注射用鹽酸頭孢替安配伍溶液中降解產(chǎn)物的測定*

于 佳，楊利紅*，劉麗娜，張 鑫

（1.黑龍江省食品藥品檢驗檢測所，黑龍江哈爾濱150088；2.黑龍江工程學(xué)院，黑龍江哈爾濱150050）

注射用鹽酸頭孢替安配伍溶液中降解產(chǎn)物的測定*

于 佳1，楊利紅1*，劉麗娜2，張 鑫2

（1.黑龍江省食品藥品檢驗檢測所，黑龍江哈爾濱150088；2.黑龍江工程學(xué)院，黑龍江哈爾濱150050）

測定注射用鹽酸頭孢替安與0.9%NaCl注射液配伍后的降解產(chǎn)物。采用LC-MS,RP-HPLC法，分別以0.02mol·L-1NH4Ac水溶液-乙腈及磷酸鹽緩沖液-乙腈為流動相，對溶液配伍后的降解產(chǎn)物進行定性、定量分析。兩個主要降解產(chǎn)物確定為DMMT和去四唑頭孢替安內(nèi)酯；配伍后室溫放置8h，DMMT的量增加明顯，百分含量由約0.03%增加至約0.15%，去四唑頭孢替安內(nèi)酯的量由約0.1%增加至約0.3%，雜質(zhì)總量由0. 03%增加至約0.15%。注射用鹽酸頭孢替安與0.9%氯化鈉注射液配伍后不穩(wěn)定，應(yīng)臨用新制，以確保臨床用藥安全。

LC-MS；注射用鹽酸頭孢替安；配伍；降解產(chǎn)物

注射用鹽酸頭孢替安為第二代半合成頭孢菌素，主要用于治療敏感菌所致的感染，如肺炎、支氣管炎、膽道感染、腹膜炎、尿路感染以及手術(shù)和外傷所致的感染和敗血癥等，臨床應(yīng)用廣泛，是目前臨床上最常用的抗生素之一[1]。然而，在實驗過程中我們發(fā)現(xiàn)：鹽酸頭孢替安原料極易吸潮變色，注射劑與氯化鈉溶液配伍后2h內(nèi)溶液顏色變化明顯。

本文采用LC-MS、RP-HPLC法，對注射用鹽酸頭孢替安與0.9%NaCl注射液配伍后產(chǎn)生主要降解雜質(zhì)進行定性定量分析：確定了主要降解雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)，并采用外標(biāo)法測定了主要降解雜質(zhì)含量隨溶液放置時間延長的變化情況。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

Agilent1100型高效液相色譜儀；ThermoFisher TSQ QuntumDiscoveryMAX型質(zhì)譜儀，配有ESI離子源及Xcalliber數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。

乙腈（色譜純，F(xiàn)ISHER）；NH4Ac（色譜純，SIGMA）；1-（2-二甲基氨基乙基）-5-巰基-1,2,3,4-四氮唑?qū)φ掌罚喎QDMMT（上海笛柏化學(xué)試劑有限公司，99.0%）；去四唑頭孢替安內(nèi)酯對照品（實驗室合成，98.4%）；去離子水：明澈-D超純水儀制；K2HPO4、KH2PO（4A.R.國藥集團)；注射用鹽酸頭孢替安（哈藥總廠）；0.9%NaCl注射液（科倫藥業(yè)）。

1.2 方法

LC-MS方法：采用XBrige Shield RP18（4.6× 250mm,5μm）色譜柱；流動相為20mmol·L-1乙酸銨水溶液-乙腈；流速：0.6mL·min-1；柱溫：25℃；進樣量：10.0μl；離子源：ESI源；電壓：4.3V；鞘氣（N2）：25arb；輔助氣（N）2：5arb；碰撞氣（Ar）；0.2Pa；離子傳輸毛細管溫度：350℃；采用全掃描一級質(zhì)譜及全掃描二級質(zhì)譜同時測定。掃描范圍（m/z）：60～1000。

HPLC方法：Waters e2695高效液相色譜儀；檢測器:Waters 2998；按參照USP方法，采用XBrige Shield RP18（4.6×250mm，5μm）色譜柱；以磷酸鹽緩沖液（0.05mmol·L-1磷酸氫二鈉溶液中，加入0.05 mmol·L-1磷酸二氫鉀溶液，調(diào)節(jié)pH值至7.6～7.8）-乙腈（85∶15）為流動相；流速：1.0mL·min-1；柱溫：25℃；進樣量：10.0μl；UV檢測波長為254nm。

2 結(jié)果與討論

2.1 配伍溶液中主要降解產(chǎn)物的定性分析

照上述LC-MS方法測定，注射用鹽酸頭孢替安配伍溶液放置1h后，共檢出4個主要降解產(chǎn)物，見圖1，其可能結(jié)夠和降解途徑推測見表1。其中降解產(chǎn)物1與購得的1-（2-二甲基氨基乙基)-5-巰基-1,2,3,4-四氮唑（DMMT）對照品比較，其色譜保留行為與質(zhì)譜碎片信息均一致；而降解產(chǎn)物4與實驗室合成并經(jīng)結(jié)構(gòu)確認的去四唑頭孢替安內(nèi)酯的色譜保留行為和質(zhì)譜碎片信息均一致。

圖1 LC-MS條件下的總離子流圖（ESI+）Fig.1 MS full scan（ESI+）

表1 各降解產(chǎn)物結(jié)構(gòu)和降解途徑推測Tab.1 Proposed structure and degradation pathway of each degradation product

2.2 配伍溶液中主要降解產(chǎn)物的定量分析

照上述HPLC方法測定，DMMT、去四唑頭孢替安內(nèi)酯及配伍溶液中降解產(chǎn)物色譜圖詳見圖2～4。

精密稱取DMMT對照品溶液，置100 ml容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，逐級稀釋，溶液濃度為1.93μg·mL-1時，S/N=8.96，得其定量限為2.15μg·mL-1；同法得到去四唑頭孢替安內(nèi)酯的定量限為8.32μg·m-1。兩種雜質(zhì)對照品溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

測定結(jié)果表明：注射用鹽酸頭孢替安配伍溶液室溫放置8h，DMMT的量增加明顯，百分含量由約0.03%增加至約0.15%（外標(biāo)法）；去四唑頭孢替安內(nèi)酯的量由約0.1%增加至約0.3%（外標(biāo)法），雜質(zhì)總量由0.03%增加至約0.15%（面積歸一化法）。

Determination of degradation products of cefepime hydrochloride for injection after compatibility*

YU Jia1，YANG Li-hong1*，LIU Li-na2，ZHANG Xin2
（1.Heilongjiang Institute for Food and Drug Control,Harbin 150088,China；2.Heilongjiang Institute of Technology,Harbin 150050,China）

The degradation products of cefotiam hydrochloride for injection were determined when mixed with 0.9%NaCl injection．LC-MS and RP-HPLC method have been applied for qualitative and quantitative analysis of the degradation products with 0.02mol·L-1ammonium acetate-acetonitrile and phosphate buffer solution-acetonitrile as mobile phase.Two main degradation products were identified as DMMT and detetrazolium cefotiam hydrochloride lactone.At room temperature for 8 hours after the compatibility,the amount of DMMT increased obviously,percent content by about 0.03%increase to about 0.15%,detetrazolium cefotiam hydrochloride lactone amount by about 0.1%increase to about 0.3%,total impurities is increased from 0.03%to about 0.15%.Conclusion:The compatibility of Cefotiam hydrochloride for injection with 0.9%NaCl injection are incompatible and should be used promptly to ensure the safety of clinical use.

LC-MS；cefepime hydrochloride for Injection；compatibility；determination of degradation products

圖2 RP-HPLC條件下DMMT色譜圖Fig.2 Chromatogram of DMMT

O657.7

A

10.16247/j.cnki.23-1171/tq.20150432

2015-02-27

黑龍江省自然科學(xué)基金項目（項目批準(zhǔn)號：H201452）

于佳（1983-），女，主管藥師，理學(xué)碩士，主要從事藥品檢驗和藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究。

楊利紅（1968-），女，主任藥師，理學(xué)博士，主要從事藥品檢驗和藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究。