正交試驗(yàn)優(yōu)選馬鞭草中總?cè)扑岬奶崛」に?/h1>
2015-11-01 03:08:34陳改敏龔如東張迪
食品研究與開發(fā) 2015年17期
陳改敏，龔如東，張迪
（南陽醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，河南南陽473061）
正交試驗(yàn)優(yōu)選馬鞭草中總?cè)扑岬奶崛」に?/p>
陳改敏，龔如東，張迪
（南陽醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，河南南陽473061）
優(yōu)選馬鞭草中總?cè)扑岬奶崛」に?。采用紫外分光光度法測(cè)定總?cè)扑岷?；以總?cè)扑岬寐蕿橹笜?biāo)，采用單因素試驗(yàn)考察乙醇濃度、料液比、提取時(shí)間、提取次數(shù)的影響，在此基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)優(yōu)選馬鞭草中總?cè)扑岬奶崛」に?。最佳提取工藝?0%乙醇35倍量超聲提取3次，每次30 min。在此條件下，總?cè)扑岬寐?1.91 mg/g。該工藝穩(wěn)定可行，為馬鞭草中三萜酸的開發(fā)利用提供參考。
馬鞭草；總?cè)扑?；正交試?yàn)
馬鞭草作為傳統(tǒng)中藥，藥用部分為其全草或帶根全草，具有活血散瘀、解毒、利水、退黃、截瘧等功效，用于治療痛經(jīng)經(jīng)閉、水腫、黃疸、瘧疾等病癥［1］。馬鞭草主要成分有黃酮類、苯丙素類、環(huán)烯醚萜類、三萜類、甾體類、糖苷類、揮發(fā)性成分和有機(jī)酸類等［2-4］。近年來，科研工作者對(duì)三萜酸的藥理作用研究較多，三萜酸的藥理作用主要為抗炎、鎮(zhèn)咳、降血脂、降血糖、抗腫瘤［5-7］，生物活性廣泛。目前，馬鞭草中總?cè)扑崽崛」に圂r見報(bào)道，本試驗(yàn)參照文獻(xiàn)［8-10］，采用超聲波提取、紫外可見分光光度法進(jìn)行總?cè)扑岬暮繙y(cè)定，通過單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)優(yōu)化提取工藝，為馬鞭草中三萜酸的開發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。
1材料
TU-1901型雙光束紫外分光光度計(jì)、普析GWAUN2-C-20型超純水機(jī)：北京普析通用儀器有限責(zé)任公司；METTLER-XS105DO萬分之一分析天平：梅特勒-托利多公司；FW-200A型萬能粉碎機(jī)：北京科偉有限責(zé)任公司；KQ-50E型超聲波清洗器：昆山市超聲儀器有限公司；齊墩果酸對(duì)照品：購自上海晶純生化科技股份有限公司，批號(hào)110087；甲醇、乙醇、石油醚均為分析純。
馬鞭草購于河南省藥材公司，經(jīng)南陽醫(yī)專藥學(xué)系姚學(xué)文鑒定為Verbena Officinalis L.全草；除雜后，經(jīng)FW-200A型萬能粉碎機(jī)粉碎過60目篩網(wǎng)，稱取適量樣品置于索氏提取器中，加入3倍體積的石油醚于80℃脫色，40℃烘干備用。
2方法與結(jié)果
2.1供試品溶液的制備
稱取石油醚脫色后粉末2.00 g，置于100 mL具塞錐形瓶中，加入80%的乙醇30 mL，超聲提取2次，每次30 min，過濾，合并濾液減壓濃縮，加入甲醇溶解轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中，定容搖勻，即得。
2.2對(duì)照品溶液的制備
精密稱取齊墩果酸對(duì)照品適量，用甲醇定容于100 mL容量瓶中，配制成濃度為0.120 0 g/L的對(duì)照品溶液，待用。
2.3顯色方法及檢測(cè)波長(zhǎng)的確定
分別精密吸取供試品溶液和對(duì)照品溶液0.2，0.4 mL于10 mL具塞試管中，水浴將溶劑蒸干，加入0.2 mL 5%香草醛-冰醋酸溶液，再加入0.8 mL的高氯酸，充分搖勻，在70℃的水浴中加熱15 min，冰水冷卻，再加入5 mL的冰醋酸，放置20 min后，用紫外可見分光光度計(jì)在400 nm～800 nm范圍內(nèi)進(jìn)行掃描其吸光度。結(jié)果表明，供試品和對(duì)照品溶液均在540 nm處有最大吸收峰，因此選540 nm作為測(cè)定波長(zhǎng)。
2.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
分別精密吸取齊墩果酸對(duì)照品溶液0.0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL置于10 mL具塞試管中，按2.3項(xiàng)下方法顯色，以試劑空白為對(duì)照，用1 cm×1 cm的比色皿在540 nm處測(cè)定吸光度（A）。以齊墩果酸的濃度C為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。線性回歸方程為：y=8.034 02 x+0.032 06，r=0.999 5。
2.5單因素試驗(yàn)
2.5.1乙醇濃度對(duì)總?cè)扑岬寐实挠绊?/p>
準(zhǔn)確稱取6份經(jīng)石油醚脫色后馬鞭草粉末2.00 g，以料液比1∶35（g/mL），提取時(shí)間30 min，提取次數(shù)2次，設(shè)計(jì)乙醇濃度分別為40%、50%、60%、70%、80%、90%，考察乙醇濃度對(duì)總?cè)扑岬寐实挠绊懀Y(jié)果如圖1所示。
圖1 乙醇濃度對(duì)總?cè)扑岬寐实挠绊慒ig.1Effect of volume fraction of ethanol on extraction rate of total triterpenoids
乙醇濃度在80%時(shí)，得率達(dá)到最大值，之后隨濃度增加得率反而逐漸減小。所以乙醇濃度為80%時(shí)的提取效果好。故選擇乙醇濃度70%、80%、90%3個(gè)水平進(jìn)行優(yōu)化。
2.5.2料液比對(duì)總?cè)扑岬寐实挠绊?/p>
準(zhǔn)確稱取6份經(jīng)石油醚脫色后馬鞭草粉末2.00 g，以乙醇濃度80%，提取時(shí)間30 min，提取次數(shù)2次，設(shè)計(jì)料液比分別為1∶20、1∶25、1∶30、1∶35、1∶40、1∶50（g/mL），考察料液比對(duì)三萜酸得率的影響，結(jié)果如圖2所示。
圖2 料液比對(duì)總?cè)扑岬寐实挠绊慒ig.2Effect of the ratio of water to materials on extraction rate of total triterpenoids
得率隨著料液比的增加而逐漸增加且趨于平緩。由于提取液體積的增大會(huì)增加蒸發(fā)濃縮的工作量，為降低分離純化的成本，因此選擇料液比1∶30、1∶35、1∶40（g/mL）3個(gè)水平進(jìn)行優(yōu)化。
2.5.3提取時(shí)間對(duì)總?cè)扑岬寐实挠绊?/p>
準(zhǔn)確稱取5份經(jīng)石油醚脫色后馬鞭草粉末2.00 g，以料液比1∶40（g/mL），乙醇濃度80%，提取次數(shù)2次，設(shè)置20、30、40、50、60 min不同的提取時(shí)間，研究提取時(shí)間對(duì)得率的影響，結(jié)果如圖3所示。
圖3 提取時(shí)間對(duì)總?cè)扑岬寐实挠绊慒ig.3Effect of extracting time on extraction rate of total triterpenoids
在40 min時(shí)，總?cè)扑岬寐首畲?，在此之后得率隨時(shí)間的延長(zhǎng)而逐步下降。故選擇提取時(shí)間30、40、50 min 3個(gè)水平進(jìn)行優(yōu)化。
2.5.4提取次數(shù)對(duì)總?cè)扑岬寐实挠绊?/p>
準(zhǔn)確稱取5份經(jīng)石油醚脫色后馬鞭草粉末2.00 g，以料液比1∶40g/mL，乙醇濃度80%，提取時(shí)間40min，提取不同次數(shù)，提取次數(shù)與得率的關(guān)系如圖4所示。
圖4 提取次數(shù)對(duì)總?cè)扑岬寐实挠绊慒ig.4Effect of extraction times on extraction rate of total triterpenoids
隨著提取次數(shù)的增加，得率逐漸增大且趨于平緩，但溶劑的消耗量增大，考慮到效益諸多方面的因素，故選擇提取次數(shù)為1、2、3次3個(gè)水平進(jìn)行優(yōu)化。
2.6正交試驗(yàn)
在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，我們選取乙醇濃度、料液比、提取時(shí)間、提取次數(shù)4個(gè)因素為優(yōu)化條件，用正交表L9（34）設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)。因素水平見表1，試驗(yàn)結(jié)果見表2，方差分析結(jié)果見表3。
表1 正交試驗(yàn)因素及水平表Table 1Factors and levels of orthogonal experiments
表2 正交試驗(yàn)結(jié)果Table 2Result of orthogonal experiments
由表2、表3可知，各因素對(duì)馬鞭草中總?cè)频寐实挠绊懘笮〈涡驗(yàn)椋禾崛〈螖?shù)＞料液比＞乙醇濃度＞提取時(shí)間。以極差最小的提取時(shí)間為誤差項(xiàng)進(jìn)行方差分析，結(jié)果顯示提取次數(shù)對(duì)馬鞭草總?cè)扑岬寐视酗@著影響，因而確定最佳的提取工藝條件為A2B2C1D3，即乙醇濃度80%，料液比1∶35（g/mL），提取時(shí)間30min，提取次數(shù)3次。
表3 方差分析結(jié)果Table 3Results of variance analysis
2.7驗(yàn)證試驗(yàn)
按照選定的條件A2B2C1D3重復(fù)試驗(yàn)3次，得率分別為21.89、21.90、21.95 mg/g，平均值為21.91 mg/g，說明上述提取工藝是合理的。
3小結(jié)
本文在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行了正交試驗(yàn)，確定了超聲波法提取馬鞭草中總?cè)扑岬淖罴压に?；本試?yàn)采用紫外分光光度法進(jìn)行測(cè)定，操作方便，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確、快速，簡(jiǎn)單易行。本文首次研究了馬鞭草中總?cè)扑岬暮繙y(cè)定及提取工藝，為馬鞭草中三萜酸的開發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。
［1］中國藥典委員會(huì).中國藥典:一部［S］.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:49
［2］任非，段坤峰，付穎，等.馬鞭草鎮(zhèn)咳有效部位化學(xué)成分的研究［J］.中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，2013，33（6）:445-449
［3］陳興麗，孟巖，張?zhí)m桐，等.馬鞭草化學(xué)成分和藥理作用的研究進(jìn)展［J］.河北醫(yī)藥，2010，32（15）:2089-2091
［4］田菁，趙毅民，欒新慧.馬鞭草化學(xué)成分的研究［J］.中國中藥雜志，2005，30（4）:268-269
［5］鞠建華，周亮，林耕，等.枇杷葉中三萜酸類成分及其抗炎、鎮(zhèn)咳活性研究［J］.中國藥學(xué)雜志，2003，38（10）:752-757
［6］馬路，史大卓，陳可冀，等.山楂總?cè)扑釋?duì)大鼠肝細(xì)胞合成14C-膽固醇及肝細(xì)胞膜HDL受體活性的影響［J］.中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，2009，29（21）:1807-1810
［7］李鋒，王航，薛原楷，等.枇杷葉三萜酸降血糖活性實(shí)驗(yàn)研究［J］.藥物生物技術(shù)，2011，18（4）:328-331
［8］尤努斯江·吐拉洪，木妮熱·依布拉音，吐爾洪·買買提.阿里紅中總?cè)扑岬奶崛」に噧?yōu)選及含量測(cè)定［J］.中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012，18（17）:24-27
［9］張慧，尹永芹，湯文偉，等.鴨腳木皮中總?cè)频奶崛」に噧?yōu)化［J］.中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2014，20（8）:5-7
［10］賴紅芳，鄧秋芬.半仿生法提取雞骨草中總?cè)扑岬墓に噧?yōu)選［J］.中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19（24）:46-48
Optimization of Extraction Technology of Total Triterpenoids from Verbena officinalis L.by Orthogonal Test
CHEN Gai-min，GONG Ru-dong，ZHANG Di
（Nanyang Medical College，Nanyang 473061，Henan，China）
To optimize the extraction technology of total triterpenoids from Verbena officinalis L..The content of total triterpenoids was determined by UV with oleanic as reference；Effects of concentration of extraction solvent，solid-liquid ratio，extraction time and extraction times by taking yield of total triterpenoids as the index，basis on this，extraction technology was optimized by orthogonal test.The optimum extraction technology were as follow：extracted 3 times with 35 times the amount of 80%ethanol，30 min each time.Under these conditions，yield of total triterpenoids from Verbena officinalis L.was 21.91 mg/g.This extraction process was stable and feasible，which provide the reference for the development and utilization of triterpenoids from Verbena officinalis.
Verbena officinalis L.；total triterpenoids；orthogonal test
10.3969/j.issn.1005-6521.2015.17.017
2015-05-04
南陽市科技局項(xiàng)目（2013GG056）
陳改敏（1980—），女（漢），講師，主要從事天然藥物化學(xué)和藥物分析的研究。
猜你喜歡
檸檬馬鞭草不是馬鞭草新青年(2023年12期)2023-12-18 13:43:42 馬鞭草小學(xué)生優(yōu)秀作文(低年級(jí))(2023年3期)2023-04-01 09:50:12 正交試驗(yàn)優(yōu)化馬鞭草中馬鞭草苷和戟葉馬鞭草苷的水提取工藝亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥(2021年6期)2021-06-23 08:54:44 澤瀉原三萜、降三萜和倍半萜的分離及其抗炎活性研究世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化(2021年12期)2021-04-19 12:31:28 天冬中總氨基酸及多糖的提取工藝研究池州學(xué)院學(xué)報(bào)(2017年3期)2017-10-16 01:38:37 佩氏靈芝中三個(gè)新三萜天然產(chǎn)物研究與開發(fā)(2016年1期)2016-06-05 10:29:25 茯苓皮總?cè)频瓮柚苽涔に嚨膬?yōu)化中成藥(2016年4期)2016-05-17 06:08:05 正交試驗(yàn)法優(yōu)化苦豆子總生物堿的超聲提取工藝中國民族民間醫(yī)藥·下半月(2014年4期)2014-09-26 05:23:44 大孔吸附樹脂分離純化蒲公英中總黃酮的工藝研究中國藥業(yè)(2014年12期)2014-06-06 02:17:32 刺梨三萜對(duì)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞增殖的影響食品科學(xué)(2013年13期)2013-03-11 18:24:34
陳改敏，龔如東，張迪
（南陽醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，河南南陽473061）
正交試驗(yàn)優(yōu)選馬鞭草中總?cè)扑岬奶崛」に?/p>
陳改敏，龔如東，張迪
（南陽醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，河南南陽473061）
優(yōu)選馬鞭草中總?cè)扑岬奶崛」に?。采用紫外分光光度法測(cè)定總?cè)扑岷?；以總?cè)扑岬寐蕿橹笜?biāo)，采用單因素試驗(yàn)考察乙醇濃度、料液比、提取時(shí)間、提取次數(shù)的影響，在此基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)優(yōu)選馬鞭草中總?cè)扑岬奶崛」に?。最佳提取工藝?0%乙醇35倍量超聲提取3次，每次30 min。在此條件下，總?cè)扑岬寐?1.91 mg/g。該工藝穩(wěn)定可行，為馬鞭草中三萜酸的開發(fā)利用提供參考。
馬鞭草；總?cè)扑?；正交試?yàn)
馬鞭草作為傳統(tǒng)中藥，藥用部分為其全草或帶根全草，具有活血散瘀、解毒、利水、退黃、截瘧等功效，用于治療痛經(jīng)經(jīng)閉、水腫、黃疸、瘧疾等病癥［1］。馬鞭草主要成分有黃酮類、苯丙素類、環(huán)烯醚萜類、三萜類、甾體類、糖苷類、揮發(fā)性成分和有機(jī)酸類等［2-4］。近年來，科研工作者對(duì)三萜酸的藥理作用研究較多，三萜酸的藥理作用主要為抗炎、鎮(zhèn)咳、降血脂、降血糖、抗腫瘤［5-7］，生物活性廣泛。目前，馬鞭草中總?cè)扑崽崛」に圂r見報(bào)道，本試驗(yàn)參照文獻(xiàn)［8-10］，采用超聲波提取、紫外可見分光光度法進(jìn)行總?cè)扑岬暮繙y(cè)定，通過單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)優(yōu)化提取工藝，為馬鞭草中三萜酸的開發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。
1材料
TU-1901型雙光束紫外分光光度計(jì)、普析GWAUN2-C-20型超純水機(jī)：北京普析通用儀器有限責(zé)任公司；METTLER-XS105DO萬分之一分析天平：梅特勒-托利多公司；FW-200A型萬能粉碎機(jī)：北京科偉有限責(zé)任公司；KQ-50E型超聲波清洗器：昆山市超聲儀器有限公司；齊墩果酸對(duì)照品：購自上海晶純生化科技股份有限公司，批號(hào)110087；甲醇、乙醇、石油醚均為分析純。
馬鞭草購于河南省藥材公司，經(jīng)南陽醫(yī)專藥學(xué)系姚學(xué)文鑒定為Verbena Officinalis L.全草；除雜后，經(jīng)FW-200A型萬能粉碎機(jī)粉碎過60目篩網(wǎng)，稱取適量樣品置于索氏提取器中，加入3倍體積的石油醚于80℃脫色，40℃烘干備用。
2方法與結(jié)果
2.1供試品溶液的制備
稱取石油醚脫色后粉末2.00 g，置于100 mL具塞錐形瓶中，加入80%的乙醇30 mL，超聲提取2次，每次30 min，過濾，合并濾液減壓濃縮，加入甲醇溶解轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中，定容搖勻，即得。
2.2對(duì)照品溶液的制備
精密稱取齊墩果酸對(duì)照品適量，用甲醇定容于100 mL容量瓶中，配制成濃度為0.120 0 g/L的對(duì)照品溶液，待用。
2.3顯色方法及檢測(cè)波長(zhǎng)的確定
分別精密吸取供試品溶液和對(duì)照品溶液0.2，0.4 mL于10 mL具塞試管中，水浴將溶劑蒸干，加入0.2 mL 5%香草醛-冰醋酸溶液，再加入0.8 mL的高氯酸，充分搖勻，在70℃的水浴中加熱15 min，冰水冷卻，再加入5 mL的冰醋酸，放置20 min后，用紫外可見分光光度計(jì)在400 nm～800 nm范圍內(nèi)進(jìn)行掃描其吸光度。結(jié)果表明，供試品和對(duì)照品溶液均在540 nm處有最大吸收峰，因此選540 nm作為測(cè)定波長(zhǎng)。
2.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
分別精密吸取齊墩果酸對(duì)照品溶液0.0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL置于10 mL具塞試管中，按2.3項(xiàng)下方法顯色，以試劑空白為對(duì)照，用1 cm×1 cm的比色皿在540 nm處測(cè)定吸光度（A）。以齊墩果酸的濃度C為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。線性回歸方程為：y=8.034 02 x+0.032 06，r=0.999 5。
2.5單因素試驗(yàn)
2.5.1乙醇濃度對(duì)總?cè)扑岬寐实挠绊?/p>
準(zhǔn)確稱取6份經(jīng)石油醚脫色后馬鞭草粉末2.00 g，以料液比1∶35（g/mL），提取時(shí)間30 min，提取次數(shù)2次，設(shè)計(jì)乙醇濃度分別為40%、50%、60%、70%、80%、90%，考察乙醇濃度對(duì)總?cè)扑岬寐实挠绊懀Y(jié)果如圖1所示。
圖1 乙醇濃度對(duì)總?cè)扑岬寐实挠绊慒ig.1Effect of volume fraction of ethanol on extraction rate of total triterpenoids
乙醇濃度在80%時(shí)，得率達(dá)到最大值，之后隨濃度增加得率反而逐漸減小。所以乙醇濃度為80%時(shí)的提取效果好。故選擇乙醇濃度70%、80%、90%3個(gè)水平進(jìn)行優(yōu)化。
2.5.2料液比對(duì)總?cè)扑岬寐实挠绊?/p>
準(zhǔn)確稱取6份經(jīng)石油醚脫色后馬鞭草粉末2.00 g，以乙醇濃度80%，提取時(shí)間30 min，提取次數(shù)2次，設(shè)計(jì)料液比分別為1∶20、1∶25、1∶30、1∶35、1∶40、1∶50（g/mL），考察料液比對(duì)三萜酸得率的影響，結(jié)果如圖2所示。
圖2 料液比對(duì)總?cè)扑岬寐实挠绊慒ig.2Effect of the ratio of water to materials on extraction rate of total triterpenoids
得率隨著料液比的增加而逐漸增加且趨于平緩。由于提取液體積的增大會(huì)增加蒸發(fā)濃縮的工作量，為降低分離純化的成本，因此選擇料液比1∶30、1∶35、1∶40（g/mL）3個(gè)水平進(jìn)行優(yōu)化。
2.5.3提取時(shí)間對(duì)總?cè)扑岬寐实挠绊?/p>
準(zhǔn)確稱取5份經(jīng)石油醚脫色后馬鞭草粉末2.00 g，以料液比1∶40（g/mL），乙醇濃度80%，提取次數(shù)2次，設(shè)置20、30、40、50、60 min不同的提取時(shí)間，研究提取時(shí)間對(duì)得率的影響，結(jié)果如圖3所示。
圖3 提取時(shí)間對(duì)總?cè)扑岬寐实挠绊慒ig.3Effect of extracting time on extraction rate of total triterpenoids
在40 min時(shí)，總?cè)扑岬寐首畲?，在此之后得率隨時(shí)間的延長(zhǎng)而逐步下降。故選擇提取時(shí)間30、40、50 min 3個(gè)水平進(jìn)行優(yōu)化。
2.5.4提取次數(shù)對(duì)總?cè)扑岬寐实挠绊?/p>
準(zhǔn)確稱取5份經(jīng)石油醚脫色后馬鞭草粉末2.00 g，以料液比1∶40g/mL，乙醇濃度80%，提取時(shí)間40min，提取不同次數(shù)，提取次數(shù)與得率的關(guān)系如圖4所示。
圖4 提取次數(shù)對(duì)總?cè)扑岬寐实挠绊慒ig.4Effect of extraction times on extraction rate of total triterpenoids
隨著提取次數(shù)的增加，得率逐漸增大且趨于平緩，但溶劑的消耗量增大，考慮到效益諸多方面的因素，故選擇提取次數(shù)為1、2、3次3個(gè)水平進(jìn)行優(yōu)化。
2.6正交試驗(yàn)
在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，我們選取乙醇濃度、料液比、提取時(shí)間、提取次數(shù)4個(gè)因素為優(yōu)化條件，用正交表L9（34）設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)。因素水平見表1，試驗(yàn)結(jié)果見表2，方差分析結(jié)果見表3。
表1 正交試驗(yàn)因素及水平表Table 1Factors and levels of orthogonal experiments
表2 正交試驗(yàn)結(jié)果Table 2Result of orthogonal experiments
由表2、表3可知，各因素對(duì)馬鞭草中總?cè)频寐实挠绊懘笮〈涡驗(yàn)椋禾崛〈螖?shù)＞料液比＞乙醇濃度＞提取時(shí)間。以極差最小的提取時(shí)間為誤差項(xiàng)進(jìn)行方差分析，結(jié)果顯示提取次數(shù)對(duì)馬鞭草總?cè)扑岬寐视酗@著影響，因而確定最佳的提取工藝條件為A2B2C1D3，即乙醇濃度80%，料液比1∶35（g/mL），提取時(shí)間30min，提取次數(shù)3次。
表3 方差分析結(jié)果Table 3Results of variance analysis
2.7驗(yàn)證試驗(yàn)
按照選定的條件A2B2C1D3重復(fù)試驗(yàn)3次，得率分別為21.89、21.90、21.95 mg/g，平均值為21.91 mg/g，說明上述提取工藝是合理的。
3小結(jié)
本文在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行了正交試驗(yàn)，確定了超聲波法提取馬鞭草中總?cè)扑岬淖罴压に?；本試?yàn)采用紫外分光光度法進(jìn)行測(cè)定，操作方便，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確、快速，簡(jiǎn)單易行。本文首次研究了馬鞭草中總?cè)扑岬暮繙y(cè)定及提取工藝，為馬鞭草中三萜酸的開發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。
［1］中國藥典委員會(huì).中國藥典:一部［S］.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:49
［2］任非，段坤峰，付穎，等.馬鞭草鎮(zhèn)咳有效部位化學(xué)成分的研究［J］.中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，2013，33（6）:445-449
［3］陳興麗，孟巖，張?zhí)m桐，等.馬鞭草化學(xué)成分和藥理作用的研究進(jìn)展［J］.河北醫(yī)藥，2010，32（15）:2089-2091
［4］田菁，趙毅民，欒新慧.馬鞭草化學(xué)成分的研究［J］.中國中藥雜志，2005，30（4）:268-269
［5］鞠建華，周亮，林耕，等.枇杷葉中三萜酸類成分及其抗炎、鎮(zhèn)咳活性研究［J］.中國藥學(xué)雜志，2003，38（10）:752-757
［6］馬路，史大卓，陳可冀，等.山楂總?cè)扑釋?duì)大鼠肝細(xì)胞合成14C-膽固醇及肝細(xì)胞膜HDL受體活性的影響［J］.中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，2009，29（21）:1807-1810
［7］李鋒，王航，薛原楷，等.枇杷葉三萜酸降血糖活性實(shí)驗(yàn)研究［J］.藥物生物技術(shù)，2011，18（4）:328-331
［8］尤努斯江·吐拉洪，木妮熱·依布拉音，吐爾洪·買買提.阿里紅中總?cè)扑岬奶崛」に噧?yōu)選及含量測(cè)定［J］.中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012，18（17）:24-27
［9］張慧，尹永芹，湯文偉，等.鴨腳木皮中總?cè)频奶崛」に噧?yōu)化［J］.中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2014，20（8）:5-7
［10］賴紅芳，鄧秋芬.半仿生法提取雞骨草中總?cè)扑岬墓に噧?yōu)選［J］.中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19（24）:46-48
Optimization of Extraction Technology of Total Triterpenoids from Verbena officinalis L.by Orthogonal Test
CHEN Gai-min，GONG Ru-dong，ZHANG Di
（Nanyang Medical College，Nanyang 473061，Henan，China）
To optimize the extraction technology of total triterpenoids from Verbena officinalis L..The content of total triterpenoids was determined by UV with oleanic as reference；Effects of concentration of extraction solvent，solid-liquid ratio，extraction time and extraction times by taking yield of total triterpenoids as the index，basis on this，extraction technology was optimized by orthogonal test.The optimum extraction technology were as follow：extracted 3 times with 35 times the amount of 80%ethanol，30 min each time.Under these conditions，yield of total triterpenoids from Verbena officinalis L.was 21.91 mg/g.This extraction process was stable and feasible，which provide the reference for the development and utilization of triterpenoids from Verbena officinalis.
Verbena officinalis L.；total triterpenoids；orthogonal test
10.3969/j.issn.1005-6521.2015.17.017
2015-05-04
南陽市科技局項(xiàng)目（2013GG056）
陳改敏（1980—），女（漢），講師，主要從事天然藥物化學(xué)和藥物分析的研究。
猜你喜歡
新青年(2023年12期)2023-12-18 13:43:42
小學(xué)生優(yōu)秀作文(低年級(jí))(2023年3期)2023-04-01 09:50:12
亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥(2021年6期)2021-06-23 08:54:44
世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化(2021年12期)2021-04-19 12:31:28
池州學(xué)院學(xué)報(bào)(2017年3期)2017-10-16 01:38:37
天然產(chǎn)物研究與開發(fā)(2016年1期)2016-06-05 10:29:25
中成藥(2016年4期)2016-05-17 06:08:05
中國民族民間醫(yī)藥·下半月(2014年4期)2014-09-26 05:23:44
中國藥業(yè)(2014年12期)2014-06-06 02:17:32
食品科學(xué)(2013年13期)2013-03-11 18:24:34
