電動微分離技術(shù)的研究進展

陳長功等

摘 要 電動微分離技術(shù)是一門近年來快速發(fā)展的技術(shù)，主要包括毛細(xì)管電泳（Capillary electrophoresis， CE）和毛細(xì)管電色譜（Capillary electrochromatography， CEC）。該技術(shù)憑借高效、快速、環(huán)境友好等特點獲得了廣泛的關(guān)注。早期電動微分離技術(shù)存在重現(xiàn)性差、定量受限及聯(lián)用檢測器類型有限等缺點，發(fā)展緩慢。針對這些問題，多種形式的儀器結(jié)構(gòu)改造及新型檢測器的研發(fā)成為電動微分離技術(shù)的研究趨勢。本文主要就近年來電動微分離技術(shù)在儀器結(jié)構(gòu)改造及檢測器研發(fā)方面進行了系統(tǒng)綜述，希望能夠為電動微分離技術(shù)的使用提供一定的指導(dǎo)。

關(guān)鍵詞 電動微分離技術(shù)； 定量毛細(xì)管電泳； 加壓毛細(xì)管電色譜； 綜述

1 引 言

近年來，隨著社會的發(fā)展和進步，食品藥品質(zhì)量控制及環(huán)境監(jiān)控的要求不斷提高，對微流試劑和低毒試劑技術(shù)來替代傳統(tǒng)的需要消耗大量試劑的分析技術(shù)的需求更加迫切[1，2]。同時，隨著生命科學(xué)在全球的興起，樣品的貴重化和微量化也顯得尤為突出，現(xiàn)有的很多分析手段已經(jīng)無法滿足科技工作者對痕量樣品的高效、快速的分析要求，需要具有更高分辨率、更快分離速度和更高靈敏度的分析技術(shù)及儀器[3]。因此，發(fā)展更加高效環(huán)保的微分離技術(shù)便成為大趨勢[4]。電動微分離技術(shù)，如毛細(xì)管電泳（Capillary electrophoresis， CE）和毛細(xì)管電色譜（Capillary electrochromatography， CEC）技術(shù)等，引起了人們越來越多的關(guān)注[5～7]。這類技術(shù)具有高效、快速及環(huán)境友好等優(yōu)勢，但由于傳統(tǒng)電動微分離技術(shù)存在重現(xiàn)性差、定量受限及聯(lián)用檢測器類型有限等缺點，它們的應(yīng)用領(lǐng)域及應(yīng)用范圍受到了很大的限制。近年來，為了提高和拓展這類電動微分離技術(shù)的性能及應(yīng)用范圍，科研工作者投入了大量的精力對儀器結(jié)構(gòu)進行了改造并開發(fā)了多種新型檢測器。

本文將針對近年來電動微分離技術(shù)在儀器結(jié)構(gòu)改造及檢測器開發(fā)進行系統(tǒng)綜述，期望能夠為電動微分離技術(shù)的使用及發(fā)展提供指導(dǎo)。

2 儀器結(jié)構(gòu)改進

傳統(tǒng)的電動微分離儀器主要由進樣裝置、微流溶劑輸送裝置、微流控制裝置、高壓電源、毛細(xì)管柱、檢測器等組成，各個部件均需要通過不斷地優(yōu)化和改進，才能使得電動微分離技術(shù)呈現(xiàn)出高柱效、高分辨率、高選擇性及快速分離的優(yōu)勢。近年來，為了進一步提高微電動分離技術(shù)的穩(wěn)定性、精密度、靈敏度和實用性，新型高精度定量進樣裝置、自動進樣裝置、微流控制方式以及毛細(xì)管柱控溫系統(tǒng)的研發(fā)都獲得了長足進展。

2.1 全自動高精度定量毛細(xì)管電泳

CE僅依靠電滲流（Electroosmotic flow， EOF）的驅(qū)動來進行離子型物質(zhì)的分離，中性物質(zhì)無法得到分離。而且傳統(tǒng)的“蘸取式”進樣方法無法進行定量分析。閆超等[8]研制了全自動高精度定量毛細(xì)管電泳儀（Quantitative capillary electrophoresis， qCE），結(jié)構(gòu)如圖1。該設(shè)備既能和UV聯(lián)用，也能與LIF等檢測器聯(lián)用， 并具有如下優(yōu)點：（1） 自動進樣器通過10 nL的定量閥實現(xiàn)系統(tǒng)的準(zhǔn)確定量，與液流分配系統(tǒng)的協(xié)作運行實現(xiàn)了該系統(tǒng)從取樣、進樣、沖洗管路以及毛細(xì)管預(yù)處理等過程的全面自動化。自動進樣過程也極大地提高了分析時間的重現(xiàn)性。（2） 自主研制的柱溫箱，可實現(xiàn)4℃～40℃范圍的控溫。有效降低了焦耳熱的影響，改善該系統(tǒng)的定量重復(fù)性和分離效率。（3） 成功引入電隔離槽裝置，將定量閥隔離于電場之外，提高了系統(tǒng)的安全性、可靠性和穩(wěn)定性。并用該系統(tǒng)進行了胞嘧啶、脫氧尿苷、腺苷、尿嘧啶、尿苷及肌苷這6種核苷及堿基類物質(zhì)的分析，保留時間的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）<0.6%，峰面積的RSD在0.5%～3%之間，表明該系統(tǒng)改善了傳統(tǒng)電泳的痼疾，定性和定量分析重復(fù)性可達到FDA的要求，分析結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

2.2 加壓毛細(xì)管電色譜

毛細(xì)管電色譜（CEC）是依靠電滲流（Electroosmotic flow， EOF） 的推動力和兩相間分配系數(shù)的不同分離極性和中性物質(zhì)，但在分析過程中容易發(fā)生干柱和氣泡現(xiàn)象。為了克服傳統(tǒng)CEC的缺陷，引入了液相色譜溶劑輸送模塊，提出了加壓毛細(xì)管電色譜（Pressurized capillary electrochromatography， pCEC）的概念。pCEC采用了壓力流和電滲流的雙驅(qū)動，柱效介于HPLC和CEC之間[9]。Yan 等推出了TriSepTM-2000系統(tǒng)，實現(xiàn)了pCEC與紫外檢測器的聯(lián)用，它通過兩個微流泵來輸送溶液并且經(jīng)過混合閥混合，在毛細(xì)管色譜柱進樣端提供一定的壓力，二元微流泵系統(tǒng)可由程序來控制其中兩種流動相的混合比例，完成溶劑的梯度洗脫。整個系統(tǒng)由于有壓力和電壓兩個參數(shù)共同作用來調(diào)節(jié)分離，拓寬了它的分離能力和應(yīng)用范圍，使其能被用在分析復(fù)雜樣品的領(lǐng)域。

最近，該研究組又推出了一款新型Trisep-2100 pCEC 系統(tǒng)（圖2），其對高效微流電色譜體系進行了柱溫箱、四通的優(yōu)化及納升級旋轉(zhuǎn)進樣閥的使用，進一步提升了pCEC進樣的準(zhǔn)確度。采用該系統(tǒng)進行了植物油中沒食子酸丙酯、叔丁基對苯二酚、丁基羥基茴香醚、二叔丁基對甲酚4種抗氧劑的測定[10]，8 min實現(xiàn)分離，樣品的加標(biāo)回收率在93.5%～108.0%之間，RSD為0.3%～1.3%，結(jié)果穩(wěn)定可靠。

3 聯(lián)用檢測器的研究進展

近年來，各類電動微分離技術(shù)憑借高效、快速、溶劑及樣品消耗少等優(yōu)勢獲得了廣泛的關(guān)注和發(fā)展，但是其本身固有的一些不足，如毛細(xì)管色譜柱內(nèi)徑窄小、檢測靈敏度低、樣品檢測種類受限等，使得研制開發(fā)新型高效的各類檢測器成為必然的發(fā)展趨勢。據(jù)統(tǒng)計，目前已發(fā)展的電動微分離儀器聯(lián)用檢測器主要包括：紫外-可見吸收檢測器（UV/Vis）、激光誘導(dǎo)熒光檢測器（LIF）、電化學(xué)檢測器（ECD）、化學(xué)發(fā)光檢測器（CL）、與核磁共振儀（NMR）聯(lián)用、與質(zhì)譜儀（MS）聯(lián)用、微型蒸發(fā)光檢測器（μELSD）等。下面將分類進行介紹：

3.1 紫外-可見吸收檢測器 （Ultraviolet/ visible absorption detector， UV/Vis）

UV/Vis吸收檢測器結(jié)構(gòu)簡單，靈敏度高、噪音低、線性范圍寬，具有很好的適用性，是電動微分離技術(shù)最常用的一種檢測器。但UV/Vis只適合具有紫外或可見光吸收基團的物質(zhì)，對紫外吸收差的化合物靈敏度低，檢出限一般為106 mol/L。UV/Vis檢測器滿足不了痕量分析的要求。為了提高電動微分離技術(shù)的檢測靈敏度，可以采用優(yōu)化檢測波長、直接激光誘導(dǎo)熒光柱上檢測、紫外光催化觸發(fā)化學(xué)反應(yīng)檢測[11，12]等手段。

3.2 激光誘導(dǎo)熒光檢測器（Laser induced fluorescence detector， LIF）

LIF檢測器最早于上世紀(jì)70年代提出，是目前檢測靈敏度最高的一種檢測器，在超痕量檢測和快速分離中具有顯著優(yōu)勢。1995年，Yan等[13]首次將CEC與LIF聯(lián)用，使用257 nm的氬離子激光源，快速分離測定了16種痕量多環(huán)芳烴，柱效高達6×105塔板數(shù)/m。Rebscher 等[14]考察了“柱上”與“在柱”兩種不同方式，前者在檢出限和區(qū)帶寬度效果要優(yōu)于后者。雖然經(jīng)歷了半個多世紀(jì)的發(fā)展，激光波長的選擇和檢測窗口校準(zhǔn)等方面的仍有很大的局限，這在一定程度上限制了LIF檢測器的應(yīng)用范圍。為了解決這個問題，閆超等[15]又研制了一種可變波長的新型LIF檢測器（圖3），有4個波長（375， 473， 561和638 nm）可供選擇。利用半導(dǎo)體光纖激光器，設(shè)計了一種激光準(zhǔn)直及位置可視化校準(zhǔn)裝置，實現(xiàn)了激光源位置、二向色鏡和濾光片組的方便更換，提高了新型LIF檢測器的重復(fù)性和安全性，大大拓展了其應(yīng)用范圍。結(jié)合這種新型可變波長LIF檢測器，采用pCEC系統(tǒng)，成功實現(xiàn)了花生醬樣品中4種黃曲霉毒素的分離檢測，驗證了這種可變波長LIF檢測器的實用性及可靠性[16]。

與紫外檢測器相比，LIF檢測器的適用范圍較窄； 影響分析靈敏度的因素較多，例如熒光淬滅、背景熒光等。

3.3 電化學(xué)檢測器 （Electrochemical detector， ECD）

ECD檢測器的原理是化合物被氧化或還原能產(chǎn)生正比于待測化合物濃度的電流，一般在特殊情況下使用，主要用于測定化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定的離子，通常只有容易氧化或還原的電活性物質(zhì)才可被檢測，有高含量的氯化物、硫酸鹽共存時，其它離子的檢測也不受干擾，選擇性非常高。而且還是一類靈敏度較高的檢測器。檢出限可達pg～ng 級，適合復(fù)雜體系（如體液、神經(jīng)遞質(zhì)、組織勻漿等）的電活性物質(zhì)的檢測。安培檢測器 （Amperometric detector， AD） 是基于在電極表面上發(fā)生氧化或還原反應(yīng)產(chǎn)生電流響應(yīng)與其電活性物質(zhì)濃度成比例而建立的， AD 是與CEC聯(lián)用中最常使用的檢測器。根據(jù)有無隔離電場，分為離柱和在柱檢測兩種方式。Abdelhader等[17]首次進行了 CEC-AD 聯(lián)用實驗。Liu 等[18]構(gòu)建了柱端式 pCEC-ED 系統(tǒng)，研制了自對準(zhǔn)式電化學(xué)檢測池，能自動實現(xiàn)電極和毛細(xì)管出口的對準(zhǔn)操作，極大地提高了實驗效率和重現(xiàn)性。Liu等[19]開發(fā)了一種 pCEC 在柱末端與 AD 相連接，在7 min內(nèi)可以快速高效的分離辣椒中添加的4種蘇丹紅染料。通過對系統(tǒng)進行改進，分離出雞蛋和牛奶等樣品中的5種酚類雌激素、氯酚、苯酚[20，21]。Li 等[22]進行了聯(lián)吡啶釕電化學(xué)電極聯(lián)用，在 pH 3.5～7.0范圍內(nèi)，可使脯氨酸、腐胺、精胺、亞精胺達到基線分離，檢出限均低于2.0 μmol/L。Lin 等[23]開發(fā)了 pCEC 與化學(xué)發(fā)光檢測器柱上聯(lián)用，通過在堿性溶液中魯米諾與過氧化氫在電極上形成的Cu2+-氨基酸絡(luò)合物的增強效應(yīng)來進行氨基酸的分離，可使L-組氨酸、L-蘇氨酸、L-絡(luò)氨酸達到基線分離。Thanh 等[24]進行了 CEC-柱上非接觸電導(dǎo)檢測器聯(lián)用進行非 UV 吸收樣品的檢測和定性工作，可在10 min內(nèi)分離12種氨基酸。

安培檢測器的靈敏度高，檢出限可達10～1012 g； 線性范圍較寬，一般為104～105。但是其選擇性受到限制，通常只對電活性物質(zhì)有響應(yīng)；對流動相的溫度、速度、pH 值等因素的變化比較敏感，其中溶解的氧會干擾測定；使用中，電極需經(jīng)常清洗和更換。

3.4 化學(xué)發(fā)光檢測器（Chemiluminescence detector， CL）

CL檢測器的光學(xué)系統(tǒng)由反應(yīng)池、檢測器和讀數(shù)裝置3部分組成，結(jié)果簡單，無需外加光源和分光系統(tǒng)，背景噪聲低，避免了雜散光和光源不穩(wěn)定性的影響，因而具有很高的檢測靈敏度（10～10-10 mol/L）?；瘜W(xué)發(fā)光檢測器具有“化學(xué)窄帶”效應(yīng)，即在樣品充分?jǐn)U散到本底溶液前就已產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光信號，適合于小體積在線快速檢測，不會造成明顯的區(qū)帶展寬。但CL選擇性較差，為了得到理想的分離效果和靈敏度及獲得穩(wěn)定的分析體系，需首先考察待測物和CL 試劑的混合模式以及檢測體積，其次是用于分離的緩沖液與CL 試劑 pH 值的兼容性及混合流體的穩(wěn)定性。一般首選柱后混合模式，因其能確保分離后組分在檢測區(qū)域仍能保持較好的分離環(huán)境。柱后流體混合接口裝置可分為合并流式、同軸流式、和貯液池式等。根據(jù)檢測區(qū)與分離電壓提供區(qū)是否隔離，接口裝置又可分為在柱式、離柱式和柱端式等。Lin 等[25]設(shè)計了離柱同軸流式的 μHPLC/pCEC-CL 系統(tǒng)，通過分離魯米諾和 N-4-氨基丁基-N-乙基異魯米諾，結(jié)果表明， 由于“化學(xué)窄帶”效應(yīng)，離柱同軸流式 CL 檢測接口對組分區(qū)帶展寬的影響可以忽略。此外，與在柱或離柱式檢測接口相比，柱端式檢測池具有結(jié)構(gòu)簡單、便于操作等優(yōu)點，尤其柱后無需引入 CL 試劑，解決了因柱后 CL 試劑流速不穩(wěn)而導(dǎo)致體系穩(wěn)定性和重現(xiàn)性下降等問題。但是，柱端式檢測池發(fā)光反應(yīng)時間不足10 s，光背景高，檢測結(jié)果的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性差；可被利用的發(fā)光試劑較少。

3.5 與核磁共振儀（Nuclear magnetic resonance detector， NMR）聯(lián)用

NMR是化合物結(jié)構(gòu)鑒定的強有力的工具。Pusecker 等[26]設(shè)計了一套 CEC-NMR 系統(tǒng)，利用該系統(tǒng)測定了連續(xù)流和停流模式下含有對乙酰氨基酚尿液的 1D 1H NMR 和2D 1H-1H TOCSY 數(shù)據(jù)。Klaus 等[27]設(shè)計了可與CE、CEC等聯(lián)用的接口裝置，采用連續(xù)流和停流兩種模式，尤其是停留模式可以有效避免信號峰的重疊，提高分辨率，實現(xiàn)了異構(gòu)體、同系物組分的分離與鑒定。Petra 等[28]設(shè)計了一種僅施加電壓于分離柱的縮短分析時間的聯(lián)用裝置。

3.6 與質(zhì)譜儀（Mass spectrometry，MS）聯(lián)用

MS是一種選擇性高、應(yīng)用面廣的檢測器，具有靈敏度高、準(zhǔn)確性高等特點，而且有較強的定性能力。根據(jù)離子化操作模式的不同，離子源可分為大氣壓化學(xué)離子源（Atmospheric pressure chemical ionization， APCI）、連續(xù)流動快速原子轟擊源（Continuous flow fast atom bombardment， CFFAB）、電噴霧離子源（Electrospray ionization， ESI）等。

將 CEC柱效高、樣品試劑用量少等特點與 MS 能提供精確分子量和結(jié)構(gòu)信息、靈敏度高以及專屬性強等功能相結(jié)合，接口技術(shù)是關(guān)鍵，目前有在線聯(lián)用和離線聯(lián)用兩種模式。CEC-MS離線聯(lián)用的關(guān)鍵是對已分離樣品的有效收集，并不涉及真正意義上的聯(lián)用接口技術(shù)。與離線聯(lián)用相比，CEC-MS在線聯(lián)用具有樣品損失少、自動化程度高、分析速度快等優(yōu)點，其應(yīng)用要比離線聯(lián)用廣泛。CEC-MS 在線聯(lián)用需要設(shè)計合適的接口，能夠?qū)⒁逊蛛x的樣品全部轉(zhuǎn)移到質(zhì)譜儀中，同時實現(xiàn)樣品快速高效的離子化。下面對 CEC-MS聯(lián)用進行介紹。

CFFAB-MS提供了一種液相分離與 FAB-MS 相連的方式。在首個 CEC和CFFAB-MS相連的離子源中，同軸 CFFAB 探針適合納流分離[29～31]。CEC-CFFAB-MS 接口的主要優(yōu)勢是能夠以高靈敏度和低檢出限分離和檢測不同極性分子的 ＼[M+H＼]+或 ＼[M-H＼] 離子，劣勢是化學(xué)背景較高，特別是在m/z<400的情況下。

與 ESI 相比，APCI 離子化效率高，樣品分子在ESI 中的絕對離子化效率只有0.01%～0.1%，而 APCI 離子化的起始離子化效率幾乎是100%。但是，現(xiàn)實中由于制備 CEC-APCI-MS 相連的毛細(xì)管重現(xiàn)性差，造成 CEC-APCI-MS 接口應(yīng)用較少。Norton 等[32]設(shè)計了在線聯(lián)用的 CEC-ESI-MS 和 CEC-APCI-MS，并用于甜菜堿型和兩性離子表面活性劑的分析。與ESI相比，APCI 的檢出限更低，相差3個數(shù)量級。Cheng 等[33]利用CEC-APCI-MS裝置，通過簡單進樣和在線富集測定海產(chǎn)品中16種多環(huán)芳烴，檢出限均低于50 ng/g。CEC-ESI-MS 接口有3種：（1）無鞘流接口；（2）同軸鞘流接口；（3）液接接口。無鞘流接口中不使用鞘流液，通過噴霧毛細(xì)管的尖端鍍金屬來形成電接觸。直接電極接口也是一種特殊類型的無鞘流接口，將金導(dǎo)線放置在毛細(xì)管出口處來實現(xiàn)電接觸，這種類型的接口克服了鞘流接口的區(qū)帶稀釋問題[34，35]。由于難以改變離子化程度來增加 ESI-MS 的靈敏度和尖端鍍金處的不穩(wěn)定型，非鞘流接口通常用于低流速離子源或納噴源。鞘流接口技術(shù)[36]優(yōu)點在于通過提高樣品流速使得噴霧更加穩(wěn)定，有利于形成穩(wěn)定的電流回路，同時可改變 CEC 運行緩沖液的組成，使其滿足 ESI 源的檢測要求，但靈敏度和重現(xiàn)性比較差。另外鞘液的引入會稀釋樣品，使檢測靈敏度下降。Masaru等[37]應(yīng)用同軸 CEC-ESI-MS分析了肝細(xì)胞癌中帶電和電中性物質(zhì)，檢出33個峰，鑒定了18種化合物。液接接口利用三通建立電接觸并為緩沖液提供額外的液流，毛細(xì)管色譜柱和噴針處于三通中相對的位置。D′Orazio等[38]運用液接納流 ESI 接口搭建了 CEC-ESI-MS 平臺用于分析殺蟲劑和藥物異構(gòu)體。他們又設(shè)計了一種 T 形聚合物的 CEC 與 MS 的壓力微流接口[39]，該接口價格低，尺寸小，易于使用。Simpson 等[40]構(gòu)建了CEC 與離子阱 TOF-MS 相連的兩步激光 MS 接口，塔板數(shù)平均可達到每米94000，萘的檢出限為500 nmol/L。

閆超等[41]設(shè)計了pCEC-ESI-MS聯(lián)用系統(tǒng)包括二元梯度微流液相泵、六通進樣閥、四通分流閥、±18 kV高壓電源，以及毛細(xì)管流通池支架。樣品被注入到一個外部的進樣環(huán)，然后隨流動相流經(jīng)四通閥，經(jīng)四通閥分流后，樣品隨流動相進入毛細(xì)管柱。毛細(xì)管柱的入口端連接到四通閥的一個接口，可以施加正電壓或負(fù)電壓，而柱末端通過零死體積的不銹鋼兩通連接到質(zhì)譜的電噴霧源，并通過該不銹鋼兩通接地。為了避免高電壓對液相泵的影響，兩個泵頭也通過導(dǎo)線接地。結(jié)構(gòu)見圖4。Wu 等[42]運用該裝置進行了肺癌尿液代謝組學(xué)研究，pCEC獨特的分離機制使得該系統(tǒng)獲得了很高的分離效率，并鑒定了一些特殊的代謝產(chǎn)物，如可將谷氨酰胺結(jié)合物的質(zhì)譜碎片峰和共流出峰區(qū)分開。結(jié)果表明，pCEC-ESI-MS方法將會在未來的代謝組學(xué)研究中發(fā)揮重要作用。

3.7 蒸發(fā)光散射檢測器（Evaporative light-scattering detector， ELSD）

ELSD檢測器是一種通用型質(zhì)量檢測器，主要基于將色譜柱洗脫液霧化形成氣溶膠，然后在加熱的漂移管中將溶劑蒸發(fā)，剩余不揮發(fā)性溶質(zhì)顆粒在光散射檢測池中得到檢測。ELSD具有很高的通用性，不受檢測物質(zhì)本身結(jié)構(gòu)的限制，適用于絕大多數(shù)不揮發(fā)和半揮發(fā)物質(zhì)的分析檢測，尤其適用于氨基酸、糖類、脂類等化合物的分析。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，ELSD檢測器對峰展寬的影響很小，因此非常適用于微分離技術(shù)。周文莉等[43]自主開發(fā)研制了一種微型ELSD檢測器（μELSD）（圖5），對常規(guī)ELSD的霧化、蒸發(fā)及檢測部分進行了整體微型化設(shè)計，可以實現(xiàn)與電動微分離技術(shù)的聯(lián)用，分離檢測了3種常見甜味劑，體現(xiàn)了分析時間短、溶劑消耗量少、樣品需求量小的優(yōu)點。利用pCEC-μELSD聯(lián)用技術(shù)測定了川貝枇杷糖漿中桔梗皂苷D、貝母辛、齊墩果酸、西貝素、貝母甲素和貝母乙素6種有效成分的含量，線性范圍達4個數(shù)量級，檢出限達 pg 級，該裝置簡便、快速、可靠，方法精密度、重復(fù)性和穩(wěn)定性良好。高紅秀等[44]利用此pCEC-μELSD聯(lián)用系統(tǒng)，測定了中藥提取物注射用血塞通（凍干）中的5種皂苷類化合物，并對其流動相體系、梯度洗脫條件、霧化載氣流速、蒸發(fā)溫度及施加電壓等參數(shù)進行了優(yōu)化，考察了系統(tǒng)的實用性和穩(wěn)定性。

ELSD檢測器是通用的質(zhì)量檢測器，響應(yīng)值與化合物粒子的大小、形狀和質(zhì)量有關(guān)；溶劑的揮發(fā)消除了前溶劑峰的干擾，可進行梯度洗脫，基線平穩(wěn)，分析時間短；與紫外檢測器相比，檢測范圍寬。其缺點是流動相須采用易揮發(fā)的溶劑；使用揮發(fā)性的緩沖溶液的濃度不宜過高。

4 展 望

隨著基因組學(xué)、代謝組學(xué)、蛋白組學(xué)的飛速發(fā)展，樣品日益復(fù)雜化和微量化，對分析儀器提出了更高的要求。高效的微流電動分離儀器，如qCE和pCEC，以其優(yōu)越的性能可以實現(xiàn)快速、穩(wěn)定、高效的分離，滿足當(dāng)前復(fù)雜和微量化樣品的分析需求；其次是各種檢測儀的配備，是適應(yīng)不同類型樣品分離的關(guān)鍵。如LIF適用于痕量樣品，ELSD具有通用性，而質(zhì)譜儀可以給出分子量和結(jié)構(gòu)信息，具有極強的定性能力。總之，高效的微流電動分離儀器和各種不同檢測儀的聯(lián)用將為科技工作者提供一種全新的手段，也為未來生物醫(yī)藥、生命科學(xué)、食品安全和環(huán)境保護等領(lǐng)域的發(fā)展提供有力的保障。

References

1 Miguel D I G. Trends Anal. Chem.， 2010， 29（7）： 577

2 Javier M， Salvador G， Miguel D I G. Trends Anal. Chem.， 2010， 29（7）： 578-591

3 Hai Y X， You Z H. Trends Anal. Chem.， 2010， 29（7）： 629-635

4 Yan C. Contemporary Microscale Separation Technology. New York： HNB Publishing， 2013

5 Acevska J， Stefkov G， Petkovska R. Anal. Bioanal. Chem.， 2012， 403（4）： 1117-1129

6 Aturki Z， D′Orazio G， Rocco A， Fanali S. Electrophoresis， 2011， 32（9）： 2602-2608

7 Zhao J， Hu D J， Lao K， Yang Z M， Li S P. Electrophoresis， 2014， 35（1）： 205-224

8 YAN Chao， YAO Dong， XU Yuan， LING Bang-Zan. China Patent， CN 201420538174， 2014

閻 超， 姚 冬， 徐 媛， 凌邦瓚. 中國專利， CN201420538174， 2014

9 Dorothee W， Karin C， Volker S. Electrophoresis， 2001， 22（12）： 2600-2605

10 WANG Xiao-Xi， WANG Yan， LI Jing， RU Xin YAN Chao. Science and Technology of Food Industry， 2015， 36（9）： 273-277

王曉曦， 王 彥， 李 靜， 茹 鑫， 閆 超. 食品工業(yè)科技， 2015， 36（9）： 273-277

11 Emily F H， Andreas J Z， Miroslav M， Paul R H. Electrophoresis， 2001， 22（7）： 1273-1281

12 Chena X J， Zhao J， Meng Q， Li S P， Wang Y T. J. Chromatogr. A， 2009， 1216（43）： 7329-7335

13 Yan C， Dadoo R， Zhao H. Anal. Chem.， 1995， 67（13）： 2026-2029

14 Rebscher H， PyellU. J. Chromatogr. A， 1996， 737（2）： 171-180

15 YAN Chao， RU Xin， WAN Qing-Yun， WANG Yu-Hong， YAO Fan， YAO Dong. China Patent CN104483297A， 2014

閻 超， 茹 鑫， 萬青云， 王玉紅， 姚 凡， 姚 冬. 中國專利， CN104483297A， 2014

16 WAN Qing-Yun， RU Xin， WANG Xiao-Xi， WANG Yan， YAN Chao. Chinese J. Anal. Chem.， 2015， 43（7）： 1063-1068

萬青云， 茹 鑫， 王曉曦， 王 彥， 閆 超. 分析化學(xué)， 2015， 43（7） ： 1063-1068

17 Abdelkader H， John H T L. Electrophoresis， 2000， 21（7）： 1395-1404

18 Liu S F， Wu X P， Xie Z H， Lin X C， Guo L Q， Yan C， Chen G N. Electrophoresis， 2005， 26（12）2342-2350

19 Liu S F， Zhang X， Lin X C Wu X P， Fu F F， Xie Z H. Electrophoresis， 2007， 28（11）： 1696-1703

20 Wu M W， YuanX W， Wu X H， Lin X C， Xie Z H. Electrophoresis， 2010， 31（6）： 1011-1018

21 Lu L X， Chen Y K， Yu X W， Wu X H， Tang F X， Wu X P. Electrophoresis， 2013， 34（14）： 2049-2057

22 Li H J， Liu X Q， Niu W X， Zhu S Y， Fan L S， Shi L H， Xu G B. Electrophoresis， 2008， 29（22）： 4475-4481

23 Lin Z， Xie Z H， Lu H X， Lin X C， Wu X P， Chen G N. Anal. Chem.， 2006， 78（15）： 5322-5328

24 Thanh D M， Hung V P， Peter C H. Anal. Chim. Acta.， 2009， 653（2）： 228-233

25 Lin Z， Lin J， Wu X P， Lin X C， Xie Z H. Electrophoresis， 2008， 29（2）： 401-409

26 Pusecker K， Schewitz J， Gfrorer P， Tseng L H， Albert K. Anal. Commun.， 1998， 35（7）： 213-215

27 Klaus P， Jens S， Petra G， Li H T， Klaus A， Ernst B. Anal. Chem.， 1998， 70（15）： 3280-3285

28 Petra G， Li-H T， Erdmann R， Klaus A， Ernst B. Anal. Chem.， 2001， 73（14）： 3234-3239

29 Deterding L J， Moseley M A， Tomer K B， Jorgenson J W. Anal. Chem.， 1989， 61（22）： 2504-2511

30 Moseley M A， Deterding L J， Tomer K B， Jorgenson J W. J. Chromatogr. A ， 1989， 480： 197- 209

31 Moseley M A， Deterding L J， Tomer K B， Jorgenson J W. Anal. Chem.， 1991， 63（141）： 467-1473

32 Norton D， Zheng J， Danielson N D， Shamsi S A. Anal. Chem.， 2005， 77（21）： 6874-6886.

33 Cheng Y J， Huang S H， Chiu J Y， Liu W L， Huang H Y. J. Chromatogr. A ， 2013， 1313（SI）： 132-138

34 Lord G A， Gordon D B， Myers P， King B W. J. Chromatogr. A， 1997， 768（1）： 9-16

35 J. Fred Banks. Electrophoresis， 1997， 18（12-13）2： 255-2266

36 Gargi C， Csaba H， Fred B. J. Chromatogr. A， 1998， 828（1-2）： 469-480

37 Masaru K， Yuko O， Masashi S， Masakuni D， Toshimasa T. J. Chromatogr. A， 2009， 1216（47）： 8277-8282

38 D′Orazio G， Fanali S. J. Chromatogr. A， 2010， 1217（25）： 4079-4086

39 D′Orazio G， Fanali S. J. Chromatogr. A， 2013， 1317（SI） ： 67-76

40 Simpson D C， Yates A J， Knox J H， Smith L. Int. J. Mass Spectrom.， 2014， 363： 8-15

41 YAN Chao， CHEN Chang-Gong， WANG Yan， GU Xue， WU Qian， YU Xin-Wei， PAN Zhe-Min， HOU Yu-Jie. China Patent， ZL20425422.9， 2014

閆 超， 陳長功， 王彥， 谷 雪， 吳 謙， 余欣尉， 潘喆敏， 侯玉潔. 中國專利， ZL 2 0425422.9， 2014

42 Wu Q， Yu X W， Wang Y， Gu X， Ma X Q， Lv W， Chen Z， Yan C. Electrophoresis， 2014， 35（17）： 2470-2478

43 ZHOU Wen-li， KAN Wen-bin， WANG Yu-hong， ZHANG Lin， WANG Yan， YAN Chao. Journal of Instrumental Analysis， 2015， 34（3）： 321 -327

周文莉， 闞文彬， 王玉紅， 張 琳， 王 彥， 閻 超. 分析測試學(xué)報， 2015， 34（3）： 321-327

44 GAO Hong-Xiu， ZHOU Wen-Li， WANG Yu-Hong， LI Peng， GU Xue， WANG Yan， LI Jing， YAN Chao. Chinese J. Anal. Chem.， 2014， 42（5）： 766-772

高紅秀， 周文莉， 王玉紅， 李 鵬， 谷 雪， 王 彥， 閆 超. 分析化學(xué)， 2014， 42（5）： 766-772