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    補陽還五湯對腦缺血大鼠不同時間點PAI-1、tPA、ICAM 1、VCAM 1表達(dá)的影響

    2015-12-08 08:13:56羅銀河葛金文
    中成藥 2015年12期
    關(guān)鍵詞:明顯降低補陽纖溶

    羅銀河, 葛金文*, 劉 林

    (1.湖南中醫(yī)藥大學(xué),湖南長沙410208;2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院,湖南長沙410007)

    [科研報道]

    補陽還五湯對腦缺血大鼠不同時間點PAI-1、tPA、ICAM 1、VCAM 1表達(dá)的影響

    羅銀河1, 葛金文1*, 劉 林2

    (1.湖南中醫(yī)藥大學(xué),湖南長沙410208;2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院,湖南長沙410007)

    目的 探討補陽還五湯 (BYHWT)對大腦中動脈栓塞 (MCAO)大鼠不同時間點纖溶酶原激活抑制物-1(PAI-1)、組織型纖溶酶原激活物(tPA)、細(xì)胞間黏附分子1(ICAM1)和血管細(xì)胞黏附分子1(VCAM1)表達(dá)的影響。方法 用頸內(nèi)動脈線栓法建立局灶性腦缺血大鼠模型,觀察缺血后1、3、7 d神經(jīng)癥狀積分,采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血漿中PAI-1、tPA的表達(dá),Western blot法檢測腦組織中ICAM1、VCAM1蛋白質(zhì)表達(dá),實時熒光定量法(RT-PCR)測定腦組織中Icam1、Vcam1 mRNA的表達(dá)。結(jié)果 補陽還五湯組神經(jīng)癥狀積分(7 d)低于模型組和依達(dá)拉奉組 (P<0.01);補陽還五湯組大鼠血漿PAI-1表達(dá)在腦缺血后3 d比依達(dá)拉奉組明顯降低 (P<0.01);依達(dá)拉奉組和補陽還五湯組大鼠血漿tPA表達(dá)在缺血后3、7 d比假手術(shù)組明顯降低 (P<0.01);假手術(shù)組、依達(dá)拉奉組和補陽還五湯組大鼠腦組織Icam1、Vcam1 mRNA的表達(dá)在腦缺血后1、3、7 d比模型組均明顯降低 (P<0.01),ICAM1蛋白表達(dá)在腦缺血后3、7 d比模型組明顯降低 (P<0.01);補陽還五湯組大鼠腦組織VCAM1蛋白表達(dá)在腦缺血后1、3、7 d比模型組明顯降低 (P<0.01)。結(jié)論 補陽還五湯能明顯下調(diào)PAI-1、上調(diào)tPA的表達(dá),降低黏附分子,PAI-1在治療后3 d降低最明顯,tPA在治療后1 d升高最明顯,黏附分子在治療后7 d降到最低值。從而有效控制血栓的形成,抑制炎性細(xì)胞的黏附、聚集和激活,拮抗缺血性腦損傷,保護(hù)腦組織。

    大腦中動脈栓塞 (MCAO);細(xì)胞間黏附分子1(ICAM1);血管細(xì)胞間黏附分子1(VCAM1);纖溶酶原激活抑制物-1(PAI-1);組織型纖溶酶原激活物(tPA)

    血漿纖溶酶原激活抑制物-1(PAI-1)和組織型纖溶酶原激活物 (tPA)是纖溶系統(tǒng)的一對關(guān)鍵物質(zhì),它們之間的動態(tài)平衡,能有效地清除體內(nèi)纖維蛋白凝塊,防止血栓形成。細(xì)胞間黏附分子1(ICAM1)和血管細(xì)胞黏附分子1(VCAM1)在腦缺血炎癥發(fā)生、發(fā)展過程中起著關(guān)鍵作用。腦缺血后ICAM1和VCAM1表達(dá)增加,與白細(xì)胞上的相應(yīng)受體結(jié)合,從而導(dǎo)致白細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞黏附、游出,進(jìn)而浸潤到血管外腦實質(zhì),導(dǎo)致缺血后炎癥。補陽還五湯是治療氣虛血瘀型腦卒中的經(jīng)典名方,臨床報道補陽還五湯可提高血小板功能,改善患者異常的血小板活化和纖溶活性,改善其不良血液循環(huán)狀態(tài)[1]。高、中、低劑量補陽還五湯均能減少血瘀證大鼠VCAM1的表達(dá),高劑量補陽還五湯能顯著減少ICAM1表達(dá),而中、低劑量組表達(dá)反而增加[2]。近年來,對本方不同劑量對血瘀證模型大鼠纖溶系統(tǒng)及黏附分子的影響等方面開展了大量的實驗研究,但尚未見本方對不同時間點纖溶系統(tǒng)及黏附分子表達(dá)影響的研究報道。本實驗運用ELISA、Western blot和RT-PCR方法,觀察補陽還五湯對腦缺血后大鼠不同時間點PAI-1、tPA、ICAM1、VCAM1表達(dá)規(guī)律,探討其腦保護(hù)的最佳時間點。

    1 材料

    1.1 實驗動物 清潔級SD大鼠,雌雄各半,體質(zhì)量200~300 g,湖南斯萊克景達(dá)實驗動物有限公司提供,合格證號:SCXK(湘)2011-0003。常規(guī)標(biāo)準(zhǔn)飼料分籠喂養(yǎng),每籠5只。

    1.2 藥物 補陽還五湯 (出自 《醫(yī)林改錯》)由生黃芪120 g,赤芍5 g,川芎3 g,當(dāng)歸尾6 g,地龍3 g,桃仁3 g,紅花3 g組成。購自湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院,經(jīng)鑒定符合 《中華人民共和國藥典》2005年的規(guī)定。將飲片分煎兩次后混合,濃縮至含生藥1 g/mL的湯劑冷藏備用。依達(dá)拉奉購自吉林博大制藥有限公司,規(guī)格15 g/10 mL,批號02-140716。

    1.3 主要試劑 TRIZOL試劑(美國BIOMIGA公司);DEPC(美國Amresco公司);反轉(zhuǎn)錄試劑盒、SYBR Green qPCR Mix(美國GeneCopoeia公司);三氯甲烷、異丙醇、

    無水乙醇 (上海生工生物有限公司);分離膠、濃縮膠、蛋白裂解液、5×SDS上樣緩沖液、電泳緩沖液、轉(zhuǎn)移緩沖液(北京Lifeman生化股份有限公司);BCA蛋白濃度測定試劑盒 (貨號P0010,上海碧云天生物技術(shù)有限公司);羊抗鼠二抗 (貨號CW0102,北京康為世紀(jì)生物科技有限公司);羊抗兔二抗 (貨號CW0103,北京康為世紀(jì)生物科技有限公司);ECL發(fā)光液(貨號K-12045-D50,美國Advansta公司);大鼠PAI-1、tPA、ICAM1、VCAM1試劑盒(武漢博士德生物技術(shù)有限公司)。

    1.4 主要儀器 立式壓力蒸汽滅菌器(型號YXQ-LS-SⅡ,上海博迅實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠);電熱鼓風(fēng)干燥箱(型號101-1AB,天津市泰斯特儀器有限公司);-80℃超低溫冰箱(型號DW-HL538,中科美菱低溫科技股份有限公司);低溫臺式高速離心機(jī) (型號HR/T 16M,赫西儀器裝備有限公司);電泳儀 (型號DYY-2C,北京六一生物科技有限公司);定量PCR儀(型號StepOneTMReal-Time PCR System,Life Technologies);水平搖床(型號WD-9405B,北京六一生物科技有限公司);全自動化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng) (型號Tanon5500,上海天能科技有限公司);臺式高速冷凍離心機(jī) (型號5424R,Eppendorf);超純水儀 (型號SIMSV0000,美國Millipore公司)。

    2 方法

    2.1 模型制備 參照Zea Longa等[3]建立的大鼠大腦中動脈內(nèi)栓線阻斷方法,作適當(dāng)改進(jìn)。術(shù)前禁食12 h,自由飲水。實驗時10%水合氯醛 (0.35 g/kg)腹腔注射麻醉,保留自主呼吸,仰臥位固定,術(shù)中體溫由肛溫計監(jiān)測,并用白熾燈加熱維持肛溫在36.5~37℃,防止低溫對腦缺血的影響。頸部正中切開皮膚,鈍性分離各層組織,暴露右側(cè)頸總動脈。分離頸內(nèi)動脈、頸外動脈和翼腭動脈,仔細(xì)分離避免損傷迷走神經(jīng)和氣管,置線備用。結(jié)扎翼腭動脈,于頸內(nèi)、頸總動脈處用動脈夾夾閉,頸外動脈近心端及遠(yuǎn)心端結(jié)扎,中間剪斷。將頸外動脈游離端拉至與頸內(nèi)動脈成一條直線,將尼龍線由頸外動脈插入,插入后用0號絲線結(jié)扎,以防止出血,打開頸內(nèi)動脈處動脈夾,將尼龍線插入頸內(nèi)動脈,插入深度約 (18.5±0.5)mm至微感阻力,固定線栓,逐層縫合,尼龍線殘端留l cm長于皮外。手術(shù)后動物保溫 (28℃左右)飼養(yǎng)。動物造模清醒后24 h進(jìn)行神經(jīng)功能評分[4],分值在1~3分者入組。假手術(shù)組僅切開皮膚、分離右頸總動脈后即縫合。

    2.2 動物分組及給藥 大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分為假手術(shù)組、模型組、依達(dá)拉奉組、補陽還五湯組,每組15只。補陽還五湯組于術(shù)后6 h起灌服24 mL/kg補陽還五湯藥液(按體表面積計算,相當(dāng)人臨床等效劑量的2倍,12.87 g/kg);依達(dá)拉奉組于術(shù)后6 h腹腔注射依達(dá)拉奉3 mg/(kg·d),分2次注射;模型組和假手術(shù)組動物均給予等量生理鹽水,自由飲食、活動。

    2.3 神經(jīng)功能缺失體征評分方法 參考Bederson[4]的5分制法在動物麻醉清醒后24 h首次進(jìn)行評分。0分:無神經(jīng)損傷癥狀。1分:不能完全伸展對側(cè)前爪。2分:向?qū)?cè)轉(zhuǎn)圈。3分:向?qū)?cè)傾倒。4分:不能自發(fā)行走,意識喪失。分值越高,說明動物行為障礙越嚴(yán)重。腦缺血后3、7 d按同樣方法進(jìn)行神經(jīng)功能缺失體征評分。

    2.4 標(biāo)本采集及處理 分別于首次給藥后1、3、7 d各組取5只大鼠,10%水合氯醛 (0.35 g/kg)腹腔注射麻醉,取腹主動脈血5 mL置于0.109 mmol/L(1∶9抗凝)的枸櫞酸鈉抗凝劑的試管中,混勻,靜置30 min,離心,及時分離血漿,置于-80℃低溫冰箱中保存待用。備皮消毒后,斷頭,分離大腦,迅速放至液氮中速凍,再移入-80℃冰箱保存。

    2.5 檢測方法 采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血漿中PAI-1、tPA的量,RT-PCR方法檢測腦組織Icam1、Vcam1 mRNA,Western blot方法測定腦組織ICAM-1、VCAM-1蛋白的量,均按試劑盒 (武漢博士德生物技術(shù)有限公司)說明書操作。

    2.6 腦組織Icam1、Vcam1引物的設(shè)計 在NCBI數(shù)據(jù)庫(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)中查找基因序列,設(shè)計RT-PCR引物,引物序列如下,見表1。

    表1 RT-PCR的引物序列

    3 結(jié)果

    3.1 補陽還五湯對局灶性腦缺血大鼠神經(jīng)癥狀積分變化的影響 腦缺血后3 d,補陽還五湯組較模型組同時間點大鼠神經(jīng)癥狀積分明顯降低 (P<0.05);腦缺血后7 d,依達(dá)拉奉組較模型組同時間點積分明顯降低 (P<0.05);腦缺血后7 d,補陽還五湯組的積分低于模型組和依達(dá)拉奉組(P<0.01)。見表2。

    表2 各組神經(jīng)癥狀積分

    3.2 不同組別不同時間點局灶性腦缺血大鼠血漿PAI-1、tPA的表達(dá) 腦缺血后3、7 d,假手術(shù)組、依達(dá)拉奉組和補陽還五湯組較模型組相同時間點大鼠血漿PAI-1表達(dá)降低;腦缺血后1、7 d,假手術(shù)組、依達(dá)拉奉組和補陽還五湯組較模型組相同時間點大鼠血漿tPA表達(dá)升高(P<0.01);與依達(dá)拉奉組比較,補陽還五湯組大鼠血漿PAI-1水平在腦缺血后3 d明顯降低(P<0.01);與假手術(shù)組比較,依達(dá)拉奉組和補陽還五湯組大鼠血漿PAI-1表達(dá)在缺血后7 d有顯著性差異(P<0.01),tPA表達(dá)在缺血后3、7 d有顯著性差異(P<0.01)。見表3。

    表3 不同組別不同時間點局灶性腦缺血大鼠血漿PAI-1、tPA的表達(dá)(n=5,)(ng/m L)

    表3 不同組別不同時間點局灶性腦缺血大鼠血漿PAI-1、tPA的表達(dá)(n=5,)(ng/m L)

    注:與模型組比較,△P<0.01;與依達(dá)拉奉組比較,★P<0.01;與假手術(shù)組比較,▲P<0.01

    PAI-1 tPA組別1 d 3 d 7 d 1 d 3 d 7 d假手術(shù)組 9.9±1.7 7.7±3.7△ 5.9±0.66△ 4.3±1.3△ 4.1±0.3 4.2±0.3△模型組 10.1±1.5 12.8±1.4 11.9±1.4 1.4±0.1 1.9±0.7▲ 0.9±0.1依達(dá)拉奉組 7.9±3.7 9.5±0.7△ 7.4±0.2△▲ 3.5±0.3△ 1.0±0.2▲ 2.5±0.2△▲補陽還五湯組 9.9±3.5 6.6±0.3△★ 8.8±1.5△▲ 3.7±0.2△ 1.6±0.3▲ 2.8±0.4△▲

    3.3 不同組別不同時間點大鼠腦組織Icam1、Vcam1 mRNA的表達(dá) Quantity one軟件分析不同組別不同時間點大鼠腦組織Icam1、Vcam1 mRNA的表達(dá)。結(jié)果顯示:與模型組比較,假手術(shù)組、依達(dá)拉奉組和補陽還五湯組Icam1、 Vcam1 mRNA的表達(dá)在腦缺血后1、3、7 d均明顯降低(P<0.01);與假手術(shù)組比較,依達(dá)拉奉組和補陽還五湯組Icam1 mRNA在缺血后1、3 d有顯著性差異(P<0.01)。RT-PCR定量分析結(jié)果見表4。

    表4 不同組別不同時間點局灶性腦缺血大鼠腦組織Icam1、Vcam1 m RNA的表達(dá)(n=5,)

    表4 不同組別不同時間點局灶性腦缺血大鼠腦組織Icam1、Vcam1 m RNA的表達(dá)(n=5,)

    注:與模型組比較,△P<0.01;與假手術(shù)組比較,▲P<0.01

    Vcam1組別 Icam1 1 d 3 d 7 d 1 d 3 d 7 d假手術(shù)組 1.9±0.1△ 1.7±0.2△ 2.0±0.3△ 3.1±0.4△ 2.6±0.4△ 2.7±0.4△模型組 7.2±0.5 8.1±0.6 8.8±0.5 5.1±0.3 5.9±0.6 7.9±1.0依達(dá)拉奉組 3.4±0.4△▲ 3.5±1.2△▲ 2.3±0.3△ 3.2±0.4△ 2.9±0.5△ 2.2±0.3△補陽還五湯組 3.3±0.1△▲ 2.9±0.3△▲ 1.8±0.4△ 2.7±0.6△ 2.4±0.5△ 1.6±0.4△

    3.4 不同組別不同時間點大鼠腦組織ICAM1、VCAM1蛋白的表達(dá) Quantity one軟件分析不同組別不同時間點大鼠腦組織ICAM1、VCAM1蛋白的表達(dá)。結(jié)果顯示:與模型組比較,假手術(shù)組、依達(dá)拉奉組和補陽還五湯組大鼠腦組織ICAM1蛋白表達(dá)在腦缺血后3、7 d明顯降低 (P<0.01);與依達(dá)拉奉組比較,補陽還五湯組大鼠腦組織ICAM1蛋白表達(dá)在腦缺血后7 d明顯降低 (P<0.01);與模型組比較,補陽還五湯組大鼠腦組織VCAM1蛋白表達(dá)在腦缺血后1、 3、7 d明顯降低 (P<0.01),假手術(shù)組大鼠腦組織VCAM1蛋白表達(dá)在腦缺血后1、3、7 d明顯降低 (P<0.01),依達(dá)拉奉組大鼠腦組織VCAM1蛋白表達(dá)在腦缺血后7 d明顯降低 (P<0.01);與假手術(shù)組比較,模型組和補陽還五湯組大鼠腦組織VCAM1蛋白表達(dá)在腦缺血后1 d有顯著性差異 (P<0.01),依達(dá)拉奉組大鼠腦組織VCAM1蛋白表達(dá)在腦缺血后1、3、7 d有顯著性差異 (P<0.01)。Western blot結(jié)果顯示見表5。

    表5 不同組別不同時間點局灶性腦缺血大鼠腦組織ICAM 1、VCAM 1蛋白的表達(dá) (n=5,)

    表5 不同組別不同時間點局灶性腦缺血大鼠腦組織ICAM 1、VCAM 1蛋白的表達(dá) (n=5,)

    注:與模型組比較,△P<0.01;與依達(dá)拉奉組比較,★P<0.01;與假手術(shù)組比較,▲P<0.01

    ICAM1 VCAM1組別1 d 3 d 7 d 1 d 3 d 7 d假手術(shù)組 34.4±5.8 34.4±2.5△ 34.3±6.2△ 19.5±2.1△△ 19.2±2.9△ 19.5±1.9△模型組 47.6±1.9 51.1±1.2 63.3±3.6 30.2±1.7▲ 33.9±4.4 39.7±3.9依達(dá)拉奉組 43.9±2.8 39.2±6.1△ 39.5±2.9△ 28.3±1.5▲ 27.0±2.4▲ 24.7±1.9△▲補陽還五湯組 39.5±7.6 37.3±4.9△ 27.6±1.5△★ 24.7±1.9△▲ 23.8±2.6△ 16.6±4.4△

    4 討論

    tPA和PAI-1主要由血管內(nèi)皮細(xì)胞合成和分泌,tPA是纖維蛋白溶解系統(tǒng)的重要組成部分,能夠轉(zhuǎn)化纖溶酶原成為具有催化作用的纖溶酶,PAI-1主要功能是阻止tPA激活纖溶酶原,局部的纖溶系統(tǒng)平衡取決于局部tPA和PAI-1的量,tPA和PAI-1能夠在體內(nèi)以1∶1的比例形成穩(wěn)定的復(fù)合物,從而維持纖溶系統(tǒng)平衡[5]。體內(nèi)纖溶活性的降低是血栓形成的主要原因。內(nèi)皮細(xì)胞合成和釋放tPA減少、PAI-1的合成和釋放增加是心腦血管病的一個獨立危險因素[6]。在血栓形成不同時間段,血漿tPA及PAI活性存在著規(guī)律性變化。在血栓形成最初24 h內(nèi),血漿tPA活性明顯降低,而血漿PAI活性明顯升高[7]。補陽還五湯有抗凝血酶、抑制血小板聚集、促進(jìn)血栓溶解的作用,對血液凝固有較強(qiáng)的抑制作用[8]。

    ICAM1和VCAM1是兩種重要的黏附分子,同屬免疫球蛋白超家族成員,在腦缺血損傷炎癥過程中起著重要作用。它們共同介導(dǎo)炎癥發(fā)生前白細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞的黏附、聚集及浸潤過程,在這種反復(fù)黏附和脫離過程中,白細(xì)胞

    與趨化因子或CD31等活性分子的接觸激活了白細(xì)胞的黏附活性,從而使ICAM1,ICAM2,VCAM1等黏附分子更易于與之結(jié)合,為白細(xì)胞更牢固結(jié)合于內(nèi)皮細(xì)胞和介導(dǎo)它們遷入內(nèi)皮下參與各種生理病理過程創(chuàng)造了條件[9]。本研究發(fā)現(xiàn):局灶性腦缺血大鼠腦組織VCAM1、Vcam1 mRNA、ICAM1和Icam1 mRNA表達(dá)明顯增強(qiáng)。因此,抑制ICAM1和VCAM1的表達(dá)或阻斷表達(dá)后與白細(xì)胞表面黏附受體的結(jié)合,均可減輕腦缺血炎癥,改善神經(jīng)功能,預(yù)防和治療腦缺血損傷[10]。

    補陽還五湯出自清代王清任 《醫(yī)林改錯》,具有補氣活血通絡(luò)之功效,主治氣虛血瘀之中風(fēng)。中風(fēng)半身不遂,一屬中氣不足則邪氣中之,二屬肝血瘀滯經(jīng)絡(luò)不暢,氣虛血瘀發(fā)為半身不遂。治宜補氣活血為法。氣虛屬脾,故方中重用生黃芪120 g補中益氣為主;血瘀屬肝,除風(fēng)先活血,故配伍當(dāng)歸尾、川芎、桃仁、赤芍、紅花入肝,行瘀活血,疏肝祛風(fēng);加入地龍活血而通經(jīng)絡(luò)。共成補氣活血通絡(luò)之劑。據(jù)現(xiàn)代藥理研究認(rèn)為,黃芪主要含有黃芪皂苷類、多糖類、黃酮類、氨基酸類及少量微量元素類,黃芪皂苷對腦血管系統(tǒng)和血液流變性均有影響[11]。當(dāng)歸多糖及其硫酸酯可顯著延長凝血時間、縮短出血時間;顯著延長凝血酶時間和活化部分凝血活酶時間,其抗凝血作用主要是影響內(nèi)源性凝血系統(tǒng)[12]。紅花中紅花黃素對內(nèi)源性和外源性凝血有明顯的抑制作用,對凝血過程諸多環(huán)節(jié)如血小板黏附、血栓形成和纖維蛋白交聯(lián)等有抑制作用[13]。以往的補陽還五湯治療缺血性腦血管疾病的實驗研究表明:補陽還五湯可明顯降低腦缺血再灌注大鼠腦組織黏附分子表達(dá),有效抑制炎性細(xì)胞的黏附、聚集和激活,拮抗缺血性腦損傷[14]。但大多忽視了腦血管疾病中時間因素的重要性。因此,本研究觀察不同時間點補陽還五湯對腦缺血大鼠tPA、PAI1、ICAM1、VCAM-1表達(dá)的影響,進(jìn)一步研究補陽還五湯治療腦梗死的作用,為臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。結(jié)果表明:補陽還五湯能明顯降低血漿PAI-1水平,升高tPA水平,降低黏附分子表達(dá),血漿PAI-1水平在治療后3 d降低最明顯,tPA水平在治療后1 d升高最明顯,黏附分子7 d降到最低值。說明纖溶抑制減弱,纖溶酶原激活增強(qiáng),血栓形成的傾向性降低。從而有效防止血栓形成,抑制炎性細(xì)胞的黏附、聚集和激活,拮抗缺血性腦損傷。

    綜上所述,大鼠局灶性腦缺血后,血漿PAI-1升高,tPA明顯減低,腦組織中VCAM1、ICAM1蛋白及其mRNA表達(dá)有不同程度的增強(qiáng),調(diào)控腦缺血時tPA、PAI1、VCAM1、ICAM-1的表達(dá)及作用可防止血栓形成,減輕腦缺血炎癥,保護(hù)腦缺血損傷。具有益氣活血、化瘀通絡(luò)之功效的補陽還五湯可明顯降低血漿PAI-1,升高tPA水平,結(jié)果表明補陽還五湯治療局灶性腦缺血后,內(nèi)皮細(xì)胞合成和釋放tPA明顯增加,激活血凝塊中的纖溶酶原生成纖溶酶,

    從而促使血栓中的纖維蛋白凝塊溶解,PAI-1水平逐漸降低,與tPA的結(jié)合減少,纖溶活性增強(qiáng),防止血栓形成。同時補陽還五湯抑制VCAM1、ICAM1蛋白及其mRNA的表達(dá),給藥7 d抑制作用最明顯,從而發(fā)揮拮抗腦缺血損傷作用。

    [1] 趙玉霞,楚中華,孔令鈞.補陽還五湯對中風(fēng)患者血小板及纖溶活性的影響[J].山東中醫(yī)雜志,2001,20(5):336-337.

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    R285.5

    B

    1001-1528(2015)12-2739-05

    10.3969/j.issn.1001-1528.2015.12.035

    2015-01-09

    國家自然科學(xué)基金項目 (81274008)

    羅銀河 (1978—),女,副教授,博士生,主要從事心腦血管疾病方面研究。Tel:13574891189,E-mail:1286313109@ qq.com

    *通信作者:葛金文(1965—),男,教授,博士生導(dǎo)師,主要研究中醫(yī)藥防治心腦血管疾病。E-mail:cmgjw@tom.com

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