Pax-8在卵巢腺癌中的表達及其意義

汪春年　陳潔　夏朝霞　吳曉英

1.浙江省寧波市臨床病理診斷中心，浙江寧波315031；2.中南大學湘雅醫(yī)學院，湖南長沙410008

Pax-8在卵巢腺癌中的表達及其意義

汪春年1陳潔1夏朝霞1吳曉英2

1.浙江省寧波市臨床病理診斷中心，浙江寧波315031；2.中南大學湘雅醫(yī)學院，湖南長沙410008

目的檢測Pax-8在卵巢腺癌組織中的表達狀況并分析Pax-8在卵巢腺癌中的診斷價值。方法收集2011年6月～2015年7月寧波市臨床病理診斷中心卵巢腺癌手術(shù)標本蠟塊，其中卵巢原發(fā)性腺癌52例、卵巢轉(zhuǎn)移性腺癌31例。采用免疫組化檢測癌組織中Pax-8的表達情況。結(jié)果卵巢原發(fā)性腺癌組織中Pax-8陽性表達率為82.7%，Pax-8在漿液性腺癌、內(nèi)膜樣腺癌、透明細胞腺癌、黏液性腺癌中的陽性率分別為96.8%、100.0%、100.0%、33.3%。卵巢原發(fā)性腺癌中Pax-8陽性表達與病理分級、臨床分期及腫瘤復發(fā)/轉(zhuǎn)移無關（P＞0.05）。Pax-8在卵巢轉(zhuǎn)移性腺癌中均未見陽性表達，與原發(fā)性腺癌比較，差異有高度統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。結(jié)論Pax-8在卵巢原發(fā)性腺癌中高水平表達，表現(xiàn)出高敏感性和高特異性，可作為卵巢原發(fā)性腺癌的判斷指標之一。

卵巢腺癌；Pax-8；原發(fā)性；轉(zhuǎn)移

卵巢腺癌是女性常見的惡性腫瘤之一，早期不容易發(fā)現(xiàn)，多數(shù)發(fā)現(xiàn)時已出現(xiàn)廣泛的浸潤和轉(zhuǎn)移，預后差。臨床工作中，經(jīng)常碰到惡性腹水或淋巴結(jié)癌轉(zhuǎn)移等晚期癌癥患者，為尋求最佳治療方案，需要依靠免疫標記尋找癌的原發(fā)灶［1］。卵巢腺癌的常用的免疫標志物包括ER、PR、CK7、WT-1等，但這些標志物受敏感性及特異性的影響，有一定的局限性。近年來研究發(fā)現(xiàn)Pax-8在卵巢癌中的表達表現(xiàn)出高敏感性和特異性，除甲狀腺、腎臟外，在乳腺以及其他非婦科原發(fā)腫瘤中幾乎不表達［2］。目前國內(nèi)文獻中，可見數(shù)篇有關Pax-8在卵巢漿液性腫瘤中的表達研究［3-4］，本研究采用免疫組化方法檢測Pax-8在卵巢腺癌中的表達，探討其在卵巢腺癌診斷中的價值。

1　資料與方法

1.1一般資料

收集2011年6月～2015年7月寧波市臨床病理診斷中心卵巢腺癌52例患者的手術(shù)標本蠟塊?；颊吣挲g29～81歲，平均（52±1）歲，術(shù)前均未接受化療或放療。其中漿液性腺癌31例，子宮內(nèi)膜樣腺癌4例，黏液性腺癌12例，透明細胞腺癌5例；按FIGO分期標準：Ⅰ期13例，Ⅱ～Ⅳ期39例。患者隨訪至2015年4月（隨訪時間為3～44個月），8例出現(xiàn)復發(fā)/轉(zhuǎn)移，其中2例因廣泛轉(zhuǎn)移死亡，44例未見復發(fā)轉(zhuǎn)移。卵巢轉(zhuǎn)移性腺癌31例，年齡30～69歲，平均（46±1）歲，其中胃腸道21例，闌尾5例，乳腺2例，肺1例，膽囊/胰膽管2例。

1.2方法

所有標本均經(jīng)10%中性福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋制片，Roche公司Benchmark XT全自動免疫組化檢測儀進行免疫組化染色。所有實驗均設置陰性及已知陽性對照。試劑一抗兔抗人Pax-8抗體購于邁新生物技術(shù)有限公司，二抗及DAB均為Roche公司Benchmark XT配套試劑。

1.3結(jié)果判定

Pax-8染色以細胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性判斷標準。每張切片選取10個高倍視野，每高倍視野計數(shù)200個癌細胞，按陽性細胞所占百分比確定Pax-8表達情況：腫瘤細胞陽性數(shù)＜10%為免疫反應陰性（-），腫瘤細胞陽性數(shù)≥10%為免疫反應陽性（+）。

1.4統(tǒng)計學方法

采用統(tǒng)計軟件SPSS 17.0對數(shù)據(jù)進行分析，正態(tài)分布計量資料以均數(shù)±標準差表示，兩獨立樣本的計量資料采用t檢驗；計數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結(jié)果

Pax-8在卵巢原發(fā)性腺癌中陽性表達率為82.7%（43/52），其中漿液性腺癌中陽性表達率為96.8%（30/31）（圖1A），黏液性腺癌中陽性表達率為33.3%（4/12）（圖1B），透明細胞腺癌中陽性表達率為100.0%（5/5）（圖1C），子宮內(nèi)膜樣腺癌中陽性表達率為100.0%（4/4）（圖1D）。Pax-8在31例卵巢轉(zhuǎn)移性腺癌中均未見陽性表達（圖1E）。原發(fā)性卵巢腺癌中Pax-8的表達與病理分級、臨床分期及腫瘤復發(fā)/轉(zhuǎn)移均無關（P＞0.05）（表1）。卵巢原發(fā)性腺癌中Pax-8的陽性表達與轉(zhuǎn)移性腺癌中的陽性表達相比較，差異有高度統(tǒng)計學意義（P＜0.01）（表2）。

3　討論

Pax-8蛋白是轉(zhuǎn)錄因子的成對盒基因（PAX）家族成員之一，為核轉(zhuǎn)錄因子，調(diào)控甲狀腺、腎臟、副中腎管系統(tǒng)等的發(fā)育。近年來研究發(fā)現(xiàn)Pax-8與器官系統(tǒng)特異性標記聯(lián)合，對于未知原發(fā)部位轉(zhuǎn)移癌原發(fā)灶的查找、或某些上皮性腫瘤的鑒別有一定的意義。Pax-8在甲狀腺、甲狀旁腺、胸腺、副中腎管、腎臟等上皮性腫瘤中表達［5-6］。但Pax-8在正常卵巢表面上皮、包涵囊腫上皮中不表達，輸卵管上皮中的分泌細胞表達Pax-8，這一現(xiàn)象更支持卵巢癌來源于苗勒系統(tǒng)，也支持高級別漿液性腺癌來源于輸卵管傘端這一假說。

本研究的主要目的是探討Pax-8在卵巢腺癌中的表達情況。本研究發(fā)現(xiàn)Pax-8在卵巢原發(fā)性腺癌中的陽性表達率為82.7%，在卵巢腺癌中的表達具有較高的敏感性。Pax-8在漿液性腺癌、內(nèi)膜樣腺癌及透明細胞腺癌中的陽性率均高于95%，而黏液性腺癌中Pax-8陽性表達率低。Pax-8的表達與卵巢原發(fā)性腺癌的分化程度、臨床分期、腫瘤復發(fā)/轉(zhuǎn)移不相關。本研究結(jié)果與相關文獻報道相一致［3-4，7-8］。邢寶玲等［9］研究發(fā)現(xiàn)在卵巢輸卵管、宮體、子宮頸的漿液性腺癌、交界性漿液性腫瘤、子宮內(nèi)膜樣腺癌、透明細胞腺癌中的表達均為100%，推斷Pax-8是苗勒管腺上皮敏感且特異性的標志物，對女性生殖道上皮性腫瘤的鑒別診斷起重要作用。

圖1　Pax-8在不同類型卵巢癌組織中的表達情況（EnVision，200×）

表1　卵巢原發(fā)性腺癌中Pax-8的表達與臨床病理參數(shù)的關系（例）

表2　卵巢原發(fā)性腺癌與轉(zhuǎn)移性腺癌中Pax-8的表達情況（例）

Zhao等［10］收集了68例確診為卵巢癌轉(zhuǎn)移的惡性腹水病例，聯(lián)合運用Pax-8和WT-1兩種免疫標志物，發(fā)現(xiàn)Pax-8陽性率為85%，WT-1陽性率為82%，Pax-8/WT-1兩者的總陽性率為94%，筆者認為同時檢測惡性腹水細胞蠟塊中的Pax-8和WT-1的表達，可提高卵巢癌原發(fā)性檢測的敏感性。Pax-8在鑒別上皮樣間皮瘤與卵巢漿液性腺癌與其他腫瘤標志物相比，具有較高的敏感性和特異性［11-13］。

為研究Pax-8蛋白在卵巢原發(fā)性腺癌中表達的特異性，本研究同時分析了31例卵巢轉(zhuǎn)移性腺癌中Pax-8蛋白的表達情況，結(jié)果顯示Pax-8蛋白在常見的卵巢轉(zhuǎn)移性腺癌中不表達，與原發(fā)性腺癌中的表達相比較，差異有高度統(tǒng)計學意義（P＜0.01），表明Pax-8蛋白在卵巢原發(fā)性腺癌中的表達具有很高的特異性。

因為苗勒系統(tǒng)的特殊性，Pax-8在卵巢腺癌鑒別診斷中有著重要的作用，特別是與進展期乳腺癌、惡性間皮瘤等的鑒別。Pax-8陽性支持卵巢原發(fā)，但Pax-8陰性不能完全排除卵巢來源。對于卵巢黏液性腺癌的診斷，臨床病理診斷特別注意要與卵巢的轉(zhuǎn)移性腺癌鑒別，以前常用的免疫組化鑒別指標包括：ER、PR、CK7、CK20、Villin、CDX-2、WT-1等。結(jié)合本研究結(jié)果，建議加做Pax-8檢測，如果Pax-8陽性更支持卵巢原發(fā)性黏液性腺癌的診斷［14-15］。Pax-8對苗勒管源性腫瘤具有很高的敏感性及特異性，可作為其診斷及鑒別診斷有用的標志物［16-18］。

本研究結(jié)果顯示，Pax-8在卵巢原發(fā)性腺癌中的表達具有較高的敏感性和特異性，盡管Pax-8的表達與腫瘤分化、FIGO分期及腫瘤復發(fā)/轉(zhuǎn)移沒有相關性，但在實際臨床病理診斷工作中有一定的應用意義。對惡性腹水患者，Pax-8聯(lián)合其他免疫標記對判斷腫瘤的來源有一定的價值［19］，這也是本研究組今后研究的方向。沉默卵巢腫瘤細胞系中Pax-8的表達可有效促進腫瘤細胞的死亡［20］，提示Pax-8在卵巢腫瘤中扮演著重要的促癌作用，可能為卵巢癌的生物治療提供新靶點。

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Expression of Pax-8 in ovarian adenocarcinoma and its significance

WANG Chunnian1CHEN Jie1XIA Zhaoxia1WU Xiaoying2
1.Ningbo Diagnostic Pathology Center，Zhejiang Province，Ningbo315031，China；2.Xiangya School of Medicine，Central South University，Hu'nan Province，Changsha410008，China

Objective To investigate the expression of Pax-8 in human ovarian adenocarcinoma and analyze the diagnostic values of Pax-8 expression.Methods From June 2011 to July 2015，in Ningbo Diagnostic Pathology Center，the paraffin blocks of ovarian adenocarcinoma were collected，52 cases were ovarian primary adenocarcinoma and 31 cases were metastatic adenocarcinoma.The expression of Pax-8 was measured by immunohistochemical technique. Results The positive expression rates of Pax-8 in ovarian cancer were 82.7%，the positive expression rates of Pax-8 in ovarian serous，mucinous，clear cell adenocarcinoma，endometrioid adenocarcinoma were 96.8%，100.0%，100.0%，33.3%respectively.There were no relationship between the expression of Pax-8 and pathological grades，clinical stage and tumor recurrence/metastasis（P＞0.05）.There was no positive expression of Pax-8 in ovarian metastatic adenocarcinoma，compared with ovarian primary，the differences were statistically significant（P＜0.01）.Conclusion The expression of Pax-8 in ovarian adenocarcinoma has show high sensibility and specificity，which may have a definite value in judging primary ovarian carcinoma.

Ovarian adenocarcinoma；Pax-8；Primary；Metastatic

R737.31

A

1673-7210（2015）12（b）-0068-03

2015-08-12本文編輯：蘇暢）

國家自然科學基金項目（81172469）；浙江省寧波市自然科學基金項目（2013A610227）

汪春年（1977-），女，碩士，副主任醫(yī)師；研究方向：婦科腫瘤、肝膽胰腫瘤。

吳曉英（1966-），女，教授，博士研究生導師；研究方向：婦科腫瘤。