抗丙肝新藥Dasabuvir

劉恕，張曼，唐小枚，蔣智

（藥渡經(jīng)緯信息科技（北京）有限公司，北京100085）

抗丙肝新藥Dasabuvir

劉恕，張曼，唐小枚，蔣智

（藥渡經(jīng)緯信息科技（北京）有限公司，北京100085）

編者按：丙型肝炎是由丙肝病毒（HCV）感染引起的急慢性傳染病。HCV是單鏈RNA病毒，存在于人體的血液和體液中，主要通過(guò)血液和母嬰傳播。丙型肝炎患者占病毒性肝炎總數(shù)的3%，而在中國(guó)這一比率高達(dá)16%。全球感染HCV患者超過(guò)1億，每年有超過(guò)300萬(wàn)的新增患者，其中80%以上發(fā)展為慢性肝炎，并可能發(fā)展為肝癌、肝硬化最終導(dǎo)致死亡。自2013年吉利德的Sovaldi（sofosbuvir）上市，丙肝的治愈率得到極大的提升，吉利德也由此開(kāi)始領(lǐng)跑全球丙肝市場(chǎng)。然而Sovaldi的高昂定價(jià)，一開(kāi)始就使吉利德處于輿論的風(fēng)口浪尖。除了定價(jià)之外，吉利德的Sovaldi還面臨專利被拒和后續(xù)產(chǎn)品競(jìng)爭(zhēng)的問(wèn)題，同時(shí)近期還被曝出或可導(dǎo)致心率降低。自Sovaldi上市以來(lái)，強(qiáng)生、百時(shí)美施貴寶和艾伯維（AbbVie）都相繼推出了新的丙肝治療藥物和治療組合，同時(shí)默沙東也在積極開(kāi)發(fā)新藥，以期重新在丙肝市場(chǎng)占據(jù)一席之地。其中，艾伯維曾于2014年末公布了其丙肝復(fù)方藥物積極的臨床數(shù)據(jù)，宣稱其藥物對(duì)復(fù)發(fā)或難治患者表現(xiàn)出極佳的療效，顯然已準(zhǔn)備好與吉利德展開(kāi)直接的競(jìng)爭(zhēng)，以撼動(dòng)其獨(dú)占鰲頭的局面。2015年1月，該復(fù)方藥的成分之一dasabuvir已作為單藥獲得歐洲藥品管理局批準(zhǔn)?！端帉W(xué)進(jìn)展》本期將重點(diǎn)對(duì)這一藥物進(jìn)行介紹。

Dasabuvir是2015年1月15日以單藥成份獲得歐洲藥品管理局批準(zhǔn)的抗丙肝新藥，該藥于2014年12月19日以復(fù)方藥形式（dasabuvir/ombitasvir/paritaprevir/ritonavir）獲得美國(guó)食品藥品管理局批準(zhǔn)用于治療基因1型慢性丙肝病毒感染，包括有代償性肝硬化患者的治療。Dasabuvir是一種HCV RNA聚合酶NS5B抑制劑，干擾HCV的正常復(fù)制而發(fā)揮抗病毒作用。介紹dasabuvir的化學(xué)合成、臨床前藥理學(xué)研究、臨床研究及專利保護(hù)情況等，為抗丙肝新藥的研發(fā)提供參考。

dasabuvir；NS5B聚合酶抑制劑；丙型肝炎

Dasabuvir（商品名為Exviera，1）于2015年1月15日被歐洲藥品管理局（EMA）作為單藥批準(zhǔn)，用于與ViekiraxTM（ombitasvir/paritaprevir/ritonavir）聯(lián)用治療基因1型（GT 1）慢性丙型肝炎病毒（HCV）［1］。該藥是由美國(guó)艾伯維制藥公司（AbbVie）研發(fā)的HCV RNA聚合酶NS5B抑制劑，是2014年12月19日美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）批準(zhǔn)的復(fù)方藥商品名為Viekira PakTM（ViekiraxTM+ ExvieraTM）的一個(gè)組分，這種復(fù)方給藥方案是一種全口服的無(wú)干擾素的丙肝雞尾酒療法，可單用或與利巴韋林（RBV）聯(lián)用［1-2］。

1

Dasabuvir的英文名為N-｛6-［5-（2，4-Dioxo-3，4-dihydro-1（2H）-pyrimidinyl）-2-methoxy-3-（2-methyl-2-propanyl）phenyl］-2-naphthyl｝methanesulfonamide；分子式為C26H26N3O5S；CAS登記號(hào)為1132935-63-7。

Dasabuvir為片劑（250 mg），推薦劑量為每日2片，早晚各1片，早上與2片ViekiraxTM（ombitasvir/ paritaprevir/ritonavir，12.5/75/50 mg）同時(shí)服用，晚上單獨(dú)服用，但不建議有失代償肝病患者使用。

1 合成方法［3］

1.1 方法1

市售的2-叔丁基苯酚（2）經(jīng)硝化反應(yīng)、三溴化吡啶鎓酸性條件下的苯環(huán)溴化反應(yīng)，兩步以35.6%的收率得到中間體4，隨后中間體4與三甲基硅基重氮甲烷（TMSCHN2）反應(yīng)以92%的收率得到含甲醚的中間體5。鈀碳催化條件下，氫氣還原硝基成氨基后，叔丁氧羰基保護(hù)氨基，隨后與8發(fā)生Suzuki反應(yīng)，三步以43%的收率得到中間體9。三氟乙酸脫除中間體9氮原子上的叔丁氧羰基后得到關(guān)鍵中間體10。然后與異氰酸酯11反應(yīng)生成取代脲后，再于10%硫酸溶液中、高溫條件下發(fā)生環(huán)合反應(yīng)，最終以7.4%的總收率，經(jīng)最長(zhǎng)線性步驟9步生成dasabuvir。

其中，中間體8可由市售化合物13經(jīng)堿性水解、Curtius重排（定量收率）后得到萘胺中間體15。再與甲磺酰氯縮合，最后與雙鏈硼酸酯17反應(yīng)得到中間體8（見(jiàn)圖1）。

圖1 Dasabuvir的合成方法1Figure 1 Dasabuvir synthesis： route 1

1.2 方法2

市售2-叔丁基苯酚（2）與碘化鈉、次氯酸鈉反應(yīng)，以93%的收率得到含有二取代碘的中間體18，隨后與碘甲烷反應(yīng)，以99%的收率得到中間體19。然后在碘化亞銅催化下與尿嘧啶20經(jīng)Ullmann反應(yīng)以70%的收率得到關(guān)鍵中間體21，隨后在Pd2（dba）3催化下與硼酸酯8發(fā)生Sukuzi反應(yīng)，最終以54.1%的總收率經(jīng)4步反應(yīng)得到dasabuvir（見(jiàn)圖2）。

圖2 Dasabuvir的合成方法2Figure 2 Dasabuvir synthesis： route 2

1.3 方法3

市售2-叔丁基苯酚（2）經(jīng)硝化反應(yīng)，以35.6%的收率得到含硝基的中間體3，隨后與氯化碘發(fā)生親電取代反應(yīng)，以96%的收率得到中間體22。中間體22與三甲基硅基重氮甲烷反應(yīng)，以84%的收率得到中間體23。鐵粉、氯化銨加熱條件下還原中間體23的硝基，以定量收率得到含苯胺的中間體24，隨后與異氰酸酯25反應(yīng)，以57%的收率生成取代脲26，再經(jīng)10%硫酸溶液、高溫條件下環(huán)合，以90%的收率生成含尿嘧啶的中間體27。最后，中間體27與硼酸酯8在Pd（dppf）Cl2催化下發(fā)生Suzuki反應(yīng)，最終以3.7%的總收率經(jīng)7步反應(yīng)得到dasabuvir（見(jiàn)圖3）。

2 臨床前藥理學(xué)研究

NS5B蛋白基因編碼HCV復(fù)制所必需的RNA依賴的RNA聚合酶（RdRp），它作為核心酶在HCV的復(fù)制過(guò)程中起到關(guān)鍵作用。Dasabuvir是一種非核苷類NS5B聚合酶抑制劑（見(jiàn)圖4），與NS5A蛋白酶抑制劑ombitasvir以及NS3/4A蛋白酶抑制劑paritaprevir以多靶點(diǎn)共同阻止HCV的復(fù)制，發(fā)揮直接抗病毒作用，而ritonavir作為細(xì)胞色素P450 3A4抑制劑，本身無(wú)抗HCV活性，但能提高partitaprevir的血藥濃度［4-6］。Dasabuvir的體外藥效學(xué)、體內(nèi)和體外藥物代謝參數(shù)、藥物相互作用及安全性評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)見(jiàn)表1［1-2］。

圖3 Dasabuvir的合成方法3Figure 3 Dasabuvir synthesis： route 3

表1 Dasabuvir臨床前藥理學(xué)數(shù)據(jù)Table 1 Preclinical pharmacology of dasabuvir

續(xù)表1

圖4 Dasabuvir的作用機(jī)制Figure 4 Acting mechanism of dasabuvir

3 臨床研究

Dasabuvir的批準(zhǔn)是基于復(fù)方藥Viekira PakTM的6項(xiàng)隨機(jī)、多中心的Ⅲ期臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)。共招募了2 308例基因1型慢性丙肝患者，分別為未經(jīng)治療的或曾經(jīng)接受聚乙二醇干擾素和利巴韋林（RBV）治療后復(fù)發(fā)或有部分病毒學(xué)應(yīng)答及無(wú)應(yīng)答的患者。給藥方案為每天服用1次ombitasvir/paritaprevir/ritonavir（12.5/75/50 mg），2次dasabuvir（250 mg）或加服RBV，治療周期為12或24周。主要終點(diǎn)指標(biāo)是治療結(jié)束后病毒學(xué)持續(xù)應(yīng)答SVR12（FDA定義為治療結(jié)束12周之后的丙型肝炎病毒達(dá)到不可測(cè)的水平）。這6項(xiàng)Ⅲ期臨床試驗(yàn)的關(guān)鍵數(shù)據(jù)見(jiàn)表2［1］。

服用Viekira Pak和利巴韋林的患者中，最常見(jiàn)的不良反應(yīng)（10%）為疲勞、惡心、皮膚瘙癢、失眠和神經(jīng)衰弱。而在不加服利巴韋林的患者中，最常見(jiàn)的不良反應(yīng)（≥5%）為惡心、皮膚瘙癢和失眠。

表2 關(guān)鍵臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)Table 2 Clinical data of dasabuvir

續(xù)表2

4 專利布局

4.1 Exviera?化合物專利的全球布局

Exviera?的化合物專利是由雅培（Abbott）公司以PCT申請(qǐng)（公開(kāi)號(hào)WO2009039134A1）公開(kāi)，并陸續(xù)在日本、歐洲、美國(guó)及中國(guó)獲得授權(quán)，現(xiàn)專利權(quán)已轉(zhuǎn)移給AbbVie公司（見(jiàn)表3）。

表3 Exviera?化合物專利的全球布局Table 3 Worldwide patent portfolio of active ingredient in Exviera?

4.2 Exviera?外圍專利的全球布局

在研發(fā)過(guò)程中，雅培/AbbVie公司主要針對(duì)其核心及關(guān)鍵專利進(jìn)行保護(hù)，公開(kāi)號(hào)WO2009039134的專利中涉及了結(jié)構(gòu)通式、晶型、鹽類、制備方法和聯(lián)合用藥等內(nèi)容；后又申請(qǐng)了制備方法、中間體及聯(lián)合用藥的專利，其中主要保護(hù)和利巴韋林的藥物聯(lián)用（見(jiàn)表4）。

表4 Exviera?外圍專利的全球布局Table 4 Worldwide peripheral patent portfolio of Exviera?

4.3 Exviera?在中國(guó)的專利申請(qǐng)情況

Exviera?的化合物專利在中國(guó)已獲得授權(quán)（授權(quán)公開(kāi)號(hào)CN101801935B），以結(jié)構(gòu)通式形式進(jìn)行保護(hù)，此篇專利還涉及適應(yīng)證和聯(lián)合用藥。其晶型、制備方法、中間體和聯(lián)合用藥的專利都處于實(shí)審狀態(tài)，專利權(quán)現(xiàn)均為AbbVie公司所有（見(jiàn)表5）。

表5 Exviera?在中國(guó)的專利保護(hù)情況Table 5 Patent protection of Exviera?in China

目前，吉利德的NS5B聚合酶抑制劑sofosbuvir在抗丙肝藥物市場(chǎng)上占領(lǐng)絕對(duì)地位，其高昂的價(jià)格，在一片爭(zhēng)議中扶搖直上，成為抗丙肝藥物的重磅炸彈。AbbVie丙肝藥物的上市，打開(kāi)了抗丙肝藥物市場(chǎng)的新局面，他們正在加緊布局丙肝藥物市場(chǎng)，從復(fù)方藥物搶先上市到單品隨后補(bǔ)位，同時(shí)化合物專利在藥品主流國(guó)家都獲得授權(quán)，并有復(fù)方及適應(yīng)證等外圍專利，吉利德同樣布局了sofosbuvir的化合物專利及復(fù)方，但是其化合物專利被中國(guó)專利局駁回（待復(fù)審）。

5 Dasabuvir同靶點(diǎn)藥物

Dasabuvir是繼Sofosbuvir上市后的第2個(gè)NS5B聚合酶抑制劑。目前還有多個(gè)NS5B聚合酶抑制劑處于不同的研發(fā)階段（見(jiàn)表6）。其中，1個(gè)藥物處于Ⅲ期臨床，17個(gè)藥物處于Ⅱ期臨床，5個(gè)藥物處于Ⅰ期臨床。由此可見(jiàn)，丙型肝炎藥物市場(chǎng)的競(jìng)爭(zhēng)將會(huì)越來(lái)越激烈。

表6 處于不同研發(fā)階段的NS5B聚合酶抑制劑Table 6 NS5B polymerase inhibitors in various development stages

續(xù)表6

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6 結(jié)語(yǔ)

近年來(lái)，以NS5B聚合酶為靶點(diǎn)的抗HCV藥物頗受關(guān)注。Dasabuvir是繼sofosbuvir后的另一種新型非核苷類NS5B聚合酶抑制劑，與其他直接作用于病毒的藥物聯(lián)用治療基因Ⅰ型慢性丙型肝炎病毒感染。這種無(wú)干擾素的聯(lián)合用藥方案在治療HCV感染上的持續(xù)病毒應(yīng)答率達(dá)到90%以上，可單用或與利巴韋林聯(lián)用，這也給丙肝患者的完全治愈帶來(lái)了新的希望。

［1］AbbVie Inc.ExvieraTM： EMA human medicineinformation ［EB/OL］.（2015-02-12） ［2015-09-03］. http：//www.ema.europa.eu.

［2］AbbVie Inc. Viekira PakTM： US prescribing information ［EB/OL］. （2014-12-19） ［2015-8-27］. http：//www.accessdata.fda.gov.

［3］Flentge C A， Hutchinson D K， Betebenner D A， et al. Anti-infective pyrimidines and uses thereof： WO， 2009039134A1 ［P］. 2009-03-26.

［4］Pilot-Matias T， Koev G， Krishnan P，et al. In vitro combinatory effect of HCV NS3/4A protease inhibitor ABT-450， NS5A inhibitor ABT-267 and nonnucleoside NS5B polymerase inhibitor ABT-333 ［J］. J Hepatol，2012， 56： S338.

［5］Feld J J， Kowdley K V， Coakley E， et al. Treatment of HCV with ABT-450/r-ombitasvir and dasabuvir with ribavirin ［J］. N Engl J Med， 2014，370 （17）： 1594-1603.

［6］Zeuzem S， Jacobson I M， Baykal T， et al. Retreatment of HCV with ABT-450/rombitasvir and dasabuvir with ribavirin ［J］. N Engl J Med，2014， 370（17）： 1604-1614.

Dasabuvir： a New Drug Approved for Hepatitis C Virus

LIU Shu， ZHANG Man， TANG Xiaomei， JIANG Zhi
（Pharmacodia（Beijing） Co.， Ltd.， Beijing 100085， China）

On Jan 15， 2015， dasabuvir was approved by European Medicines Agency as monotherapy for the treatment of HCV. The drug was also approved by FDA on Dec 19， 2014 as combined therapy （dasabuvir/ombitasvir/paritaprevir/ritonavir） for the treatment of HCV genotype 1. Dasabuvir is a NS5B RNA-dependent RNA polymerase inhibitor， which exerts anti-viral activity by interfering with HCV replication. The chemical synthesis，preclinical pharmacology， clinical trials and patent protection of dasabuvir were summarized in this article， so as to provide

for the R&D of new anti-HCV drugs.

dasabuvir； NS5B polymerase inhibitor； HCV

R978.7

A

1001-5094（2015）09-0712-09