球孢白僵菌對橘小實蠅實驗種群的影響

潘志萍, 翟 欣

(廣東省昆蟲研究所, 廣東省野生動物保護與利用公共實驗室, 廣東省農(nóng)業(yè)害蟲綜合治理重點實驗室，廣州 510260)

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球孢白僵菌對橘小實蠅實驗種群的影響

潘志萍, 翟 欣

(廣東省昆蟲研究所, 廣東省野生動物保護與利用公共實驗室, 廣東省農(nóng)業(yè)害蟲綜合治理重點實驗室，廣州 510260)

研究了球孢白僵菌(Beauveriabassiana)B6菌株對橘小實蠅成蟲(BactroceradorsalisHendel)的影響。結(jié)果表明,在楊桃、番石榴與香蕉3種水果上噴施球孢白僵菌孢子懸浮液,橘小實蠅雌成蟲平均產(chǎn)卵量分別為(188.3±11.4)粒、(156.7±13.1)粒、(165.3±9.1)粒,與對照差異不顯著;孵化的老熟幼蟲數(shù)量分別(156.3±11.5)頭、(130.3±8.3)頭、(147.7±10.6)頭,與對照差異也不顯著;成蟲存活率分別為51.1%、52.2%、62.3%,與對照差異極顯著。干擾作用控制指數(shù)IIPC為0.554 2、0.573 0、0.667 7,對橘小實蠅成蟲控制效果明顯。

橘小實蠅; 球孢白僵菌; 產(chǎn)卵; 控制作用

橘小實蠅(BactroceradorsalisHendel),又名東方果實蠅,屬雙翅目(Diptera),實蠅科(Tetriphitidae),果實蠅屬(BactroceraMacquar),是一種食性廣,世代重疊嚴重,繁殖力強,傳播快,危害大,難防治的危險性檢疫害蟲,給我國的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)尤其是果業(yè)生產(chǎn)帶來了巨大問題,并造成水果外銷困難,極大地影響了我國出口創(chuàng)匯[1-2]。

利用蟲生真菌防治害蟲是目前生物防治研究的一大熱點。球孢白僵菌[Beauveriabassiana(Bals.-Criv.) Vuill.]被認為是最具開發(fā)潛力的一種昆蟲病原真菌,在多種害蟲的防治中取得了顯著的經(jīng)濟、社會和生態(tài)效益[3-5]。為了進一步研究球孢白僵菌對橘小實蠅的控制效果,本研究通過在不同水果上噴施球孢白僵菌,研究其對橘小實蠅成蟲繁殖的影響,以探討球孢白僵菌對橘小實蠅種群的控制能力,為橘小實蠅防控尋找適宜的途徑。

1 材料與方法

1.1 供試蟲源與菌種

從廣東省廣州天河區(qū)楊桃公園采集被橘小實蠅為害的楊桃、番石榴等果實,收集橘小實蠅幼蟲,置于溫度(25±3)℃,相對濕度 75%～90%,光周期L∥D=12 h∥12 h的室內(nèi)養(yǎng)蟲室用人工飼料飼養(yǎng)2代后供試。

球孢白僵菌B6菌株,由中國農(nóng)科院農(nóng)業(yè)環(huán)境與可持續(xù)發(fā)展研究所真菌農(nóng)藥創(chuàng)制實驗室提供,經(jīng)本研究中心用橘小實蠅成蟲與蛹篩選確認對橘小實蠅具有較高的致病力。

冰箱保存的試管斜面菌種,移至新鮮的SDAY斜面培養(yǎng)基上,在25 ℃、L∥D=8 h∥16 h培養(yǎng)箱中培養(yǎng)10～15 d后備用。

新鮮孢子粉的準備：新鮮培養(yǎng)的試管斜面孢子粉接種到廣口瓶斜面SDAY培養(yǎng)基上擴繁,在25 ℃、L∥D=8 h∥16 h培養(yǎng)箱中培養(yǎng)后備用。

試驗材料：將室外采回的河沙過篩、洗凈后晾干,于150 ℃烘箱中消毒2 h,冷卻后調(diào)節(jié)含水量為5%備用。供試水果,從超市中購買,選擇新鮮、個體大小與成熟度一致的水果。

1.2 菌株培養(yǎng)和孢子懸浮液配制

菌種接種于SDAY平板培養(yǎng)基上,(25±1)℃恒溫光照(L∥D=16 h∥8 h)培養(yǎng),用0.1%吐溫-80無菌水將平板上培養(yǎng)10～15 d的B6菌株分生孢子沖洗,收集孢子。經(jīng)磁力攪拌器攪拌15 min,待孢子被打散均勻后,通過4層無菌醫(yī)用紗布過濾,獲得孢子懸浮液,經(jīng)孢子計數(shù)器確定孢子濃度后,按梯度稀釋法配制成濃度1.2×107孢子/mL的孢子懸浮液,用于測定。

1.3 試驗方法

供試羽化的成蟲每30頭(♀∶♂=1∶1)引入一個40 cm×30 cm×30 cm養(yǎng)蟲籠中,放在20～28 ℃室內(nèi)培養(yǎng),喂以適量的酵母與蔗糖混合物(1∶3)補充營養(yǎng)并補充蒸餾水飼養(yǎng),在羽化后20、23、26 d分別選取大小、成熟度一致的楊桃、番石榴與成熟香蕉8個,為了增加橘小實蠅的產(chǎn)卵量,用昆蟲針在水果上均勻刺20個小孔,在水果表面噴施濃度為1.2×107孢子/mL的白僵菌懸浮液。對照用清水噴施。待水果晾干后,噴菌液和清水的水果同時放入同一籠子,放入養(yǎng)蟲籠內(nèi)供成蟲產(chǎn)卵,24 h后取出水果,檢查產(chǎn)卵數(shù)量,觀察記錄成蟲死亡數(shù)量,并從中取出死蟲進行保濕培養(yǎng),以蟲體表面長出菌絲為有效致死,每處理重復3次,觀察20 d。取出已被產(chǎn)卵的水果,放在50 cm×20 cm×30 cm器皿中,底下盛有高20 cm細沙,放置通風透氣的室內(nèi)常溫培養(yǎng),等幼蟲發(fā)育至老熟時將其挑出放入濕潤的細沙中化蛹。記錄從卵到老熟幼蟲的存活率、化蛹率、羽化率情況。

1.4 球孢白僵菌對橘小實蠅成蟲影響的評價方法

采用簡化后的干擾作用控制指數(shù)(interference index of population control,IIPC)作為評價指標。當IIPC<1時,表明球孢白僵菌對橘小實蠅成蟲種群有一定的影響,影響作用的大小可以用IIPC值的大小進行估計,IIPC越小,表明對成蟲影響作用越大;IIPC=1時,表明與對照作用一致;IIPC>1時,表明球孢白僵菌對橘小實蠅種群有促進的作用。其計算方法如式1或式2：

(1)

式1中I為種群趨勢指數(shù),I′為作用因式分解干擾i后的種群趨勢指數(shù)。

(2)

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)用EXCEL統(tǒng)計軟件處理,采用t檢驗進行差異性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 在楊桃上噴施球孢白僵菌對橘小實蠅成蟲的影響

在楊桃上噴施球孢白僵菌孢子懸浮液,與對照比較,成蟲存活率明顯降低,處理組為51.1%±3.8%,而對照成蟲存活率為92.2%±1.9%,在0.05水平上差異極顯著。橘小實蠅成蟲每雌每天平均產(chǎn)卵量為(62.8±3.8)粒,與對照產(chǎn)卵量(65.6±3.1)粒在0.05水平上差異不顯著。同樣,卵孵化率、幼蟲數(shù)量、化蛹率、羽化率與對照在0.05水平上差異不顯著。從干擾控制指數(shù)IIPC來看,IIPC越小對成蟲影響作用越大,因此噴施球孢白僵菌對成蟲存活率影響最明顯,IIPC為0.554 2(見表1)。

2.2 在番石榴上噴施球孢白僵菌對橘小實蠅成蟲的影響

在番石榴上噴施球孢白僵菌孢子懸浮液,處理組成蟲存活率為52.2%±6.9%,對照成蟲存活率為91.1%±1.9%,在0.05水平上差異顯著(見表2)。橘小實蠅成蟲每雌每天平均產(chǎn)卵量為(52.3±4.4)粒,與對照(57.9±3.7)粒在0.05水平上差異不顯著。同樣,卵孵化率、幼蟲數(shù)量、化蛹率、羽化率與對照在0.05水平上差異不顯著。從干擾控制指數(shù)IIPC來看,噴施球孢白僵菌對成蟲存活率作用最明顯,IIPC為0.573 0,其次是對幼蟲存活率的影響,IIPC為0.868 7,對產(chǎn)卵量、化蛹率、羽化率等控制作用不明顯。

表1 在楊桃上噴施球孢白僵菌對橘小實蠅成蟲的影響1)

1) 表中同列相同字母表示經(jīng)t檢驗分析在0.05水平上差異不顯著。下同。

The same letters in the same column indicate no significant difference at 0.05 level byt-test. The same below.

表2 在番石榴上噴施球孢白僵菌對橘小實蠅成蟲的影響

2.3 在香蕉上噴施球孢白僵菌對橘小實蠅成蟲的影響

從表3可知,在香蕉上噴施球孢白僵菌孢子懸浮液,成蟲存活率處理組為62.3%±5.2%,而對照組成蟲存活率為93.3%±3.4%,差異顯著。在其他方面,橘小實蠅成蟲每雌每天平均產(chǎn)卵量、卵孵化率、幼蟲數(shù)量、化蛹率、羽化率與對照差異不顯著。從干擾控制指數(shù)IIPC來看,噴施球孢白僵菌對成蟲存活率作用最明顯,IIPC為0.667 7,對產(chǎn)卵量、卵孵化率、化蛹率、羽化率等控制作用不明顯。

表3 在香蕉上噴施球孢白僵菌對橘小實蠅成蟲的影響

在上述楊桃、番石榴與香蕉3種水果上噴施球孢白僵菌孢子懸浮液,干擾控制指數(shù)分別為0.454 0、0.433 2、0.588 9?？刂菩Ч蠲黠@是在番石榴果實上噴施,其次是在楊桃果實噴施,效果最差是在香蕉噴施。也就是說,果實不同形狀、氣味等性狀在一定程度上影響了噴施球孢白僵菌防治橘小實蠅的效果。

3 結(jié)論與討論

應(yīng)用球孢白僵菌防治具有應(yīng)用方便、保護天敵、不污染環(huán)境等優(yōu)點,是許多害蟲生物防治的重要選擇[7]。橘小實蠅成蟲產(chǎn)卵于果實的表面,幼蟲在寄主果實內(nèi)取食,直到果實腐爛,老熟幼蟲從果內(nèi)爬出,以彈跳方式移動尋找適宜地點化蛹。成蟲期與幼蟲入土化蛹期是施藥和感病的最佳階段。因此,本文針對敏感期,對在不同水果表面噴施球孢白僵菌對橘小實蠅成蟲控制作用進行評價,以期為應(yīng)用防治提供依據(jù)。

研究結(jié)果表明,在不同水果上噴施球孢白僵菌,對直接接觸到藥劑的成蟲影響比較大,成蟲死亡率與對照相比均差異顯著,控制作用明顯。但對其產(chǎn)生的后代影響較小,如對產(chǎn)卵量、卵孵化率、化蛹率及羽化率影響均不明顯。也就是說,球孢白僵菌對橘小實蠅成蟲控制效果明顯,成蟲可在交配、產(chǎn)卵過程中感染球孢白僵菌,發(fā)病,導致死亡率上升。因此,在橘小實蠅成蟲羽化高峰期噴施球孢白僵菌,可有效控制橘小實蠅種群數(shù)量。這與Rosa等[8]的結(jié)果一致,即白僵菌對墨西哥實蠅(AnastrephaludensLoew)幼蟲的致死率較低,而對成蟲致死率很高,與章玉蘋等[9]、潘志萍等[10-11]利用球孢白僵菌劑防治橘小實蠅所用方法及所取得的防效較為一致。

廣東省春季溫度較高、降水較多,是多種作物的生長季節(jié)和害蟲的盛發(fā)季節(jié),也正是最適合使用球孢白僵菌控制這些害蟲的季節(jié)。由此,在防治過程中,在分生孢子不易失活的情況下,在果樹葉面噴施白僵菌孢子懸浮液,可有效降低橘小實蠅成蟲種群數(shù)量,減輕橘小實蠅的為害。果園的小氣候相對較穩(wěn)定,噴施的球孢白僵菌較容易定殖,不易散失,通過人為因素改善果園的環(huán)境條件,可以創(chuàng)造一個有利于球孢白僵菌流行的小環(huán)境,提高球孢白僵菌持續(xù)防治效果。

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(責任編輯：田 喆)

Effects ofBeauveriabassianaon experimental populations ofBactroceradorsalis

Pan Zhiping, Zhai Xin

(Guangdong Provincial Institute of Entomology, Guangdong Public Laboratory of Wild Animal Conservation and Utilization, Guangdong Key Laboratory of Integrated Pest Management in Agriculture, Guangzhou 510260, China)

The effects ofBeauveriabassianastrain on the adults ofBactroceradorsaliswere studied. The results showed that, by spraying carambola, guava and banana withB.bassianaspore suspension,B.dorsalisfemale adults laid 188.3±11.4, 156.7±13.1, and 165.3±9.1 eggs on average, respectively, not significantly different from the control. The numbers of hatched larvae were 156.3±11.5, 130.3±8.3, and 147.7±10.6, respectively, not significantly different from the control; adult survival rates were 51.1%, 52.2%, and 62.3%, respectively, significantly different from the control. The interference index of population control (IIPC) was 0.554 2, 0.573 0, and 0.667 7, respectively. It indicated thatB.bassianastrain could effectively controlB.dorsalisadults.

Bactroceradorsalis;Beauveriabassiana; oviposition; control

2014-04-10

2014-07-16

公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(200903047)

S 476.12

A

10.3969/j.issn.0529-1542.2015.03.012

聯(lián)系方式 E-mail: zhipingpan@126.com