驗(yàn)誤差小?？梢岳迷摶貧w方程確定葡萄籽油的最佳提取工藝條件。通過該方程，各因素之間存在著一定的交互作用，其中A、B、C、AC、BC、A2、B2、C2均呈極顯著影響，AB呈不顯著。

從單因素水平觀察，可以得出其影響順序?yàn)椋禾崛囟龋玖弦罕龋咎崛r(shí)間。在有交互作用存在條件下，對(duì)葡萄籽油提取率的影響順序?yàn)椋築C＞AC＞AB。

2.2.3 各因素的交互作用的響應(yīng)面

圖5 各因素交互作用對(duì)葡萄籽油提取率的影響Fig.5 Interactive effects of various factors on grape seed oil yield

根據(jù)圖5中響應(yīng)面及圖中的等值線的形狀分析提取溫度、提取時(shí)間、料液比3 個(gè)因素對(duì)葡萄籽油提取率的影響。響應(yīng)面圖像曲線走勢(shì)越陡，其影響越顯著；走勢(shì)越平滑，其影響越小。由圖5可以看出，響應(yīng)面存在極值，即響應(yīng)面有最高點(diǎn)。進(jìn)一步通過Design-Expert 9.0.3軟件分析計(jì)算可知，當(dāng)提取溫度58.136 ℃、提取時(shí)間1.703 h、料液比1∶5.627時(shí)，回歸模型預(yù)測(cè)理論葡萄籽油提取率可達(dá)14.45%。對(duì)分析結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，在提取溫度58 ℃、提取時(shí)間1.7 h、料液比1∶6時(shí)，葡萄籽油的提取率為14.03%，驗(yàn)證值略低于預(yù)測(cè)值，其相對(duì)誤差為3.009%，二者非常接近，因此該工藝穩(wěn)定可行，適用于葡萄籽油的提取。

2.3 葡萄籽油的抗氧化性

2.3.1 對(duì)超氧陰離子自由基的清除作用

圖6 不同物質(zhì)對(duì)超氧陰離子自由基清除作用的比較Fig.6 Superoxide anion radical scavenging capacities of grape seed oil and other natural antioxidants

由圖6可以看出，葡萄籽油在6 mg/mL時(shí)，對(duì)超氧陰離子自由基的清除率顯著高于同等質(zhì)量濃度的白藜蘆醇、抗壞血酸和沙棘黃酮。隨著質(zhì)量濃度的變化，只顯著高于沙棘黃酮，且與同等質(zhì)量濃度的原花青素、白藜蘆醇和抗壞血酸相比并無顯著性差異。由此可見，葡萄籽油與其他常見的抗氧化劑一樣對(duì)超氧陰離子自由基具有較強(qiáng)的清除作用。

2.3.2 對(duì)羥自由基的清除作用

圖7 不同物質(zhì)對(duì)羥自由基清除作用的比較Fig.7 Hydroxyl radical scavenging capacities of grape seed oil and other natural antioxidants

由圖7可知，葡萄籽油對(duì)羥自由基的清除率顯著高于沙棘黃酮。在低質(zhì)量濃度時(shí)，略高于白藜蘆醇。當(dāng)質(zhì)量濃度達(dá)到84 μg/mL時(shí)，顯著高于原花青素、白藜蘆醇和抗壞血酸。隨著質(zhì)量濃度的增高，對(duì)羥基自由的清除率顯著低于同等質(zhì)量濃度的原花青素。

2.3.3 對(duì)亞硝基的清除作用

圖8 不同物質(zhì)對(duì)亞硝基清除作用的比較Fig.8 Nitroso radical scavenging capacities of grape seed oil and other natural antioxidants

由圖8可以看出，在低質(zhì)量濃度（2 mg/mL）條件下，葡萄籽油對(duì)亞硝基的清除率最低。但隨著質(zhì)量濃度的增加，與同等質(zhì)量濃度的原花青素對(duì)亞硝基的清除率無顯著差異，并顯著高于同等質(zhì)量濃度條件下的抗壞血酸和沙棘黃酮，但顯著低于白藜蘆醇對(duì)亞硝基的清除率。

2.3.4 還原能力

圖9 不同物質(zhì)還原能力的比較Fig.9 Reducing power of grape seed oil and other natural antioxidants

由圖9可知，在低質(zhì)量濃度（小于56 μg/mL）時(shí)，葡萄籽油的還原能力略高于白藜蘆醇；但當(dāng)質(zhì)量濃度增加，葡萄籽油的還原能力顯著低于同等質(zhì)量濃度的原花青素和白藜蘆醇。隨著質(zhì)量濃度的變化，葡萄籽油的還原能力均顯著高于同等質(zhì)量濃度的沙棘黃酮和抗壞血酸。

3 討論與結(jié)論

葡萄籽油含有大量的不飽和脂肪酸和VE，較低的膽固醇，可作為優(yōu)質(zhì)的食用油，但其提取技術(shù)一直是制約其大規(guī)模生產(chǎn)的問題之一。冷榨法出油率低，在柴佳等[6]的研究中，出油率僅為12.3%；超聲波輔助提取噪音大；CO2超臨界萃取法對(duì)設(shè)備要求嚴(yán)格；水酶提取法提取所使用酶價(jià)格高，提取工藝復(fù)雜，不利于大規(guī)模生產(chǎn)；有機(jī)溶劑提取法能耗低，溶劑可循環(huán)利用，利于大規(guī)模生產(chǎn)。

本研究通過考察提取溫度、提取次數(shù)、提取時(shí)間及料液比4 組單因素水平對(duì)葡萄籽油提取率的影響，最終篩選出3 組主要因素進(jìn)行響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)，優(yōu)化了提取條件，建立了影響葡萄籽油提取率的二次多項(xiàng)數(shù)學(xué)模型。經(jīng)檢驗(yàn)該模型具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可用于生產(chǎn)預(yù)測(cè)。

試驗(yàn)結(jié)果表明提取溫度、提取時(shí)間、料液比各因素及其二項(xiàng)式對(duì)葡萄籽油提取率均有顯著影響。綜合考慮各方面的因素，葡萄籽油提取優(yōu)化條件為提取溫度58.136 ℃、提取時(shí)間1.703 h、料液比1∶5.627，葡萄籽油提取率理論達(dá)到最大值為14.45%。經(jīng)驗(yàn)證得14.03%，其相對(duì)誤差為3.009%，表明該提取工藝參數(shù)在葡萄籽油的提取中是可行的。

活性氧自由基對(duì)機(jī)體有一定的毒害作用，如進(jìn)攻多不飽和脂肪酸可引起脂質(zhì)過氧化，導(dǎo)致生物膜結(jié)構(gòu)和功能的改變；引發(fā)蛋白質(zhì)氧化變性、核酸損傷和酶失活[25]，并能激活程序性細(xì)胞死亡。因此生物體內(nèi)活性氧的生成與清除的平衡對(duì)生命過程的正常進(jìn)行是十分重要的。近年來，油脂的抗氧化作用受到廣泛的重視，研究表明許多油脂具有清除自由基的作用。

比較不同物質(zhì)之間的抗氧化能力，葡萄籽油對(duì)超氧陰離子自由基的清除能力高于同等質(zhì)量濃度的沙棘黃酮；對(duì)羥自由基的清除能力高于抗壞血酸；對(duì)亞硝基的清除能力比較，顯著高于抗壞血酸和沙棘黃酮；還原能力比較中，高于沙棘黃酮和抗壞血酸。因此，葡萄籽具有良好的抗氧化能力，研究為其開發(fā)利用提供了理論依據(jù)。

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Optimization of Extraction Process for Grape Seed Oil by Response Surface Methodology and Evaluation of Its Antioxidant Properties

HU Cuizhen1, LI Sheng1, MA Shaoying1,*, SU Lirong1, CAO Baochen1, ZHOU Wenzheng2,3, LIU Qi1
(1. College of Life Science and Technology, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, China; 2. Gansu Shunyi Bio-Technology Co. Ltd., Zhangye 743000, China; 3. Zhangye Huitong Bio-Technology Co. Ltd., Zhangye 743000, China)

Objective: To optimize the extraction of grape seed oil and investigate its antioxidant properties. Methods: Response surface methodology was applied to optimize the extraction process. Antioxidant properties of grape seed oil were evaluated using superoxide anion, hydroxyl and nitroso radical scavenging and reducing power assays. Results: The optimum conditions for extracting grape seed oil were determined as extraction for 1.703 h at 58.136 ℃ with a solid/liquid ratio of 1:5.627. The grape seed oil obtained possessed superoxide anion radical scavenging capacity higher than that of seabuckthorn fl avones at the same concentration and hydroxyl radical scavenging capacity comparable to that of ascorbic acid without signifi cant difference, and its nitroso radical scavenging capacity and reducing power were signifi cantly higher than those of ascorbic acid and seabuckthorn fl avones. Conclusion: The optimized extraction conditions are feasible, and grape seed oil possesses good antioxidant potential.

grape seed; grape seed oil; response surface methodology; antioxidant activity

TS224.2

A

1002-6630（2015）20-0056-06

10.7506/spkx1002-6630-201520010

2015-04-28

甘肅省科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目（1304FKCA065）；甘肅省高校基本科研經(jīng)費(fèi)項(xiàng)目

胡翠珍（1989—），女，碩士研究生，研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物的提取與開發(fā)。E-mail：zhonglarkspur@163.com

*通信作者：馬紹英（1975—），女，實(shí)驗(yàn)師，碩士，研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物。E-mail：mashy@gsau.edu.cn