血清白三烯B4、MMP-9水平與冠心病患者的臨床研究

張美玲

濰坊市第二人民醫(yī)院急診科,山東濰坊 261041

心血管疾病是全球發(fā)病率和死亡率最高的疾病之一，其中最常見的冠心病是眾多因素共同作用引發(fā)的復(fù)雜疾病。動(dòng)脈粥樣硬化是冠心病患者的血管病理表現(xiàn)，炎癥一方面是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展的主要機(jī)制，另外更是冠心病發(fā)生的關(guān)鍵[1]。通過臨床研究可以發(fā)現(xiàn)，冠心病患者的外周血炎癥因子，如C反應(yīng)蛋白、腫瘤壞死因子等水平明顯提升，這是評估冠心病患者病變嚴(yán)重程度的判斷標(biāo)準(zhǔn)，也是預(yù)后轉(zhuǎn)歸的有效生化標(biāo)志物，白三烯（LT）貫穿于動(dòng)脈粥樣硬化形成整個(gè)過程，白三烯B4是LT中含量最高，作用最強(qiáng)的一類.其通過上調(diào)斑塊內(nèi)基質(zhì)金屬蛋白酶的表達(dá)，導(dǎo)致粥樣斑塊的不穩(wěn)定，破裂[2]。基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)是一類蛋白水解酶，它的生存依賴于鋅、鈣金屬離子。它主要能參與降解細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）。動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的主要成分就是ECM，而MMPs對細(xì)胞外基質(zhì)成分之間有較高親和力，能降解幾乎所有的ECM成分。該研究整群選取2014年5月—2015年3月期間在該院就診住院的患者82例，按病情分為冠心病組和非冠心病組，比較兩組血清LTB4 MMP-9變化，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

在該院就診住院的患者82例中，將入院病人分為冠心病組40 例（男 22 例，女 18 例），平均年齡（55.25±2.72），非冠心病組患者42例（男22例，女 20例，平均年齡56.23±2.45），年齡基數(shù)各指標(biāo)、各組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 指標(biāo)檢測方法

所有研究組患者均在入院后24 h空腹抽取肘靜脈血3 mL，靜止1 h后超速離心(2 500 r/min)10 min，取上清液置于-70℃低溫冰箱中保存?zhèn)錅y。用ELISA法檢測血清LTB4 MMP-9濃度，比較各組患者血清LTB4 MMP-9水平的變化，并進(jìn)行相關(guān)性分析。

1.3 標(biāo)本的采集和保存

所有病人于入院24 h內(nèi)抽肘靜脈血約4 mL,置于試管中,4000 rpm離心10 min,收集完上層血清,分裝在2支試管中,放在-70℃冰箱中保存，留以測試。收集的全部一次性完成，能避免批間誤差和測量誤差,樣本檢測，實(shí)驗(yàn)均嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。

1.4 排除標(biāo)準(zhǔn)

慢性肝腎功能不全、心肌炎、慢性心力衰竭、風(fēng)濕性心臟病、心內(nèi)膜炎、結(jié)締組織病和腫瘤,近期有過創(chuàng)傷和手術(shù)史及近半年內(nèi)經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈成形術(shù)、心肌梗死、冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)史。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS 13.5統(tǒng)計(jì)軟件。檢測所得計(jì)量資料數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示。兩組間均數(shù)比較，采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。多個(gè)樣本均數(shù)間的兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)，各因素之間的相關(guān)關(guān)系采用直線相關(guān)分析。計(jì)數(shù)指標(biāo)的檢測采用描述例數(shù)及百分?jǐn)?shù)，組間采用χ2檢驗(yàn)，均以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 臨床資料比較

臨床資料比較：冠心病合患者，非冠心病患者在年齡、性別、身高、體重、吸煙、飲酒、糖尿病、血脂方面差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05)。 見表 1、2。

表1 各組臨床基本特征的比較（±s）

表1 各組臨床基本特征的比較（±s）

注：各組指標(biāo)間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

臨床資料冠心病組(n=4 0)非冠心病組（n=4 2) P年齡（歲）體重指數(shù)(k g/m 2)5 5.2 5±2.7 2 2 5.0 3±1.6 9 5 6.2 3±2.4 5 2 5.4 3±1.1 6 0.9 7 5 0.3 3 8

表2 各組臨床資料基本特征的比較[n(%)]

2.2 血清LTB4 MMP-9變化

冠心病明顯高于非冠心病組（P<0.01)。見表3。

表3 各組血清白三烯B4和MMP-9結(jié)果比較(±s)

表3 各組血清白三烯B4和MMP-9結(jié)果比較(±s)

組別白三烯 B 4（p g/m L） M M P-9(n g/m L)冠心病組(n=4 0)非冠心病組(n=4 2)t P(6 1 4.0 6±6 6.3 5)(3 0 1.5 8±6 2.3 6)1 1 4.1 9 0.0 0 0(8 9 2.1 8±2 0 1.3 9)(4 7 4.2 0±1 3 9.6 2)1 2 3.3 5 0.0 0 0

2.3 血清LTB4 MMP-9相關(guān)性比較

冠心病患者血清LTB4 MMP-9水平均較對照組明顯升高,且二者呈正相關(guān)（r=0.774，P<0.01）。

3 討論

心血管疾病是全球發(fā)病率和死亡率最高的疾病之一，其中最常見的冠心?。–AD）是眾多因素共同作用引發(fā)的復(fù)雜疾病。動(dòng)脈粥樣硬化(AS)是冠心病患者的血管病理表現(xiàn)，它的特點(diǎn)是AS的受累動(dòng)脈的病變首先從內(nèi)膜開始，接著可能有多種病變合并存在，其中局部有脂質(zhì)和復(fù)合糖類集聚、纖維組織增生和鈣質(zhì)沉著形成斑塊，并有動(dòng)脈中層的逐漸退變，繼發(fā)性病變尚有斑塊內(nèi)出血，斑塊破裂及局部血栓形成。炎癥不僅是AS發(fā)生發(fā)展的主要機(jī)制，也是CAD發(fā)生,發(fā)展的關(guān)鍵。白三烯（LT）貫穿于動(dòng)脈粥樣硬化形成整個(gè)過程。白三烯B4是LT中含量最高，作用最強(qiáng)的一類其通過上調(diào)斑塊內(nèi)MMPS的表達(dá)，后者分解細(xì)胞質(zhì)，導(dǎo)致粥樣斑塊的不穩(wěn)定，破裂[2]。越來越多的證據(jù)顯示其可能通過上調(diào)MMP-2/MMP-9表達(dá)促使細(xì)胞外基質(zhì)代謝失平衡，進(jìn)而促使易損斑塊破裂。大量研究表明,許多細(xì)胞因子與CAD的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。

LTB4是從白細(xì)胞代謝產(chǎn)物花生四烯酸分離得到的具有共軛三烯結(jié)構(gòu)的二十碳不飽和酸。在體內(nèi)含量雖微,但卻具有很高的生理活性,并且是某些變態(tài)反應(yīng)、炎癥以及心腦血管等疾病中的化學(xué)介質(zhì)[3]。該研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),CAD患者LTB4水平顯著高于非冠心病患者,證明了LTB4參與了冠心病的發(fā)生、發(fā)展的病理變化過程。活化的LTB4也會(huì)生成一些化學(xué)因子,如：組織因子,粘附細(xì)胞因子,都可能與炎癥上調(diào)得作用關(guān)聯(lián)。同時(shí)可使粥樣斑塊的纖維帽ECM降解大于合成,促使血小板的聚集,血栓形成，促使斑塊裂解[4]。

基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）是蛋白水解酶，它依賴于鋅、鈣金屬離子，它參與降解細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）。ECM的過度降解會(huì)導(dǎo)致下降A(chǔ)S斑塊穩(wěn)定性，產(chǎn)生破裂，導(dǎo)致CAD的發(fā)生[5]。MMPs是降解細(xì)胞外基質(zhì)蛋白酶的總稱，其中的MMP-9對細(xì)胞外基質(zhì)有極強(qiáng)的降解作用，因此與動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的不穩(wěn)定有很大關(guān)聯(lián)[6]。Luttun等[7]將鼠的載脂蛋白 E基因敲除（apoE-/-），MMP-9基因敲除，飲食上喂以高膽固醇，并且設(shè)立對照組，分別隨機(jī)于15、25周選取小鼠殺死，與對照組比較（P<0.01），在減輕主動(dòng)脈粥樣斑塊的形成有顯著效果，并阻礙巨噬細(xì)胞浸潤、中膜彈力蛋白降解和膠原沉積，從而減少AS的形成。Gough等[8]通過轉(zhuǎn)染逆轉(zhuǎn)錄病毒，apoE-/-鼠巨噬細(xì)胞過度表達(dá)MMP-9，降解AS基質(zhì)，斑塊急性破裂。上述實(shí)驗(yàn)說明，血清MMP-9與CAD的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。該研究發(fā)現(xiàn)血清MMP-9濃度在CAD患者中明顯高于非冠心病組,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,進(jìn)一步證實(shí)了MMP-9是CAD的一種保護(hù)因素。該研究將LTB4，MMP-9在CAD患者中的相關(guān)性做了分析,發(fā)現(xiàn)兩者成顯著正相關(guān)關(guān)系。

該研究也有一定的局限性，樣本例數(shù)相對較少,LTB4、MMP-9受多種因素的影響,盡管在篩選病例時(shí)排除了一些可能的影響因素,但仍不能排除一些潛在的干擾因素,所有標(biāo)本都是取外周血作為檢測指標(biāo),并不能特異的反映冠狀動(dòng)脈病變,其它部位的血管如頸動(dòng)脈、主動(dòng)脈的動(dòng)脈粥樣硬化病變也對其有一定程度的影響。聯(lián)合檢測生化指標(biāo),為CAD提供發(fā)病機(jī)制、臨床預(yù)后及最佳治療信息，為遠(yuǎn)期預(yù)后的判斷提供依據(jù)，聯(lián)合檢測炎癥因子有望為CAD患者的檢測及防治提供新的治療靶點(diǎn)。

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