負(fù)性急性時相蛋白在慢性蕁麻疹患者的研究

唐慧敏 楊文林 黃桃源 尹嘉文 楊健

負(fù)性急性時相蛋白在慢性蕁麻疹患者的研究

唐慧敏 楊文林 黃桃源 尹嘉文 楊健

目的 探討急性時相反應(yīng)與慢性蕁麻疹的關(guān)系。方法 慢性蕁麻疹患者50例，按癥狀分為輕型（1級）、中型（2級）、重型（3級）3組，同時選取健康體檢者28例，用免疫比濁法測定血清前白蛋白（PA）、轉(zhuǎn)鐵蛋白（TRF）水平，采用酶聯(lián)免疫吸附法測定胰島素樣生長因子1（IGF-1）和腫瘤壞死因子α（TNF-α）水平；比較兩組之間的差異、各檢測項(xiàng)目之間的相關(guān)性及與病情分級的關(guān)系。結(jié)果 慢性蕁麻疹患者PA（229.99±54.16）mg/L、IGF-1（177.23±46.48）μg/L均明顯低于健康對照組，兩組差異有統(tǒng)計學(xué)意義（均P<0.05）。TNF-α（25.39 ± 11.01）ng/L高于健康對照組（14.13 ± 6.12）ng/L，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。TRF水平（2.48±0.49）g/L與健康對照組（2.48±0.25）g/L比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。血清PA與TNF-α呈顯著負(fù)相關(guān)（P<0.05），并與病情嚴(yán)重程度呈顯著負(fù)相關(guān)（P<0.01），而TNF-α則與病情嚴(yán)重程度呈顯著正相關(guān)（P<0.01）；其余各指標(biāo)之間無明顯相關(guān)性（均P>0.05）。結(jié)論 在慢性蕁麻疹患者中，部分急性時相反應(yīng)負(fù)性蛋白水平降低且與病情呈負(fù)相關(guān)，急性時相反應(yīng)可能參與慢性蕁麻疹的發(fā)病。

蕁麻疹；前白蛋白；轉(zhuǎn)鐵蛋白；胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白質(zhì)1；腫瘤壞死因子-α

近年，慢性蕁麻疹（chronic urticaria,CU）發(fā)病機(jī)制的研究取得一定的進(jìn)展，有研究提示，C反應(yīng)蛋白、纖維蛋白原等急性時相反應(yīng)蛋白和白細(xì)胞介素6（IL-6）在CU患者中升高，且分別與CU病情嚴(yán)重程度、疾病活動有一定相關(guān)性［1-3］。Kasperska-Zajac［4］認(rèn)為，CU患者體內(nèi)可能發(fā)生急性時相反應(yīng)。本研究通過檢測CU患者體內(nèi)負(fù)性急性時相反應(yīng)蛋白前白蛋白（PA）、轉(zhuǎn)鐵蛋白（TRF）、胰島素樣生長因子 1（IGF-1）和腫瘤壞死因子α（TNF-α）水平，探討急性時相反應(yīng)與CU的關(guān)系。

一、對象與方法

（一）對象：2013年10月至2014年1月到本院皮膚科門診就診的CU患者50例，其中男23例，女27例；年齡18～60歲，平均（39.50±14.12）歲。入選標(biāo)準(zhǔn)：既往無過敏性鼻炎、特應(yīng)性皮炎、哮喘等過敏性疾病，無寄生蟲感染及自身免疫病等病史；過去4周內(nèi)未使用過糖皮質(zhì)激素、免疫調(diào)節(jié)藥物或過去3 d內(nèi)未用過抗組胺藥者；無合并皮炎，濕疹等引起瘙癢的皮膚??；無合并腦、肺、心、肝、腎、血液等重大器官疾病以及糖尿病、高血壓患者。非妊娠、月經(jīng)期、哺乳期婦女。排除標(biāo)準(zhǔn)：其他類型蕁麻疹如，皮膚劃痕癥、物理性蕁麻疹、膽堿能性蕁麻疹、遺傳血管性水腫、蕁麻疹性血管炎及藥物、感染等明確原因引起的蕁麻疹。來自本院體檢中心的健康對照組28例，男14例，女14例，年齡（38.07±11.55）歲。兩組間性別、年齡差異無統(tǒng)計學(xué)意義。全部入選者無腦、肺、心、肝、腎、血液等重大器官疾病；肝腎功能等生化檢查正常。

嚴(yán)重程度評估：根據(jù)患者近1周的風(fēng)團(tuán)表現(xiàn)，按報道的研究方法［2］進(jìn)行評級：1級為輕型，1～10個直徑 <3 cm風(fēng)團(tuán)；2級為中型，10～50個<3 cm風(fēng)團(tuán)或1～10個直徑 >3 cm風(fēng)團(tuán)；3級為重型，直徑<3 cm的風(fēng)團(tuán)>50個或直徑>3 cm的風(fēng)團(tuán)>10個。CU組輕型患者19例，中型24例，重型7例。

（二）方法：

1.標(biāo)本收集：清晨空腹抽取靜脈血4 ml，以4℃、1 000×g、離心5 min，取血清存-80℃保存?zhèn)錅y。

2.PA和TRF用德國羅氏全自動生化分析儀及配套試劑的免疫比濁法測定。IGF-1和TNF-α用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）法，試劑盒產(chǎn)自美國Cloud-Clone Corp公司，操作按說明書。MK3型酶標(biāo)儀Thermo購自上海賽默飛世爾儀器有限公司。MK3型酶標(biāo)儀450 nm測定吸光度（A）值，用SPSS軟件繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算各樣本值。

3.統(tǒng)計學(xué)處理：用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。計量資料結(jié)果以±s表示，計數(shù)資料用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，各組間數(shù)據(jù)相關(guān)性采用Spearman相關(guān)分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

二、結(jié)果

1.CU 組與健康對照組血清 PA、TRF、IGF-1、TNF-α 水平：兩組間血清負(fù)性急性時相反應(yīng)蛋白PA、TRF、IGF-1水平及TNF-α水平的比較見表1。CU組血清與對照組相比PA、IGF-1水平水平明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=3.667，P<0.05；t=5.748，P<0.05）。而 TRF水平在 CU 組與對照組之間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），CU組患者血清TNF-α水平較健康對照組明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。

2.CU組PA、TRF、IGF-1及TNF-α水平之間的相關(guān)性：CU組PA水平與 TNF-α水平呈負(fù)相關(guān)（r=-0.312，P<0.05），余各指標(biāo)之間無明顯相關(guān)性（P>0.05）。

3.CU組PA、TRF、IGF-1及TNF-α水平與患者病情分級的關(guān)系：PA水平與病情嚴(yán)重程度呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.635，P<0.01），而TNF-α水平則與病情分級呈正相關(guān)（r=0.409，P<0.01），TRF及IGF-1水平分別與病情分級無相關(guān)性（P>0.05）。

表1 慢性蕁麻疹組與健康對照組4種急性時相蛋白水平的檢測（±s）

表1 慢性蕁麻疹組與健康對照組4種急性時相蛋白水平的檢測（±s）

注：兩組進(jìn)行比較

組別 例數(shù) 前白蛋白（mg/L）腫瘤壞死因子α（ng/L）慢性蕁麻疹組 50 229.99±54.16 2.48±0.49 177.23±46.48 25.39±11.01健康對照組 28 272.06±36.42 2.48±0.25 239.88±45.16 14.13±6.12 t值 3.667 0.004 5.748 4.989 P值 <0.05 >0.05 <0.05 <0.01轉(zhuǎn)鐵蛋白（g/L）胰島素樣生長因子 1（μg/L）

三、討論

急性時相反應(yīng)蛋白是指在機(jī)體發(fā)生炎癥、感染或腫瘤等因素刺激下，血漿濃度發(fā)生改變的一系列蛋白質(zhì)，與炎癥和損傷的性質(zhì)、范圍有一定相關(guān)性。其中，在急性時相反應(yīng)中血漿濃度增加超過25%的蛋白稱為正性急性時相反應(yīng)蛋白，如C反應(yīng)蛋白、鐵蛋白、銅藍(lán)蛋白、血漿淀粉樣A物質(zhì)、抗蛋白酶系、補(bǔ)體系統(tǒng)、纖維蛋白原等。血漿濃度降低25%以上的蛋白則稱為負(fù)性急性時相反應(yīng)蛋白，如PA、α甲胎蛋白、甲狀腺素結(jié)合球蛋白、TRF、IGF-1等。不同的正性急性時相反應(yīng)蛋白在炎癥過程中發(fā)揮多種生物學(xué)效應(yīng)，而負(fù)性急性時相反應(yīng)蛋白目前作用還不清楚，可能是濃度減少后，使更多的氨基酸合成其他正性急性時相反應(yīng)蛋白參與機(jī)體防御功能［5］。近年文獻(xiàn)報道，CU患者體內(nèi)部分正性急性時相反應(yīng)蛋白較健康對照組升高，且分別與CU病情活動度有一定相關(guān)性［1-3］，有學(xué)者［4］推測，CU患者體內(nèi)可能發(fā)生急性時相反應(yīng)，且可能來自于皮膚風(fēng)團(tuán)的炎癥反應(yīng)。

本研究結(jié)果顯示，CU患者PA、IGF-1的水平較健康對照組中均有一定程度的下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；而TRF與健康對照組差異無統(tǒng)計學(xué)意義，但CU組仍有10例（20%）患者血清TRF低于臨床正常值下限（2.2～4.0 g/L）。PA的水平與CU患者病情分級呈負(fù)相關(guān)（P<0.01），表明患者體內(nèi)可能發(fā)生急性時相反應(yīng)。但目前急性時相反應(yīng)蛋白在CU的研究較少，CU患者體內(nèi)PA、IGF-1的水平下降是否由于負(fù)性急性時相反應(yīng)蛋白合成減少，使更多的氨基酸參與正性急性時相反應(yīng)蛋白的合成，參與機(jī)體防御功能過程尚待進(jìn)一步研究。

目前有研究［6］認(rèn)為，CU作為一種持續(xù)炎癥性皮膚疾病，局部炎癥可引起急性時相反應(yīng)，局部炎癥細(xì)胞釋放 TNF-α、IL-6、IL-18、IL-1等炎癥介質(zhì)，在補(bǔ)體途徑下引起機(jī)體產(chǎn)生各種急性時相反應(yīng)蛋白，其中TNF-α可以活化內(nèi)皮細(xì)胞，趨化白細(xì)胞，使其他細(xì)胞產(chǎn)生更多細(xì)胞因子，還能明顯增加嗜酸性粒細(xì)胞活化趨化因子以及誘導(dǎo)嗜酸性粒細(xì)胞顆粒蛋白分泌并沉積于皮損真皮內(nèi)細(xì)胞，并可促進(jìn)肝細(xì)胞合成多種急性時相反應(yīng)蛋白，也可減少肝細(xì)胞表面生長激素受體表達(dá)，抑制對生長激素的反應(yīng)，降低血漿IGF-1濃度［7］。已有研究表明，CU患者體內(nèi)TNF-α水平顯著升高［8］，我們的結(jié)果顯示，TNF-α與CU患者PA水平呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）,但與IGF-1無相關(guān)性（P>0.05）。迄今為止的研究提示，TNF-α可能參與CU的急性時相反應(yīng)過程，參與急性時相反應(yīng)蛋白的調(diào)控。

［1］黃桃源,楊文林,尹嘉文,等.急性時相反應(yīng)標(biāo)志物及凝血、纖溶標(biāo)志物與慢性蕁麻疹的相關(guān)性研究［J］.中華皮膚科雜志,2014,47（7）:473-476.

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［3］Kasperska-Zajac A,Sztylc J,Machura E,et al.Plasma IL-6 concentration correlates with clinical disease activity and serum C-reactive protein concentration in chronic urticaria patients［J］.Clin Exp Allergy,2011,41（10）:1386-1391.

［4］Kasperska-Zajac A.Acute-phase response in chronic urticaria［J］.J Eur Acad Dermatol Venereol,2012,26（6）:665-672.

［5］Kemik O,Sumer A,Kemik AS,et al.The relationship among acute-phase response proteins,cytokines and hormones in cachectic patients with colon cancer［J］.World J Surg Oncol,2010,8（1）:85.

［6］黃桃源,楊文林.急性時相反應(yīng)及凝血/纖溶系統(tǒng)參與慢性蕁麻疹發(fā)病的研究進(jìn)展［J］.中國皮膚性病學(xué)雜志,2014,28（1）:84-86.

［7］Postal M,Appenzeller S.The role of tumor necrosis factor-alpha（TNF-α）in the pathogenesis of systemic lupus erythematosus［J］.Cytokine,2011,56（3）:537-543.

［8］石麗君,曾抗,李利豪,等.卡介菌多糖核酸治療慢性蕁麻疹患者嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子、腫瘤壞死因子α和干擾素γ水平的檢測［J］.中華皮膚科雜志,2013,46（9）:676-678.

Negative acute phase proteins in patients with chronic urticaria

Tang Huimin,Yang Wenlin*,Huang Taoyuan,Yin Jiawen,Yang Jian.*Department of Dermatology,Second Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University,Guangzhou 510260,China

Yang Wenlin,Email:yangwenlin@21cn.com

Objective To investigate the relationship between negative acute phase proteins and chronic urticaria （CU）.Methods Fifty patients with CU were enrolled into this study,and divided into three grades,i.e.,mild （grade 1）,moderate （grade 2）and severe （grade 3）according to symptoms.Twenty-eight health checkup examinees served as the control group.Immunoturbidimetry was performed to determine serum levels of prealbumin（PA）and transferrin（TRF）.Enzyme-linked immunosorbent assay was conducted to measure serum levels of insulinlike growth factor-1 （IGF-1） and tumor necrosis factor-α （TNF-α）.Statistical analysis was carried out to assess differences in these indices between these two groups,the relationship among these indices and between these indices and disease severity.Results Compared with the control group,the patients with CU showed reduced serum levels of PA（（229.99 ± 54.16）vs.（272.06 ± 36.42）mg/L,t=3.667,P<0.05）and IGF-1（（177.23 ± 46.48）vs.（239.88 ± 45.16）μg/L,t=5.748,P<0.05）,but higher serum levels of TNF-α （（25.39 ± 11.01）vs.（14.13 ±6.12）ng/L,t=4.989,P<0.05）,and similar serum levels of TRF（（2.48 ± 0.49）vs.（2.48 ± 0.25）g/L,P>0.05）.The serum level of PA showed a significant negative correlation with that of TNF-α （r= － 0.312,P<0.05）,as well as with disease severity （r= －0.635,P<0.01）,whereas the serum level of TNF-α showed a significant positive correlation with disease severity （r=0.409,P<0.01）,and no statistical correlation was found between the remaining indices（allP>0.05）in the patients with CU.Conclusions Serum levels of some negative acute phase proteins decrease and negatively correlate with disease severity in patients with CU.Acute phase response may be involved in the occurrence of CU.

Urticaria；Prealbumin；Transferrin；Insulin-like growth factor binding protein 1；Tumor necrosis factor-α

10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2015.01.021

510260廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院皮膚科［唐慧敏（現(xiàn)在廣州醫(yī)學(xué)院荔灣醫(yī)院皮膚科，510170）、楊文林、黃桃源、尹嘉文、楊?。?/p>

楊文林，Email：yangwenlin@21cn.com

2014-05-12）

（本文編輯：吳曉初）