間充質(zhì)干細胞在炎癥性腸病的研究與臨床應(yīng)用研究進展

葉蕾 汪芳裕

·綜述·

間充質(zhì)干細胞在炎癥性腸病的研究與臨床應(yīng)用研究進展

葉蕾 汪芳裕

間充質(zhì)干細胞（MSC）是一種具有多分化潛能的細胞，具有歸巢、組織修復(fù)和免疫調(diào)節(jié)功能。炎癥性腸?。↖BD）病因尚未完全明確，其發(fā)病與遺傳、免疫、腸道微生物和感染等因素有關(guān)。近年來MSC在IBD 中的治療作用得到越來越多的關(guān)注，是一種有前途的新型的IBD治療方法。本研究對IBD的病因及MSC在IBD的研究狀況做個綜述。

間質(zhì)干細胞； 結(jié)腸炎； Crohn??； 干細胞

炎癥性腸?。╥nfl ammatory bowel disease， IBD）是一種慢性非特異性腸道炎癥性疾病，主要分為潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis， UC）和克羅恩?。–rohn's disease， CD），其具體病因還未完全明確。該病呈慢性復(fù)發(fā)遷延病程，多數(shù)患者的生活質(zhì)量受到嚴重的影響。目前IBD的治療還是集中在控制炎癥活動和調(diào)節(jié)患者免疫紊亂兩個方面［1］。近年來，利用干細胞移植來修復(fù)受損組織并調(diào)節(jié)患者的免疫功能紊亂已經(jīng)成為一個研究熱點，大量的文獻報道證明其具有廣闊的應(yīng)用前景。間充質(zhì)干細胞（mesenchymal stem cell， MSC）在IBD的治療作用在國內(nèi)外均得到一定程度的認可［2］。本文主要對MSC在IBD中的研究現(xiàn)狀作一綜述，同時總結(jié)目前研究所面臨的挑戰(zhàn)。

一、MSC

1. MSC的定義：MSC首次由Friedenstein等［3］在上世紀70年代發(fā)現(xiàn)，最初被命名為骨髓形成細胞。不同于骨髓造血干細胞，MSC來源廣泛，除了骨髓，在羊膜、脂肪組織、胎盤、牙髓，甚至經(jīng)血［4］。體外實驗證實，在適宜培養(yǎng)條件下，MSC可以分化為成骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞和間質(zhì)細胞［5］。近年來文獻報道MSC可以轉(zhuǎn)分化為非中胚層細胞像肝細胞，神經(jīng)細胞［6-7］。國際細胞治療協(xié)會（ISCT）于2006年制定了多功能MSC的基本定義［8］：（1）貼壁性；（2）表達基質(zhì)細胞抗原（CD105，CD73，CD90），不表達造血細胞表面抗原（CD45，CD34，CD14，CD11b，CD79a，CD19和HLA-DR）；（3）體外培養(yǎng)可以分化為成骨細胞、軟骨細胞和脂肪細胞。但滿足這些標準的細胞群仍具有異質(zhì)性。伴隨著大量的新的研究結(jié)果，ISCT進一步從免疫學(xué)特征角度來細化MSC的定義，以指導(dǎo)其在臨床試驗中的規(guī)范使用，主要有［9］：（1）MSC可以調(diào)節(jié)IFN-γ和TNF-a；（2）針對臨床患者對MSC治療的效果差異性，可以從體外培養(yǎng)細胞的免疫調(diào)節(jié)功能方面探索；（3）進行功能分析試驗時采用純化的免疫應(yīng)答者；（4）體外細胞培養(yǎng)時，吲哚胺2，3過氧化物酶應(yīng)答試驗陽性；（5）動物試驗?zāi)Ｐ偷慕Y(jié)論對臨床試驗指導(dǎo)應(yīng)持謹慎態(tài)度；（6）對接受MSC注射治療的患者應(yīng)鼓勵進行淋巴細胞群落分析；（7）臨床試驗需納入對已接受MSC注射治療的患者進行免疫應(yīng)答的監(jiān)測。

2. MSC的免疫調(diào)節(jié)功能：MSC因其免疫調(diào)節(jié)功能被廣泛地運用到免疫紊亂相關(guān)的疾病中，包括多發(fā)性硬化，移植物抗宿主反應(yīng)以及代謝綜合征。然而，目前為止，具體的調(diào)節(jié)機制依舊沒有完全被闡明。文獻報道，MSC發(fā)揮其調(diào)節(jié)作用主要是通過分泌具有免疫抑制功能的可溶性細胞因子［10］。已有文獻研究證實，MSC分泌吲哚胺2，3-雙加氧酶，進而抑制T細胞的增殖［11］。Melief等［12］報道MSC調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的可能機制是促進調(diào)節(jié)T細胞（Treg）的分化。MSC分泌TGF-β1直接誘導(dǎo)Treg細胞形成，或是參與單核細胞向CCL18（+）Ⅱ型巨噬細胞分化，從而間接誘導(dǎo)Treg細胞分化。前列腺素E2（PGE2）也是一種MSC分泌的具有生物活性的細胞因子，其可以抑制T細胞增殖和IL-2的產(chǎn)生，另文獻報道PGE2抑制NK細胞，DC細胞增殖，發(fā)揮免疫抑制作用［13-14］。

二、IBD的病因

IBD是慢性非特異性腸道炎癥性疾病，包含兩種臨床疾病形式——UC和CD。潰瘍性結(jié)腸炎主要局限于直腸和結(jié)腸黏膜，病變呈連續(xù)性，表現(xiàn)為腸道粘膜的充血水腫及糜爛或淺潰瘍形成；而CD可以發(fā)生在胃腸道的任何一個部位，表現(xiàn)為節(jié)段性或跳躍性，病理為非連續(xù)性肉芽腫性病變。IBD確切病因仍未明，主流觀點將其歸因于三大因素：遺傳因素，宿主異常免疫調(diào)節(jié)和環(huán)境因素。大量的研究表明患者的一級親屬患病幾率高于流行病學(xué)的4 ～ 20倍［15］。過去20年里，運用全基因組掃描技術(shù)，大量的候選基因被陸續(xù)報道。有研究指出，位于16號染色體上的NOD2/ CARD15基因是歐洲和北美CD患者重要的易感基因［16］。最近，發(fā)表在Nature上的一篇meta分析納入6個CD全基因組掃描研究，報道了30個新的易感基因，包括SMAD3，ERAP2，IL10，IL2RA，TYK2，F(xiàn)UT2，DNMT3A，DENND1B，BACH2和 TAGAP［17］。環(huán)境因素如腸道微生物，在IBD的發(fā)生發(fā)展過程中扮演著重要的角色。在無菌動物模型中結(jié)腸炎不能被成功誘導(dǎo)間接說明了腸道菌群對于疾病發(fā)生的不可缺少性［18］。IBD是易感個體對腸道菌群紊亂的異常免疫反應(yīng)綜合所致［19］。動物模型已經(jīng)明確指出IBD存在免疫調(diào)節(jié)失衡，主要表現(xiàn)為Th1、Th2、Th17和調(diào)節(jié)T細胞的表達失衡［20］。輔助T細胞和炎癥介質(zhì)表達失衡是腸道長期炎癥狀態(tài)的重要原因［21］。

三、MSC與IBD

相比較于20世紀六十年代，IBD的治療已經(jīng)取得了長足的進展，從以降低死亡率為目標到以預(yù)防疾病發(fā)生為首要目標。建立在對病情的全面評估的基礎(chǔ)上，IBD的治療采用逐步升級藥物的方案，從抗炎（氨基水楊酸、糖皮質(zhì)激素）到免疫抑制劑（硫唑嘌呤）或生物制劑（英夫利昔單抗）。然而，對于重度、復(fù)發(fā)性IBD的治療，目前的治療方案均沒有達到理想的黏膜愈合。干細胞，包括造血干細胞、MSC和最近提出的羊膜來源的干細胞，因其再生和免疫調(diào)節(jié)特性，為IBD的治療提供了一個新的希望［22］。其中，MSC因其來源廣泛，在體外易于培養(yǎng)，成為臨床和基礎(chǔ)試驗的研究熱點。

如前文所述，MSC具有免疫調(diào)節(jié)功能，幫助機體調(diào)節(jié)紊亂的免疫系統(tǒng)，這可能是MSC治療IBD的機制之一。此外，研究發(fā)現(xiàn)MSC對損傷和炎癥部位有很強的趨向性［23］。在動物實驗中，免疫熒光顯微鏡下觀察來自于人的臍帶血MSC可以歸巢定植在結(jié)腸炎癥部位，分化為腸上皮細胞，修復(fù)受損的腸上皮細胞［24］。He等［25］構(gòu)建DSS誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎模型，通過尾靜脈注射氯甲基苯甲酰氨標記的MSC。在實驗的第15天，被標記的MSC聚集在結(jié)腸受損部位，且主要是在黏膜下層。那么，MSC是如何參與腸上皮細胞的損傷修復(fù)呢？文獻報道，MSC可以分化為腸上皮下成肌纖維細胞（ISEMF），為損傷部位MSC和腸干細胞提供重要的微環(huán)境，如生長因子TGF-a，趨化因子IL-8和MCP1［26-27］。另外有部分MSC定植在上皮層，可以分化為免疫細胞，如CD45+淋巴細胞。在接受骨髓移植治療患者再生的結(jié)腸上皮細胞內(nèi)，CD45+淋巴細胞明顯高于正常人樣本［28］。

應(yīng)用于臨床上的MSC來源廣泛，包括骨髓、脂肪組織、皮膚、牙髓、臍帶血和羊水。其中，來自于患者本人或是志愿者捐贈的骨髓來源的MSC是目前應(yīng)用最多的一類MSC。常規(guī)細胞培養(yǎng)體外擴增MSC，培養(yǎng)至1代至3代，未感染病原菌，流氏鑒定細胞生存能力大于90%［29］。就IBD而言，可以采用腹腔注射、靜脈注射或者是局部病變黏膜注射治療，在結(jié)腸炎的動物模型上均取得了滿意的療效［30-32］。不同于造血干細胞，MSC使患者免于移植物抗宿主反應(yīng)，因此大大簡化了患者的準備程序?；颊咧皇切枰Ｒ?guī)進行各項檢查，例如體格檢查、各項生化指標檢查、X線和結(jié)腸鏡檢查，以評估患者疾病活動指數(shù)，便于治療前后的療效觀察［29］。

1.MSC與UC：臨床上針對MSC在UC患者中的治療報道并不多。Lazebnik等［33］學(xué)者納入96例UC患者，其中44例患者接受MSC注射治療，40例患者接受以美沙拉嗪為代表的標準治療，另外12例患者進行英夫利昔維持緩解治療。臨床結(jié)果發(fā)現(xiàn)34例進行MSC移植治療的患者，其自身免疫反應(yīng)和損傷黏膜的修復(fù)與其他兩組患者有著顯著的差異性，提示MSC可以作為一種新的治療策略。對于葡聚糖酸鈉（DSS）誘導(dǎo)的小鼠潰瘍性結(jié)腸炎，MSC通過其抗炎調(diào)節(jié)作用，顯著降低病變黏膜和血漿中的促炎因子（如TNF-a，IL-β）［34］。Wang等［34］學(xué)者進一步提出，IL-37b基因轉(zhuǎn)染到MSC中可以協(xié)同MSC的免疫調(diào)節(jié)作用，進而增強MSC在潰瘍性結(jié)腸炎小鼠中的療效。然而，Nam等［35］研究發(fā)現(xiàn)腹腔注射MSC并不能阻止DSS誘導(dǎo)的小鼠潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)生以及降低IBD的臨床病理嚴重程度。

表1　針對IBD患者的臨床試驗情況（2015）

2.MSC與CD：González MA等［36］向結(jié)腸炎小鼠體內(nèi)腹腔注射105～ 106脂肪來源的MSC，發(fā)現(xiàn)其可以顯著減輕疾病的嚴重程度，腸道的炎癥并防止結(jié)腸炎的再次復(fù)發(fā)。骨髓來源的MSC也有類似的實驗結(jié)果［37］。Duijvestein等［38］學(xué)者研究指出用IFN-γ轉(zhuǎn)染骨髓MSC，可以增強MSC在結(jié)腸炎小鼠的療效。這些體內(nèi)試驗表明MSC治療可能對早期的結(jié)腸炎有效，然而，MSC對于臨床上復(fù)發(fā)且難治性的CD患者是否有效，還有待于標準的隨機對照試驗證實。目前，已登記注冊的針對MSC在CD患者療效評估的臨床試驗總共有7例［39）［39］。García-Olmo D等［40］開展臨床一期試驗，追蹤并發(fā)瘺管的CD患者在接受脂肪來源的MSC局部注射治療12 ～ 30個月后，不良反應(yīng)的發(fā)生率。令人興奮的是，不良反應(yīng)發(fā)生率為0%，且MSC可以促進上皮細胞的再生和75%的肛周瘺管愈合。試驗結(jié)果強有力地支撐了MSC在難治性多發(fā)性CD患者的治療前景。同樣的觀察結(jié)果也在一項多中心臨床隨機試驗中被報道［41］。然而，MSC靜脈注射治療黏膜病變的CD患者，療效卻差強人意。在Duijvestein等［42］的研究中，10例重度CD患者進行骨髓MSC移植，在移植后6周，僅有3例患者病情得到緩解。Lazebnik等［43］納入11例CD患者，靜脈輸注骨髓來源的MSC，4 ～ 8個月后，患者的臨床癥狀并未得到明顯改善。

雖然臨床試驗研究結(jié)果不一，但在體外細胞培養(yǎng)時，MSC均可以抑制T細胞增殖，表明患者對干細胞治療的反應(yīng)差異性并不是由MSC免疫調(diào)節(jié)能力缺陷所致，可能與患者個體差異性和移植途徑有關(guān)。這些研究也提示病變部位局部注射MSC的療效優(yōu)于靜脈注射。但是，臨床數(shù)據(jù)顯示MSC僅對部分難治性復(fù)發(fā)性CD患者有效，且這些研究的結(jié)果指標并不相同（瘺管愈合vs疾病活動度），因此，正確評估MSC治療CD患者還需要更多的臨床及臨床前期研究。目前，大量的臨床Ⅰ/Ⅱ期試驗正在開展以更好地評價MSC治療方案的有效性和安全性。

四、展望

MSC在IBD中的應(yīng)用價值已經(jīng)成為當(dāng)今臨床和基礎(chǔ)的研究熱點，但研究結(jié)果差強人意。這有多方面的限制因素。例如，缺少一個標準化的MSC階段性治療方案，以及缺少對MSC的生物學(xué)特性的深入全面理解。從MSC的分離提取，到體外培養(yǎng)再到移植途徑，甚至對于治療目標的選擇，都會影響到對治療效果的最終判斷。

1.MSC異質(zhì)性：MSC是一群異質(zhì)性基質(zhì)干細胞，沒有特異性分子標記物。雖然2013年ISCT從MSC免疫學(xué)特點細化了相關(guān)的定義，但目前識別并確認MSC依舊是依據(jù)2006年ISCT所制定的指南。該指南缺少MSC的功能性表面分子標記物，可以將MSC與成纖維細胞或者其他與MSC類似的基質(zhì)細胞區(qū)分開。這也就意味著目前研究中所提到的MSC移植，很有可能會混入其他基質(zhì)細胞，而它們對于最終結(jié)果的影響并不為人們所知。因此，在應(yīng)用MSC進行干預(yù)之前，一個更加具體且準確的標準亟待被公認。值得一提的是，不同來源的MSC在分化調(diào)控中可以誘發(fā)宿主不同的免疫反應(yīng)特點，而目前的臨床試驗利用的是不同種類MSC來評估療效［44］。Orbsen治療最近從骨髓、胎盤、骨骼肌和脂肪中分離出一種具有較高同質(zhì)性的MSC，都表達CD362［45］。針對這種細胞治療前景的前期研究已經(jīng)在開展。期待它可以為干細胞治療提供一個更好的材料來源。

2.臨床試驗方案的標準化：當(dāng)前的臨床研究采用不同劑量的MSC，有研究采用106個/kg，有研究則是5×106個/kg。國際上普遍采用1.4×106個/ kg來治療移植物抗宿主病［46］。在一項同種自體的MSC研究中，CD患者每周接受2次靜脈注射治療，細胞量分別為1×106個/kg，2×106個/kg［47］。但并沒有證據(jù)表明注射更大劑量的MSC可以提高臨床療效。有報道，隨著MSC的培養(yǎng)和傳代，它們會逐步失去增殖分化和免疫調(diào)節(jié)功能［48］。正常情況下，臨床前期的研究所使用的MSC是在1 ～ 5代之內(nèi)，而在更大規(guī)模的多中心的研究中，需要足夠數(shù)量的MSC植入患者體內(nèi)，此時MSC常常在體外擴增培養(yǎng)到5代之后。那么，值得關(guān)注的是，在長期的體外培養(yǎng)中，MSC會不會逐漸減弱其免疫調(diào)節(jié)功能或者培養(yǎng)條件是否會對其產(chǎn)生不利影響。不止這樣，靜脈注射時，MSC歸巢的比例很低（＜ 1%），大部分滯留在肺臟和肝臟［49］。因此，有理由推測試驗中觀察到的治療后癥狀改善，很有可能是由免疫細胞所產(chǎn)生的可溶性介質(zhì)所致，而非MSC在病變部位的分化調(diào)控所致。相比較之下，局部定點注射療效勝于傳統(tǒng)的靜脈注射［49］。陸續(xù)報道的相互沖突的試驗結(jié)果提示制定一個標準的MSC治療方案十分必要，只有這樣才可以使得治療效果得到最優(yōu)化。

3.MSC潛在的致病性：長期的炎性微環(huán)境對內(nèi)源性MSC的表型影響依舊不是很清楚。MSC可能會通過轉(zhuǎn)分化從而失去其免疫調(diào)節(jié)能力甚至成為促炎細胞。有研究曾指出在TLR4的刺激下，MSC可以發(fā)生極化成為促炎細胞［50］?，F(xiàn)在仍然不清楚其他的炎癥介質(zhì)是不是可以誘導(dǎo)MSC的這種轉(zhuǎn)變。但是炎性微環(huán)境可以轉(zhuǎn)變其他基質(zhì)細胞的表型已有報道［51］?？傊?，這些研究表明MSC對其所處的微環(huán)境敏感，可以隨著環(huán)境的改變發(fā)生表型變化，從抗炎介質(zhì)變?yōu)榇傺准毎?。因此，炎性微環(huán)境對于MSC的功能影響需要進一步的研究。

五、結(jié)論

MSC在IBD中的治療依舊處于一個探索階段，許多臨床或者基礎(chǔ)研究的問題需要得到解決。但相信，隨著MSC移植技術(shù)的不斷發(fā)展，越來越多的IBD患者將從中獲益，也為IBD提供新的治療方法。

1 Danese S. New therapies for infl ammatory bowel disease：from the bench to the bedside［J］. Gut ，2012， 61（6）：918-932.

2 Griffin MD， Elliman SJ， Cahill E， et al. Concise review：adult mesenchymal stromal celltherapy for inflmmatory diseases： how well are we joining the dots［J］？ Stem Cells，2013， 31（10）：2033-2041.

3 Friedenstein AJ， Piatetzky-Shapiro II， Petrakova KV. Osteogenesis in transplants of bone marrow cells［J］. J Embryol Exp Morphol， 1966， 16（3）：381-390.

4 Hass R， Kasper C， B?hm S， et al. Different populations and sources of human mesenchymal stem cells （MSC）： A comparison of adult and neonatal tissue-derived MSC［J］. Cell Commun Signal， 2011， 9：12.

5 Stoltz JF， De Isla N， Li YP， et al. Stem cells and regenerative medicine： myth or reality of the 21th century［J］. Stem Cells Int， 2015：734731.

6 Ye JS， Su XS， Stoltz JF， et al. Signalling pathways involved in the process of mesenchymal stem cells differentiating into hepatocytes［J］. Cell Prolif， 2015， 48（2）：157-165.

7 Feng N， Han Q， Li J， et al. Generation of highly purified neural stem cells from human adipose-derived mesenchymal stem cells by Sox1 activation［J］. Stem Cells Dev， 2014， 23（5）：515-529.

8 Horwitz EM， Le Blanc K， Dominici M， et al. Clarifi cation of the nomenclature for MSC： The International Society for Cellular Therapy position statement［J］. Cytotherapy， 2005，7（5）：393-395.

9 Krampera M， Galipeau J， Shi Y， et al. Immunological characterization of multipotent mesenchymal stromal cells--The International Society for Cellular Therapy （ISCT）working proposal［J］. Cytotherapy， 2013， 15（9）：1054-1061.

10 Ghannam S， BouffiC， Djouad F， et al. Immunosuppression by mesenchymal stem cells： mechanisms and clinical applications［J］. Stem Cell Res Ther， 2010， 1（1）：2.

11 Meisel R， Zibert A， Laryea M， et al. Human bone marrow stromal cells inhibit allogeneic T-cell responses by indoleamine 2，3-dioxygenase-mediated tryptophan degradation［J］. Blood， 2004， 103（12）：4619-4621.

12 Melief SM， Schrama E， Brugman MH， et al. Multipotent stromal cells induce human regulatory T cells through a novel pathway involving skewing of monocytes toward anti-inflammatory macrophages［J］. Stem Cells， 2013，31（9）：1980-1991.

13 Aggarwal S， Pittenger MF. Human mesenchymal stem cells modulate allogeneic immune cell responses［J］. Blood，2005， 105（4）：1815-1822.

14 Harizi H. Reciprocal crosstalk between dendritic cells and natural killer cells under the effects of PGE2 in immunity and immunopathology［J］. Cell Mol Immunol， 2013，10（3）：213-221.

15 Orholm M， Munkholm P， Langholz E， et al. Familial occurrence of inflammatory bowel disease［J］. N Engl J Med ， 1991， 324：84-88.

16 Gersemann M， Wehkamp J， Stange EF. Innate immune dysfunction in inflammatory bowel disease［J］. J Intern Med， 2012， 271（5）：421-428.

17 Franke A， Mcgovern DP， Barrett JC， et al. Genome-wide meta-analysis increases to 71 the number of confirmed Crohn's disease susceptibility loci［J］. Nat Genet， 2010，42（12）：1118-1125.

18 Saleh M， Elson CO. Experimental inflammatory bowel disease： insights into the host-microbiota dialog［J］. Immunity， 2011， 34（3）：293-302.

19 Han DS. Current status and prospects of intestinal microbiome studies［J］. Intestinal research， 2014，12（3）：178-183.

20 Fonseca-Camarillo G， Yamamoto-Furusho JK. Immunoregulatory pathways involved in inflammatory bowel disease［J］. Inflamm Bowel Dis， 2015， 21（9）：2188-2193.

21 Abraham C， Cho J. Mechanisms of disease infl ammatory bowel disease［J］. N Engl J Med， 2009， 361：2066-2078.

22 Gazouli M， Roubelakis MG， Theodoropoulos GE. Stem cells as potential targeted therapy for infl ammatory bowel disease［J］. Infl amm Bowel Dis， 2014， 20（5）：952-955.

23 Le Blanc K， Ringdén O. Immunomodulation by mesenchymal stem cells and clinical experience［J］. J Intern Med， 2007， 262（5）：509-525.

24 Liang L， Dong C， Chen X， et al. Human umbilical cord mesenchymal stem cells ameliorate mice trinitrobenzene sulfonic acid （TNBS）-induced colitis［J］. Cell Transplant，2011， 20（9）：1395-1408.

25 He XW， He XS， Lian L， et al. Systemic infusion of bone marrow-derived mesenchymal stem cells for treatment of experimental colitis in mice［J］. Dig Dis Sci， 2012，57（12）：3136-3144.

26 Brittan M， Hunt T， Jeffery R， et al. Bone marrow derivation of pericryptal myofibroblasts in the mouse and human small intestine and colon［J］. Gut， 2002， 50（6）：752-757.

27 Beck PL， Rosenberg IM， Xavier RJ， et al. Transforming growth factor-beta mediates intestinal healing and susceptibility to injury in vitro and in vivo through epithelial cells［J］. Am J Pathol， 2003， 162（2）：597-608.

28 Okamoto R， Yajima T， Yamazaki M， et al. Damaged epithelia regenerated by bone marrow-derived cells in the human gastrointestinal tract［J］. Nat Med， 2002，8（9）：1011-1017.

29 González MA， Gonzalez-Rey E， Rico L， et al. Adiposederived mesenchymal stem cells alleviate experimental colitis by inhibiting inflammatory and autoimmuneresponses［J］. Gastroenterology， 2009， 136（3）：978-989.

30 Tanaka F， Tominaga K， Ochi M， et al. Exogenous administration of mesenchymal stem cells ameliorates dextran sulfate sodium-induced colitis via antiinfl ammatory action in damaged tissue in rats［J］. Life Sci，2008， 83（23/24）：771-779.

31 Hayashi Y， Tsuji S， Tsujii M， et al. Topical implantation of mesenchymal stem cells has benefi cial effects on healing of experimental colitis in rats［J］. J Pharmacol Exp Ther， 2008，326（2）：523-531.

32 Duijvestein M， Vos AC， Roelofs H， et al. Autologous bone marrow-derived mesenchymal stromal cell treatment for refractory luminal Crohn's disease： results of a phase I study［J］. Gut， 2010， 59（12）：1662-1669.

33 Lazebnik LB， Kniazev OV， Konopliannikov AG， et al. Allogeneic mesenchymal stromal cells in patients with ulcerative colitis： two years of observation［J］. Eksp Klin Gastroenterol， 2010（11）：3-15.

34 Wang WQ， Dong K， Zhou L， et al. IL-37b gene transfer enhances the therapeutic effi cacy of mesenchumal stromal cells in DSS-induced colitis mice［J］. Acta Pharmacol Sin，2015， 36（11）：1377-1387.

35 Nam YS， Kim N， Im KI， et al. Negative impact of bonemarrow-derived mesenchymal stem cells on dextran sulfate sodium-induced colitis［J］. World J Gastroenterol， 2015，21（7）：2030-2039.

36 González MA， Gonzalez-Rey E， Rico L， et al. Adiposederived mesenchymal stem cells alleviate experimental colitis by inhibiting inflammatory and autoimmune responses［J］. Gastroenterology， 2009， 136（3）：978-989.

37 Chen QQ， Yan L， Wang CZ， et al. Mesenchymal stem cells alleviate TNBS-induced colitis by modulating infl ammatory and autoimmune responses［J］. World J Gastroenterol， 2013，19（29）：4702-4717.

38 Duijvestein M， Wildenberg ME， Welling MM， et al. Pretreatment with interferon-γ enhances the therapeutic activity of mesenchymal stromal cells in animal models of colitis［J］. Stem Cells， 2011， 29（10）：1549-1558.

39 National Institutes of Health US. Available at：URL：http：// clincialtrials.gov. Accessed May， 2015.

40 García-Olmo D， García-Arranz M， Herreros D， et al. A phase I clinical trial of the treatment of Crohn's fi stula by adipose mesenchymal stem cell transplantation［J］. Dis Colon Rectum， 2005， 48（7）：1416-1423.

41 De La Portilla F， Alba F， García-Olmo D， et al. Expanded allogeneic adipose-derived stem cells （eASCs） for the treatment of complex perianal fistula in Crohn's disease：results from a multicenter phase I/IIa clinical trial［J］. Int J Colorectal Dis， 2013， 28（3）：313-323.

42 Duijvestein M， Vos AC， Roelofs H， et al. Autologous bone marrow-derived mesenchymal stromal cell treatment for refractory luminal Crohn's disease： results of a phase I study［J］. Gut， 2010， 59（12）：1662-1669.

43 Lazebnik LB， Konopliannikov AG， Kniazev OV， et al. Use of allogeneic mesenchymal stem cells in the treatment of intestinal inflammatory diseases［J］. Ter Arkh， 2010，82（2）：38-43.

44 Prasanna SJ， Gopalakrishnan D， Shankar SR， et al. Proinflammatory cytokines， IFNgamma and TNFalpha，influence immune properties of human bone marrow and Wharton jelly mesenchymal stem cells differentially［J］. PLoS One， 2010， 5（2）：e9016.

45 Orbsen.Mesenchymal stem cells. Available at：URL：http：// www.orbsentherapeutics.com/our-technologies/

46 Von Bahr L， Sundberg B， L?nnies L， et al. Long-term complications， immunologic effects， and role of passage for outcome in mesenchymal stromal cell therapy［J］. Biol Blood Marrow Transplant， 2012， 18（4）：557-564.

47 Le Blanc K， Frassoni F， Ball L， et al. Mesenchymal stem cells for treatment of steroid-resistant， severe， acute graftversus-host disease： a phase II study［J］. Lancet， 2008，371（9624）：1579-1586.

48 Le Blanc K， Mougiakakos D. Multipotent mesenchymal stromal cells and the innate immune system［J］. Nat Rev Immunol， 2012， 12（5）：383-396.

49 Augello A， Tasso R， Negrini SM， et al. Cell therapy using allogeneic bone marrow mesenchymal stem cells prevents tissue damage in collagen-induced arthritis［J］. Arthritis Rheum， 2007， 56（4）：1175-1186.

50 Waterman RS， Tomchuck SL， Henkle SL， et al. A new mesenchymal stem cell （MSC） paradigm： polarization into a pro-infl ammatory MSC1 or an Immunosuppressive MSC2 phenotype［J］. PLoS One， 2010，5（4）：e10088.

51 Mcgettrick HM， Butler LM， Buckley CD， et al. Tissue stroma as a regulator of leukocyte recruitment in infl ammation［J］. J Leukoc Biol， 2012， 91（3）：385-400.

Clinical and basic studies on mesenchymal stem cell therapy for inflammatory boweldisease

Wang Fangyu， Email：wangfangyul@126.com

Mesenchymal stem cells（MSC） arecells with multipotentdifferentiation capacity and are capable of selectively homing to inflammation areas for tissue healing and immunoregulation. The etiology of inflammatory bowel diseases （IBD） is not yet fully elucidated， which is thought to be associated with gene， immunity， gut microbiome and infection，etc. In recent years， MSC have attracted more and more attention in the treatment of IBD. It seems to be a new promisng therapy in IBD. In the review， we will focus on the causes of IBD and the status of researches of MSC for IBD.

Mesenchymal stem cells； colitis； Crohn Disease； stem cell

2015-09-02）

（本文編輯：蔡曉珍）

10.3877/cma.j.issn.2095-1221.2015.04.008

210002，南京大學(xué)附屬金陵醫(yī)院消化內(nèi)科

汪芳裕，Email：wangfangyul@126.com

Ye Lei， Wang Fangyu. Department of Gastroenterology and Hepatology， Jinling Hospital， Medical School of Nanjing University， 305 Zhongshan East Road， Nanjing 210002，China