淺談野生動物病料的采集與寄送

尹志芳（臨沂動植物園，山東臨沂 276003）

隨著動物園內(nèi)飼養(yǎng)的野生動物品種和數(shù)量越來越多，動物疾病變得多而復(fù)雜。大型動物園特別是近幾年新建的半放養(yǎng)或全放養(yǎng)式森林動物園、野生動物園，由于野生動物品種多、數(shù)量多，一旦發(fā)生疾病，如不能及時正確診斷，其后果可想而知。因此，快速準(zhǔn)確地找出病因及病源是解決問題的關(guān)鍵，而確定病因病源就離不開病料的采集與寄送這項工作，這是基礎(chǔ)，也是關(guān)鍵。下面就動物病料的采集與寄送的注意事項和方法介紹如下。

1 病料采集應(yīng)注意的事項

1.1 采集病料要有明確的目的 野生動物疾病的病因復(fù)雜，病原種類繁多，不同的病原在其體內(nèi)各器官分布也不盡一樣。因此，不同的疾病，要求采集不同的病料。如果經(jīng)調(diào)查一時弄不清是哪種病，也可根據(jù)臨床癥狀和病理變化采集病料，如神經(jīng)癥狀明顯，可采集腦和脊髓；如消化道病理變化明顯，可采集腸內(nèi)容物及腸系膜淋巴等。

1.2 病料力求新鮮 采集病料一定要及時，一般病獸死亡即采集，最遲不超過6 h，尤其是炎熱的夏天，時間過長，尸體腐爛，影響病原微生物的檢出。必要時可從發(fā)病早期活體或急宰的尸體上采集病料。采集病料所用器械及容器一定要進(jìn)行嚴(yán)格消毒，并遵守?zé)o菌操作規(guī)程，一種病料必須專用一件器械和容器。

1.3 解剖前的檢查 如果病獸突然死亡，天然孔出血，血液不凝固，或懷疑炭疽者，不能解剖；可自末梢血管采一滴血，涂片，染色，鏡檢。當(dāng)排除炭疽后，方可進(jìn)行剖檢和采集病料。

1.4 病例的選擇 采集病料時，應(yīng)選擇臨床癥狀明顯或病理變化典型的病例取材。采集病料的病例，未經(jīng)抗生素治療過的為宜。

2 病理材料的采集和寄送

2.1 要求

2.1.1 采集病料所用的器械（刀、剪）要銳利；

2.1.2 術(shù)者要細(xì)心，動作要輕巧；

2.1.3 選取病料切勿擠壓、刮抹、沖洗；

2.1.4 所取病料應(yīng)盡量全面并有代表性，還要保持器官的正常結(jié)構(gòu)和層次；

2.1.5 選取的組織塊不宜太大，越大、越厚，越難固定，用作切片的組織塊，通常為長寬1 cm、厚0.3~0.5 cm為宜；

2.1.6 所采集的病料塊，要插上編號，以免混肴。

2.2 固定

2.2.1 一般以10%的福爾馬林固定，也可用95%的酒精或Zenker氏液固定；

2.2.2 固定液量要充實，一般以5~10倍為宜；

2.2.3 固定病料的容器最好用廣口瓶；

2.2.4 固定容器底部要墊上脫脂棉，以防組織塊粘于瓶底，而且固定不良；

2.2.5 胃壁、腸壁、膽囊等薄器官易卷縮，固定前應(yīng)將其貼在硬紙上再行固定；

2.2.6 肺組織塊易浮在固定液表面，可在其上面覆蓋脫脂棉或紗布，以防上??；

2.2.7 固定時間約l~2 d即可；

2.2.8 固定病料用的廣口瓶要蠟封口。

2.3 包裝及寄送

將固定的病料塊，裝入不漏水的雙層塑料袋內(nèi)（加固定液或以浸有固定液脫脂棉包裹均可，封口后，將塑料裝入有填料的木盒內(nèi)寄送。送檢時應(yīng)注明固定液名稱，病料種類及數(shù)量。

3 細(xì)菌材料的采集和寄送

3.1 細(xì)菌材料應(yīng)在尸體剖開時立即采集。術(shù)者一定以無菌操作采取病料。將采取的病料或組織塊放入預(yù)先消毒的并盛有滅菌的液體石蠟、對嘰甘油緩沖鹽水或飽合氯化納的溶液容器中，以便寄送。

3.2 不同的疫病可采取不同的組織器官。病料采取方法也因其質(zhì)地不同而異。

3.2.1 實質(zhì)器官（肝、脾、腎、淋巴結(jié)等），應(yīng)用燒紅的鐵片或廢刀、剪、鑷從其組織深部取1~2 cm2的組織材料，放在滅菌的容器內(nèi)；同時還應(yīng)作組織觸片送檢。

3.2.2 包膜腔積液、心血、腦脊髓液、關(guān)節(jié)腔積液、膽汁、分泌物及排泄物也可觸片送檢。

3.2.3 全血（指加抗凝劑的血液）從頸靜脈、股靜脈取之，盛入裝有抗凝劑的試管中。

3.2.4 血清分離，以無菌操作自頸靜脈或股靜脈采血10 mL（不加抗凝劑），注入試管中，斜面放置凝固，待血清析出后吸取。

3.2.5 腸內(nèi)容物及腸壁的采集，首先燒烙腸道表面，用吸管孔穿腸壁，從腸腔中吸取內(nèi)容物，置試管中，或雙重結(jié)扎一段腸管，從兩端剪斷送檢。腸壁應(yīng)用生理鹽水洗掉內(nèi)容物，然后置于盛有30%甘油水溶液或飽合鹽水的容器中寄送。

3.2.6 胎兒流產(chǎn)后，可將其裝入塑料袋包好寄送。

3.3 裝有細(xì)菌材料的容器，應(yīng)在冷藏條件下，寄出或送檢；同時附上尸檢記錄和有關(guān)病情說明。

4 病毒材料的采集和寄送

4.1 病毒材料以在機(jī)體尚未產(chǎn)生抗體之前的疾病急性期采集為宜，術(shù)者一定要用無菌操作方法采取病毒材料。病毒種類較多，采取病料的部位也不盡一樣。如血液、鼻拭子、鼻咽拭子、糞、尿、膿汁、水泡液、皮膚病變、脊髓液和活體穿刺材料及剖解時采集的組織，均可用于病毒分離。如上呼吸道感染可采集鼻咽分泌物；肺部疾病可采集痰；瘧疾病可采集殖疹液或水泡皮；腦膜炎可采集腦脊髓液；狂犬病可采集腦組織；腸道感染可采集糞便：白血病可采集血液；有些病毒積聚于組織器官內(nèi)，可無菌采集1.5~2 cm2的組織塊，放入滅菌的平皿內(nèi)（不加固定液）供檢毒用。

4.2 病毒材料必須保持低溫和潮濕的環(huán)境。一般將棉拭子折斷放入含有2 mL（pH7.4）等滲平衡鹽溶液的小瓶內(nèi)，并加有0.2%的明膠或牛白蛋白，最小每毫升含有青霉素100單位、鏈霉素100μg（糞樣應(yīng)加2.5μg/mL的兩性霉素B或40μg/mL的制菌霉素）。腦組織等可放在50%甘油緩沖液中。病料與保存液之比為1:10。血清病料可加少許硼酸，或加5%石炭酸1~2滴/mL。將采集的病毒材料封好，放在裝有冰的廣口瓶內(nèi)或裝在泡沫苯乙烯隔熱紙盒內(nèi)，再用冰充填后，快速寄出。

4.3 病毒材料包裝必須嚴(yán)密、堅固。將裝病毒的容器加塞蠟封后，貼上標(biāo)簽，注明病料名稱和編號，并附有病料送檢單。

5 毒物材料的采集和寄送

5.1 毒物檢樣應(yīng)收集動物飼槽內(nèi)剩下的飼料、飼草、肉食、飲水及可能食入的可疑食物等，采樣數(shù)量不得少于0.5kg。

5.2 尸體中采樣，應(yīng)根據(jù)毒物的種類、中毒時間及染毒途徑選擇。經(jīng)消化道急性中毒死亡的病獸應(yīng)以胃腸內(nèi)容物為主，慢性中毒則應(yīng)以臟器及排泄物為主，經(jīng)皮膚染毒的應(yīng)取染毒部位的皮膚。一般取樣應(yīng)包括肝、腎、胃，以及胃腸內(nèi)容物，膀胱內(nèi)容物、血液等。取樣數(shù)量：胃內(nèi)容物不少于0.5kg，腸道有病變，可連同內(nèi)容物一齊取下（大動物不少于0.5 m，小動物可酌情取之），血液最好從心臟取之（大動物不可少于200mL，小動物酌取），膀胱連同尿液一齊取之，肝、腎可取其一部分，必要時可取皮、毛及骨骼等。

5.3 將采樣分類裝在潔凈的廣口瓶、瓷罐、塑料瓶或塑料袋內(nèi)（不能用金屬器皿）注明檢樣名稱，并填寫送檢單。封口后，在冷藏情況下，應(yīng)盡快寄出。