云南通海小菜蛾種群抗藥性監(jiān)測及田間藥效評價

尹艷瓊, 沐衛(wèi)東, 李向永, 趙雪晴,黃春芬, 艾 英, 諶愛東*

(1. 云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)環(huán)境資源研究所, 昆明 650205;2. 云南省通海縣植保植檢站, 通海 652700)

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云南通海小菜蛾種群抗藥性監(jiān)測及田間藥效評價

尹艷瓊1#, 沐衛(wèi)東2#, 李向永1, 趙雪晴1,黃春芬2, 艾 英2, 諶愛東1*

(1. 云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)環(huán)境資源研究所, 昆明 650205;2. 云南省通海縣植保植檢站, 通海 652700)

為掌握云南蔬菜主產(chǎn)區(qū)通?？h小菜蛾種群對常用殺蟲劑的敏感性及其田間防治效果,采用浸葉法和田間小區(qū)試驗(yàn)對常用殺蟲劑進(jìn)行室內(nèi)毒力測定和田間藥效試驗(yàn)。結(jié)果表明：通?？h小菜蛾種群對丁醚脲和Bt的敏感性最高,仍處于敏感水平,對茚蟲威屬低抗水平,對蟲螨腈和多殺菌素的抗性倍數(shù)分別為24.28和31.68倍,屬中抗水平,對氯蟲苯甲酰胺抗性倍數(shù)為44.62倍,到高抗水平,對阿維菌素的敏感性最差,抗性倍數(shù)829.90倍,達(dá)極高抗水平?？剐运胶吞镩g藥效呈一定相關(guān)性,氯蟲苯甲酰胺和阿維菌素藥后7 d對小菜蛾的防治效果均低于50%,茚蟲威、多殺菌素和丁醚脲的田間防效較好。通海縣小菜蛾可選擇的防治藥劑包括茚蟲威、多殺菌素和丁醚脲,注意不同藥劑之間的輪換和交替使用。

小菜蛾; 敏感性; 抗藥性; 防治效果

小菜蛾[Plutellaxylostella(L.)] 屬鱗翅目(Lepidoptera),菜蛾科(Plutellidae),主要為害十字花科蔬菜,如甘藍(lán)、花椰菜、青花菜、小白菜、芥菜等,寄主種類達(dá)40 多種,是世界性十字花科蔬菜的重要害蟲, 在全國各地均有分布。小菜蛾抗藥性發(fā)展速度快、抗藥譜廣,抗性水平高, 治理難度為國內(nèi)外所公認(rèn)[1], 現(xiàn)已成為抗藥性最嚴(yán)重的和最難防治的害蟲之一[2]。在云南省由于“冬無嚴(yán)寒,夏無酷暑、干濕季分明、蔬菜四季種植”的特殊氣候條件,使小菜蛾周年發(fā)生且種群數(shù)量大,繁殖快[3-4],導(dǎo)致其對藥劑的抗性水平越來越高,云南通海和彌渡菜區(qū)的小菜蛾抗性水平極高,居全國抗藥性之首,已對90% 以上的小菜蛾防治藥劑產(chǎn)生了抗藥性[5]。使用殺蟲劑是目前防治小菜蛾的關(guān)鍵技術(shù)措施之一,為了科學(xué)合理地使用殺蟲劑,需對田間常用藥劑進(jìn)行抗性測定和田間藥效試驗(yàn),制定科學(xué)的用藥策略指導(dǎo)生產(chǎn),減少盲目使用殺蟲劑,從而延長藥劑的使用年限。

1 材料與方法

1.1 供試蟲源地基本情況

通海縣位于云南中部,東經(jīng)102°30′,北緯23°65′,海拔1 820 m,氣候溫和,年溫差小而晝夜溫差相對較大,年平均氣溫16.6 ℃,適宜十字花科蔬菜的周年種植,全年白菜、甘藍(lán)、蘿卜、花椰菜等為主的十字花科蔬菜種植面積在8 000 hm2左右,當(dāng)?shù)卦耘嗨礁?用藥量大,小菜蛾周年發(fā)生。

1.2 供試藥劑

抗藥性監(jiān)測的7種殺蟲劑為：1.68%阿維菌素(abamectin)乳油、20.18%丁醚脲(diafenthiuron)乳油、9.17%蟲螨腈(chlorfenapyr)乳油、4.86%茚蟲威(indoxacarb)乳油、3%Bt(Bacillusthuringiensis)可濕性粉劑、2.5%多殺菌素(spinosad)懸浮劑、5.22%氯蟲苯甲酰胺(chlorantraniliprole)乳油。藥劑由廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所用原藥配制而成,并分析檢測其有效含量。

田間藥效試驗(yàn)的7種藥劑(其中氯蟲苯甲酰胺有2個劑型),濃度設(shè)定按廠家推薦劑量的上限：1.5%阿維菌素乳油 (河北威遠(yuǎn)生物化工股份有限公司)1 000倍液、50%丁醚脲乳油 (江蘇常隆化工有限公司)500倍液、20%蟲螨腈懸浮劑(德國巴斯夫公司)1 000倍液、15%茚蟲威懸浮劑(美國杜邦公司)3 000倍液、Bt 32000IU/mg(武漢科諾生物農(nóng)藥有限公司)750倍液、2.5%多殺菌素懸浮劑(美國陶氏益農(nóng)公司)750倍液、20%氯蟲苯甲酰胺水分散粒劑(日本株式會社)3 000倍液、20%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑(美國杜邦公司)3 000倍液。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 生物測定方法

試蟲飼養(yǎng)：采集的小菜蛾蛹放入4 ℃的冰箱保存,高齡幼蟲在人工氣候室內(nèi)[溫度(25±1)℃,RH 65%～70%, L∥D=16 h∥8 h]用寄主植物飼養(yǎng)到蛹,收集蛹。全部蛹收集完后放到產(chǎn)卵箱(45 cm×45 cm×45 cm),在養(yǎng)蟲室[溫度(25±1)℃,RH 70%～75%, L∥D=16 h∥8 h]中羽化,成蟲用15%的蜂蜜水飼養(yǎng)以補(bǔ)充營養(yǎng)。待50%以上的成蟲羽化后,將用甘藍(lán)汁液浸泡的鋁箔片,晾干后吊掛于養(yǎng)蟲籠內(nèi)壁四周,每24 h更換1次產(chǎn)卵箔,收集的卵在4 ℃冰箱保存。產(chǎn)卵7 d后把卵箔取出放在培育好的蘿卜苗[6]上飼養(yǎng),取F1代3齡初期幼蟲進(jìn)行測試。

測定方法(浸葉法)[7]：用含0.05% Triton X-100的蒸餾水稀釋藥液,按等比級數(shù)稀釋法,順次配制成5個系列濃度,每濃度藥液量200 mL。用潔凈的甘藍(lán)(Brassicaoleracea)葉,剪成直徑6.5 cm的圓片(避免主葉脈)。將葉片在不同濃度的溶液中浸泡10 s后取出晾干,放在直徑6.5 cm的培養(yǎng)皿中,接入10頭3齡初期幼蟲,重復(fù)4次,用0.05% Triton X-100水溶液浸漬的葉片作為對照,覆蓋雙層吸水卷紙,最后蓋上培養(yǎng)皿上蓋。將其正面向上置于(RXZ-380B型)培養(yǎng)箱中[溫度(25±1)℃,RH 65%～70%, L∥D=16 h∥8 h]。除Bt藥后96 h調(diào)查外,其余藥劑48 h后調(diào)查,以小毛筆輕觸蟲體,不能協(xié)調(diào)運(yùn)動視為死亡,記錄最終試蟲數(shù)和死蟲數(shù)。

1.3.2 田間藥效試驗(yàn)

試驗(yàn)地點(diǎn)：云南省通?？h秀山鎮(zhèn)黃龍村五組。

試驗(yàn)作物：花椰菜,移栽成活期。

試驗(yàn)方法：采用隨機(jī)區(qū)組排列,3次重復(fù),小區(qū)面積10 m2,施藥前蟲量調(diào)查,每小區(qū)蟲量高于30頭,3齡前幼蟲占80%以上,按5點(diǎn)取樣法每點(diǎn)計數(shù)12株進(jìn)行標(biāo)記,傍晚17:00,用自動噴霧器(新峰牌15 L)進(jìn)行噴霧。噴施清水作對照。施藥前一天調(diào)查藥前基數(shù),藥后4、7和14 d各調(diào)查1次標(biāo)記植株上小菜蛾的幼蟲數(shù)。

1.4 計算方法

抗藥性倍數(shù)計算：測定結(jié)果用POLO軟件計算毒力回歸方程的斜率,LC50值及其95%置信限,并與室內(nèi)敏感品系的LC50相比較,計算出抗性倍數(shù)?？剐员稊?shù)=田間種群的LC50/敏感種群的LC50。小菜蛾敏感毒力基線參照十字花科小菜蛾抗藥性監(jiān)測技術(shù)規(guī)程[8]。

抗性分級標(biāo)準(zhǔn)[9]：抗性倍數(shù)RR≤5.0為無抗性,抗性倍數(shù)5.0160.0極高水平抗性。

藥效計算方法[10]：

蟲口減退率(%)=(藥前蟲口基數(shù)-藥后蟲口基數(shù))/藥前蟲口基數(shù)×100;

校正防效(%)=(防治區(qū)蟲口減退率-空白對照區(qū)蟲口減退率)/(100-空白對照區(qū)蟲口減退率)×100;

方差分析采用SPSS軟件,鄧肯氏新復(fù)極差(DMRT)法對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行差異顯著性分析(P<0.05)。

2 結(jié)果與分析

2.1 室內(nèi)毒力測定結(jié)果

室內(nèi)毒力測定結(jié)果表明,云南滇中通海菜區(qū)小菜蛾田間種群對丁醚脲和Bt的敏感性最高,LC50分別為60.53 mg/L和1.05 mg/L,處于敏感水平;對茚蟲威的敏感性下降,抗性倍數(shù)9.22倍;對蟲螨腈、多殺菌素的抗藥性達(dá)中抗水平,抗性倍數(shù)24.28、31.68倍;對氯蟲苯甲酰胺達(dá)到高抗水平,LC50為10.08 mg/L,抗性倍數(shù)為44.62倍;敏感性最差的是阿維菌素,LC50為16.60 mg/L,抗性倍數(shù)829.90倍。通海菜區(qū)小菜蛾田間種群對7種常用藥劑的敏感性依次為：丁醚脲>Bt>茚蟲威>蟲螨腈>多殺菌素>氯蟲苯甲酰胺>阿維菌素。

表1 幾種常用殺蟲劑對通海小菜蛾種群室內(nèi)毒力測定結(jié)果(2012年)

2.2 田間藥效評價

20%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑3 000倍液、20%氯蟲苯甲酰胺水分散粒劑3 000倍液和1.5%阿維菌素乳油1 000倍液藥后4、7 d防治效果均低于50%,防效較差;15%茚蟲威懸浮劑3 000倍液、2.5%多殺菌素懸浮劑750倍液、50%丁醚脲乳油500倍液的效果較好,蟲口減退率均高于80%,20%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑、20%氯蟲苯甲酰胺水分散粒劑與這3種藥劑的田間防效差異顯著,與1.5%阿維菌素乳油沒有顯著性差異,藥后7 d,除了15%茚蟲威懸浮劑、50%丁醚脲乳油和20%蟲螨腈懸浮劑的效果有所上升之外,其他藥劑的防效呈下降趨勢,20%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑的防效藥后7 d與對照間在0.05水平無顯著性差異,已失去了防效。藥后14 d,50%丁醚脲乳油的田間防效為84.7%,表現(xiàn)出較好的持效性。8種常用藥劑對通海菜區(qū)小菜蛾田間種群的防治效果總體表現(xiàn)為：丁醚脲>茚蟲威>多殺菌素>Bt>蟲螨腈>氯蟲苯甲酰胺水分散粒劑>阿維菌素>氯蟲苯甲酰胺懸浮劑。

通海小菜蛾對7種常用殺蟲劑的抗性水平與藥后7 d的田間防效有一定的相關(guān)性,除Bt外,抗藥性水平處于無抗和低抗的丁醚脲、茚蟲威的田間防效最高,抗藥性水平為中抗的多殺菌素、蟲螨腈的田間防效也相對較高,抗藥性水平為高抗和極高抗的氯蟲苯甲酰胺、阿維菌素田間防效最差,按廠家推薦的劑量使用已基本無效。

表2 不同藥劑對小菜蛾田間防治效果(2012,通?？h)1)

1) 表中同列數(shù)據(jù)后小寫英文字母不同者表示在0.05水平差異顯著。

Data followed by different letters in the same column are significantly different at 0.05 level.

3 討論

通?？h小菜蛾對目前常用殺蟲劑的抗性水平在不斷上升,除丁醚脲、Bt和茚蟲威在低抗水平外,其他測定的藥劑均在中抗以上,阿維菌素達(dá)到了極高抗水平,敏感性與田間防治效果總體一致。通?？h1995年開始使用阿維菌素類殺蟲劑, 2001年抗藥性為46.1倍[11],到了2008年就上升到1 034.5～ 40 624.5 倍,達(dá)到極高抗水平[12],2009年后隨著氯蟲苯甲酰胺等新型藥劑的使用,對阿維菌素抗藥性有所下降,本研究監(jiān)測到抗性倍數(shù)達(dá)829.90倍,但仍處于極高抗水平,田間防效在推薦濃度下也不理想。對氯蟲苯甲酰胺的抗藥性達(dá)到了高抗水平,藥后7 d藥效與清水對照無顯著性差異。15%茚蟲威懸浮劑和2.5%多殺菌素懸浮劑對小菜蛾的田間防治效果藥后7 d達(dá)85.9%和73.1%,藥后14 d仍在55.8%和64.9%,室內(nèi)毒力測定的結(jié)果也較敏感,處于低中抗水平;丁醚脲對云南通海菜區(qū)小菜蛾敏感性最高,田間防治效果較好,且持效期長。敏感性與田間防效的一致性說明抗藥性的室內(nèi)毒力測定結(jié)果對指導(dǎo)田間用藥具有實(shí)際意義。

室內(nèi)毒力測定的結(jié)果與田間防效總體一致,但不是完全吻合的正相關(guān)性,如Bt和蟲螨腈,抗藥性低于多殺菌素,而田間防效沒有多殺菌素高,所以在用藥建議中除依靠抗藥性監(jiān)測的結(jié)果外,還要考慮藥劑的劑型、作用機(jī)制和施藥方式,才能達(dá)到提高田間防效、降低抗藥性的理想效果。根據(jù)本研究的結(jié)果針對不同的藥劑對通海菜區(qū)提出如下用藥建議：氯蟲苯甲酰胺抗藥性增加,田間防效也明顯降低,該藥與現(xiàn)有的藥劑無交互抗性[13],建議減少該藥劑的使用,僅用于小菜蛾發(fā)生前或發(fā)生初期或作為抗性治理的輪換藥劑;多殺菌素是一種較新的生物農(nóng)藥,低毒、高效、廣譜,殺蟲效果受下雨影響較小,小菜蛾對多殺菌素產(chǎn)生抗性的速度較慢,該藥與阿維菌素、氟蟲腈、殺蟲單沒有交互抗性[14],可作為常規(guī)用藥;茚蟲威使用時應(yīng)注意用藥的次數(shù),盡量不連續(xù)施用;蟲螨腈處于中抗水平,對高齡幼蟲的防效較差,建議在卵孵化高峰、低齡幼蟲發(fā)育初期噴霧能起到良好的防治效果;丁醚脲對小菜蛾的活性高,可用于防治已對有機(jī)磷和擬除蟲菊酯類藥劑產(chǎn)生抗性的害蟲[15],也可作為通海縣防治小菜蛾常規(guī)用藥;Bt室內(nèi)毒力測定處于敏感水平,但在使用過程中Bt存在防效不穩(wěn)定、殘效期短、殺蟲速度慢等問題應(yīng)要注意施藥條件,盡量在傍晚施藥,增加濕展劑以保證Bt在作物上均勻分布, 同時應(yīng)用菌液霧化良好的藥械和適宜的噴霧量[16],也可利用增效劑[17-18]提高菌劑的田間防效。

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(責(zé)任編輯：王 音)

Resistance monitoring of diamondback moth and field control efficacy of pesticides against the pest in Tonghai, Yunnan Province

Yin Yanqiong1, Mu Weidong2, Li Xiangyong1, Zhao Xueqing1, Huang Chunfen2, Ai Ying2, Chen Aidong1

(1.Institute of Agricultural Environment and Resources, Yunnan Academy of Agricultural Sciences, Kunming 650205, China; 2. Tonghai County Plant Protection and Quarantine Station, Yunnan 652700, China)

To understand the current status of insecticide resistance in diamondback moth (DBM),Plutellaxylostella(L.) and the control efficacy of some common insecticides to DBM in Tonghai County, Yunnan Province, the indoor leaf-dipping bioassay and field trial were conducted, respectively. The results showed that the susceptibility of the Tonghai DBM to diafenthiuron and Bt were the highest, and exhibited sensitive levels. The resistance level was low to indoxacarb. The resistance ratios to chlorfenapyr and spinosad were 24.28 and 31.68 fold, respectively, which showed a middle resistance level. As to chlorantraniliprole, the resistance ratio was 44.62 fold with a high resistance level. The susceptibility to abamectin was the lowest and the resistance ratio was high to 829.90-fold. There was some correlation between the resistance ratio and the field control efficacy. The control efficacy of chlorantraniliprole and abamectin to the DBM was below 50% seven days after treatment. Indoxacarb, spinosad and diafenthiuron provided good control efficacy to the DBM, which can be selected for the DBM control in Tonghai with rational rotation and alternative using strategy.

Plutellaxylostella; susceptibility; insecticide resistance; control effects

2014-04-10

2014-07-29

公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(200803001，201103021)

S 481.4

B

10.3969/j.issn.0529-1542.2015.03.041

*通信作者 E-mail:shenad68@163.com

#共同第一作者