殼聚糖-蒲公英提取物的抑菌活性與穩(wěn)定性研究

張　強(qiáng)，胡維崗，金新文，*（.新疆農(nóng)墾科學(xué)院，農(nóng)產(chǎn)品加工研究所，新疆石河子83000；.新疆農(nóng)墾科學(xué)院，農(nóng)產(chǎn)品加工重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，新疆石河子83000）

殼聚糖-蒲公英提取物的抑菌活性與穩(wěn)定性研究

張強(qiáng)1，胡維崗2，金新文1，*
（1.新疆農(nóng)墾科學(xué)院，農(nóng)產(chǎn)品加工研究所，新疆石河子832000；2.新疆農(nóng)墾科學(xué)院，農(nóng)產(chǎn)品加工重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，新疆石河子832000）

研究天然抑菌劑殼聚糖和蒲公英提取物聯(lián)用抑菌活性和抑菌穩(wěn)定性。分別測定殼聚糖和蒲公英提取物對大腸桿菌、沙門氏菌、金黃葡萄球菌的抑菌最小濃度以及在最小抑菌濃度下的抑菌率和抑菌圈直徑，并研究了殼聚糖和蒲公英提取物聯(lián)用時(shí)的抑菌活性與抑菌穩(wěn)定性。結(jié)果表明：單獨(dú)使用殼聚糖與蒲公英提取物，均對大腸桿菌、沙門氏菌、金黃葡萄球菌有一定的抑菌活性。兩者聯(lián)用后，抑菌活性較單獨(dú)使用有所提高。將聯(lián)用抑菌劑通過不同溫度、pH和紫外照射時(shí)間處理后測定可知，殼聚糖與蒲公英提取物聯(lián)用抑菌劑在40～60℃、pH為5～7和紫外照射時(shí)間20～40 min的情況下仍具有較強(qiáng)的抑菌活性，抑菌穩(wěn)定性良好。

殼聚糖，蒲公英，抑菌活性，抑菌穩(wěn)定性

抗菌防腐對食品保鮮貯藏起著至關(guān)重要的作用，天然抑菌物質(zhì)具有安全、無毒、無害的優(yōu)點(diǎn)，近年來受到了國內(nèi)外的廣泛關(guān)注［1-2］。殼聚糖是一種無毒無味的天然物質(zhì)，是甲殼質(zhì)經(jīng)脫乙酰反應(yīng)后的產(chǎn)品，具有良好的生物相容性和可降解性，同時(shí)具有良好的抑菌活性［3-4］。殼聚糖的分子量從幾千到幾十萬不等，有研究表明，粘均分子量在1.5×105左右的殼聚糖具有較強(qiáng)的抑菌活性［5］。目前，已應(yīng)用于殼聚糖種衣劑、殼聚糖殺菌、功能性纖維、農(nóng)藥緩釋劑、植物生長促進(jìn)劑、土壤改良劑、可降解殼聚糖地膜、殼聚糖菜蔬保鮮劑等［6-8］。蒲公英屬菊科多年生草本植物，蒲公英植物體中含有蒲公英醇、蒲公英素、膽堿、有機(jī)酸、菊糖等多種健康營養(yǎng)成分，具有廣譜抑菌效果，對肺炎雙球菌、腦膜炎球菌、白喉?xiàng)U菌、綠膿桿菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌等有較強(qiáng)的抑菌活性［9-10］。由于不同的抑菌劑有著不同的抑菌機(jī)理［11-12］，聯(lián)合使用，能夠發(fā)揮各自的抑菌特性，對不同微生物的抑菌活性形成互補(bǔ)，提高總體抑菌活性，目前復(fù)合抑菌劑的保鮮貯藏已有研究和應(yīng)用［13-14］。因此，本課題研究了粘均分子量為1.5×105的殼聚糖和蒲公英提取物對大腸桿菌（E.coli）、沙門氏菌（Salmonella）、金黃葡萄球菌（S.aureus）的抑菌活性，并將兩者聯(lián)合使用，研究其抑菌效果，為開發(fā)新型的天然抗菌防腐材料與抗菌保鮮方法提供了參考和依據(jù)。

1　材料與方法

1.1材料與儀器

殼聚糖脫乙酰度96%，粘均分子量為1.5×105，上海紫一試劑廠；蒲公英采摘于野外，全草晾干，經(jīng)石河子華強(qiáng)醫(yī)藥公司鑒定；供試菌種：大腸桿菌（E.coli）、沙門氏菌（Salmonella）、金黃葡萄球菌（S. aureus）由新疆農(nóng)墾科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供；無水乙醇99.5%、醋酸南京化學(xué)試劑有限公司；其他試劑均為分析純。

TDZ6B-W型離心機(jī)上海盧湘儀離心機(jī)有限公司；HHS-11-4型水浴鍋杭州匯爾儀器設(shè)備有限公司；DH-500（303-3）AB恒溫培養(yǎng)箱北京科偉永興儀器有限公司；V-1800型光度計(jì)上海美普達(dá)儀器有限公司；KK25F55TI型冰箱西門子公司；MLS-3780型高壓蒸汽滅菌鍋杭州亞旭生物科技有限公司。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1殼聚糖抑菌溶液制備實(shí)驗(yàn)采用粘均分子量為1.5×105殼聚糖，用2%的醋酸溶液溶解達(dá)到飽和后，再用0.1 mol/L的NaOH將溶液pH調(diào)節(jié)至6.0，用調(diào)節(jié)好的殼聚糖溶液進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)［15］。

1.2.2蒲公英浸提液的制備取干蒲公英全草，粉碎至40目，將無水乙醇配制為70%體積濃度，作為浸提劑，按照料液比為1/25（m/v）投料，在水浴鍋內(nèi)100℃回流提取2 h。結(jié)束后進(jìn)行過濾濃縮，制成濃度為1 g/mL的浸提液［16-18］。

1.2.3菌株及其菌懸液的制備將菌株大腸桿菌、沙門氏菌、金黃葡萄球菌，分別接種到LB固體培養(yǎng)基上，在37℃培養(yǎng)24 h，挑選單一菌落，置于MH培養(yǎng)基，在37℃培養(yǎng)，直至菌液達(dá)到所需濃度為止。

菌懸液的制備：將所培養(yǎng)的細(xì)菌調(diào)至0.5麥?zhǔn)媳葷釂挝唬?9］。

1.2.4抑菌活性的測定

1.2.4.1殼聚糖、蒲公英浸提液最小抑菌濃度（MIC）的測定采用微量二倍稀釋法進(jìn)行［20］，將待測菌液稀釋至0.5麥?zhǔn)媳葷釂挝?，加?6孔聚苯乙烯板中，取180 μL加入第一排孔，其余孔加入100 μL，取20 μL配制好的抑菌溶液加入第一孔，混勻，取100 μL加入第二孔，混勻，取100 μL加入第三孔，依次加樣至第11孔，第十二孔加待測浸提混合液，作為對照，以浸提劑做陰性對照，重復(fù)2～4次，將平板置于37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24 h，觀察結(jié)果。重復(fù)3次，取平均值。

1.2.4.2抑菌圈直徑的測定采用濾紙片擴(kuò)散法［20］。

制備藥敏紙片：用濾紙制成直徑為6 mm的圓形紙片若干，滅菌、烘干。取200 μL待測抑菌溶液浸泡濾紙片2 h，取出紙片置于培養(yǎng)基中，37℃下干燥3 h。以浸提劑浸泡的濾紙片做空白對照。

接種培養(yǎng)：在無菌操作下，取200 μL菌懸液均勻涂布于無菌平皿，取6片藥敏濾紙片等距離貼放，中心貼一片做對照，每個(gè)樣品重復(fù)3次。于37℃培養(yǎng)24 h，用十字交叉法測定抑菌圈直徑。

1.2.4.3抑菌率的測定采用比色法測定抑菌率［20］。將待測菌種進(jìn)行活化至濃度為4.0 lg CFU/g的菌懸液［21］，以1/100稀釋，配制為A600nm波長處吸光度為0.3～0.6的標(biāo)準(zhǔn)菌液，作對照組。取標(biāo)準(zhǔn)菌液，加入抑菌劑，配制為MIC的混合菌液，作為實(shí)驗(yàn)組。以無菌LB培養(yǎng)基作標(biāo)準(zhǔn)液，調(diào)節(jié)分光光度計(jì)的零點(diǎn)。在LB培養(yǎng)基中加入標(biāo)準(zhǔn)液300 μL，測吸光度（A600nm），測定后于37℃培養(yǎng)3 h，測定A600nm，計(jì)算單位時(shí)間內(nèi)A600nm變化（標(biāo)示為ΔA600nm），以此表示細(xì)菌的生長速率。按此方法測定含抗菌劑實(shí)驗(yàn)組菌液的A600nm變化值（標(biāo)示為ΔA′600nm），下降百分比作為抗菌劑的抗菌活性［22］。

抑菌率（%）=［（ΔA600nm-ΔA′600nm）/ΔA600nm］×100

1.2.4.4殼聚糖與蒲公英提取物聯(lián)用時(shí)抑菌活性測定聯(lián)用抑菌液的配制：由于同一種抑菌劑對不同細(xì)菌有不同的MIC，若同時(shí)對三種細(xì)菌有抑菌作用，應(yīng)當(dāng)取三種細(xì)菌中MIC值的最大者。因此分別取殼聚糖組和蒲公英提取物組中三種細(xì)菌的MIC值最大者，濃度值分別記為C1和C2。根據(jù)C1和C2的值，分別將殼聚糖與蒲公英提取物配制成濃度為2C1和2C2的溶液，然后取等質(zhì)量的兩種溶液混合配制成殼聚糖與蒲公英提取物的聯(lián)用抑菌劑，最后對聯(lián)用抑菌劑進(jìn)行抑菌活性的測定。

1.2.5抑菌活性穩(wěn)定性的測定［22］

1.2.5.1熱處理對聯(lián)用抑菌劑抑菌活性的影響將聯(lián)用抑菌劑分別置于40、60、80、100℃水浴處理30 min，對照組為20℃，測定聯(lián)用抑菌劑的抑菌圈直徑與抑菌率，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，取平均值。

1.2.5.2pH對聯(lián)用抑菌劑抑菌穩(wěn)定性的影響用0.1 mol/L的HCl和0.1 mol/L的NaOH分別將聯(lián)用抑菌劑溶液pH調(diào)至3、5、7、9、11，測定聯(lián)用抑菌劑的抑菌圈直徑與抑菌率，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，取平均值。

1.2.5.3紫外照射對聯(lián)用抑菌劑抑菌活性的影響將聯(lián)用抑菌劑置于20 W的紫外燈下30 cm處分別照射20、40、60、80 min，分別測定抑菌劑的抑菌圈直徑和抑菌率，重復(fù)3次。

1.3數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行方差分析。

2　結(jié)果與分析

2.1殼聚糖與蒲公英提取物最小抑菌濃度以及抑菌活性的測定

采用微量二倍稀釋法，分別測定了殼聚糖與蒲公英提取物的最小抑菌濃度，數(shù)據(jù)如表1所示，殼聚糖對大腸桿菌和金黃葡萄球菌最小抑菌濃度小于蒲公英提取物，對沙門氏菌的最小抑菌濃度則大于蒲公英提取物的。有研究表明，殼聚糖的濃度對其抗菌活性有重要影響，醋酸濃度和pH亦能產(chǎn)生影響，但影響較?。?3］。

2.2殼聚糖與蒲公英提取物聯(lián)用與單獨(dú)使用抑菌圈直徑

殼聚糖在C1濃度（0.055 g/mL）下，蒲公英提取物在C2濃度下（0.125 g/mL），根據(jù)C1和C2值配制殼聚糖和蒲公英聯(lián)用抑菌劑，對以上條件下抑菌圈直徑進(jìn)行測定。由表2數(shù)據(jù)可知，殼聚糖在C1濃度下較蒲公英提取物在C2濃度下產(chǎn)生的抑菌直徑小，兩者存在顯著性差異（p＜0.05）；殼聚糖和蒲公英聯(lián)用制劑產(chǎn)生抑菌圈直徑較C2濃度的蒲公英提取物有了顯著增加（p＜0.05）。

表1　殼聚糖與蒲公英提取物最小抑菌濃度Table 1　The MIC of chitosan and dandelion extract

表2　C1濃度下殼聚糖與C2濃度下蒲公英提取物及兩者混合聯(lián)用的抑菌圈直徑Table 2　The inhibitory zone diameters of chitosan in C1and dandelion extract in C2and the mixture of chitosan and dandelion extract

2.3殼聚糖與蒲公英提取物聯(lián)用與單獨(dú)使用抑菌率

表3　C1濃度下殼聚糖與C2濃度下蒲公英提取物及兩者混合聯(lián)用的抑菌率Table 3　The inhibitory rate of chitosan in C1and dandelion extract in C2and the mixture of chitosan and dandelion extract

由表3所示，殼聚糖-蒲公英提取物對大腸桿菌、沙門氏菌、金黃葡萄球菌的抑菌率均比殼聚糖和蒲公英單獨(dú)使用時(shí)有所增加（p＜0.05）。

由抑菌圈直徑和抑菌率變化可知，并且殼聚糖與蒲公英提取物聯(lián)用比單獨(dú)使用一種抑菌劑能夠產(chǎn)生更強(qiáng)的抑菌活性。結(jié)合表2和表3分析可知，在固體培養(yǎng)基中，殼聚糖遠(yuǎn)比蒲公英提取產(chǎn)生的抑菌圈直徑小，相差2.5～5.3倍。而在液體菌懸液中的抑菌率差距則相對較小，殼聚糖對大腸桿菌和金黃葡萄球菌的抑菌率反而較蒲公英提取物強(qiáng)。這是由于殼聚糖粘度較高，在固體培養(yǎng)基中不易擴(kuò)散，而在菌懸液溶中，殼聚糖充分溶解分散，抑菌活性得以充分發(fā)揮。

由于兩種抑菌劑有著不同的抑菌機(jī)制，殼聚糖的有效基因N可以與細(xì)菌細(xì)胞壁形成一個(gè)負(fù)電荷環(huán)境，阻礙細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)的正常流通，有些則通過滲透作用穿過多孔細(xì)胞壁，破壞細(xì)胞質(zhì)中內(nèi)含物的膠體狀態(tài)［24］。蒲公英對細(xì)菌的細(xì)胞膜有強(qiáng)烈的破壞作用，導(dǎo)致胞內(nèi)物質(zhì)滲出，使細(xì)菌死亡［25］。因此，兩種抑菌劑聯(lián)用后能夠分別發(fā)揮自身的抑菌作用，抑菌活性超過單獨(dú)使用一種抑菌劑的抑菌活性［26］。

2.4殼聚糖-蒲公英提取物的抑菌穩(wěn)定性

2.4.1熱處理對聯(lián)用抑菌劑抑菌活性的影響食品生產(chǎn)過程中，經(jīng)常會(huì)使用巴士殺菌控制微生物數(shù)量，這要求抑菌劑有較好的熱穩(wěn)定性，能在盡量高的溫度下保持較強(qiáng)的抑菌活性。

圖1　溫度對殼聚糖-蒲公英提取物抑菌圈直徑的影響Fig.1　The effect of temperature on the inhibitory zone diameters of chitosan and dandelion extract

圖2　溫度對殼聚糖-蒲公英提取物抑菌率的影響Fig.2　The effect of temperature on the inhibitory rate of chitosan and dandelion extract

由圖1、圖2可知，殼聚糖與蒲公英聯(lián)用抑菌劑的抑菌活性在40℃下保持良好，無顯著性變化（p＞0.05），在60℃的巴氏殺菌溫度下略有下降，但仍有較強(qiáng)的抑菌活性，殼聚糖與蒲公英的聯(lián)用抑菌劑熱穩(wěn)定性良好，能夠滿足食品加工生產(chǎn)要求。在80℃和100℃高溫下，抑菌活性下降嚴(yán)重（p＜0.05）。

2.4.2pH對聯(lián)用抑菌劑抑菌穩(wěn)定性的影響抑菌劑在使用時(shí)，環(huán)境pH處在不斷變化過程中。因此，抑菌劑對酸堿環(huán)境保持穩(wěn)定性非常重要，能在較大pH范圍內(nèi)保持抑菌穩(wěn)定性較為理想。

圖3　pH對殼聚糖-蒲公英提取物抑菌圈直徑的影響Fig.3　The effect of pH on the inhibitory zone diameters of chitosan and dandelion extract

圖4　pH對殼聚糖-蒲公英提取物抑菌率的影響Fig.4　The effect of pH on the inhibitory rate of chitosan and dandelion extract

由圖3和圖4分析可知，在pH＜5時(shí)，殼聚糖與蒲公英聯(lián)用抑菌劑的抑菌活性隨pH的升高急劇升高（p＜0.05），當(dāng)pH=5時(shí)，抑菌活性達(dá)到最高，在pH5～7時(shí)，抑菌活性隨著pH增加緩慢下降，pH＞7時(shí)，抑菌活性加速下降（p＜0.05）。

2.4.3紫外照射對聯(lián)用抑菌劑抑菌活性的影響許多種類的食品在生產(chǎn)及保鮮貯藏過程中，要進(jìn)行紫外線照射滅菌處理，因此，理想的抑菌劑其抑菌活性受紫外線照射影響較小為好。

圖5　紫外線照射時(shí)間對殼聚糖-蒲公英提取物抑菌圈直徑的影響Fig.5　The effect of UV irradiation time on the inhibitory zone diameters of chitosan and dandelion extract

圖6　紫外線照射時(shí)間對殼聚糖-蒲公英提取物抑菌率的影響Fig.6　The effect of UV irradiation time on the inhibitory rate of chitosan and dandelion extract

由圖5和圖6分析可知，殼聚糖與蒲公英的聯(lián)用抑菌劑在短時(shí)間內(nèi)受紫外線照射，如20 min，抑菌活性沒有顯著變化（p＞0.05），照射40 min以后，抑菌活性下降顯著（p＜0.05）。

3　結(jié)論

研究了粘均分子量為1.5×105的殼聚糖和干蒲公英全草提取物對大腸桿菌（E.coli）、沙門氏菌（Salmonella）、金黃葡萄球菌（S.aureus）的抑菌活性。結(jié)果表明，殼聚糖和蒲公英提取物均有一定的抑菌效果。在最小抑菌濃度時(shí)，蒲公英提取物比殼聚糖有較強(qiáng)的抑菌活性，而殼聚糖在充分溶解擴(kuò)散的情況下能夠產(chǎn)生較強(qiáng)的抑菌活性。將兩種抑菌劑進(jìn)行混合聯(lián)用，抑菌活性進(jìn)一步增強(qiáng)，對三種實(shí)驗(yàn)菌的抑菌率分別達(dá)到89.6%、96.4%和92.5%。雖然兩種抑菌劑的抑菌機(jī)制不同，但兩種抑菌劑聯(lián)用后分別能夠發(fā)揮自身的抑菌作用，抑菌活性較單獨(dú)使用時(shí)顯著加強(qiáng)。同時(shí)，聯(lián)用后抑菌穩(wěn)定性良好。由于殼聚糖與蒲公英提取物均是天然產(chǎn)物，具有安全無毒、自然資源豐富、易取材、生產(chǎn)成本低的優(yōu)點(diǎn)，在開發(fā)安全健康的食品抑菌保鮮制劑和保鮮材料方面有著良好的應(yīng)用前景。

［1］王燕燕，努爾巴依·阿布都沙力克.蒲公英的民族植物學(xué)研究及開發(fā)利用［J］.中央民族大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2011，20（2）：23-25，38.

［2］陳佳陽，陳實(shí)，樂學(xué)義.殼聚糖抗菌膜的研究進(jìn)展［J］.廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，39（12）：122-126.

［3］J Keaton Smith，Joel D Bumgardner，Harry S Courtney，et al. Antibiotic-loaded chitosan film for infection prevention：A preliminary in vitro characterization［J］.Biomedical Materials，2010，94（1）：203-211.

［4］Arun Ghosh，M Azam Ali.Studies on physicochemical characteristics of chitosan derivatives with dicarboxylic acids［J］. Journal of Materials Science，2012，47（3）：1196-1204.

［5］Zh T Azimov，B L Oksengendler，N N Turaeva，et al.Effect of the structure of the biopolymer chitosan on its bactericidal activity［J］.Polymer Science Series A，2013，55（2）：98-101.

［6］楊玲玉，孟祥紅，劉成圣，等.殼聚糖的抗菌性及其對果實(shí)病害的防治研究進(jìn)展［J］.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，42（2）：626-635.

［7］Riccardo A A Muzzarelli，Joseph Boudrant，Diederick Meyer，et al.Current views on fungal chitin/chitosan，human chitinases，food preservation，glucans，pectins and inulin：A tribute to Henri Braconnot，precursor of the carbohydrate polymers science，on the chitin bicentennial［J］.Carbohydrate Polymers，2012，87（2）：995-1012.

［8］Mohsen M Mady，Mirhane M Darwish，Safaa Khalil，et al. Biophysical studies on chitosan-coated liposomes［J］.European Biophysics Journal，2009，38（8）：1127-1133.

［9］杜軍英，姜東伯，狄柯坪，等.蒲公英抑菌抗炎作用的研究進(jìn)展［J］.白求恩軍醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2012，10（2）：128-131.

［10］孟靜思，袁進(jìn)罡，馬輝.中草藥蒲公英的體外抑菌實(shí)驗(yàn)［J］.河北化工，2013，36（3）：29-31.

［11］林水森，李明春，辛梅華，等.殼聚糖及其衍生物抗菌機(jī)理研究進(jìn)展［J］.化學(xué)通報(bào)，2014，77（3）：220-226.

［12］王曉英.蒲公英總黃酮對假單胞菌抑菌機(jī)理的探討［J］.食品研究與開發(fā)，2012，33（11）：18-21.

［13］姜忠麗，王俊偉.丁香、苦蕎麥及蒲公英的復(fù)配抑菌作用［J］.糧食與飼料工業(yè)，2011（8）：39-41.

［14］任艷芳，劉暢，何俊瑜，等.黃連殼聚糖復(fù)合涂膜保鮮劑對夏橙保鮮效果的研究［J］.食品科學(xué)，2012，33（16）：291-296.

［15］廖愛琳，吳曉萍，易蜀婷，等.殼聚糖對金黃色葡萄球菌抑菌活性的研究［J］.中國食物與營養(yǎng)，2011，17（4）：40-43.

［16］劉利本，平家奇，高海飛，等.蒲公英不同部位提取物體外抑菌作用的比較［J］.延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)學(xué)報(bào)，2010，32（1）：65-68.

［17］孫長霞，童應(yīng)凱，黃亮，等.蒲公英不同溶劑提取物體外抑菌效果的研究［J］.食品科技，2012，37（1）：204-206.

［18］梁引庫.巨大型蒲公英根脂溶性成分的抗氧化活性及抑菌實(shí)驗(yàn)研究［J］.食品工業(yè)科技，2013，34（12）：153-156.

［19］淵小春，魏希穎，張榮奎，等.兩種培養(yǎng)基對蒲公英體外抑菌效果觀察［J］.陜西師范大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2004，32（2）：93-96.

［20］柯德森，王紅星，巫錦雄，等.乳清蛋白水解程度與抗菌能力的相關(guān)性［J］.食品科學(xué)，2013，34（9）：61-65.

［21］靳春秋，遲海，楊憲時(shí)，等.復(fù)配抑菌劑對假單胞桿菌抑制效果的研究［J］.食品工業(yè)科技，2013，34（20）：169-172.

［22］游玉明，黃琳琳.山胡椒提取物的抑菌活性及其穩(wěn)定性［J］.食品與發(fā)酵工業(yè)，2013，39（5）：116-119.

［23］Magdy W Sabaa，Nadia A Mohamed，Riham R Mohamed，et al.Synthesis，characterization and antimicrobial activity of poly（N-vinyl imidazole）grafted carboxymethyl chitosan［J］. Carbohydrate Polymers，2010，79（4）：998-1005.

［24］Nadia A Mohamed，Nahed A Abd El-Ghany.Synthesis，Characterization，and Antimicrobial Activity of Carboxymethyl Chitosan-Graft-Poly（N-acryloyl，N′-cyanoacetohydrazide）Copolymers［J］.Carbohydrate Chemistry，2012，31（3）：220-240.

［25］王曉英，劉長姣，段連海，等.蒲公英總黃酮提取物在冷鮮豬肉涂膜保鮮中的應(yīng)用［J］.食品科學(xué)，2014，35（6）：214-218.

［26］孫莎，覃宇悅，程春生，等.殼聚糖薄荷提取液復(fù)合保鮮劑對冷卻肉保鮮效果的研究［J］.科學(xué)技術(shù)與工程，2011，11（31）：7697-7700.

Study on antibacterial activity and stability of chitosan and dandelion extract

ZHANG Qiang1，HU Wei-gang2，JIN Xin-wen1，*
（1.Institute of Agro-Products Processing Science and Technology，Xinjiang Academy of Agricultural and Reclamation Science，Shihezi 832000，China；2.Key Laboratory of Agro-Products Processing Science and Technology，Xinjiang Academy of Agricultura and Reclamation Science，Shihezi 832000，China）

The antibacterial activity and stability of the two natural antibacterial agents chitosan and dandelion extracts had been studied.The minimum antibacterial concentration of E.coli，Salmonella，S.aureus which were produced by chitosan and dandelion were determined，and the inhibition rate and inhibition zone diameterand at the MIC had been studied also.And antibacterial activity and stability of the two antibacterial mixtures had been determined too.The results showed that both chitosan and dandelion extract have some antibacterial activity to E.coli，Salmonella，S.aureus，and the mixtures of chitosan and dandelion extract have more antibacterial activity than the two substance had been used alone.The mixtures had been reduced in different temperature，pH and UV irradiation time，and antibacterial activity could be ketp well in 40～60℃，pH5～7 and 20～40 minutes UV irradiation，the results showed that the antibacterial stability of the mixtures was very well.

chitosan；dandelion；antibacterial activity；antibacterial stability

TS254.3

A

1002-0306（2015）20-0150-05

10.13386/j.issn1002-0306.2015.20.023

2015－03－01

張強(qiáng)（1977－），男，碩士，助理研究員，研究方向：農(nóng)產(chǎn)品加工與貯藏保鮮，E-mail：821861127@qq.com。

金新文（1970－），男，博士研究生，副研究員，研究方向：農(nóng)產(chǎn)品加工與貯藏保鮮，E-mail：372557223@qq.com。

新疆農(nóng)墾科學(xué)院科技引導(dǎo)計(jì)劃（50YYD201210）。