微性狀鑒別法鑒別中藥紅花及其摻偽品

張 帆，趙鑫磊，張 偉，方成武，周建理，劉耀武

（1．亳州職業(yè)技術(shù)學(xué)院 安徽省中醫(yī)藥科學(xué)院亳州中醫(yī)藥研究所，安徽 亳州 236800；2．安徽中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，安徽 合肥 230012）

紅花始載于《開寶本草》，又稱草紅花或刺紅花，來源于為菊科植物紅花CarthamustinctoriusL．的干燥花［1］，其味辛性溫，歸心、肝經(jīng)，具有活血通經(jīng)、散瘀止痛的功效［2］。由于紅花用途廣泛，且價格一直居高不下、貨源不足，市場上存在大量紅花混偽品。娜仁［3］統(tǒng)計了市場中紅花藥材，發(fā)現(xiàn)紅花摻偽情況達到92．3%。宋俊驪［4］在紅花樣品中發(fā)現(xiàn)以染色處理的菊花花瓣冒充紅花的現(xiàn)象。摻偽藥材嚴重影響藥品療效，甚至?xí)θ梭w造成損害，危害人類健康。筆者于2012年9月至2013年7月針對中藥材市場的紅花藥材商品進行專項收集，針對文獻以及市場中出現(xiàn)的常見混偽品進行鑒別。

前期的文獻報道對于紅花混偽品的鑒別主要是從傳統(tǒng)經(jīng)驗鑒別和實驗分析入手，但傳統(tǒng)性狀鑒別對經(jīng)驗的要求頗高，實驗分析往往用時過長，不利于基層快速檢驗。本研究基于微性狀鑒別技術(shù)［5］對紅花及其摻偽品進行鑒別。

1 紅花摻偽現(xiàn)狀調(diào)查

紅花入藥部位為管狀花，由于產(chǎn)地在采收加工過程中，一般是摘取整個紅花頭狀花序，再將采摘后的花序經(jīng)過碾壓，分離出管狀花，所以一般的紅花藥材中?；煊锌偘?、花梗和葉片等雜質(zhì)，另外在碾壓過程中也會混入少量泥沙。課題組早期在亳州市食品藥品檢驗所的協(xié)助下，對紅花藥材市場調(diào)查工作中發(fā)現(xiàn)市場內(nèi)摻偽手段多樣，經(jīng)過對比研究，發(fā)現(xiàn)紅花摻偽手段主要有：摻入染色的菊花；將提取（水提或醇提）后的紅花染色；摻入MgSO4·7H2O，以增加紅花商品單位質(zhì)量；摻糖水或食鹽水，以增加紅花商品單位質(zhì)量；噴灑食用植物油，以增加質(zhì)量并使藥材美觀；摻雜染色的細沙，以增加紅花商品總質(zhì)量。目前部分摻偽方法已消失。

2 材料與方法

2．1 儀器 熒光顯微鏡（Leica DM2500，500萬像素電子目鏡）、蒸餾水、白乳膠等。

2．2 藥材樣品 實驗用藥材樣品為課題組自亳州中藥材市場、亳州市食品藥品檢驗所、亳州藥業(yè)企業(yè)等處收集，共25批次（見表1），樣品經(jīng)安徽中醫(yī)藥大學(xué)周建理教授鑒定，存于亳州職業(yè)技術(shù)學(xué)院中藥標(biāo)本中心（BZCM）。

表1 實驗藥材來源表

2．3 微性狀鑒別法

2．3．1 樣品制備 取紅花樣品1份，輕壓樣品，撥動聚藥雄蕊，使紅花花冠筒展開，暴露雄蕊和花冠筒基部，用少量白乳膠黏附樣品于載玻片上；另取紅花樣品1份用水浸泡1min，觀察是否有水被染色的情況出現(xiàn)，并依據(jù)上法制備樣品以備觀察。同種方法做10組實驗，以完全展示紅花樣品的微性狀特征。

2．3．2 微性狀觀察 在載物臺上固定裝有樣品的載玻片，在載物臺兩個側(cè)面架設(shè)攝影用燈作為主燈光，調(diào)整燈光角度和距離，保證光路暢通，根據(jù)光線強弱不同，輔以反光板和小臺燈，在10倍目鏡和10倍物鏡下調(diào)節(jié)顯微鏡至圖像介于模糊與清晰之間狀態(tài)。

2．3．3 圖像拍攝 觀察 Leica DM2500熒光顯微鏡標(biāo)配的電子目鏡成像系統(tǒng)界面，調(diào)節(jié)RGB選項中紅綠藍通道三色比，使鏡下顏色趨于藥材本色，并按照預(yù)實驗的結(jié)果，固定好載玻片，每隔細準(zhǔn)焦螺旋4個固定分度格調(diào)節(jié)細準(zhǔn)焦螺旋，自上而下拍攝一組不同景深的圖像。

2．3．4 圖像合成 在電腦中，將拍攝的照片按照順序?qū)刖吧詈铣杉夹g(shù)軟件，按照要求完成操作步驟，按照順序合并圖層清晰部位后保存，獲得清晰的高景深樣品圖像。

2．3．5 標(biāo)尺制作 在既有的成像系統(tǒng)界面制作標(biāo)尺，根據(jù)電子目鏡與物鏡的放大倍數(shù)，系統(tǒng)中有與之對應(yīng)的標(biāo)尺，選中圖片后，選定標(biāo)尺的分度值，調(diào)整至合適位置后合并圖層，完成制作。

3 結(jié)果

3．1 紅花與其偽品菊花的微性狀觀察

3．1．1 紅花的微性狀觀察（圖1A） 紅花為管狀花，長1～2cm，花冠筒呈紅色，色澤均一自然，表面常黏附黃色的花粉粒?；ü诹哑敹丝梢姳砥ぜ毎黄?，且呈短絨毛狀，聚藥雄蕊花絲與花藥呈金黃色，表面黏附有大量花粉粒。雌蕊呈褐色，花柱上端可見直立的圓錐形的單細胞毛，柱頭表面黏附大量花粉粒?；ㄋ幊书L橢圓形，基部細胞類方形，有縱向的數(shù)條條帶狀增厚?；ǚ哿ｎ悎A形或橢圓形，呈金黃色，表面有突起。

3．1．2 偽品菊花舌狀花（圖1B）與花托（圖1C）的微性狀觀察 偽品菊花多為舌狀花，管狀花少見，基部有皺褶，斷面常呈鋸齒狀。舌狀花長1～1．5cm，寬0．2～0．4cm，表面被染色至紅色，經(jīng)水浸泡后，部分顏色褪去，呈淡紅色至黃色。多數(shù)樣品雌蕊脫落，僅剩舌狀花花冠部分。在舌狀花表面偶見花粉粒，花粉粒染色后呈紅色，表面有突起。

樣品中?？梢娋栈ǖ幕ㄍ?，花托呈半球形，直徑0．3～0．5cm，表面呈棕褐色至黑色，半球狀凸面有細密的凹陷，表面附著有花粉粒，花粉粒（圖1D）紅色 。

在市場調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，偽品菊花摻雜于紅花中出售，偽品表面?？梢婞S色的紅花花粉粒。

3．2 紅花摻偽品微性狀觀察 紅花摻偽品的目的主要是提高單位質(zhì)量，摻雜染色的細沙或摻入食用植物油的樣品［6－7］未收集到。

3．2．1 噴灑硫酸鎂溶液的紅花（圖2A） 花冠呈深紅色，表面有黏成小塊狀白色結(jié)晶，結(jié)晶往往存在于紅花花冠皺縮處，結(jié)晶表面可見黃紅色的花粉粒，多數(shù)紅花雄蕊花絲及花藥部分可見少量的白色結(jié)晶。

3．2．2 噴灑糖水的紅花（圖2B） 花冠呈紅色，表面附著黏成塊狀的黃色至黃紅色結(jié)晶，結(jié)晶布滿紅花表面，在結(jié)晶表面常見花粉粒，花粉粒多為紅色，是由于在噴灑糖水過程中，水將紅花中色素浸出，使紅花花粉粒染色，另在貯存過程中受濕度影響，摻糖水的紅花極易吸濕返潮，這也會導(dǎo)致花粉粒及表面蔗糖結(jié)晶染色。個別紅花雄蕊花絲部分可見少量的白色至黃色結(jié)晶。

3．2．3 噴灑食鹽水的紅花（圖2C） 花冠呈暗紅色，表面分散附著有細小的正四面體結(jié)構(gòu)的白色晶體，偶見較大的正四面體結(jié)晶，部分晶體顏色為黃色?；ǚ哿Ｅc結(jié)晶交雜附著于紅花表面，多數(shù)為黃色。多數(shù)紅花雄蕊部分，可見白色晶體分散附著于花絲表面。

3．3 提取有效物質(zhì)并摻偽的紅花微性狀觀察 染色的目的是掩飾藥材不正常顏色，改善外觀。閔春艷等［8］、欒潔等［9］通過薄層色譜法、高效液相色譜法實驗研究認為，紅花染色染料主要有檸檬黃、胭脂紅、酸性紅73和金橙Ⅱ，并認為酸性紅73、胭脂紅是主要染色物質(zhì)。

3．3．1 提取后的紅花 醇提后的紅花（圖3A）花冠顏色呈黃紅色至紅黃色，顏色不均一；少數(shù)花冠裂片邊緣有深紅色條紋；花冠基部顏色較上端深；聚藥雄蕊呈淡黃色至黃白色；在花冠表面可見花粉粒，花粉粒為橢圓形或圓形，黃白色。

水提后的紅花（圖3B）近似于醇提的紅花，但花冠筒顏色較淡；花冠筒和裂片呈黃色至黃紅色；花冠裂片邊緣有明顯的暗紅色條紋。

3．3．2 提取后染色的紅花（圖3C） 提取后的紅花花冠表面呈紅色，經(jīng)水浸后顏色褪去，呈黃色，在花冠表面可見被染色至紅色的花粉粒，部分花粉?？梢姳砻嬗型黄稹?/p>

3．3．3 提取后染色并摻雜增加質(zhì)量的紅花（圖3D） 花冠呈深紅色，顏色暗淡，染色不均一，表面可見有紅色花粉粒，由于摻雜于未染色紅花藥材中，亦可見混雜有黃色花粉粒。由于直接將增加質(zhì)量物質(zhì)撒入紅花中攪拌均勻，增加質(zhì)量物質(zhì)未緊緊黏附在紅花表面，故花冠裂片表面和內(nèi)部可見形狀不規(guī)則、大小不一的晶體，白色透明狀或夾雜部分黑色物質(zhì)。

4 討論

紅花與其偽品、摻偽品的微性狀特征十分明顯，微性狀實驗方法簡單迅速，適合快速檢驗。從紅花花冠顏色和形態(tài)可以明顯區(qū)別正、偽品；從花絲與花藥顏色及水浸后花冠顏色可以區(qū)別是否提取了有效成分；紅花花冠表面附著物的形態(tài)可以區(qū)別是否為液體噴灑或固體摻雜，從花粉粒的顏色可以區(qū)別是否染色。

中藥微性狀鑒定法是借助儀器觀察中藥材表面（包括斷面）肉眼不易察覺的細微性狀特征，并以此作為鑒定依據(jù)的一種鑒別方法，其能夠觀察到傳統(tǒng)性狀鑒定和顯微鑒定未能觀測的藥材特征信息，對于大多數(shù)動植物類藥材都有鑒別意義，具有簡單、快速、廉價的特點，適合推廣。

（安徽省亳州市食品藥品檢驗所提供部分實驗樣品，束國強協(xié)助制作圖版，謹致謝忱！）

［1］康廷國．中藥鑒定學(xué)［M］．北京：中國中醫(yī)藥出版社，2007：35．

［2］國家藥典委員會．中華人民共和國藥典［M］．北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：141．

［3］娜仁．紅花摻偽現(xiàn)象嚴重［C］／／科技創(chuàng)新與經(jīng)濟結(jié)構(gòu)調(diào)整：第七屆內(nèi)蒙古自治區(qū)自然科學(xué)學(xué)術(shù)年會優(yōu)秀論文集．中共內(nèi)蒙古自治區(qū)委員會組織部，內(nèi)蒙古自治區(qū)科學(xué)技術(shù)協(xié)會，內(nèi)蒙古自治區(qū)教育廳，等：呼和浩特，2012：525－526．

［4］宋俊驪．紅花摻偽品菊花瓣鑒別［J］．時珍國醫(yī)國藥，1999，10（8）：593－593．

［5］黃璐琦．胡之璧．中藥鑒定新技術(shù)新方法及其應(yīng)用［M］．北京：人民衛(wèi)生出版社，2010：23．

［6］石勇．注意鑒別紅花摻偽新現(xiàn)象［J］．時珍國醫(yī)國藥，2000，11（11）：980－980．

［7］稅丕先．紅花的摻假鑒別［J］．中國藥業(yè)，2000，9（12）：14－14．

［8］閔春艷，付凌燕，汪祺，等．紅花藥材摻偽染色檢測方法的實驗研究［J］．中國藥事，2011，25（8）：772－775．

［9］欒潔，倪艷娜，丁晴．紅花飲片染色摻偽品的檢測方法探討［J］．安徽醫(yī)藥，2012，16（7）：917－919．