貴州甘蔗真菌病害初步調(diào)查及褐斑病防治藥劑篩選

龍友華, 劉洋洋, 吳小毛, 胡安龍, 張 承, 王 偉, 李榮玉

(貴州大學(xué)農(nóng)學(xué)院， 貴陽(yáng) 550025)

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貴州甘蔗真菌病害初步調(diào)查及褐斑病防治藥劑篩選

龍友華, 劉洋洋, 吳小毛, 胡安龍, 張 承, 王 偉, 李榮玉

(貴州大學(xué)農(nóng)學(xué)院， 貴陽(yáng) 550025)

為掌握貴州甘蔗真菌病害種類及發(fā)生情況,采用隨機(jī)踏查、定點(diǎn)調(diào)查、癥狀診斷與病原菌形態(tài)特征觀察等方法對(duì)貴州甘蔗產(chǎn)區(qū)7個(gè)縣進(jìn)行真菌病害調(diào)查;采用菌絲生長(zhǎng)速率法,對(duì)甘蔗褐斑病進(jìn)行了5種殺菌劑室內(nèi)毒力測(cè)定和田間防效試驗(yàn)。結(jié)果表明,貴州甘蔗主要真菌病害有褐斑病、褐銹病、赤腐病、黃斑病、輪斑病、褐條病、煤煙病、黑穗病,其中褐斑病、輪斑病、褐條病發(fā)生較重,煤煙病發(fā)生嚴(yán)重;5種殺菌劑中,325 g/L苯甲·嘧菌酯懸浮劑對(duì)甘蔗褐斑病毒力最高,防效最好,EC50為0.002 5 mg/L,第3次藥后10 d防效達(dá)86.46%。其他4種殺菌劑對(duì)褐斑病均有較好的防治效果,可應(yīng)用于甘蔗生產(chǎn)防治褐斑病。

貴州; 甘蔗; 真菌病害; 褐斑病; 藥劑篩選

貴州是農(nóng)業(yè)部劃定的全國(guó)7個(gè)南亞熱作省區(qū)之一,甘蔗生產(chǎn)和蔗糖業(yè)是貴州低熱河谷地區(qū)特色優(yōu)勢(shì)產(chǎn)業(yè),隨著種植面積不斷擴(kuò)大,甘蔗病害發(fā)生逐年加重。近年來(lái),國(guó)內(nèi)學(xué)者對(duì)甘蔗病害做了大量調(diào)查研究,韋金菊等[1]進(jìn)行了廣西甘蔗主要真菌病害調(diào)查,明確了廣西蔗區(qū)主要真菌病害的發(fā)生情況和種類;熊國(guó)如等[2]等調(diào)查了海南甘蔗產(chǎn)區(qū)病害,初步明確了海南甘蔗病害種類,共發(fā)現(xiàn)真菌病害有19種,其中甘蔗黑穗病、赤腐病、黃斑病、輪斑病、梢腐病發(fā)生普遍;吳偉懷等[3]對(duì)甘蔗梢腐病病原菌進(jìn)行鑒定及其室內(nèi)毒力測(cè)定,試驗(yàn)表明多菌靈毒力最強(qiáng),EC50為1.77～2.51 μg/mL;易代勇等[4]初步調(diào)查了貴州‘黔糖3號(hào)’果蔗病害,共發(fā)現(xiàn)真菌病害6種,其中以虎斑病、褐條病、黃斑病危害較重。

貴州蔗區(qū)作為全國(guó)蔗糖業(yè)的補(bǔ)充部分,病蟲(chóng)害嚴(yán)重影響甘蔗產(chǎn)量及品質(zhì),已成為威脅貴州甘蔗生產(chǎn)的主要因素。目前貴州甘蔗真菌病害系統(tǒng)調(diào)查及褐斑病防治藥劑篩選未見(jiàn)報(bào)道,2011-2012年,筆者在貴州甘蔗產(chǎn)區(qū)開(kāi)展了病害種類調(diào)查,進(jìn)行5種殺菌劑對(duì)甘蔗褐斑病病菌室內(nèi)毒力測(cè)定和田間藥效試驗(yàn),旨在明確貴州甘蔗主要真菌病害種類,篩選出防治甘蔗褐斑病高效、低毒的殺菌劑及其適宜使用濃度,以期為貴州甘蔗病害高效、安全防治提供技術(shù)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 調(diào)查時(shí)間和地點(diǎn)

2011年5月-2012年10月,在貴州甘蔗主要種植區(qū)貞豐縣魯榮鄉(xiāng)、白層鎮(zhèn)、魯貢鎮(zhèn)、沙坪鄉(xiāng);望漠縣昂武鄉(xiāng)、納夜鎮(zhèn)、大觀鄉(xiāng)、桑朗鎮(zhèn),冊(cè)亨縣慶坪、丫他、巧馬、八渡、巖架5個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn);關(guān)嶺縣八德鄉(xiāng)、斷橋鄉(xiāng)、新鋪鄉(xiāng);荔波縣朝陽(yáng)鎮(zhèn)、撈村鄉(xiāng)、瑤山鄉(xiāng)、洞塘鄉(xiāng);晴隆縣雞場(chǎng)鎮(zhèn)和普安縣江西坡鎮(zhèn)等7個(gè)縣22鄉(xiāng)鎮(zhèn)開(kāi)展病害發(fā)生種類及發(fā)生情況調(diào)查。

1.2 調(diào)查方法

采用普查與詳查、定點(diǎn)與定時(shí)、病發(fā)特點(diǎn)特征與病原鏡檢相結(jié)合的方法進(jìn)行調(diào)查。對(duì)調(diào)查的田塊,采用5點(diǎn)取樣法進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)記錄,每點(diǎn)調(diào)查10叢共50叢甘蔗植株地上部分的病害,同時(shí)采集典型病害癥狀制作標(biāo)本,編號(hào)帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行鑒定。

1.3 病害種類鑒定

將采回實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本進(jìn)行癥狀觀察,選取癥狀典型的標(biāo)本直接提取病原物制片,利用光學(xué)顯微鏡對(duì)病原菌形態(tài)特征進(jìn)行觀察、記錄;對(duì)病征不明顯或復(fù)合侵染的病害,采用常規(guī)組織分離培養(yǎng)鑒定方法,接種于PDA平板培養(yǎng)基上,在23～25 ℃條件下培養(yǎng)純化,觀察培養(yǎng)性狀,進(jìn)行種類鑒定。根據(jù)鏡檢結(jié)果,結(jié)合癥狀特征,并對(duì)照魏景超的《真菌鑒定手冊(cè)》[5]、陸家云的《植物病原真菌學(xué)》[6]和張中義等的《植物病原真菌學(xué)》[7]以及其他有關(guān)甘蔗病害的描述以確定病害種類[8-10]。

1.4 褐斑病防治藥劑篩選

1.4.1 室內(nèi)毒力測(cè)定

1.4.1.1 供試菌株

甘蔗褐斑病菌(CercosporalongipesButler)采取組織分離法[11],在貞豐縣魯貢鎮(zhèn)甘蔗生產(chǎn)試驗(yàn)基地采樣分離獲得,經(jīng)分離純化后保存于PDA斜面培養(yǎng)基中,低溫(4 ℃)保存。

1.4.1.2 培養(yǎng)基

PDA培養(yǎng)基[11]：去皮馬鈴薯200 g、蔗糖20 g、瓊脂20 g、水1 000 mL。

1.4.1.3 供試藥劑

供試藥劑及使用濃度見(jiàn)表1。

表1 供試藥劑及使用濃度

1.4.1.4 含藥PDA培養(yǎng)基配制

按表1配制不同藥劑處理系列濃度的母液,以1∶9的比例與PDA培養(yǎng)基混合均勻即得到系列濃度梯度的含藥培養(yǎng)基。每種藥劑不同濃度處理重復(fù)3次,以添加滅菌水的培養(yǎng)基平板為空白對(duì)照。

1.4.1.5 測(cè)定方法

采用菌絲生長(zhǎng)速率測(cè)定法[12]。在純化后擴(kuò)繁的甘蔗褐斑病菌菌落上用打孔器取直徑5 mm菌餅,接種到含藥培養(yǎng)基和空白對(duì)照培養(yǎng)基平板中央(每皿接種1個(gè)菌餅),分別于28 ℃恒溫箱中培養(yǎng)。3 d后采用十字交叉法分別測(cè)量甘蔗褐斑病菌菌落直徑,計(jì)算不同處理對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制率。

1.4.1.6 數(shù)據(jù)分析

利用Microsoft Excel 2007和DPS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析,以殺菌劑濃度的對(duì)數(shù)值為x,對(duì)應(yīng)的菌絲生長(zhǎng)抑制率的幾率值為y進(jìn)行線性回歸,得出毒力回歸方程、決定系數(shù)(R2)及藥劑對(duì)靶標(biāo)病菌的毒力EC50。

1.4.2 田間藥效試驗(yàn)

1.4.2.1 試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)于2012年7月在貴州省貞豐縣魯貢鄉(xiāng)魯貢村甘蔗種植基地進(jìn)行,試驗(yàn)地位于東經(jīng)105°25′～105°56′,北緯25°07′～25°44′,海拔450 m,年平均氣溫16.6 ℃,年降水量1 376.9 mm,屬典型的喀斯特地貌,低山丘陵。供試甘蔗品種為‘黔糖3號(hào)’,連作時(shí)間長(zhǎng),甘蔗褐斑病發(fā)生嚴(yán)重。

1.4.2.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)設(shè)80%甲基硫菌靈可濕性粉劑1 000倍液、325 g/L苯甲·嘧菌酯懸浮劑1 500倍液、10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑1 500倍液、80%丙森鋅可濕性粉劑800倍液、80%戊唑醇水分散粒劑10 000倍液,清水對(duì)照(CK)共6個(gè)處理。每小區(qū)面積30 m2,重復(fù)3次,采用隨機(jī)區(qū)組排列。于7月14日甘蔗褐斑病零星發(fā)生時(shí)施第1次藥,7月29日施第2次藥,8月13日施第3次藥,均勻施藥于蔗株葉片正反面,以葉面霧滴開(kāi)始下滴為準(zhǔn),試驗(yàn)期間不使用其他藥劑。

1.4.2.3 調(diào)查統(tǒng)計(jì)方法

于8月23日第3次藥后10 d調(diào)查并記錄發(fā)病情況[13]。每小區(qū)隨機(jī)5點(diǎn)取樣,每點(diǎn)取2株,每株調(diào)查10片葉。褐斑病嚴(yán)重度參照文獻(xiàn)[14]的標(biāo)準(zhǔn)分為0～5級(jí)(表2)。

表2 甘蔗褐斑病分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

病葉率(%)=病葉數(shù)/調(diào)查總數(shù)×100;病情指數(shù)=∑(各級(jí)病葉數(shù)×各級(jí)代表值)/(調(diào)查總?cè)~片數(shù)×最高一級(jí)代表值)×100;防效(%)=(對(duì)照病情指數(shù)-處理病情指數(shù))/對(duì)照病情指數(shù)×100。

2 結(jié)果與分析

2.1 貴州甘蔗真菌病害種類及發(fā)生情況

通過(guò)調(diào)查鑒定,貴州甘蔗真菌病害常見(jiàn)的有8種(表3),即褐斑病、褐銹病、赤腐病、黃斑病、輪斑病、褐條病、煤煙病、黑穗病,其中褐斑病、輪斑病、褐條病發(fā)生較重,煤煙病發(fā)生嚴(yán)重。甘蔗褐斑病在貴州各蔗區(qū)均有發(fā)生,‘黔糖3號(hào)’和‘新臺(tái)糖22號(hào)’2個(gè)品種發(fā)生普遍;輪斑病主要發(fā)生在貞豐、望漠、冊(cè)亨蔗區(qū),‘黔糖3號(hào)’和‘粵糖00-236’均有發(fā)病;褐條病在貞豐、望漠、冊(cè)亨、荔波蔗區(qū)發(fā)生較重;黑穗病主要發(fā)生在貞豐魯貢、荔波朝陽(yáng),主要危害‘新臺(tái)糖22號(hào)’,有逐年加重的趨勢(shì),其余病害在貴州甘蔗產(chǎn)區(qū)都有發(fā)生。

2.2 不同藥劑對(duì)褐斑病菌的室內(nèi)毒力

從表4可以看出,甘蔗褐斑病菌對(duì)5種殺菌劑均具有較高的敏感性,其中對(duì)325 g/L苯甲·嘧菌酯懸浮劑的敏感性最高,EC50為0.002 5 mg/L;其次是10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑,EC50為0.017 5 mg/L;對(duì)80%丙森鋅可濕性粉劑的敏感性最低,EC50為0.403 6 mg/L。

2.3 不同藥劑對(duì)甘蔗褐斑病的防效

由表5可知,在甘蔗褐斑病發(fā)生期,325 g/L苯甲·嘧菌酯懸浮劑1 500倍液、80%甲基硫菌靈可濕性粉劑1 000倍液對(duì)甘蔗褐斑病防治效果顯著,第3次藥后10 d防效分別為86.46%、84.86%,且與其他處理差異均達(dá)極顯著水平;10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑1 500倍液、80%丙森鋅可濕性粉劑800倍液防治效果次之,第3次藥后10 d防效分別為81.80%和82.39%,但兩者間差異不顯著;80%戊唑醇水分散粒劑防效最低,第3次藥后10 d防效為75.69%。

表3 貴州甘蔗主要真菌病害及發(fā)生情況

表4 5種殺菌劑對(duì)甘蔗褐斑病菌的毒力

表5 5種藥劑防治甘蔗褐斑病的效果1)

1) 同列數(shù)據(jù)后標(biāo)不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05),不同大寫(xiě)字母表示差異極顯著(P<0.01)。

The different small letters mean significant difference at 5% level, different capital letters indicate extremely significant difference at 1% level.

3 小結(jié)與討論

調(diào)查結(jié)果表明,貴州甘蔗主要真菌病害有褐斑病、褐銹病、赤腐病、黃斑病、輪斑病、褐條病、煤煙病、黑穗病等8種,其中褐斑病、輪斑病、褐條病發(fā)生較重,煤煙病發(fā)生嚴(yán)重。貴州甘蔗單一品種連作現(xiàn)象嚴(yán)重,由于長(zhǎng)期不合理施肥及大面積密植,造成病害逐年加重。甘蔗病害防治應(yīng)加強(qiáng)綜合防治技術(shù)應(yīng)用,甘蔗生產(chǎn)中,科學(xué)應(yīng)用農(nóng)業(yè)、物理、生物防治措施,通過(guò)農(nóng)業(yè)防治措施清除病殘葉,減少病原物,加強(qiáng)肥水管理,增施P、K肥,促進(jìn)甘蔗光合作用,提高蔗株抗病能力,在病害發(fā)生流行時(shí)輔以化學(xué)防治措施,從而達(dá)到有效防控甘蔗病害的目的。

室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果表明,5種殺菌劑對(duì)甘蔗褐斑病病菌菌絲生長(zhǎng)均有不同程度的抑制作用,抑制率隨濃度的增加而增加,且藥劑間抑制率存在明顯差異。其中,苯醚甲環(huán)唑和嘧菌酯復(fù)配具有增效作用,抑制作用最強(qiáng),其次是10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑。

田間藥效試驗(yàn)結(jié)果表明,325 g/L苯甲·嘧菌酯懸浮劑對(duì)甘蔗褐斑病防治效果最好,防效達(dá)86.46%,與室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果一致;其他4種殺菌劑均有較好的防治效果,室內(nèi)毒力測(cè)定10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑毒力高于80%丙森鋅可濕性粉劑,但田間試驗(yàn)前者防效低于后者,可能與農(nóng)藥施用技術(shù)有關(guān)。

化學(xué)藥劑防治是有害生物綜合治理的重要手段,在日益重視食品安全、環(huán)境保護(hù)與可持續(xù)發(fā)展的今天,化學(xué)防治措施應(yīng)做到合理利用,必須選用合適的藥劑及適宜使用濃度,選擇最佳防治時(shí)期才能獲得理想防治效果。從室內(nèi)毒力測(cè)定和田間試驗(yàn)結(jié)果可以看出,325 g/L苯甲·嘧菌酯懸浮劑是防治甘蔗褐斑病的理想藥劑,適宜施用濃度在1 500倍液左右。

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(責(zé)任編輯：王 音)

Preliminary investigation of the fungal diseases on sugarcane in Guizhou and screening of fungicides againstCercosporalongipes

Long Youhua, Liu Yangyang, Wu Xiaomao, Hu Anlong, Zhang Cheng, Wang Wei, Li Rongyu

(College of Agriculture, Guizhou University, Guiyang 550025, China)

In order to make clear the fungal pathogen species on sugarcane and their occurrence regularity, present situation of the fungal diseases on sugarcane was investigated by random survey, site investigation, symptomatic diagnosis and morphological observation in seven counties of Guizhou Province. Virulence of the five fungicides againstCercosporalongipesButler were also determined by mycelium growth rate method and field plot experiment. The results showed that the major pathogens in sugarcane-growing regions of Guizhou wereC.longipes,PucciniamelanocephalaH. Syd. & P. Syd.,ColletotrichumfalcatumWent,Mycovellosiellakoepkei(W.Krüger) Deighton,LeptosphaeriasacchariBreda de Haan,Cochliobolusstenospilus(Drechsler)Mat.W.Yamam,Capnodiumsp.,UstilagoscitamineaSyd. 325 g/L difenoconazole·azoxystrobin SC had the highest inhibition rates againstC.longipesamong the five fungicides, with EC50value of 0.002 5 mg/L, and field control efficacy was 86.46% on the 10th day after the third spraying. Other fungicides also had good control effect againstC.longipes, and could be applied in practice.

Guizhou; sugarcane; fungal disease;Cercosporalongipes; fungicides screening

2014-05-22

2014-07-15

貴州省科技廳農(nóng)業(yè)攻關(guān)項(xiàng)目(黔科合NY字[2011]3024號(hào))

S 435.661

A

10.3969/j.issn.0529-1542.2015.04.037

聯(lián)系方式 E-mail:gzlyh126@126.com