老年非小細胞肺癌患者中外周血T細胞的表達與癌胚抗原表達的相關性

劉東利,張宇祥,杜延玲

(延安大學附屬醫(yī)院 呼吸內科，陜西 延安716000)

老年非小細胞肺癌患者中外周血T細胞的表達與癌胚抗原表達的相關性

劉東利,張宇祥,杜延玲

(延安大學附屬醫(yī)院 呼吸內科，陜西 延安716000)

目的 探討老年非小細胞肺癌患者中外周血T細胞的表達與癌胚抗原(CEA)表達的相關性。方法 采用前瞻性方法，2013年5月到2015年5月選擇在我院經病理確診的65例老年非小細胞肺癌患者作為觀察組，同期選擇在我院進行體檢的健康老年人65例作為對照組，兩組都進行外周血T細胞表達檢測與血清CEA表達檢測，同時進行相關性分析。結果 觀察組與對照組的血清CEA含量分別為34.45±14.19 ng/mL和2.19±0.13 ng/mL，觀察組明顯高于對照組(P<0.05)。觀察組的總T細胞比例為2.53±2.19%，明顯低于對照組的6.54±2.98%(P<0.05)，同時觀察組的CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+的比例也明顯低于對照組(P<0.05)。Spearman秩相關分析結果顯示老年非小細胞肺癌患者外周血總T細胞比例與血清CEA含量之間的表達呈現明顯負線性相關(r=-0.569，P<0.05)；Cox多因素分析結果顯示總T細胞、CD3+、CD3+CD4+的比例為影響CEA表達的獨立影響因素(P<0.05)。結論 老年非小細胞肺癌患者中外周血T細胞與CEA表達都呈現異常情況，外周血T細胞下降與CEA高表達可能具有一定相關性，為此檢測外周血T細胞與CEA表達可評價患者疾病狀況。

老年人；非小細胞肺癌；外周血T細胞；癌胚抗原；相關性

(ChinJLabDiagn,2017,21:1329)

非小細胞肺癌是嚴重威脅我國人民生命健康的惡性腫瘤，多發(fā)病于老年人[1]。由于早期發(fā)病比較隱匿，很多患者在發(fā)病時以為晚期，導致治療效果欠佳，總體5年生存率不到20.0%，為此早發(fā)現和提高診斷率成為提高患者生存率的關鍵[2]。當前臨床上多依靠影像學診斷和病理學對肺癌進行診斷，但是效果一直不太好?，F代研究表明非小細胞肺癌的產生與遺傳、環(huán)境因素等多種因素是密切相關的，其中血清腫瘤標志物是由于惡性腫瘤細胞異常而產生的物質，能反映腫瘤發(fā)生、發(fā)展情況[3,4]。癌胚抗原(CEA)是一種細胞內糖蛋白，是目前診斷非小細胞肺癌應用最常用的一種腫瘤標志物，但是在早期篩查非小細胞肺癌上仍有一定的局限性[5,6]?，F代研究表明惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與機體的細胞免疫功能狀態(tài)密切相關，生理狀態(tài)下免疫系統(tǒng)能夠清除出現的突變細胞[7,8]。T細胞構成細胞免疫的主要部分，腫瘤患者的外周血T細胞亞群存在異常情況，也表明T細胞亞群在機體細胞免疫調控和抗腫瘤免疫中起主導作用[9]。本文為此具體探討了老年非小細胞肺癌患者中外周血T細胞的表達與癌胚抗原表達的相關性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象

采用前瞻性方法，2013年5月到2015年5月選擇在我院經病理確診的65例老年非小細胞肺癌患者作為觀察組，納入標準：均未經任何治療；排除遠處轉移；年齡≥60歲。其中男36例，女29例；年齡最小61歲，最大84歲，平均年齡73.13±5.29歲；病程最短3個月，最長2年，平均為1.98±0.45年；平均體重指數為21.09±1.87 kg/m2；臨床分期：Ⅰ期20例，Ⅱ期20例，Ⅲ10例，Ⅳ15例；分化程度：低分化15例，中分化26例，高分化24例。同期選擇在我院進行體檢的健康老年人65例作為對照組，其中男38例，女27例；年齡最小60歲，最大89歲，平均年齡73.13±5.29歲。兩組都排除術前曾有過惡性腫瘤病史(包括非小細胞肺癌患者)，合并心、肝、胃等重要臟器的疾病患者，妊娠與哺乳期婦女；研究得到醫(yī)院倫理委員會的批準與入選者的知情同意。兩組的性別、年齡等對比無明顯差異(P<0.05)。

1.2 外周血T細胞表達檢測

分別抽取兩組入選者的外周抗凝血2 ml，采用直接免疫熒光標記法進行實驗，選擇連接有熒光素的抗體進行免疫標記反應，上FACS流式細胞儀(BD FACS Calibur)檢測后，用系統(tǒng)配套的軟件進行數據分析，計算與檢測總T細胞比例、CD3+占淋巴細胞比例，CD3+CD4+、CD3+CD8+占CD3+T細胞比例，檢測試劑購于美國BD公司。

1.3 CEA檢測

分別抽取兩組入選者的空腹靜脈血3 ml，靜置20 min,3 000 rpm 的轉速離心5 min，取上層血清置于-20℃低溫冰箱保存待測，所用儀器為羅氏全自動電化學發(fā)光免疫分析儀，Roche公司提供檢測試劑盒，CEA的檢測方法為電化學發(fā)光免疫分析法，均嚴格按照儀器和試劑盒說明書進行。

1.4 統(tǒng)計方法

2 結果

2.1 血清CEA含量對比

經過檢測，觀察組與對照組的血清CEA含量分別為34.45±14.19ng/mL和2.19±0.13ng/mL，觀察組明顯高于對照組(P<0.05)，見表1。

表1 兩組血清CEA含量對比

2.2 外周血T細胞對比

經過檢測，觀察組的總T細胞比例為2.53±2.19%，明顯低于對照組的6.54±2.98%(P<0.05)，同時觀察組的CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+的比例也明顯低于對照組(P<0.05)，見表2。

表2 兩組外周血T細胞對比

2.3 相關性分析

在觀察組患者中，我們把外周血總T細胞比例與血清CEA含量進行Spearman秩相關分析，結果顯示老年非小細胞肺癌患者外周血總T細胞比例與血清CEA含量之間的表達呈現明顯負線性相關(r=-0.569，P<0.05)。

我們也對老年非小細胞肺癌患者中外周血T細胞表達與CEA表達經Cox多因素分析，結果顯示總T細胞、CD3+、CD3+CD4+的比例為影響CEA表達的獨立影響因素(P<0.05)，見表3。

表3 老年非小細胞肺癌患者中外周血T細胞表達與CEA表達的多因素Cox回歸分析

3 討論

由于各種因素的影響，當前我國老年人非小細胞肺癌的發(fā)病率正迅猛增長，是造成癌癥相關性死亡的最主要病因，已成為我國部分城市人口惡性腫瘤死亡原因的第一位。同時很多患者在第一次就診時，病變已屬中晚期而失去手術機會，為此早期診斷與病情判斷有助于改善預后[10]。

伴隨著分子生物學標志物的發(fā)展，越來越多的血清腫瘤分子標志物開始應用于臨床，其有利于對非小細胞肺癌進行早期診斷與治療[11]。癌胚抗原(CEA)是一種位于細胞質內的糖蛋白，正常胚胎的消化管組織中也存在一定量的癌胚抗原，也可微量存在于正常個體血清中，而在多數癌組織中呈現高表達狀況[12]。研究顯示非小細胞肺癌患者的血清中CEA的檢測和診斷的靈敏度在40.0%左右，CEA還可以用于疾病預后的輔助診斷，可作為非小細胞肺癌復發(fā)的監(jiān)視器[13]。本研究顯示觀察組與對照組的血清CEA含量分別為34.45±14.19 ng/mL和2.19±0.13 ng/mL，觀察組明顯高于對照組(P<0.05)，說明老年非小細胞肺癌患者中CEA呈現高表達狀況。

當前研究證據表明肺癌的發(fā)生、發(fā)展與機體的免疫功能密切相關。生理狀態(tài)下免疫系統(tǒng)能夠清除突變細胞及早期的腫瘤細胞，而細胞免疫缺陷者可導致腫瘤發(fā)病率高，同時腫瘤負荷使宿主免疫系統(tǒng)的功能失衡，形成惡性循環(huán)[14]。在機體細胞免疫系統(tǒng)中，T細胞作為主要的效應細胞，可通過T細胞亞群來完成復雜的免疫調控。T細胞也可根據細胞表面分子又分為幾大亞類，從而在維持機體免疫平衡中均起著各自的作用[15]。本研究顯示觀察組的總T細胞比例為2.53±2.19%，明顯低于對照組的6.54±2.98%(P<0.05)，同時觀察組的CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+的比例也明顯低于對照組(P<0.05)，也表明觀察組患者存在明顯的細胞免疫紊亂狀況。從機制上分析，腫瘤可能通過不表達MHC Ⅰ類分子，下調T細胞的激活表位；同時腫瘤細胞分泌趨化因子可趨化T細胞至腫瘤局部，發(fā)揮免疫抑制效應[16]。

CEA 是一種重要的廣譜性腫瘤標志物，對肺癌的判斷療效、監(jiān)控病情、監(jiān)測與預后分析都有一定的價值，CEA 的高表達狀況與非小細胞肺癌的病情與病理狀況也有一定的相關性，但其具有不強的特異性[17，18]。而當前T細胞及抑制分子在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲及轉移中的作用日漸受到重視[19-21]；不過由于腫瘤免疫微環(huán)境構成復雜，且機體細胞免疫調節(jié)受多因素影響，還需要進行進一步分析。本研究Spearman秩相關分析結果顯示老年非小細胞肺癌患者外周血總T細胞比例與血清CEA含量之間的表達呈現明顯負線性相關(r=-0.569，P<0.05)；Cox多因素分析結果顯示總T細胞、CD3+、CD3+CD4+的比例為影響CEA表達的獨立影響因素(P<0.05)，說明老年非小細胞肺癌患者外周血T細胞的下降表達可影響腫瘤細胞的理化性質及其代謝情況，造成CEA的異常高表達。

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The correlation analysis between peripheral blood T cells expression and tumor antigen expression in the elderly patients with non small cell lung cancer

LIUDong-li,ZHANGYu-xiang,DUYan-ling.

(DepartmentofRespiratoryMedicine,AffiliatedHospitalofYan'anUniversity,Yan'an716000,China)

Objective To investigate the correlation analysis between peripheral blood T cells expression and tumor antigen(CEA) expression in the elderly patients with non small cell lung cancer.Methods Used a prospective method,From May 2013 to May 2015,65 elderly patients with non small cell lung cancer by pathological diagnosis in our hospital were selected as the observation group,and the medical examination of the health of the elderly 65 cases were selected at the same period as the control group,two groups were given the peripheral blood T cells expression detecting and serum CEA detection and correlation analysis.Results The serum CEA levels of the observation group and the control group were 34.45±14.19 ng/mL and 2.19±0.13 ng/mL,the observation group was significantly higher than that of the control group (P<0.05).The total T cell ratio in the observation group was 2.53±2.19%,which was significantly lower than that of the control group of 6.54±2.98%(P<0.05),and the ratios of CD3+,CD3+CD4+and CD3+CD8+in the observation group were significantly lower than that in the control group (P<0.05).Spearman rank correlation analysis showed that the peripheral blood T cell ratio and serum CEA levels in the elderly patients with non small cell lung cancer patients were showed a significantly negative linear correlation(r=0.569,P<0.05).Cox multivariate analysis showed that the ratios of total T cells,CD3+,CD3+CD4+expression were the independent influence factors for the CEA levels(P<0.05).Conclusion The peripheral blood T cells and CEA expression in the elderly patients with non small cell lung cancer patients are showed abnormal situation,the decrease of peripheral blood T cells and the high expression of CEA may have some correlation,lfor the detection of peripheral blood T cells and CEA expression can evaluate the status of patients.

Elderly;non small cell lung cancer;peripheral blood T cell;tumor antigen;correlation

1007-4287(2017)08-1329-04

R734.2

A

2016-07-18)